干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)FV006对发酵食品中生物胺的降解性能

为验证干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)对生物胺的降解性能及潜在应用价值。本研究利用高效液相色谱法,探究该菌在液态培养条件下的降胺性能和应用于贵州6种市售发酵食品中的降胺效果。结果表明,在液态培养试验中该菌对组胺、亚精胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、酪胺和色胺的降胺率分别为9.44%、23.39%、16.27%、13.68%、19.14%、18.16%和12.45%。此外,研究发现该菌对道菜中色胺的降胺率为56.68%;对豆瓣酱中尸胺、组胺和亚精胺的降胺率分别为68.06%、74.52%和85.82%;对酱油中色胺和尸胺的降胺率为66.75%%、81.53%;对泡菜中色胺的降胺率为45.74%;对鱼罐头中色胺、尸胺、组胺和亚精胺的降胺率分别为55.66%、63.92%、45.96%、52.62%;对香肠中色胺、组胺和亚精胺的降胺率分别为71.15%、56.26%、75.54%。研究还发现该菌既具有产生物胺的能力,也具有降解生物胺的能力,且对不同食品中同一种生物胺的降解具有差异性。本研究为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)在低胺发酵食品中的应用提供理论依据。

Lactobacillus casei Zhang的甲基转移酶突变体与其野生型的代谢组学比较

DNA甲基化作为表观遗传学的重要组成部分,在细菌的很多生理过程中发挥着重要作用。作者基于超高效液相色谱-质谱联用非靶向代谢组学技术,比较DNA甲基转移酶突变体Lactobacillus casei(L.casei)ZhangΔpglX与野生型L.casei Zhang在对数生长前期(4 h)的代谢差异。共鉴定得到23个显著差异代谢物(P<0.05),主要富集在氨酰-tRNA生物合成、不饱和脂肪酸生物合成、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢及半乳糖代谢等代谢途径。结果表明,DNA甲基化表型在对数生长前期可能会影响菌株对氨基酸的合成和利用;另一方面,DNA甲基化表型在对数生长前期可能会调节菌株细胞膜脂肪酸成分,改变细胞膜的通透性和流动性。

干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)HDS-01甘露聚糖酶基因异源表达及功能验证

为实现甘露聚糖酶基因异源表达并验证功能,本研究以产甘露聚糖酶的副干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)HDS-01为供试菌株,将基因组序列中功能预测为甘露糖苷酶的基因M1在大肠杆菌中表达,分别以pET-28a和Escherichia coli BL21(DE3)为载体和宿主菌构建M1基因工程菌株,纯化重组蛋白并验证甘露聚糖降解功能。结果表明:重组蛋白M1在表达过程中以包涵体形式存在,经Ni柱亲和层析纯化后,SDS-PAGE显示蛋白为98 kDa,复性后酶活和蛋白浓度分别为19.24±0.55 U/mL和0.51±0.01 mg/mL。高效液相色谱(High pressure liquid chromatography,HPLC)检测重组蛋白M1降解魔芋粉的产物,反应前3 h,甘露三糖或四糖浓度显著高,此后,甘露糖和甘露二糖浓度逐渐升高。本研究为产甘露聚糖酶乳酸菌直接用于食品级领域奠定了基础,也为乳酸菌甘露聚糖酶蛋白的定向改造提供了依据。

喂饲Lactobacillus casei Zhang对大鼠体内脂质代谢的影响

从内蒙古锡林郭勒盟正蓝旗传统酸马奶中分离筛选到1株降胆固醇功效较好的乳杆菌Lactobacillus．casei Zhang。用Lb．casei Zhang灌胃高脂血症模型大鼠研究其对血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果表明:灌胃14 d后,Lb．casei Zhang热致死菌体组大鼠血清中TC浓度较对照组显著降低(P<0．01),TG浓度虽有降低但不呈显著性,同时HDL-C浓度显著升高(P<0．05);Lb．casei Zhang活菌体组大鼠血清中TC、TG浓度均有所降低,HDL-C浓度升高,但未呈显著性。灌胃28 d后,Lb．casei Zhang热致死菌体组大鼠血清中TC浓度较对照组显著降低(P<0．05),Lb．casei Zhang活菌体组TC浓度及两组TG、LDL-C浓度降低,但差异不显著,HDL-C未发生明显的改变。Lb．casei Zhang热致死菌体组和活菌体组粪便中的胆酸含量均增高,但只有热致死菌体组差异显著(P<0．05)。通过实验表明Lb．casei Zhang通过菌体对胆固醇的吸收吸附及减少肝肠循环中的胆酸来达到降血脂的功效。

益生菌Lactobacillus casei Zhang对凝固型发酵乳质构和挥发性风味物质的影响

【目的】评价益生菌Lactobacillus casei Zhang(L.casei Zhang)货架期内活菌数的变化及其对发酵乳物理特性和挥发性风味物质的影响。【方法】将2株Streptococcus thermophilus(S.thermophilus)分别与益生菌L.casei Zhang复配发酵,发酵结束(pH 4.5)于4℃冷藏28 d,并对发酵乳各指标进行测定。【结果】4℃贮藏28 d时,发酵乳中益生菌L.casei Zhang活菌数没有显著性变化(P<0.05),且数量保持在108CFU/g以上;益生菌L.casei Zhang与S.thermophilus复配发酵有利于提高3-羟基-2-丁酮和己酸等挥发性风味物质的含量,同时短期贮藏过程中(1—7 d)可赋予产品较高的黏度、硬度、脆度、胶性和耐嚼性,随着贮藏时间的延长其对产品物理特性的影响随发酵用S.thermophilus菌株的不同而呈现不同的变化。【结论】4℃贮藏28 d过程中,益生菌L.casei Zhang具有非常好的稳定性,同时其与S.thermophilus复配发酵可赋予产品较好的质构和风味。

益生菌Lactobacillus casei Zhang对酸奶风味、质地及感官特性的影响

将益生菌Lactobacillus casei Zhang(Lb.casei Zhang)以1.0×107g-1的添加量与商业酸奶发酵剂YC-X11共同接种进行发酵乳制备。发酵结束(pH=4.5)于4℃冷藏24h后,分别测定发酵乳样品的酸度、黏度、脱水收缩性、挥发性风味物质、L.delbrueckii subsp.Bulgaricus、S.thermophilus和Lb.casei Zhang活菌数及对其进行感官鉴评。结果表明,Lb.caseiZhang对发酵乳样品的酸度、黏度、脱水收缩性、S.thermophilus活菌数无影响(P>0.05),可促进L.delbrueckii subsp.Bulgaricus生长(P<0.05),并使酸奶样品中挥发性风味物质总的质量分数提高17.1%,从而总体上提高发酵乳的感官品质。同时Lb.casei Zhang在发酵乳中具有良好的稳定性,因而益生菌Lb.casei Zhang与商业酸奶发酵剂YC-X11复配进行发酵乳生产具有极大的可行性。

饲喂益生菌Lactobacillus casei Zhang对高脂日粮大鼠肝脏脂质代谢的作用

【目的】研究不同剂量益生菌L.casei Zhang(2.0×1010CFU/d、2.0×109CFU/d和2.0×108CFU/d)及其发酵乳饮料(2.0×108CFU/mL/d)对高胆固醇血症大鼠肝脏脂质的治疗作用。【方法】采用高脂饲料诱导高脂血症,采用相应试剂盒测定肝脏总胆固醇水平(TC)和甘油三酯(TG)水平、粪便总胆汁酸水平与胆固醇水平以及血清载脂蛋白ApoAⅠ与ApoB水平。【结果】益生菌各剂量组和发酵饮料组与高脂模型组相比,肝脏总胆固醇水平(TC)和甘油三酯(TG)水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。各试验组均可显著增加高血脂大鼠粪便总胆汁酸水平和血清载脂蛋白ApoAⅠ水平以及显著降低血清载脂蛋白ApoB水平(P<0.01),但对粪便胆固醇水平影响不明显(P>0.05)。【结论】益生菌L.casei Zhang主要通过增加总胆汁酸的排出和调节载脂蛋白水平来改善高血脂大鼠肝脏脂质水平。

益生菌Lactobacillus casei Zhang对凝固型发酵乳感官品质的影响

【目的】评价益生菌Lactobacillus casei Zhang(L.casei Zhang)对凝固型发酵乳感官品质的影响。【方法】将Streptococcus thermophilus(S.thermophilus)与益生菌L.casei Zhang复配发酵,发酵结束(pH4.5)于4℃冷藏1 d或28 d,并对发酵乳进行感官鉴评试验。【结果】益生菌L.casei Zhang与S.thermophilus复配发酵可赋予产品更好的细腻性、更为浓郁的奶油味和乙醛风味,从而提升产品的风味总体得分、气味总体得分及产品总得分。4℃贮藏7 d时益生菌发酵乳具有最好的气味和风味感官特征,而贮藏14 d时具有最好的表观和质地感官特征。【结论】益生菌L.casei Zhang可提高发酵乳制品的感官品质,同时贮藏时间对发酵乳感官特性产生影响。

利用Lactobacillus casei Zhang开发益生菌新鲜干酪

通过添加不同比例Lactobacillus casei Zhang发酵剂制作新鲜干酪，并对其在新鲜干酪中的活力和添加Lactobacillus后新鲜干酪的理化性质进行了研究。结果表明，Lb．casei Zhang在新鲜干酪中具有较高的活力，添加2％、1％、0．5％Lb．casei Zhang发酵剂的干酪中，4℃冷藏开始前，Lb．casei Zhang活菌数分别为2．24×10^8 cfu／g，1．38×10^8 cfu／g，5．55×10^8 cfu／g，4℃冷藏28d后，Lb．casei Zhang存活率分别为99．12％，98．31％，98．61％。在制作过程中和4℃冷藏过程中，与空白组相比，添加Lb．casei Zhang对新鲜干酪的pH值、滴定酸度、蛋白水解活性影响都不显著（P〉0．05）。

L.casei Zhang对小鼠T淋巴细胞亚群及血清IgG和肠黏膜SIgA的影响

对从内蒙古传统发酵酸马奶中分离筛选的L.caseiZhang对小鼠T淋巴细胞亚群、血清IgG和肠黏膜SIgA的影响进行了研究。结果表明,L.caseiZhang可以显著提高小鼠外周血中CD3+、CD4+、CD8+的比例,优化了CD4+/CD8+比值,同时L.caseiZhang可以显著增加小鼠血清IgG质量浓度和小鼠肠黏膜SIgA质量浓度。这些结果说明了L.caseiZhang对小鼠的细胞免疫、体液免疫及肠黏膜局部免疫具有调节功能。

乳杆菌Lb.casei.Zhang对小鼠血清中细胞因子水平的影响

目的:观察及评价乳杆菌Lb.caseiZhang对小鼠血清中IFN-γ、IL-12、IL-1α、TNF-α水平的影响。方法:应用分离自酸马奶,并经过耐酸性实验、人工胃肠消化液中存活能力筛选的L.caseiZhang,制备成热致死菌体和活菌制剂各分成高、中、低三个剂量组灌服小鼠至15d,采用ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-12、IL-1α、TNF-α的含量。结果:活菌制剂高、中剂量组小鼠血清中IFN-γ、IL-12含量明显高于对照组(p<0.05),IL-1α、TNF-α含量明显低于对照组(p<0.01);灭活菌制剂对细胞因子的影响与对照相比无显著差异。结论:Lb.caseiZhang活菌制剂的免疫调节作用优于热致死菌体制剂。活菌制剂对小鼠的细胞免疫功能产生了多方面的、有利于机体免疫功能状态的调节作用。

益生菌Lactobacillus casei Zhang冻干粉对小鼠急性毒性的研究

通过研究益生菌Lactobacillus casei Zhang冻干粉对小鼠急性毒性作用,为该菌株的安全应用提供依据。连续14d对小鼠灌胃不同剂量的L.casei Zhang冻干粉,各剂量组小鼠的一般体征、肝脏功能、脏器指数以及肝、肾、脾形态学的观察结果与对照组相比无显著差异(P>0.05)。急性毒性试验及相关指标检测结果显示L.casei Zhang冻干粉无毒副作用。

益生菌Lactobacillus casei Zhang在酸胁迫下的蛋白质组学研究

Lactobacillus casei Zhang是1株筛选自发酵酸马奶,并具有耐酸等益生特性的益生乳杆菌。该研究利用蛋白质组双向电泳,比较了其在pH值为7.0和5.5的培养液中分别生长至对数生长期中期的蛋白质组表达差异。结果表明,有11个蛋白质点表达发生明显变化,经过基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定,其中有3个表达增强的蛋白质点分别鉴定为翻译因子(EF-Tu),N-乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸脱醛酶(NagA)和小热休克蛋白(sHsp)。酸胁迫可诱导乳酸菌产生复杂的酸应激反应,涉及不同的代谢调控途径。

益生菌Lactobacillus casei Zhang高密度发酵中试工艺及动力学研究

在益生菌L.caseiZhang高密度培养小试(3L)基础上,进行30L到150L逐级放大中试生产工艺的研究以确定规模化生产工艺。在优化的发酵工艺下,150L规模发酵菌体密度可达2.9×1010cfu/mL,与小试水平无差异。采用origin7.5软件在logistic equation基础上建立L.caseiZhang的生长和葡萄糖代谢动力学模型,模型与试验值拟合良好,平均误差小于10%,能够较好地反应发酵过程。初步探讨发酵后菌体的离心和冷冻干燥过程对菌体的影响,虽然发酵液经离心收集菌体后冷冻干燥可得到平均活菌数2.65×1011cfu/g的菌粉,能够满足益生菌制剂和发酵剂对高活菌数的要求,但冻干前后活菌得率仅49.97%。有必要针对L.casei Zhang的冻干保护剂和冻干工艺进一步优化,以提高菌体存活率得到更高菌体浓度的益生菌粉。

Lactobacillus casei rhamnosus的抑菌作用及最佳抑菌作用发酵条件优化

为了研究Lactobacillus casei subsp.rhamnosus LCR 719产生抑菌作用的原因,应用牛津杯琼脂扩散法测定LCR719在MRS上清液的抑菌作用。LCR719在MRS中发酵时,醋酸先升后降,乳酸不断增加,乳酸和醋酸的摩尔浓度比从6h的0.28增加到60h的2.63。最佳抑菌作用的培养条件为:初始pH6.5,吐温8010.0ml/L,葡萄糖20.0g/L,培养温度37℃,培养时间为42h。该条件下的上清液对S.aureus抑菌圈直径达42mm,对枯草芽孢杆菌和肠炎沙门氏菌也有很好的抑菌效果,可降低E.coli及EHEC O157菌群密度,对酵母无抑制作用。结果表明,LCR719是一种潜在的可用于生物防腐的保护性菌种。

Lactobacillus casei-14对小鼠溃疡性结肠炎的预防作用

采用2.5%右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导小鼠溃疡性结肠炎模型,研究Lactobacillus casei-14（L.casei-14）对小鼠溃疡性结肠炎（UC）的预防作用,并探讨其可能的机制.结果表明：L.casei-14高剂量组小鼠结肠长度为（7.66±0.58）cm,与模型组（（6.73±0.42）cm）相比差异显著（P〈0.05）;中、高剂量组小鼠结肠炎疾病活动指数（DAI）分别为（4.22±0.97）和（4.17±1.33）,与模型组（8.00±2.12）相比差异极显著（P〈0.01）;组织病理学炎症评分结果显示,中、高剂量组小鼠炎症评分分别为（4.88±0.83）和（4.13±0.64）,极显著低于模型组（10.50±1.85）（P〈0.01）;中、高剂量组小鼠IL-1β、TNF-αmRNA表达水平均显著低于模型组,与正常对照组没有极显著性差异（P〈0.01）.说明L.casei-14对小鼠溃疡性结肠炎具有预防作用,其机制可能是通过抑制IL-1β和TNF-α炎症细胞因子的表达而减轻小鼠结肠黏膜的损伤,以达到预防UC的目的.

益生菌L.casei Zhang的多项分类鉴定

结合传统生理生化鉴定结果和16S rDNA序列分析方法对L.casei Zhang在干酪乳杆菌这个类群中的分类学地位进行了综述。结果表明,该菌应属于干酪乳杆菌干酪亚种。

Lb．casei．Zhang肽聚糖体内外抗肿瘤作用

为研究干酪乳杆菌Lb.casei.Zhang细胞壁肽聚糖(peptidoglycan;PG)的抗肿瘤作用,用流式细胞仪检测肽聚糖对人胃癌BGC-823细胞生长周期的影响。以肝癌H22细胞移植瘤昆明小鼠为模型,分别采用原位杂交和免疫组化方法检测小鼠移植瘤增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA的表达以及凋亡因子Bcl-2和Bax基因的蛋白表达。结果显示,肽聚糖能够阻滞人胃癌BGC-823细胞生长于G0/G1期;实验组PCNA mRNA的表达和Bcl-2基因的蛋白表达平均光密度值均明显低于对照组,而Bax基因蛋白表达情况则相反,与对照组比较,均差异显著(α=0.05),且抑瘤率达37.21%。提示干酪乳杆菌Lb.casei.Zhang细胞壁肽聚糖具有抗肿瘤作用。

碳源限制条件下Lactobacillus casei Zhang传1000代过程中的稳定性

通过检测细胞形态、活菌数、浊度和菌株活力的变化情况对Lactobacillus casei Zhang在碳源限制性培养基中连续传代1 000代期间稳定性进行了初步研究。结果表明:L.casei Zhang在传代期间细胞形态有微弱变化;活菌数、浊度和菌株活力总体基本维持不变;L.casei Zhang在碳源限制条件下长期传代过程中的稳定性可能受多种因素影响。