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犬2型腺病毒的分离鉴定 被引量:1
1
作者 李凤艳 陈生雷 +3 位作者 刘艳霞 王一平 王博 舒秀伟 《现代畜牧兽医》 2023年第4期15-19,共5页
研究旨在通过对采集自辽宁省辽阳某犬专业合作社犬传染性肝炎患犬病料进行分离和鉴定,了解犬腺病毒(CAV)的生物学特性。试验通过分子生物学鉴定、病毒分离、抗性测定、电镜观察、病毒特异性鉴定和动物回归试验等对分离毒株的生物学特性... 研究旨在通过对采集自辽宁省辽阳某犬专业合作社犬传染性肝炎患犬病料进行分离和鉴定,了解犬腺病毒(CAV)的生物学特性。试验通过分子生物学鉴定、病毒分离、抗性测定、电镜观察、病毒特异性鉴定和动物回归试验等对分离毒株的生物学特性及致病力进行研究。结果显示,通过PCR扩增可得到1019 bp的特异性的核酸片段,命名为CAV A22株。通过核苷酸序列分析,分离株与GenBank上登录的国内外已发表CAV参考序列的核苷酸序列同源性最高达100%。由遗传进化树可知,分离株与U77082亲缘关系较近,处于同一分支;该分离株可在MDCK细胞上连续传代,病毒含量可达105.5TCID50/0.1 mL以上;电镜观察可见圆形、无囊膜、直径约80 nm的典型病毒粒子。病毒特异性鉴定表明分离株为犬2型腺病毒(CAV-2)。病毒回归试验表明,分离株致病力较弱,加以驯化可成为一株良好的疫苗毒株。 展开更多
关键词 2型腺病毒 犬传染性肝炎 病毒分离鉴定
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表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒免疫原性测定 被引量:4
2
作者 闫芳 夏咸柱 +4 位作者 扈荣良 谢之景 赵忠鹏 高玉伟 黄耕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期258-262,共5页
为测定表达犬瘟热病毒(CDV)H基因的重组犬2型腺病毒(CAV-2/CDVLPH)免疫原性,25只45-50日龄犬(抗CDV中和抗体小于1∶2,CAV-2 HI抗体效价小于1∶2)随机分为5组进行免疫犬试验,第1组为CAV-2/CDVLPH免疫组,第2组为pVAXLPH免疫组,第3组为pVAX... 为测定表达犬瘟热病毒(CDV)H基因的重组犬2型腺病毒(CAV-2/CDVLPH)免疫原性,25只45-50日龄犬(抗CDV中和抗体小于1∶2,CAV-2 HI抗体效价小于1∶2)随机分为5组进行免疫犬试验,第1组为CAV-2/CDVLPH免疫组,第2组为pVAXLPH免疫组,第3组为pVAXLPH和CAV-2/CDVLPH联合免疫组,CDV弱毒疫苗组和pVAX1空载体组分别作为阳性和阴性对照组。利用间接ELISA和CDV中和试验检测免疫犬的抗CDV体液免疫水平、CAV-2 HI试验检测免疫犬的抗CAV体液免疫水平、淋巴细胞转化试验检测免疫犬的抗CDV和抗CAV-2细胞免疫水平,分析CAV-2/CDVLPH的免疫性。结果,能够在各试验组免疫犬血清中检测到抗CDV ELISA抗体和抗CDV中和抗体,同时在第1组和第3组免疫犬的血清中检测到抗CAV-2的HI抗体,免疫犬的外周淋巴细胞对特异性和非特异性抗原刺激均有明显增殖,第2组的免疫应答水平低于第3组,第1组又高于第3组,但低于CDV弱毒疫苗免疫组,试验表明CAV-2/CDVLPH可同时诱导免疫犬产生抗CDV和CAV特异性免疫,CAV-2/CDVLPH与pVAXLPH相比能诱导犬产生较高的特异性免疫应答,然而低于CDV弱毒疫苗。 展开更多
关键词 犬瘟热 CDV H基因 cav-2
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表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒的构建与鉴定 被引量:7
3
作者 闫芳 夏咸柱 +3 位作者 扈荣良 谢之景 赵忠鹏 黄耕 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期425-428,共4页
将犬瘟热病毒 ( canine distemper virus,CDV ) H基因表达盒克隆入转移质粒 p VAXΔE3,构建含 CDV H基因表达盒的转移质粒 p VAXΔ E3L PH,用 Nru 和 Sal 分别酶切转移质粒 p VAXΔ E3L PH和犬 2型腺病毒全基因组质粒p Poly2 - CAV- 2 ,... 将犬瘟热病毒 ( canine distemper virus,CDV ) H基因表达盒克隆入转移质粒 p VAXΔE3,构建含 CDV H基因表达盒的转移质粒 p VAXΔ E3L PH,用 Nru 和 Sal 分别酶切转移质粒 p VAXΔ E3L PH和犬 2型腺病毒全基因组质粒p Poly2 - CAV- 2 ,将 CDV H基因表达盒定向克隆入 p Poly2 - CAV- 2质粒中 ,构建 E3区部分缺失的包含 CDV H基因表达盒的犬 2型腺病毒重组质粒 p CAV- 2 / CDVL PH。 Asc 和 Cla 对 p CAV- 2 / CDVL PH进行双酶切 ,释放 CAV- 2 /CDVL PH重组基因组 ,利用脂质体将 CAV- 2 / CDVL PH重组基因组与去除 Sal 和 Nru 片段的 CAV- 2基因组两端片段共转染 DK细胞 ,盲传和重复转染 3次 ,4 d后出现典型 CAV- 2病变 ,获得重组病毒 CAV- 2 / CDVL PH。用 CDV H基因特异性引物经 RT- PCR扩增重组病毒 DK细胞培养物 ,能够扩增出相应的核酸片段 ,表明 CAV- 2 / CDVL PH在DK细胞繁殖的过程中能够转录 CDVL P H的 m RNA,重组病毒免疫犬 ,可以诱导犬产生特异的抗 CAV- 2 HI抗体和抗 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 H基因 重组 2型腺病毒 表达
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表达狂犬病毒糖蛋白抗原的重组犬2型腺病毒的构建及鉴定 被引量:8
4
作者 赵忠鹏 夏咸柱 +4 位作者 扈荣良 谢之景 闫芳 黄耕 杨松涛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期335-339,共5页
为研制一种预防犬科动物狂犬病的新型疫苗,将含有狂犬病毒ERA株糖蛋白基因(Rabies glycoprotein,Rgp)表达盒的穿梭质粒pVAXΔE3Rgp中的Rgp表达盒克隆入犬2型腺病毒(Canine adenovirus type2,CAV2)骨架质粒pPoly2-CAV2中,获得重组质粒pPo... 为研制一种预防犬科动物狂犬病的新型疫苗,将含有狂犬病毒ERA株糖蛋白基因(Rabies glycoprotein,Rgp)表达盒的穿梭质粒pVAXΔE3Rgp中的Rgp表达盒克隆入犬2型腺病毒(Canine adenovirus type2,CAV2)骨架质粒pPoly2-CAV2中,获得重组质粒pPoly2-CAV2-ΔE3-Rgp,释放其基因组,转染MDCK细胞系,获得E3缺失区(Deletion of early protein3,ΔE3)含有Rgp表达盒的重组病毒CAV2-ΔE3-Rgp。该重组病毒能在MDCK细胞上产生典型的腺病毒细胞病变。通过酶切、PCR、基因测序,表明该重组病毒含有完整的Rgp表达盒。通过RT-PCR、Western blot等检测,表明该重组病毒能够表达Rgp抗原。用该重组病毒免疫犬,3次免疫后,可以诱导犬产生特异的抗CAV2HI抗体,其效价超过1∶256和抗狂犬病病毒(Rabies virus,RV)中和抗体,其效价超过0.50IU/mL。试验结果表明,获得的重组病毒免疫犬后,能够产生抗狂犬病毒和腺病毒的高效价保护性抗体,是一种有潜力的犬科动物狂犬病毒腺病毒二联疫苗候选株。 展开更多
关键词 狂犬病毒 2型腺病毒
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小窝蛋白-1、基质金属蛋白酶-2在膀胱癌的表达及其关系 被引量:6
5
作者 李恒平 陈一戎 +2 位作者 颜东文 史葆光 郭应芳 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2007年第2期94-96,共3页
目的探讨小窝蛋白-1(CAV-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在膀胱癌表达及其两者关系。方法应用免疫组化SP法检测77例膀胱癌和15例正常膀胱组织CAV-1、MMP-2的表达。结果CAV-1、MMP-2在膀胱移行细胞癌(TCCB)、膀胱腺癌表达明显高于正常膀胱... 目的探讨小窝蛋白-1(CAV-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在膀胱癌表达及其两者关系。方法应用免疫组化SP法检测77例膀胱癌和15例正常膀胱组织CAV-1、MMP-2的表达。结果CAV-1、MMP-2在膀胱移行细胞癌(TCCB)、膀胱腺癌表达明显高于正常膀胱黏膜,有显著性差异(P<0.01),CAV-1在G1、G2、G3膀胱移行细胞癌阳性率分别15%、40%、68%,临床分期浸润型表达明显高于表浅型,有显著性差异(P<0.01);MMP-2在G1、G2、G3阳性率分别20%、40%、72%,临床分期浸润型表达明显高于表浅型,有显著性差异(P<0.01)。CAV-1和MMP-2在膀胱癌表达有明显正相关(P<0.01),在正常膀胱黏膜无相关性(P>0.05)。结论CAV-1,MMP-2与膀胱癌病理分级、临床分期有关,提示CAV-1可能促进MMP-2分泌。 展开更多
关键词 小窝蛋白-1 基质金属蛋白酶-2 膀胱癌 免疫组织化学 腺癌
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犬2型腺病毒SY株的致弱驯化 被引量:2
6
作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《中国兽药杂志》 2001年第6期7-9,共3页
作者对分离和系统鉴定的一株犬传染性喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 ) SY(沈阳 )株 ,用犬肾传代细胞 MDCK进行了致弱驯化 ,每驯化 1 5代做一次初步的犬的安全性试验 ,用大剂量不同代次病毒对易感犬进行人工感染试验 ,每天观察犬的临床症... 作者对分离和系统鉴定的一株犬传染性喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 ) SY(沈阳 )株 ,用犬肾传代细胞 MDCK进行了致弱驯化 ,每驯化 1 5代做一次初步的犬的安全性试验 ,用大剂量不同代次病毒对易感犬进行人工感染试验 ,每天观察犬的临床症状及白细胞总数 ,并于接毒后的第 5 d安乐死 ,作病理解剖学和病理组织学检查。易感犬的感染试验结果表明 ,SY株在犬肾细胞上传 1 5代时对犬的致病力已降低 ,3 0代时对犬已不引起发烧、精神沉郁和厌食等症状 ,仅引起轻度的鼻炎、中度的咽炎 ,剖检肺表现正常 ,仅见支气管淋巴结肿大 ,45代时无临床症状 ,剖检除扁桃体肿大外没有见到其它症状 ,6 0代毒已完全失去致病力 ,未见任何临床症状及病理变化。 展开更多
关键词 2型腺病毒 传染性喉气管炎病毒 传代驯化 免疫原性 安全性 噬斑克隆
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犬2型腺病毒E3区表达载体的构建 被引量:1
7
作者 邱薇 夏咸柱 +6 位作者 范泉水 扈荣良 王雷 高玉伟 张守峰 孙阳 尹惠琼 《生物技术通讯》 CAS 2003年第1期8-11,15,共5页
利用构建的犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因和狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达... 利用构建的犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因和狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36h即可观察到荧光,72~96h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光的细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48~96h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白的表达,而pBE3LGFP和pBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建的E3区缺失性载体不能利用E3区自身的启动子进行目的基因的表达,但利用外源性启动子可使外源基因获得良好表达。 展开更多
关键词 2型腺病毒 E3区 表达载体
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犬腺病毒2型抗原的制备及间接ELISA的建立 被引量:1
8
作者 葛艳华 姜骞 +4 位作者 刘家森 司昌德 郭东春 林欢 曲连东 《实验动物科学》 2010年第5期40-44,共5页
用MDCK细胞增殖犬腺病毒2型弱毒疫苗株,病毒培养上清液经差速离心和酒石酸钾密度梯度离心浓缩、纯化后作为诊断抗原,建立了犬腺病毒2型抗体检测的间接ELISA。确定最佳抗原包被量为0.168μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1:100,作用时间为60... 用MDCK细胞增殖犬腺病毒2型弱毒疫苗株,病毒培养上清液经差速离心和酒石酸钾密度梯度离心浓缩、纯化后作为诊断抗原,建立了犬腺病毒2型抗体检测的间接ELISA。确定最佳抗原包被量为0.168μg/孔,待检血清最佳稀释倍数为1:100,作用时间为60 min,羊抗犬酶标抗体稀释倍数为1:2000,作用时间为60 min,底物作用时间为37℃,10 min。判定标准为S/P值≥0.351者判为阳性,S/P值≤0.318者判为阴性。该抗原不与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬波特氏杆菌等3种犬常见传染病的阳性血清反应,具有良好的特异性;批内、批间重复试验,变异系数小于15%,显示具有较好的重复性;检测血清样品56份,与病毒中和试验结果比对的符合率为93.75%。本研究结果为实现犬腺病毒感染监测,进行犬腺病毒流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。 展开更多
关键词 2型腺病毒 间接ELISA
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犬2型腺病毒E1转化细胞的建立
9
作者 邱薇 夏咸柱 +6 位作者 范泉水 扈荣良 王雷 高玉伟 张守峰 孙阳 杨美峰 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第4期65-70,共6页
为建立能表达犬 2型腺病毒 (CAV 2 )E1基因的辅助细胞 ,本研究用含CAV 2E1基因的重组质粒pc E1t对DK细胞进行转染 ,经G41 8的筛选 ,得到 2 6个细胞克隆。用CAV 2E1A特异引物对各细胞克隆进行PCR和RT PCR检测 ,PCR结果表明转染后的细胞... 为建立能表达犬 2型腺病毒 (CAV 2 )E1基因的辅助细胞 ,本研究用含CAV 2E1基因的重组质粒pc E1t对DK细胞进行转染 ,经G41 8的筛选 ,得到 2 6个细胞克隆。用CAV 2E1A特异引物对各细胞克隆进行PCR和RT PCR检测 ,PCR结果表明转染后的细胞克隆都能扩增出 5 3 6bp的特异性片段 ,但仅有 6株为RT PCR强阳性 ,能扩增出 6 5 2bp的特异带。再对RT PCR强阳性的细胞克隆进行Westernblot分析 ,最终挑选到一个既能转录E1A基因 ,又能表达E1B 1 9kD蛋白的克隆细胞株 (DK E1 )。 展开更多
关键词 2型腺病毒 E1基因 细胞克隆 表达载体 DK细胞系
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犬2型腺病毒E1转化细胞系的特性研究
10
作者 邱薇 夏咸柱 +6 位作者 范泉水 扈荣良 王雷 高玉伟 孙阳 尹惠琼 李刚山 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期108-112,共5页
对筛选到的一株CAV-2 E1转化细胞(DK/E1)进行了初步的特性研究。以DK细胞为对照,观察到转化细胞的形态与DK细胞有明显区别,细胞变长,易聚集生长。通过测定DK及DK/E1细胞分别在2%、5%和10%牛血清培养基中的生长曲线,结果发现DK/E1细... 对筛选到的一株CAV-2 E1转化细胞(DK/E1)进行了初步的特性研究。以DK细胞为对照,观察到转化细胞的形态与DK细胞有明显区别,细胞变长,易聚集生长。通过测定DK及DK/E1细胞分别在2%、5%和10%牛血清培养基中的生长曲线,结果发现DK/E1细胞的生长速度比DK细胞快。用蚀斑和TCID50测定了病毒在DK和DK/E1细胞上的病毒滴度,结果表明DK/E1细胞产生的病毒蚀斑比DK细胞的大,TCID50测得的病毒滴度比DK细胞产生的病毒滴度高。CAV-2全基因组DNA对DK/E1细胞和DK细胞的转染试验结果表明,5μg和10μg的CAV-2DNA转染的DK/E1细胞,分别在转染后第14天和第11天均出现了典型的腺病毒细胞病变,而相同量CAV-2 DNA转染的DK细胞未出现病变,说明DK/E1细胞有助于CAV-2 DNA的复制和病毒粒子的包装。在DK/E1细胞内的重组试验表明,DK/E1细胞也有利于重组病毒的产生。以上转化特性在DK/E1细胞传至80代时仍保持不变,说明本试验获得了一株CAV-2 E1基因的转化细胞系。 展开更多
关键词 2型腺病毒 E1转化细胞系 形态 生长曲线 病毒载体 遗传稳定性 转染 重组
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胃癌细胞中Caveolin-1对表皮生长因子受体2活化的影响 被引量:2
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作者 郭艳丽 朱铁年 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1125-1130,共6页
目的:检测Caveolin-1蛋白(Cav-1)对胃癌(gastric cancer,GC)细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响及其可能的作用机制。方法:构建Cav-1过表达稳转染细胞系N87/Cav-1,应用MTT、克隆形成、划痕修复实验检测Cav-1对胃癌细胞株NCI-N87恶性生... 目的:检测Caveolin-1蛋白(Cav-1)对胃癌(gastric cancer,GC)细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响及其可能的作用机制。方法:构建Cav-1过表达稳转染细胞系N87/Cav-1,应用MTT、克隆形成、划痕修复实验检测Cav-1对胃癌细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响,应用Western blotting检测在EGF配体诱导下Cav-1蛋白对Her-2活化及ERK、Akt信号通路的影响。结果:Cav-1过表达可明显抑制胃癌细胞NCI-N87的增殖及迁移能力;在配体EGF刺激下,Cav-1过表达明显抑制了Her-2酪氨酸磷酸化水平以及P-ERK/ERK、P-AKT/AKT的比率(P<0.01)。结论:Cav-1过表达可明显抑制EGF诱导的Her-2酪氨酸磷酸化水平,并可能通过下游MAPK及PI3K/Akt信号通路的作用抑制了胃癌细胞株NCI-N87的增殖及迁移能力。 展开更多
关键词 胃癌 NCI-N87细胞 CAVEOLIN-1蛋白 增殖 迁移 HER-2 信号通路
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犬2型腺病毒SY株E1区、E3区的克隆与序列分析
12
作者 邱薇 夏咸柱 +4 位作者 范泉水 扈荣良 王雷 高玉伟 张守峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期339-342,共4页
根据犬2型腺病毒Toronto A26/61株的全基因序列物理图谱,确定E1、E3区位置,从CAV-2SY株的细胞培养物中提取了CAV-2全基因组DNA,经电泳检测其完整性并用多个限制性内切酶鉴定后,用EcoRⅠ和Kpn Ⅰ分别进行酶切,回收含E1区和E3区的相应片段... 根据犬2型腺病毒Toronto A26/61株的全基因序列物理图谱,确定E1、E3区位置,从CAV-2SY株的细胞培养物中提取了CAV-2全基因组DNA,经电泳检测其完整性并用多个限制性内切酶鉴定后,用EcoRⅠ和Kpn Ⅰ分别进行酶切,回收含E1区和E3区的相应片段,分别克隆到质粒pGEM-3zf和pBluescriptⅡKs(+)中,得到含E1区的重组质粒pGE1和含E3区的重组质粒pBE3-2。对获得的两个片段进行了序列测定和分析,结果表明,犬2型腺病毒SY株E1、E3基因的核苷酸序列与Toronto株的相应序列完全相同,其同源性均为100%。 展开更多
关键词 2型腺病毒 E1、E3 克隆 序列分析
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亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因重组犬2型腺病毒的构建
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作者 张秀芹 夏咸柱 +2 位作者 卫广森 常惠芸 高玉伟 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期118-121,共4页
应用PCR方法扩增出亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒的VP1基因,继而构建出真核表达载体pVAX-VP1。再将含有巨细胞启动子CMV的目的基因表达盒连接到穿梭载体pVAX△E3上,筛选出VP1表达盒方向与E3区转录方向一致的重组子,获得转移载体。再经酶切,连接等... 应用PCR方法扩增出亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒的VP1基因,继而构建出真核表达载体pVAX-VP1。再将含有巨细胞启动子CMV的目的基因表达盒连接到穿梭载体pVAX△E3上,筛选出VP1表达盒方向与E3区转录方向一致的重组子,获得转移载体。再经酶切,连接等方法获得重组腺病毒质粒。利用脂质体介导将重组质粒转染DK细胞,转染3次后,细胞出现明显的腺病毒病变。经PCR扩增、测序检测及基因组酶切鉴定,证明该病毒即为重组犬2型腺病毒。命名为CAV2/FMDV。经验证,该重组毒可稳定遗传,其毒价为103.5TCID50/mL。 展开更多
关键词 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒 2型腺病毒 重组 VP1基因
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Ca_V 2.3电压门控性钙通道与癫痫
14
作者 杨茜 杨卓 张涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期401-404,408,共5页
The CaV 2.3 encoded Ca2+ channel is one of the least well-known voltage-gated calcium channels in terms of physiology, pharmacology and clinical relevance. Epilepsy is a family of neurological disorders that are commo... The CaV 2.3 encoded Ca2+ channel is one of the least well-known voltage-gated calcium channels in terms of physiology, pharmacology and clinical relevance. Epilepsy is a family of neurological disorders that are common and harmful to human health. More and more studies such as gene knock-out experiment have demonstrated that the channel is related to epileptic seizure, including participating to plateau potential generation, regulating intracellular Ca2+ concentration, CaV 2.3 splice variant, interacting with some muteins. In addition, some antiepileptic drugs inhibit the epileptiform discharges by targeting CaV 2.3 voltage-gated calcium channel. 展开更多
关键词 钙通道 CaV2.3电压门控性 癫痫
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犬腺病毒1型和2型的差异 被引量:2
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作者 钟志宏 杨春梅 《中国畜禽传染病》 CSCD 1990年第5期59-62,共4页
犬腺病毒是腺病毒科典型的成员。根据其血凝抑制作用和中和作用的不同划分为两个血清型,即犬1型腺病毒(CAV-1)和犬2型腺病毒(CAV-2)。以前认为 CAV-1是狐狸脑炎和犬传染性肝炎的致病因子,而 CAV-2是犬喉气管炎的病因。事实上,犬腺病毒... 犬腺病毒是腺病毒科典型的成员。根据其血凝抑制作用和中和作用的不同划分为两个血清型,即犬1型腺病毒(CAV-1)和犬2型腺病毒(CAV-2)。以前认为 CAV-1是狐狸脑炎和犬传染性肝炎的致病因子,而 CAV-2是犬喉气管炎的病因。事实上,犬腺病毒两个成员之间不但致病性不同,而且病毒的肜态结构、抗原特性、血凝特性、组织培养特性乃至基因组成上都存在着明显的区别。 展开更多
关键词 腺病毒 犬腺病毒 cav-1 cav-2
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犬腺病毒SY-45株不同大小蚀斑特性研究 被引量:2
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作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期86-87,99,共3页
应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对... 应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在 MDCK细胞上产毒量比较 ,以筛选最佳的疫苗株 ,试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后 ,所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常 ;对挑选的 4窝 CAV HI抗体效价小于等于 1 :2的健康幼犬进行免疫试验 ,测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价 ,结果表明 :大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒 ,而明显高于小斑毒 ;不同大小蚀斑毒在 MDCK细胞上产毒量差异很大 ,大斑毒可达 1 0 7TCID50 / m L、小斑毒达 1 0 6 TCID50 /ml、小斑毒达 1 0 4 .5TCID50 / m L。综合所有试验结果表明 :大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点 ,是较为理想的疫苗株。 展开更多
关键词 犬传染性喉气管炎病毒 2型腺病毒 蚀斑特性
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犬Ⅱ型腺病毒弱毒DNA的酶切分析及分子克隆 被引量:1
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作者 童光志 赵永军 +5 位作者 白丽萍 吴保成 郭英宁 岳军明 王玫 殷震 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期379-382,共4页
犬Ⅱ型腺病毒(CAV-2)是犬喉气管炎的病原。CAV-2感染通常只引起轻微的呼吸道疾病,但在其它病毒或细菌继发感染下可诱发较严重的肺炎、支气管炎、扁桃体炎和咽炎。此病毒与引起传染性犬肝炎(ICH)的CAV-1有密切的抗原相关性。CAV-2弱毒株... 犬Ⅱ型腺病毒(CAV-2)是犬喉气管炎的病原。CAV-2感染通常只引起轻微的呼吸道疾病,但在其它病毒或细菌继发感染下可诱发较严重的肺炎、支气管炎、扁桃体炎和咽炎。此病毒与引起传染性犬肝炎(ICH)的CAV-1有密切的抗原相关性。CAV-2弱毒株可产生抗CAV-1的保护性免疫,是目前用于预防ICH和狐狸脑炎的有效疫苗。由于CAV-2本身致病不严重,致弱的CAV-2更为安全。因此,用弱毒株构建成基因工程载体,把犬细小病毒或犬及狐狸的其它病毒的主要抗原基因重组到其中的非必需区,可获得安全、有效和多用的病毒载体疫苗。为此,我们首先分析了CAV-2弱毒DNA的酶切图谱,并克隆了全病毒DNA的76.5%。 展开更多
关键词 犬Ⅱ型腺病毒 酶切分析 分子克隆
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Ⅱ型犬腺病毒自然弱毒YCA18株的实验免疫研究 被引量:4
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作者 夏咸柱 范泉水 +2 位作者 扈荣良 黄耕 邱薇 《中国兽药杂志》 2001年第2期1-4,共4页
应用 YCA1 8株第 8代细胞培养物 (YCA1 8- 8)经口鼻和静脉接种犬腺病毒 (CAV) SN抗体 <1∶ 2的易感犬作安全试验 ,结果未见任何 CAV临床症状与病理解剖学改变 ;用不同剂量的YCA1 8- 8分组免疫 CAV易感犬 ,经 SN抗体测定与用 CAV强毒... 应用 YCA1 8株第 8代细胞培养物 (YCA1 8- 8)经口鼻和静脉接种犬腺病毒 (CAV) SN抗体 <1∶ 2的易感犬作安全试验 ,结果未见任何 CAV临床症状与病理解剖学改变 ;用不同剂量的YCA1 8- 8分组免疫 CAV易感犬 ,经 SN抗体测定与用 CAV强毒攻击试验 ,结果 SN抗体达 1∶ 1 6以上的犬 95%以上可获得免疫保护 ,最低免疫量为 1 0 4 TCID50 ;应用 YCA1 8- 8分别免疫母源抗体达 1∶ 4和 1∶ 8的两组试验犬 ,第一次免疫 1 4d后 SN抗体均未有升高 ,追加 2~ 3次免疫后 SN抗体才逐渐上升至 1∶ 1 6以上的免疫保护水平 ;用 CAV易感犬和 MDCK分别将 YCA1 8连续传 8代和 2 0代 ,结果对犬仍然安全 ,对犬的免疫原性未见下降 ,最低免疫量仍为 1 0 4 TCID50 ;与 CDV和CPV弱毒作免疫互扰试验 ,结果与各弱毒的单独免疫结果未见差异 ;将 YCA1 8- 8冰冻保存于 -30℃ ,6个月内 TCID50 仍不低于 1 0 -4 /0 .1 ml,经加明胶 -蔗糖低温真空冻干后 ,4℃和 - 30℃保存 1年 ,TCID50 均仍维持在 1 0 -4 /0 .1 ml以上 ;经 YCA1 8- 2 0 3次免疫的试验犬 ,1年后 SN抗体仍在最低抗体保护值 1∶ 1 6以上。 展开更多
关键词 Ⅱ型犬腺病毒 自然弱毒株 弱毒疫苗 实验免疫 开发利用
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犬2型腺病毒纤突蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 王枞嵘 牛欣蕊 +5 位作者 郭江涛 鲁维飞 刘忠虎 褚贝贝 付朋飞 王江 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1635-1642,共8页
犬2型腺病毒(canine adenovirus-2,CAV-2)主要引起犬科动物的传染性呼吸道疾病和消化道疾病,且其传染性极强,全球范围内感染率非常高,但现有的临床防治措施难以完全阻断病毒的传播和快速特异性治疗患病动物。为了获得可用于CAV-2基础病... 犬2型腺病毒(canine adenovirus-2,CAV-2)主要引起犬科动物的传染性呼吸道疾病和消化道疾病,且其传染性极强,全球范围内感染率非常高,但现有的临床防治措施难以完全阻断病毒的传播和快速特异性治疗患病动物。为了获得可用于CAV-2基础病毒学研究和临床诊治所需的单克隆抗体,本研究将浓缩纯化的CAV-HN45株灭活后免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,经免疫过氧化物酶单层细胞试验和间接免疫荧光试验筛选出2株能分泌CAV FIBER蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞系:1-A12-C6、8-A12-B10,抗体亚类分别为IgG2a和IgG2b。腹水纯化后质量浓度为1 g/L抗体的间接免疫荧光效价为1-A12-C6:1∶8192;8-A12-B10:1∶2048,2株单克隆抗体均不能用于免疫印记试验检测。抗体具有体外中和病毒的活性,1-A12-C6和8-A12-B10抗体的CAV中和效价分别为1∶256和1∶64。本研究单克隆抗体的成功制备为建立快速、高效的CAV-2免疫学检测技术和CAV-2的防治提供了依据。 展开更多
关键词 cav-2 Fiber蛋白 单克隆抗体 IGG2A IgG2b
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表达虎源H_5N_1亚型禽流感病毒NP蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定
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作者 彭广能 耿长国 +5 位作者 何春燕 汪开毓 夏咸柱 高玉伟 杨松涛 刘益新 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1623-1628,共6页
将A/Tiger/Harbin/132/2007(H5N1)的NP基因克隆入pVAX1载体中,然后将含有NP基因的表达盒(CMV+NP+PolyA)克隆入pVAXE3的SspⅠ酶切缺失处,获得含有NP基因表达盒的穿梭载体pVAXΔE3-NP。用SalⅠ+NruⅠ分别对pVAXΔE3-NP和pPoly-2-CAV-2进... 将A/Tiger/Harbin/132/2007(H5N1)的NP基因克隆入pVAX1载体中,然后将含有NP基因的表达盒(CMV+NP+PolyA)克隆入pVAXE3的SspⅠ酶切缺失处,获得含有NP基因表达盒的穿梭载体pVAXΔE3-NP。用SalⅠ+NruⅠ分别对pVAXΔE3-NP和pPoly-2-CAV-2进行双酶切,将含有NP基因表达盒的片段定向克隆入pPoly-2-CAV-2,获得在E3区缺失处插入NP基因表达盒的重组质粒pCAV-2-NP。释放CAV-2-NP重组基因组,脂质体介导转染DK细胞,获得了能使DK细胞产生典型腺病毒样细胞病变的CAV-2-NP重组病毒。从形态学、基因组水平、NP基因的转录、NP蛋白的表达以及重组病毒的生长特征等方面进行鉴定。结果表明,CAV-2-NP具有典型的CAV-2形态特征,在繁殖过程中没有对H5N1NP表达盒片段进行缺失或重排,并且能够转录H5N1NP基因的mRNA,ELISA和免疫荧光分析表明重组表达产物可被流感病毒NP基因单克隆抗体1G6G4所识别。 展开更多
关键词 虎源H5N1亚型禽流感病毒 NP基因 2型腺病毒
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