lncRNA CASC2C靶向Wnt/β-catenin信号通路影响口腔鳞癌顺铂敏感性的实验研究

目的探讨长链非编码RNA癌易感性候选基因2C(lncRNA CASC2C)对Wnt/β-catenin信号通路的负性调控作用,以及对口腔鳞癌细胞株顺铂(DDP)耐药的影响。方法体外培养FaDu细胞和FaDu顺铂耐药细胞(FaDu/DDP),将lncRNA CASC2C序列和无序序列分别转染至FaDu/DDP细胞中作为过表达组和阴性对照(NC)组,另设空白对照组(CTL),并通过实时荧光定量PCR(QPCR)法进行验证。采用MTT法检测不同浓度DDP(3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L)对各组细胞增殖的影响。流式细胞术法检测CTL组、NC组、过表达组细胞凋亡情况。采用Western blotting法检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Axin1、c-myc、cyclin D1、β-catenin表达情况。结果FaDu/DDP细胞lncRNA CASC2C的表达量为0.67±0.045,明显低于FaDu细胞(P<0.05)。MTT法结果显示,DDP对FaDu细胞和FaDu/DDP细胞的IC50分别为14.471μmol/L和39.886μmol/L。FaDu/DDP的耐药指数为2.756。QPCR结果显示,过表达组FaDu/DDP细胞lncRNA CASC2C的相对表达量为1.47±0.139,明显高于CTL组和NC组(P<0.05)。不同浓度DDP(3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L)对过表达组FaDu/DDP细胞增殖抑制率分别为(5.46±1.29)%、(10.31±1.34)%、(22.69±2.15)%、(40.83±3.40)%、(69.71±3.67)%、(73.54±4.10)%,明显高于CTL组和NC组(P<0.05)。过表达组FaDu/DDP细胞FZD8蛋白、c-myc蛋白、cyclin D1蛋白、β-catenin蛋白表达量分别为0.66±0.17、0.84±0.12、0.78±0.15、0.52±0.16,低于CTL组和NC组;而Anxin蛋白表达量为1.12±0.16,高于CTL组和NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调lncRNA CASC2C表达可逆转口腔鳞癌顺铂耐药细胞株FaDu/DDP的耐药性,其作用机制可能是通过负性调控FZD8的表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活。

lncRNA CASC2c通过ERK1/2和Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞SGC-7901增殖及迁移的影响

目的本实验通过筛选出与胃癌相关的长链非编码RNA(lncRNA)CASC2c,探讨CASC2c对胃癌增殖、迁移的影响。方法利用生物信息学技术筛选出与胃癌相关的lncRNA CASC2c,采用实时荧光定量PCR(RTqPCR)方法测定CASC2c在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达。采用CCK8实验、Transwell实验分别测定实验组与对照组胃癌细胞增殖和迁移的变化;采用Western blot实验检测两组p-ERK1/2和β-catenin的表达水平。结果RT-qPCR检测结果显示,与正常相邻胃组织及正常胃细胞GSE-1相比,CASC2c在胃癌组织及胃癌细胞SGC-7901中低表达(t=3.651、2.366,P<0.05)。CCK8实验及Transwell实验检测结果显示,诱导CASC2c高表达后,与对照组相比,胃癌细胞的增殖和迁移能力均明显降低(t=18.910、2.821,P<0.05)。Western blot检测结果显示,CASC2c表达升高后能够降低p-ERK1/2和β-catenin的表达(t=8.538、5.667,P<0.05)。结论 lncRNA CASC2c在胃癌组织及胃癌细胞中表达下调,并且通过抑制p-ERK1/2和β-catenin的表达抑制胃癌细胞增殖和迁移。