联合检测胃癌组织中CASP-3和Bcl-xl的表达

目的 人胃癌组织中caspase-3和bcl-xl表达的研究，探讨caspase-3和Bcl-xl表达与胃癌预后的关系，及caspase-3与bcl-xl表达相互调控的关系。方法 应用免疫组化ABC法检测人胃癌组织中caspase-3和bcl-xl的表达情况。结果 周围正常胃粘膜上皮和胃癌组织中caspase-3阳性率分别为48／50(96％)和35／50(70％)，较周围正常胃粘膜上皮明显降低(P<0．05)；周围正常胃粘膜上皮和胃癌组织中bcl-xl的阳性率分别为21／50(42．0％)和33／50(66％)，较周围正常胃粘膜上皮明显降低(P<0．05)。caspase-3和bcl-xl的表达分别与胃癌的预后指标(如组织学类型，TNM分期等)明显相关性(P<0．05)。但caspase-3与bcl-xl表达之间无明显相关性(P>0．05)。结论 人胃癌组织中caspase-3的表达较低而bcl-xl的表达较高。这一结果提示caspase-3低表达和bcl-xl的高表达导致的细胞凋亡异常降低及增生过度可能是胃癌的发病原因之一。这一结果亦提示caspase-3与胃正常粘膜及肿瘤细胞的凋亡有关。Caspase-3和bcl-xl在胃癌可能具有预后价值。

胃癌组织中CASP-3和bcl-xl表达的研究

目的 探讨胱氨酸蛋白酶 3(CASP 3)和bcl xl表达与胃癌预后的关系 ,及CASP 3与bcl xl表达相互间的关系。方法 应用免疫组织化学ABC法检测人胃癌组织中CASP 3和bcl xl的表达情况。结果 正常胃粘膜上皮和胃癌组织中CASP 3的阳性率分别为 96 .0 % ( 4 8/ 5 0 )、70 .0 % ( 35 / 5 0 ) ,两者比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;正常胃粘膜上皮和胃癌组织中bcl xl的阳性率分别为 42 .0 % ( 2 1/ 5 0 )、6 6 .0 % ( 33/ 5 0 ) ,两者比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。CASP 3和bcl xl的表达与胃癌的预后指标 (如组织学类型 ,TNM分期等 )明显相关 (P <0 .0 5 ) ,但CASP 3与bcl xl表达之间无明显相关性 (P >0 .0 5 )。结论 人胃癌组织中CASP 3的表达较低而bcl xl的表达较高。CASP 3低表达和bcl xl的高表达导致的细胞凋亡异常降低及增生过度 ,可能是胃癌的发病原因之一。CASP 3与胃正常粘膜及肿瘤细胞的凋亡有关。CASP 3和bcl

疏风宣肺方和解表清里方干预流感病毒性肺炎小鼠细胞凋亡的研究

目的病毒感染宿主细胞后,细胞凋亡天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(caspase)途径激活限制病毒复制,但甲型流感病毒感染引起的细胞凋亡的分子机制尚不完全清楚。探讨流感病毒性肺炎小鼠肺组织细胞凋亡相关的基因及2种不同抗流感病毒方药的治疗作用。方法制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,随机分为空白组、肺炎模型组、奥司他韦对照组、疏风宣肺方高、中、低剂量组,解表清里方高、中、低剂量组。提取各组小鼠肺组织总RNA,采用基因组芯片筛选出与凋亡密切相关的差异表达基因,并用荧光定量PCR对天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白基因进行验证。结果肺炎模型组肺组织中差异表达基因casp-3、casp-8、casp-9、Fas、FasL、TNF、TNFrasf1a、Tradd、IL1a、IL1b、IL1r1、IL1r2、casp-7明显上调,与空白组比较差异有统计学意义。疏风宣肺方中剂量组差异表达基因casp-8、casp-7、Fas、FasL、TNF、TNFrasf1a、Tradd、IL1a、IL1b、IL1r1、IL1r2明显下调。疏风宣肺方低剂量组下调上述基因的作用强于解表清里方低剂量组,疏风宣肺方中剂量组治疗效果优于解表清里方中剂量组。疏风宣肺方低剂量组与解表清里方中剂量组对casp-3、-8、-9表达有显著抑制,差异有统计学意义(P<0.01)。不同剂量疏风宣肺方的治疗效果与解表清里方比较如下:疏风宣肺方低剂量组>疏风宣肺方中剂量组>解表清里方中剂量组>解表清里方低剂量组。结论疏风宣肺方对细胞凋亡调控基因的调控作用强于解表清里方,上调casp-3、-8、-9表达,对抗流感病毒感染后的细胞凋亡较强,对甲型流感病毒性肺炎小鼠治疗作用优于解表清里方。

来氟米特对类风湿关节炎滑膜细胞焦亡的调控作用

目的:探讨来氟米特调控CASP-1/3/IL-1β信号通路抑制人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞焦亡的作用机制。方法:组织块法培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(human rheumatoid arthritis synovial fibroblast, HFLS-RA)予来氟米特及实验相关试剂干预。HE染色和免疫组化鉴定细胞,流式细胞术检测细胞周期,ELISA、RT-qPCR和Western blot法检测信号通路中焦亡相关炎性蛋白IL-1β、IL-18、Caspase-1、Caspase-3、NLRP3和GSDMD表达量。结果:组织块法培养的细胞鉴定为HFLS-RA。细胞周期结果,在G1期,与阳性对照组比较,来氟米特组细胞DNA生成量升高(P<0.05);在G2、S期,与阳性对照组比较,来氟米特组细胞DNA生成量降低(P<0.05)。ELISA结果显示,与阳性对照组比较,来氟米特组IL-1β、IL-18、Caspase-1、Caspase-3的分泌量降低(P<0.05)。RT-qPCR结果显示,与阳性对照组比较,来氟米特组IL-1β、IL-18、Caspase-1、Caspase-3、NLRP3和GSDMD的mRNA表达降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与阳性对照组比较,来氟米特组IL-1β、IL-18、Caspase-1、Caspase-3、NLRP3和GSDMD蛋白表达量降低(P<0.05)。结论:来氟米特调控CASP-1/3/IL-1β信号通路中多个焦亡相关蛋白。通过抑制中上游的NLRP3、Caspase-1合成炎小体,减少GSDMD蛋白表达而抑制通路下游IL-1β、IL-18等炎症因子生成及释放,在细胞周期G0/G1起阻滞作用,可能是来氟米特治疗RA的机制之一。