miR-216a通过下调CAPN6抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡的研究

目的探讨微小RNA-216a(miR-216a)对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法收集2019年5月至2021年5月于河北北方学院附属第一医院行手术治疗的82例宫颈癌患者的宫颈癌组织和癌旁正常组织,用实时荧光定量PCR(qRT-RCR)法检测组织中miR-216a和钙激活中性蛋白酶6(CAPN6)表达。转染miR-216a模拟物(miR-216a mimic)、CAPN6小干扰RNA(si-CAPN6)或共转染miR-216a mimic与CAPN6过表达质粒(pcDNA-CAPN6)至宫颈癌HeLa细胞。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测CAPN6、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)的蛋白表达情况,并进行统计分析。结果宫颈癌组织中miR-216a mRNA相对表达量明显低于癌旁正常组织(t=52.968,P<0.05),而CAPN6 mRNA和CAPN6蛋白相对表达量均明显高于癌旁正常组织(t值分别为26.622、45.036,P<0.05)。过表达miR-216a降低了HeLa细胞24、48、72h的增殖活力及Bcl-2蛋白相对表达量,提高了细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Bax蛋白相对表达量(F=11.885~90.813,P<0.05)。过表达miR-216a降低了HeLa细胞中CAPN6 mRNA和CAPN6蛋白相对表达量(F值分别为58.990、156.82,P<0.05)。下调CAPN6降低了HeLa细胞24、48、72h的增殖活力及Bcl-2蛋白相对表达量,提高了细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Bax蛋白相对表达量(F=42.390~241.912,P<0.05)。过表达CAPN6可逆转过表达miR-216a对HeLa细胞增殖、凋亡及凋亡蛋白的影响。结论miR-216a在宫颈癌组织中低表达,过表达miR-216a可抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,其可能是通过靶向下调CAPN6表达发挥作用。

miR-216a通过靶向CAPN6影响子宫肌瘤细胞的增殖和凋亡

目的:探讨miR-216a在子宫肌瘤中表达及调控CAPN6基因对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-216a在正常子宫肌层及子宫肌瘤组织和细胞中的表达。在子宫肌瘤细胞中过表达miR-216a,利用qRT-PCR检测CAPN6 mRNA的表达,Western blot法检测CAPN6蛋白的表达。利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)实验检测过表达miR-216a后子宫肌瘤细胞增殖能力。流式细胞术检测过表达miR-216a后细胞凋亡情况。结果:miR-216a在子宫肌瘤组织中的表达低于子宫肌层组。过表达miR-216a后CAPN6基因mRNA及蛋白的表达量明显降低。过表达miR-216a抑制了子宫肌瘤细胞的增殖而促进了细胞凋亡。结论:miR-216a在子宫肌瘤中呈低表达,可在体外靶向抑制CAPN6基因,抑制子宫肌瘤细胞增殖能力,促进细胞凋亡,可能成为生物治疗子宫肌瘤的有效靶标分子。