CASP3基因R101H多态性与法洛四联症的相关性

目的探讨CASP3基因R101H多态性与法洛四联症(TOF)的相关性。方法选择TOF患儿112例(TOF组)。男69例,女43例;年龄(4.27±1.93)岁。同时选取200名健康体检儿童为健康对照组。男102例,女98例;年龄(5.68±2.17)岁。采用病例对照研究,应用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)进行CASP3基因R101H位点(NCBI SNP ID:rs146285839)多态性检测,分析基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组的分布,比较不同基因型与TOF患病风险的关系。应用SPSS 15.0软件进行统计学分析。结果在312例样本中,CASP3基因R101H多态位点存在C/T多态。R101H多态位点基因型频率在TOF组与健康对照组中的分布存在统计学差异(χ2=9.752,P=0.008),等位基因频率在TOF组与健康对照组中的分布亦存在统计学差异(χ2=11.682,P=0.001),且T等位基因携带者患TOF的风险高于C等位基因携带者(OR=1.854,95%CI 1.298～2.647)。结论 CASP3基因R101H多态性与TOF具有明显的相关性,具有T等位基因的个体TOF患病风险增高,CASP3基因可能是TOF的遗传易感基因。

湖羊CASP3基因的序列分析及其在临床型乳腺炎乳腺组织中的表达特征

半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3,CASP3)是半胱氨酸蛋白酶家族(caspase,CASP)中的重要成员,处于细胞凋亡有序级联反应下游,是多种凋亡刺激信号传递的汇聚点,其活化也成为凋亡进入不可逆阶段的标志。然而,目前有关CASP3基因在绵羊乳腺炎发生过程中的调控机制尚不清楚。因此,本试验以湖羊作为试验动物,基于课题组前期转录组测序获得的湖羊CASP3基因CDS序列,采用生物信息学方法对其编码蛋白的理化性质、结构以及不同物种之间的同源性等进行了分析,并利用RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色方法检测了CASP3基因在健康和患临床型乳腺炎湖羊乳腺组织中的表达与定位特征差异。生物信息学分析显示湖羊CASP3蛋白为亲水性稳定蛋白,其蛋白结构无跨膜区,属于非分泌蛋白,在进化过程中具有高度保守性。RT-qPCR与蛋白免疫印迹结果显示,在健康和临床型乳腺炎乳腺组织中均存在CASP3基因的表达,且临床型乳腺炎乳腺组织中CASP3 mRNA和蛋白的相对表达量极显著(P<0.01),高于健康组。免疫组织化学结果显示CASP3蛋白在健康乳腺组织中主要分布于乳腺上皮细胞中,而在临床型乳腺炎乳腺组织中主要分布于基质细胞和乳腺上皮细胞。提示CASP3 mRNA和蛋白在临床型湖羊乳腺组织中表达均上调,这为进一步研究CASP3基因在绵羊乳腺炎发病机制中的调控作用提供基础信息。