山羊CAST基因Ⅱ型转录本的克隆及在山羊不同组织中的表达

钙蛋白酶抑制蛋白（Calpastatin，CAST）基因是与畜禽肉质性状密切相关的重要候选基因。文章根据牛和绵羊CAST基因mRNA，应用RACE技术首次成功克隆了山羊CAST基因Ⅱ型转录本（以下简称CASTII基因）全长cDNA，对序列及编码的氨基酸进行了生物信息学分析。结果显示，该基因cDNA全长2474bp，完整的开放阅读框（ORF）为558～2252bp，编码564个氨基酸。氨基酸序列中存在4个保守结构域和1个保守七肽序列；蛋白质二级结构以无规卷曲和a-螺旋为主，富含疏水区，存在多个磷酸化位点以及蛋白激酶C（Protein kinaseC，PKC）的磷酸化位点。通过实时荧光定量RT—PCR技术分析了CASTⅡ基因在天府肉羊部分组织中的表达情况。结果表明：CASTII基因在所选择的天府肉羊7种组织中均有表达，半岁各组织中，眼肌的表达量最高，与腿肌差异显著（P〈0．05），极显著高于内脏各组织（P〈0．01）；在眼肌组织中，CASTⅡ基因的表达量随着年龄的增长而增加，3岁时的表达量最高。