大麻素CB2受体激动剂对HSC-T6抗氧化作用的研究

目的探讨大麻素CB2受体激动剂AM1241对大鼠肝星状细胞系（HSC-T6）的作用及其对抗氧化酶的影响。方法用噻唑蓝法分别检测0、20、50、80μmol／L）AM1241和0、10、20、30、40μmol／LAM630干预24h下HSC-T6的存活率，根据实验所测得的细胞存活率选择最佳的用药浓度。将HSC—T6随机分成对照组、氧化应激组、AM1241干预组、AM1241＋AM630拮抗组共4组。除对照组，其余各组用含100mU／L的葡萄糖氧化酶（GO）的低糖DMEM完全培养液培养12h制备细胞氧化应激模型，然后AM1241干预组用含50μmol／LAM1241的低糖DMEM完全培养液培养12h，AM1241＋AM630拮抗组用大麻素CB2受体拮抗剂AM630（20μmol／L）干预2h后，再用含50μmol／LAM1241的依氏低糖完全培养基培养12h；酶联免疫吸附法检测备组HSC—T6培养液上清液中Ⅲ型胶原（ColⅢ）的含量；分光光度法检测各组HSC—T6中谷胱甘肽（GSH）的含量；Westernblot法分别检测HSC-T6中CB2受体与血红素加氧酶1（HO-1）蛋白的表达量。多组间比较用单因素方差分析。结果AM1241各浓度组明显抑制HSC—T6的增殖且呈现浓度依赖性（P〈0．05），80μmol／L时抑制作用最大，细胞存活率为41．61％±3．13％（P〈0．05）。AM630各浓度组对HSC—T6的增殖无明显抑制作用（P〉0．05）；各组中的HSC—T6可以表达CB2受体，与对照组相比，AM1241干预组CB2的表达量有所增高（P〈0．05）；与对照组相比，氧化应激组ColⅢ的表达量明显升高（P〈0．05），AM1241干预组ColⅢ的表达较氧化应激组明显减低（P〈0．05），而AM1241＋AM630拮抗组ColⅢ的表达与AM1241干预组相比明显增高（P〈0．05），与氧化应激组相比无明显差异；与对照组相比，氧化应激组HO-1、GSH含量有所升高（P〈0．05），AM1241干预组GSH、HO-1含量较氧化应激组相比有所升高，而AM1241＋AM630拮抗组HSC-T6中HO-1、GSH含量较AM1241干预组明显下降（P〈0．05），与氧化应激组差异无统计学意义。结论大麻素CB2受体激动剂AM1241可抑制HSC-T6的增殖与活化，其机制可能与AM1241结合HSC—T6大麻素CB2受体，激活HSC—T6Nrf2转录到细胞核内，启动了抗氧化酶HO-1、GSH蛋白表达量上调，增加HSC-T6的抗氧化作用有关。

HU308对脂多糖诱导小胶质细胞分泌NO及IL-6的影响

目的研究大麻素CB2受体激动剂HU308对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞激活后NO及IL-6分泌的影响。方法体外培养小鼠小胶质细胞株(BV-2细胞),分为对照组、LPS刺激组及干预组(LPS+HU308)。通过显微镜观察各组小胶质细胞的形态学变化,CCK-8法检测各组小胶质细胞的增殖情况,Griess法检测各组NO含量,ELISA法检测各组IL-6水平。结果 LPS刺激组的小胶质细胞中出现大量胞体增大,伪足粗短或消失的细胞和一些坏死细胞,细胞增殖较差,NO及IL-6表达水平显著增高。经大麻素CB2受体激动剂HU308干预后,大部分细胞胞体稍大,伪足尚明显,细胞破坏程度轻,增殖较好,炎性因子表达均明显下降。结论激动小胶质细胞表面的大麻素CB2受体,可以减轻LPS造成的小胶质细胞过度活化或损伤,抑制其炎性因子N0及IL-6的分泌,从而达到中枢神经系统炎性损伤后的神经保护作用。