不同拷贝数CArG/5HRE+HSV-TK系统辅助伽玛刀杀伤C6胶质瘤的初步研究

目的研究不同拷贝数CArG/5HRE+HSV-TK系统辅助伽玛刀杀伤C6胶质瘤效果,寻求伽玛刀条件下对胶质瘤杀伤更有效的适宜拷贝数CArG/5HRE+HSV-TK系统。方法在Wistar大鼠颅内C6胶质瘤模型的基础上,构建不同拷贝数CArG/5HRE+HSV-TK质粒(空质粒转染+伽玛刀照射组、HSV-TK+伽玛刀照射组、4CArG/5HRE启动子+伽玛刀照射组、9CArG/5HRE启动子+伽玛刀照射组、12CArG/5HRE启动子+伽玛刀照射组),通过脂质体转染到大鼠颅内胶质瘤组织中,对瘤组织伽玛刀放射外科治疗后取大鼠肿瘤组织。通过对瘤组织常规病理、瘤体细胞凋亡、HSV-TK mRNA及蛋白表达的观察,确定不同拷贝数CArG/5HRE+HSV-TK系统辅助伽玛刀诱导HSV-TK表达及对C6胶质瘤杀伤效果。结果各组肿瘤细胞均可见凋亡、破坏,CArG/HRE双启动子+伽马刀照射组更为明显(P<0.05),尤以9CArG/5HRE启动子+伽马刀照射组最为突出,凋亡率为(0.71±0.12)%(P<0.05);CArG/HRE双启动子+伽马刀照射组中HSV-TK mRNA及蛋白表达较无启动子组明显增加(P<0.05),9CArG/5HRE启动子+伽马刀照射组最为明显,HSV-TK mRNA的相对表达量为(0.84±0.09,P<0.05)。结论在SRS治疗条件下,CArG/HRE双启动子能促进目的基因HSV-TK的表达,增加对C6胶质瘤细胞的杀伤,其中,9CArG/5HRE双启动子的作用最明显。