用CB微核法研究离体血辐射剂量与微核率的量效关系

应用胞质分裂阻滞微核技术（简称CB微核法），探讨了X射线与60Coγ射线，以及不同剂量率的60Coγ射线诱发微核率与辐射剂量的量效关系。结果表明，剂量率相同，照射剂量相同，60Coγ射线辐照所得微核频率明显高于X射线照射所得微核频率。不同剂量率的60Coγ射线照射，高剂量率所得微核产率高。剂量效应曲线不仅与不同的辐射种类有关，而且同一种性质的射线在不同剂量率情况下，刻度曲线不一样，因而应选用不同剂量率作刻度曲线。在发生辐射事故时，应选用剂量率刻度曲线接近的一种。

用CB微核法预测癌细胞的放射敏感性

用细胞质分裂阻断微核技术（简称ＣＢ微核法）研究了癌细胞的放射敏感性，结果表明；ＣＢ 微核法可用来预测癌细胞对重离子和γ射线的放射敏感性，具有省时且成功率高的特点。细胞 受重离子作用后，每双核细胞的微核与剂量的效应关系适合方程 Y＝ c＋ ｋＤｎ或 Y＝ｃ＋ａＤ＋βＤ２，受γ射线作用后，每双核细胞的微核与剂量的效应关系适合方程 Y＝ｃ＋ ａＤ。在相同剂量下，重离子效应高于ｒ射线效应。

河南两起辐射事故受照者染色体畸变和CB微核分析及生物剂量估算

[目的 ]对 2 0 0 0年河南许昌“3 0 6”60 Co辐射事故 1例受照者 (A)和 2 0 0 0年河南开封“6 2 6”辐射事故 1例过量放射性核素内污染致γ射线照射受照者 (B)的外周血淋巴细胞染色体畸变和CB微核进行分析 ,并估算其生物剂量。 [方法 ]受照者“A”为男性 ,37岁 ,照后 15d取血培养。受照者“B”为女性 ,2 7岁 ,照后 3d取血培养。外周血淋巴细胞染色体和CB微核的标本制备采用常规方法 ,双盲法阅片 ,记录每个细胞中的染色体结构畸变数或微核数 ,结果以染色体畸变百分率或微核千分率表示。 [结果 ]“A”的双 +环率为 ( 19 5± 2 0 ) % ,估算剂量均值为1 44Gy ,95 %可信限范围为 1 2 7～ 1 6 1Gy ;GB微核率为 ( 15 4 0 0± 12 41)‰ ,估算剂量均值为 1 43Gy ,95 %可信限范围为 1 35～ 1 5 1Gy。“B”的双 +环率为 ( 0 6 7± 0 47) % ,估算剂量均值为0 15Gy ,95 %可信限范围为 0 0 6～ 0 2 3Gy ;CB微核率为 ( 2 7 33± 4 2 7)‰ ,估算剂量均值为 0 2 2Gy ,95 %可信限范围为 0 13～0 30Gy。 [结论 ]用染色体畸变和微核分析 ,受照者受照剂量的估算结果 ,与临床症状和物理剂量基本一致。对剂量小于 1Gy的照射 ,CB微核剂量高于染色体畸变剂量。在小剂量照射条件下 ,由于自发微核率高、个体差异大。

3例辐射事故受照者CB微核分析及生物剂量估算

[目的 ]对河南新乡一起6 0 Co源辐射事故中 3例受照者进行了CB微核分析 ,并对其生物剂量进行估算。 3例受照者A、B、C均为男性 ,受照时年龄分别为 3 1、3 9和 51岁 ,分别受照后2 4d、44d和 96d采血培养 ,进行CB微核分析和剂量估算。 [方法 ]CB微核标本的制备方法为 :对 3例受照者分别取 0 3～ 0 4ml肝素抗凝静脉血 ,加到 4ml含 2 0 %小牛血清和 50 μg/mlPHA的混合培养液中 ,置 3 7℃恒温培养箱中培养 ,培养至 40～ 44h ,加入终浓度为 6mg/L的松胞素B ,继续培养至 72h收获。常规制片 ,Giemsa染色。显微镜下观察双核淋巴细胞 ,并记录其微核数。结果以微核细胞率 (CBCMN ,‰ )和微核率 (CBMN ,‰ )表示 ,并估算剂量。生物剂量估算采用白玉书教授等建立的6 0 Coγ射线照射离体人血诱发的CB微核的剂量曲线估算生物剂量。[结果 ]照后 2 4d 3例受照者的CB微核率和CB微核细胞率均明显升高 ,由此估算的剂量分别为 :① 3例受照者依据CBMN率估算的个体辐射剂量分别为 0 97Gy(A)、0 74Gy(B)和 0 58Gy(C) ;②依据CBCMN率估算的个体辐射剂量分别为 0 87Gy(A)、0 64Gy(B)和 0 50Gy(C)。 [结论 ]本文用CBMN估算剂量与染色体“双 +环”畸变剂量和物理剂量接近 ,与放射损伤的临床诊断亦相符合。说明CB微核分析估?

CB微核法在辐射效应检测中的应用

本文用CB微核法观察了30例恶性肿瘤患者放射治疗前后外周血淋巴细胞微核率、微核细胞率的变化及其剂量效应关系。结果表明放疗后患者的微核率、微核细胞率明显升高，与累积剂量间呈线性正比关系，回归方程分别为：YMNF＝39．27＋0．71x，YMNCF＝34．05＋0．58x，其R2值分别为0．9720，0．9782（P＜0．01），有较好的拟合度。其中10例食管癌患者放疗后，疗效较优的6例微核率明显高于疗效差的4例（P＜0.01），提示机体或局部肿瘤对照射的敏感性不同，微核率的改变与疗效有关系。

用CB微核法研究离体血辐射剂量与微核的量效关系

本实验应用外周微量血培养加细胞松弛素 B 观察微核(CB 法)探讨了 X 射线与不同剂量率的^(60)Coγ射线诱发微核率的量效关系.结果表明,剂量率相同,辐射剂量相同,^(60)Coγ射线辐照所得微核频率明显高于 X 射线照射所得微核频率;不同剂量率的^(60)Coγ射线照射,高剂量率所得微核产率高.因而在辐射事故时,应选用同一性质及相应剂量率的效应曲线,来评估诱发微核的辐射剂量。

CB微核法人体外周血淋巴细胞检测在全自动微核扫描分析系统上的应用

本文旨在通过应用AXIO Imager Z2扫描系统和MetaSystems图像分析系统对胞质阻断微核法(CB微核法)人体外周血淋巴细胞进行分析,得出双核淋巴细胞的微核率、微核细胞率,为自动化检测微核提供新思路。利用CB微核法结合全自动微核扫描分析系统分析人外周血T淋巴细胞微核率、微核细胞率,并与人工盲法阅片镜下观察数据相比较。结果显示,CB微核法试验在全自动微核扫描分析系统检测出阳性各组的微核细胞率、微核率与对照组P<0.05。CB微核法试验在全自动微核扫描分析系统上应用具有可行性且效率更高。

CB微核法在忻州事故生物剂量估算中的应用

本文作者报道了在忻州放射事故中３４例受检者ＣＢ法微核的检测结果。同时，用本实验室建立的ＣＢ微核剂量效应曲线对上述受检者进行生物剂量估算，并与染色体畸变分析估算的剂量进行比较，结果两种方法估算的剂量基本一致。表明ＣＢ微核法是估算事故受照者所受剂量的一种较为理想的方法。

哈尔滨7·13 ^192Ir源事故受照者CB微核分析及生物剂量估算

早在1976年，Countryman和Heddle用不同剂量X射线照射离体人血，经培养后观察淋巴细胞微核率，结果微核率与受照剂量呈良好的相关性。大量的文献资料表明，淋巴细胞微核法是估算受照剂量的生物学方法之一。本研究用该方法对2005年7月发生在哈尔滨^192Ir源事故中14例受检者进行微核率分析，对部分受检人员进行了微核率的检测，并利用本实验室建立的剂量效应曲线进行生物剂量的估算。

CB法微核检测技术应用于诱导基因组不稳定性的研究

对γ 射线诱导中国仓鼠成纤维(CHL)细胞基因组不稳定性进行了研究。利用 CB 法微核检测技术对一次照射、二次照射的 CHL 细胞进行微核测定,观察 DNA 损伤程度的变化情况。结果显示,微核发生率与细胞受照剂量呈相关关系,并随培养时间延长呈下降趋势。细胞再次受照后,其微核发生率与一次受照剂量呈相关关系。表明微核发生率与染色体损伤程度存在剂量相关性,微核检测技术可以用于生物效应表现为染色体损伤的辐射诱导基因组不稳定性的研究。

医用X射线工作人员染色体畸变及微核分析

目的 研究长期小剂量受照者辐射损伤细胞遗传效应。方法 用微量全血法培养检测X射线工作人员的微核胞浆分裂阻滞微核法 (CB法 )及染色体畸变率。结果 X射线诊断组与介入放射组染色体畸变率及微核率分别为0 3 8%、0 62 %、12 80 %、2 0 40 % ,均显著高于对照组 ,并随工龄的增加而增高。结论 X射线工作人员的染色体畸变率及微核率随放射工龄的增加呈现剂量累积效应 。

用胞质分裂阻断法建立淋巴细胞微核率的剂量效应曲线

本文采用胞质分裂阻断微核法建立^(60)Coγ线照射离体人血诱发微核的剂量效应关系曲线,结果在0.1—5.0Gy范围内呈良好的剂量效应关系。对回归方程式的同归系数和曲线拟合度进行了显著性检验,表明微核细胞率和微核率皆适于拟合二次多项式(Y=a+bD+cD^2),同时对加Cyt-B的浓度和时间以及终止培养时间进行了讨论。

14.8 MeV单能中子所致淋巴细胞微核的剂量-效应关系

采用14.8 MeV单能中子对3名健康成人外周血进行照射,照射剂量分别为0.0、0.1、0.3、0.6、1.0、2.0、3.0、4.0 Gy,观察双核CB细胞微核,建立本实验室CB微核法的微核细胞率和微核率与受照剂量的剂量-效应关系。微核细胞率与中子剂量的回归方程为Y=14.8681+43.3973D(r2=0.976),Y=3.3758+73.4099D-7.9360D2(r2=0.986),Y=69.8514D0.6735(r2=0.986);微核率与中子剂量的回归方程为Y=13.9096+55.9122D(r2=0.986),Y=2.6949+85.1997D-7.7442D2(r2=0.991),Y=81.5022D0.7367(r2=0.990)。结果表明,人体外周血CB细胞微核细胞率和微核率与14.8 MeV单能中子照射剂量存在良好的二次多项式和幂函数关系。

淋巴细胞胞浆分裂阻滞微核技术及其应用前景

淋巴细胞胞浆分裂阻滞微核法是检测人及动物细胞在Cyt-B作用后形成的双核CB细胞中的微核,它克服了常规培养微核法在细胞动力学上存在的问题,确保检测第一次分裂后细胞中的微核.该法比常规培养微核法准确、敏感,预计不久将有可能取代常规培养微核法.

利用胞质分裂阻断微核法分析394名放射工作人员微核率

目的对放射工作人员的微核率进行分析,为长期接受低水平电离辐射的放射工作人员提供更加准确的职业健康监护依据。方法放射组为在岗期间接触射线的353名放射工作人员,对照组为上岗前尚未接触射线的41名放射工作人员。采用胞质分裂阻断微核法测定微核率。结果放射组平均微核率明显高于对照组平均微核率(t=−2.95,P<0.05)。放射组中,随着年龄的增加,微核率逐渐增加,差异具有统计学意义(F=8.36,P<0.05)。10~年和30~年工龄组人员微核率明显高于<10年工龄组人员的微核率(χ^(2)=−44.79,−60.47,P<0.05)。女性微核率明显高于男性微核率(t=3.93,P<0.05);放射诊断学组和探伤组的微核率明显高于对照组(t=3.51,3.65,P<0.05)。结论微核率在长期接触低水平电离辐射的放射工作人员中有所增加,有必要进一步加强对放射工作人员特别是最大的辐射暴露工作者群体医务人员的职业健康监护和辐射防护教育。

两例事故受照者染色体畸变分析及生物剂量估算

应用外周血淋巴细胞染色体畸变和CB微核分析方法,对2000年河南许昌“3.06”60Co辐射事故1例受照者（A）和2000年河南开封“6.26”辐射事故一例过量放射性核素内污染致γ射线照射受照者（B）的生物剂量进行估算。结果表明,“A”和“B”两例受照者依据双十环率估算的剂量分别为1.44Gy和0.15GyCB微核率估算的剂量分别为1.43Gy和0.22Gy,与用物理方法估算的剂量比较接近,亦与放射损伤的临床诊断一致。泊松分布检验证实,“A”偏离泊松分布,受到不均匀照射。提示染色体畸变和CB微核分析是非常可靠的生物计量估算方法。

外周血胞质分裂阻滞微核预测肿瘤风险的研究进展

遗传损伤是化学物致癌的必经途径,因而遗传损伤常作为检测致癌因子危害的生物标志.近年来,遗传损伤检测方法如外周血胞质分裂阻滞微核（CB微核）试验（cytokinesis-block micronucleus assay,CBMN）日趋成熟,CB微核又称双核微核,已逐步应用于放射作业人群健康监护和致癌物接触人群的生物标志研究,研究表明CB微核可以作为致癌物所致遗传损伤的效应标志,具有预测肿瘤发生风险的潜力.我们对近年来CB微核在肿瘤风险预测以及职业与环境致癌物接触导致遗传损伤检测的研究进展予以综述.

重离子束^(12)C^(6+)照射人离体血建立淋巴细胞微核的剂量-效应曲线

目的 研究建立重离子束1 2 C6 + 照射人离体血诱发淋巴细胞微核的剂量 效应曲线。方法 用地面加速器产生的重离子1 2 C6 + (平均LET为 36 70keV μm) ,不同吸收剂量、不同吸收剂量率照射离体人血 ,用CB微核法观察双核淋巴细胞中的微核。结果 在 0～ 6Gy吸收剂量范围内 ,淋巴细胞微核率随吸收剂量的增加而增加 ,拟合的最佳方程为Y =6 6 5 0 9×D0 .85。结论 1 2 C6 + 照射人离体血诱发淋巴细胞微核在 0～ 6Gy吸收剂量范围内呈幂函数关系。

人淋巴细胞胞浆分裂阻滞微核法的探讨

本文用健康人血对 CB 微核法进行了探讨,发现用全血、1ml 培养体系、准确滴加 Cyt-B 的方法,比由全血分离淋巴细胞的方法省时、省血,且细胞不易成堆,破坏小,不需二氧化碳孵箱设备。诱发大量双核 CB 细胞的最适浓度为6μg/ml,虽 Cyt-B 用量比文献报道的稍大,但节省了其它试剂,仍值得选择使用。

某金矿井下从业人员外周血淋巴细胞微核分析

目的了解金矿井下从业人员的外周血淋巴细胞微核率的变化情况。方法用胞质分裂阻滞(CB)微核测试法分析我省某金矿井下凿岩等从业人员的外周血淋巴细胞微核变化情况。结果检查56名井下工作者的外周血淋巴细胞,微核细胞率为10.8‰,微核率为11.6‰,明显高于正常对照组(8.7‰,9‰)P<0.05。井下从业者各工龄组间和正常对照组比较统计学分析有显著性差异(P<0.05)。6～10a和20a以上工龄组的微核检出率明显高于不足5年的井下工龄组,差异有统计学意义(P<0.05),但其他工龄组间统计学分析意义不显著(P>0.05)。结论金矿井下从业人员的DNA遗传物质已产生不同程度的损伤效应。有必要进一步加强防治措施,最大限度的减少工作人员的职业危害。