类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中c-FLIP与外源性凋亡途径的相关性分析

目的:分析类风湿关节炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中Fas相关死亡区样白介素1转换酶抑制蛋白(c-FLIP)与外源性凋亡途径相关蛋白死亡结构域蛋白(FADD)、caspase-8表达水平变化的相关性。方法:选择2014年1月至2015年6月福建医科大学附属漳州市医院类风湿关节炎患者60例,按照类风湿关节炎疾病活动指数将患者分为低、中、高活动度组(分别为22、20和18例)。同时选择健康体检者25名作为健康对照组。采用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测PBMC中c-FLIP、FADD和caspase-8的mRNA和蛋白表达水平,并采用Pearson检验对c-FLIP与FADD、caspase-8表达的相关性进行分析。结果:类风湿关节炎患者PBMC中c-FLIP、FADD和caspase-8的mRNA表达量均高于健康对照组(均P <0. 05)。其中,中活动度组PBMC中FADD和caspase-8的mRNA表达量高于低活动度组(均P <0. 05),c-FLIP的mRNA表达量与低活动度组相近(P>0. 05);高活动度组PBMC中c-FLIP的mRNA表达量高于中、低活动度组(均P <0. 05),caspase-8的mRNA表达量低于中、低活动度组(均P <0. 05),FADD的mRNA表达量高于低活动度组(P <0. 05)。类风湿关节炎患者PBMC中c-FLIP mRNA水平与FADD mRNA水平呈正相关(r=0. 323,P <0. 05),与caspase-8mRNA水平呈负相关(r=-1. 104,P <0. 05)。中活动度组c-FLIP和FADD蛋白表达量高于健康对照组、低活动度组和高活动度组(P <0. 05或P <0. 01);中、高活动度组caspase-8蛋白表达量高于健康对照组和低活动度组(P <0. 05或P <0. 01),且高活动度组caspase-8蛋白表达量高于中活动度组(P <0. 05)。结论:类风湿关节炎患者PBMC中凋亡相关蛋白c-FLIP可能参与了外源性凋亡途径,并可为类风湿关节炎病情评估提供参考。

靶向CFLAR改善小鼠和非人灵长类动物的非酒精性脂肪肝炎

非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)逐渐成为发病率最高的慢性肝病类型。NASH发病常常伴随全身代谢综合征,疾病进展具有发生肝硬化甚至肝癌的高风险。然而,目前临床上尚无一种获批的针对NASH的有效治疗药物。我们的最新研究结果发现,天然免疫重要分子CFLAR[CASP8 and FADD(Fas-associating protein with death domain)-like apoptosis regulator]直在NASH疾病进程中的关键负调控作用。深入的分子机制探索证实,CFLAR接靶向激酶MAP3K5[mitogen-activated protein kinase kinase kinase 5,也称为ASK1(apoptosis signal-regulating kinase 1)]并阻断其N-端二聚化,从而抑制ASK1和激酶MAPK8[mitogen-activated protein kinase 8,也称为JNK1(c-Jun N-terminal kinase 1)]的信号通路。此外,我们鉴定出源于CFLAR的一个小肽片段(S1)可以有效发挥CFLAR对ASK1的抑制作用。应用CFLAR(S1)治疗可有效改善并逆转小鼠和猴子中的NASH及并发的代谢综合征。综上所述,我们发现,CFLAR是控制NASH疾病进展的关键抑制子。CFLAR(S1)特异性抑制ASK 1激活的作用机制,为开发或筛选NASH的靶向治疗药物提供了可行的新方案。

胆囊癌和胆囊炎组织中c-FLIP和P53的表达分析

目的检测c-FLIP与P53在胆囊癌和胆囊炎组织中的表达,比较c-FLIP和P53各自在胆囊癌和胆囊炎组织中的表达差异,探讨它们是否与肿瘤的生物学行为相关,以及两者之间表达的相互关系。方法采用免疫组化法检测c-FLIP和P53在49例胆囊癌标本和30例慢性胆囊炎标本中的表达,并对结果进行统计学分析。结果胆囊癌组织中c-FLIP和P53表达(85.71%和65.31%)显著高于胆囊炎组织(26.67%和26.67%)。c-FLIP和P53在胆囊癌组织中的表达与患者性别、胆囊癌的分化程度、TNM分期及有无淋巴结转移之间无显著关联。c-FLIP和P53在胆囊癌组织中表达有明显差异(χ2=5.06,P<0.05),但无显著联系(χ2=1.82,P>0.05)。结论 c-FLIP和突变型P53的过表达与胆囊癌的发生关系密切,可能都属于早期事件。c-FLIP与突变型P53在胆囊癌发生过程中的作用机制、途径可能不同。

c—FLIP在SLE患者外周血B细胞的表达及与临床特征的相关性研究

目的探讨SLE患者外周血B细胞凋亡抑制蛋白c—FLIP的表达及其与临床特征的相关性。方法53例SLE患者和30例正常人对照组，采用流式细胞术检测外周血B细胞c—FLIP表达阳性率，采用ELISA方法检测血清中IL-4和IL-10的水平。结果活动期SLE患者（18例）外周血B细胞内c—FLIP表达（3．11％±0．70％）明显高于非活动期患者（35例）（0．78％±0．28％）和正常人对照组（0．68％±0．12％）（P均〈0．05），而非活动期组和正常人对照组比较，差异无统计学意义（t=1．56，P〉0．05）。SLE患者外周血B细胞c～FLIP的表达与SLEDAI、ESR、C反应蛋白、ANA滴度均呈正相关（P均〈0．05）；伴有WBC减少的36例SLE患者中e—FLIP的表达与WBC的数目呈负相关（P〈0．01）。伴有狼疮肾炎的23例SLE患者的外周血B细胞内c—FLIP的表达（3．04％±1．09％）明显高于30例不伴狼疮肾炎者（1．76％4-1．09％）（t=4．23，P〈0．05）。SLE患者c-FLIP的表达与血清中IL-4和IL～10的水平均呈正相关（P均〈0．01）。结论活动期SLE患者外周血B细胞c—FLIP高表达，且与SLE病情严重程度正相关。同时其表达水平与SLE患者血清中IL4和IL-10水平呈正相关。

cFLIP与黑素瘤研究进展

cFLIP是近年来发现的一种凋亡抑制蛋白，通过抑制caspase-8的活化阻断死亡受体介导的凋亡信号。cFLIP还参与多种信号通路的传递。最近研究发现，cFLIPL还可以活化caspase-8。cFLIP的高表达与许多肿瘤相关，在黑素瘤组织及多种黑素瘤细胞系中存在cFLIP的高表达，向黑素瘤细胞引入cFLIP小干扰RNA，通过化疗药物或者UVB联合TRAIL阻断cFLIP的功能，能促进黑素瘤细胞的凋亡。