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肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的表达及鉴定
被引量:
3
1
作者
刘宝山
赵芝娜
+1 位作者
赵雨杰
王桂珍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期588-591,共4页
目的探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的免疫反应活性。方法对CARDS毒素蛋白的抗原表位进行分析,选取10个重要的表位进行拼接,反向翻译后合成并克隆,插入pET28a表达载体构建pET-CARDS表达质粒并转入受体菌。经IPTG诱导表达的...
目的探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的免疫反应活性。方法对CARDS毒素蛋白的抗原表位进行分析,选取10个重要的表位进行拼接,反向翻译后合成并克隆,插入pET28a表达载体构建pET-CARDS表达质粒并转入受体菌。经IPTG诱导表达的多表位拼接CARDS蛋白使用6×His单克隆抗体和人阳性血清进行了免疫印迹的检测。结果 CARDS毒素蛋白的多表位拼接抗原表达载体构建成功,诱导后表达大小为30KDa的重组蛋白,Western blot测定其能与6×His单克隆抗体和人阳性血清发生反应。结论本研究选取的CARDS毒素蛋白抗原表位具有较强的免疫活性,可为Mp感染的诊断提供新的候选抗原。
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关键词
肺炎支原体
cards毒素蛋白
多表位拼接抗原
表达
鉴定
下载PDF
职称材料
重组肺炎支原体CARDS毒素蛋白临床检测应用的初步研究
被引量:
5
2
作者
司文
周世冠
+3 位作者
刘宝山
白爽
王蒙
王桂珍
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015年第11期1262-1265,共4页
目的初步探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白在检测肺炎支原体感染中的应用价值。方法 PCR扩增CARDS毒素基因并连接到PMD-19-T载体,经酶切、PCR及核苷酸测序分析后,将CARDS毒素基因片段克隆到pGEX-6p-1表达载体内并转入受体菌。IPTG诱导大肠...
目的初步探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白在检测肺炎支原体感染中的应用价值。方法 PCR扩增CARDS毒素基因并连接到PMD-19-T载体,经酶切、PCR及核苷酸测序分析后,将CARDS毒素基因片段克隆到pGEX-6p-1表达载体内并转入受体菌。IPTG诱导大肠埃希菌BL21重组株(pGEX-6p-1-CARDS)的表达。GST柱层析纯化重组CARDS毒素蛋白,以该重组蛋白和重组P1蛋白为抗原建立间接ELISA方法,检测85份感染肺炎支原体的血清标本,并与重组P1蛋白的ELISA结果进行比较。结果 CARDS毒素蛋白表达载体构建成功并表达大小为43kDa的重组蛋白,Western blot测定其能与兔抗Mp多价抗血清发生反应。ELISA结果显示,CARDS毒素蛋白的阳性率为70.59%(60/85),重组P1蛋白的阳性率为63.53%(54/85)。结论本研究成功构建了CARDS毒素蛋白表达载体并获得了稳定表达的重组菌株;在诊断肺炎支原体感染的血清学ELISA试验中,重组CARDS毒素蛋白的敏感性高于重组P1蛋白,为Mp感染的诊断提供了新的可用抗原。
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关键词
肺炎支原体
cards毒素蛋白
ELISA
临床检测
原文传递
题名
肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的表达及鉴定
被引量:
3
1
作者
刘宝山
赵芝娜
赵雨杰
王桂珍
机构
沈阳农业大学
沈阳药科大学
中国医科大学
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期588-591,共4页
基金
辽宁省社会科学发展基金(No.20122225019)项目资助~~
文摘
目的探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的免疫反应活性。方法对CARDS毒素蛋白的抗原表位进行分析,选取10个重要的表位进行拼接,反向翻译后合成并克隆,插入pET28a表达载体构建pET-CARDS表达质粒并转入受体菌。经IPTG诱导表达的多表位拼接CARDS蛋白使用6×His单克隆抗体和人阳性血清进行了免疫印迹的检测。结果 CARDS毒素蛋白的多表位拼接抗原表达载体构建成功,诱导后表达大小为30KDa的重组蛋白,Western blot测定其能与6×His单克隆抗体和人阳性血清发生反应。结论本研究选取的CARDS毒素蛋白抗原表位具有较强的免疫活性,可为Mp感染的诊断提供新的候选抗原。
关键词
肺炎支原体
cards毒素蛋白
多表位拼接抗原
表达
鉴定
Keywords
Mycoplasma pneumonia
cards
toxin
chimeric
expression
identification
分类号
R375 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
重组肺炎支原体CARDS毒素蛋白临床检测应用的初步研究
被引量:
5
2
作者
司文
周世冠
刘宝山
白爽
王蒙
王桂珍
机构
中国医科大学
中国人民解放军
沈阳农业大学
出处
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015年第11期1262-1265,共4页
基金
辽宁省社会科学发展基金课题:肺炎支原体嵌合蛋白抗原诊断试剂的制备与应用研究(辽科发2012-46)
文摘
目的初步探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白在检测肺炎支原体感染中的应用价值。方法 PCR扩增CARDS毒素基因并连接到PMD-19-T载体,经酶切、PCR及核苷酸测序分析后,将CARDS毒素基因片段克隆到pGEX-6p-1表达载体内并转入受体菌。IPTG诱导大肠埃希菌BL21重组株(pGEX-6p-1-CARDS)的表达。GST柱层析纯化重组CARDS毒素蛋白,以该重组蛋白和重组P1蛋白为抗原建立间接ELISA方法,检测85份感染肺炎支原体的血清标本,并与重组P1蛋白的ELISA结果进行比较。结果 CARDS毒素蛋白表达载体构建成功并表达大小为43kDa的重组蛋白,Western blot测定其能与兔抗Mp多价抗血清发生反应。ELISA结果显示,CARDS毒素蛋白的阳性率为70.59%(60/85),重组P1蛋白的阳性率为63.53%(54/85)。结论本研究成功构建了CARDS毒素蛋白表达载体并获得了稳定表达的重组菌株;在诊断肺炎支原体感染的血清学ELISA试验中,重组CARDS毒素蛋白的敏感性高于重组P1蛋白,为Mp感染的诊断提供了新的可用抗原。
关键词
肺炎支原体
cards毒素蛋白
ELISA
临床检测
Keywords
Mycoplasma pnumoniae
cards
toxin protein
ELISA
Clinical detection
分类号
R725.6 [医药卫生—儿科]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的表达及鉴定
刘宝山
赵芝娜
赵雨杰
王桂珍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
下载PDF
职称材料
2
重组肺炎支原体CARDS毒素蛋白临床检测应用的初步研究
司文
周世冠
刘宝山
白爽
王蒙
王桂珍
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015
5
原文传递
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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