CBERS02B卫星CCD传感器数据反演陆地气溶胶

研究利用CBERS02B卫星的CCD传感器数据反演陆地气溶胶的方法。采用的方法是暗像元法。具体步骤为:根据地面采集的植被光谱数据,结合CCD传感器特点,建立浓密植被(暗像元)红蓝波段(CCD传感器的第三和第一波段)反射率与地表反射率之间的关系,确定了暗像元识别的阈值,讨论气溶胶光学厚度对暗像元识别的影响以及消除这种影响的方法;利用6S进行辐射传输运算,构建查找表;根据CBERS02B卫星的CCD传感器数据,从查找表插值得到气溶胶光学厚度,并进行了算法的误差分析。用广西南宁市及北京地区附近的两景数据进行了实际的反演试验,使用MODIS的气溶胶产品与反演结果进行比对。结果显示,CBERS02B卫星的CCD传感器数据能够较好的反演陆地气溶胶。

CBERS02B卫星CCD相机在轨辐射定标与真实性检验

利用贡格尔实验场对CBERS02B卫星进行场地反射率基法辐射定标,获得CCD相机可见近红外波段的绝对辐射定标系数,利用敦煌实验场对定标系数进行了真实性检验。结果表明:此次定标结果和测量值非常吻合,定标系数可信度高。

CCD卫星相机时间序列定标:以CBERS02B为例

采用沙漠场景法、稳定目标法和交叉定标法对CBERS02B星的CCD相机开展时间序列定标,分别得到CCD相机2007—2008年期间三种方法对应的定标系数,并同CBERS02B卫星官方提供的定标系数进行比对。结果表明,三种方法得到的定标系数其误差均小于10%,不同方法的结果具有较好的一致性。最后,分析总结各种时间序列定标方法的优缺点,为今后开展类似卫星的时间序列定标提供参考。

食品添加剂2,3-丁二酮通过激活NF-κB诱发肝细胞L02发生凋亡

在现代社会中,食品添加剂在食品工业的生存和发展中起到了关键作用。作为食品添加剂家族的重要一员,2,3-丁二酮(2,3-butanedione,BUT)被广泛用于制造牛奶香精。然而为了降低成本,生产商使用BUT作为原料,对食品的安全性构成了极大的威胁。近年来,已发现BUT可引起肺部闭塞性细支气管炎,但BUT对肝脏是否具有潜在毒性仍然未知。本研究使用L02细胞作为体外模型,检测细胞暴露于BUT 12 h是否会引起肝毒性。实验结果表明,当BUT的剂量达到0.5 mM时,肝细胞活性显著降低,出现大量死细胞,细胞活性氧增加并且线粒体膜电位降低,Capase-3活性显著升高,Nf-κB和Caspase-3基因与蛋白表达量均升高。这些结果表明,当BUT浓度达到一定的剂量阈值时,可以引起一定程度的肝细胞凋亡。

关于公布《公路工程基本建设项目概算预算编制办法》(JTG B06-2007)及《公路工程概算定额》(JTG/T B06-01-2007)、《公路工程预算定额》(JTG/T B06-02-2007)、《公路工程机械台班费用定额》(JTG/T B06-03-2007)的公告

现公布《公路工程基本建设项目概算预算编制办法》(JTG B06-2007)及《公路工程概算定额》(JTG/T B06-01-2007)、《公路工程预算定额》(JTG/T B06-02-2007)、《公路工程机械台班费用定额》(JTG/T B06-03-2007),自2008年1月1日起施行,原发布的《公路基本建设工程概算、预算编制办法》

高三尖杉酯碱联合IFNα-2b可促进白血病源性树突状细胞成熟

目的:研究高三尖杉酯碱(HHT)、干扰素α-2b(IFNα-2b)和两者联合(HHT+IFNα-2b)对白血病源性树突状细胞(DCs)的促成熟作用。方法:在白血病多药耐药细胞K562/A02中加入细胞因子rhGM-CSF和rhIL-4,7d后Wright-Gimsa染色观察细胞形态的变化,流式细胞术检测细胞免疫表型的变化,同种混合淋巴细胞反应、CTL杀伤效应、细胞因子IL-12的分泌来评价此白血病源性DC的成熟程度,然后在上述白血病源性DC中分别加入HHT、IFNα-2b和HHT+IFNα-2b,3d后以上述同样方法检测它们对此白血病源性DC的促成熟作用。结果:K562/A02细胞在rhGM-CSF和rhIL-4作用7d后,CD83、HLA-DR和CD86分子的表达分别为(65.50±8.40)%、(32.00±4.32)%和(18.65±3.20)%,经HHT作用后这3种分子的表达升高到(85.36±8.42)%、(39.58±7.68)%和(35.53±4.35)%;经IFNα-2b作用后升高到(87.15±7.59)%、(40.53±6.30)%和(38.45±6.42)%;经HHT+IFNα-2b联合作用后升高到(94.38±6.59)%、(52.75±8.51)%和(42.98±9.87)%,与作用前相比差异均显著。经HHT、IFNα-2b和HHT+IFNα-2b作用后具有典型DC形态的细胞增多。经HHT和IFNα-2b作用的DC均可刺激T细胞产生较强的增殖效应,诱导产生的CTL对靶细胞K562/A02的杀伤率明显增强且当效靶比为20:1时杀伤效率最强,IL-12分泌明显增高。结论:HHT和IFNα-2b对白血病源性DC有促成熟作用,且两者联用时作用最强。

NF-κB信号通路的激活对白血病细胞K562／A02多药耐药的影响

目的研究K562细胞株及其耐药细胞株K562／A02 NF-κB活性的差异性表达，探讨白血病多药耐药（MDR）发病机制。方法用MTT法检测K562／A02的耐药倍数，观察细胞生长的形态学变化，PI单染法检测K562／S、K562／A02细胞周期分布，并用RT—PCR方法检测mRNA的表达、流式细胞仪检测P糖蛋白（P-gp）表达及其功能，Western blotting方法检测细胞核NF—κB p65表达，比较K562与K562／A02白血病耐药细胞株之间的差异性。结果与K562细胞不同，耐药细胞株K562／A02细胞生长特性发生改变，呈半贴壁生长，与K562／S细胞相比，K562／A02细胞的G0／G1期、S期比例增高，G2／M期细胞比例减低，差异有统计学意义（P〈0．05），凋亡细胞比例差异无统计学意义（P〉0．05），且检测到mdr1 mRNA及细胞膜P-gP表达增高以及细胞核内NF-κB p65表达明显增加。结论NF-κB信号通路的激活即NF-κB p65细胞核内转位可能参与了白血病MDR的形成。

核因子-κB信号通路在自来水有机提取物致L02细胞炎性损伤中的作用

[目的]观察自来水有机提取物致正常人肝细胞株(L02细胞)炎性损伤中核因子-κB(NF-κB)信号通路的激活情况及其调控作用。[方法]采用固相萃取法提取自来水中的有机污染物。将L02细胞分别暴露于培养液(空白对照)、0.1%二甲基亚砜(溶剂对照)和0.312 5、0.625 0、1.250 0、2.500 0、5.000 0 L/m L自来水有机提取物中24、48、72 h。采用免疫印迹方法观察NF-κB信号通路的激活情况;并使用ELISA法测定细胞培养液上清中白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。[结果](1)L02细胞染毒24、48、72 h,细胞活力在各剂量组均明显降低(P<0.05)。(2)L02细胞染毒24、48、72 h,NF-κB抑制蛋白的表达水平在0.625 0 L/m L以上剂量组均明显降低(P<0.05);p65蛋白表达水平在染毒24、48 h时点,仅在1.250 0 L/m L以上剂量组明显升高(P<0.05),而在72 h时点,0.625 0 L/m L以上剂量组即明显升高(P<0.05)。(3)L02细胞染毒24、48 h后,0.625 0 L/m L以上处理组的IL-8水平均明显升高(P<0.05);而染毒72 h,低剂量组(0.312 5 L/m L)的IL-8水平即可升高明显(P<0.05);染毒24 h,1.250 0 L/m L以上处理组的TNF-α水平明显升高(P<0.05);而染毒48、72 h,TNF-α水平在0.625 0 L/m L以上处理组即升高明显(P<0.05)。与24 h染毒组比较,48、72 h各染毒组的IL-8与TNF-α水平均明显升高(P<0.05)。(4)IL-8、TNF-α水平与NF-κB抑制蛋白表达水平均呈负相关关系(r=-0.851 0、-0.818 0,P<0.05),与p65蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.816 0、0.865 0,P<0.05)。[结论]自来水有机提取物可剂量-依赖性及时间-依赖性地激活NF-κB信号通路,诱导IL-8及TNF-α的分泌,此可能为其诱发L02细胞炎性损伤的重要原因之一。

镉对蛋白磷酸酶2A-B55δ高表达L02细胞周期和核因子-κB活化影响

目的探讨镉对蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B55δ亚基高表达和不同多态性单体型调控高表达的肝细胞周期的影响及其与核因子-kappaB(NF-κB)活化的关系。方法选择永生化人正常肝L02细胞,采用B55δ编码基因PPP2R2D序列构建高表达的L02-2R2Dc细胞、与不同启动子区单体型调控高表达的L02-2R2D-PC1和L02-2R2D-PC3细胞株,以导入空载体的L02-pBabe为对照细胞。各细胞给予5～80μmol/L的氯化镉(CdCl2)处理建立细胞模型。噻唑蓝法检测各细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测细胞核内NF-κBp65蛋白的活化情况;荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测环氧合酶-2(COX-2)基因mRNA水平的改变。结果与对照组比较,CdCl2组各细胞的增殖抑制率随镉水平增高呈剂量依赖性增高(Pearson’s r均P<0.05);与CdCl2组比较,冈田酸+CdCl2组各细胞的增殖抑制率明显增加(P<0.05);与对照组比较,CdCl2组细胞G1期比例下降、S期比例增加(P<0.05);胞核p65蛋白水平增高,COX-2 mRNA水平上调;这种效应在不同细胞株之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论镉可引起PP2A-B55δ高表达的人肝L02细胞增殖功能抑制并导致细胞周期S期阻滞,这种效应与NF-κB信号通路的活化有关。

连翘脂素通过调控P2X7R/NF-κB/NLRP3炎性小体信号通路缓解LPS/ATP诱导的L02细胞炎症

目的:为研究连翘脂素(Phillygenin,PHI)对脂多糖(LPS)和腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)联合诱导L02细胞中的抗炎药效和对P2X7受体(P2X7R),NOD样蛋白结构域受体3(NLRP3)和核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:本研究采用先给予100μg·L^(-1)LPS处理24 h后,再使用5 mmoL·L^(-1)ATP 5 h建立L02细胞炎症模型。给药组在给予LPS处理的同时给予不同浓度PHI(100、50、25 mg·L^(-1))培养6 h,随后换液,继续用LPS处理18 h,ATP处理5 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测L02细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、P2X7R、NLRP3、胱天蛋白酶-1前体(pro-Caspase-1)、裂解胱天蛋白酶-1(cleaved Caspase-1)、NF-κB、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA和蛋白表达。通过分子对接实验预测P2X7R与PHI能否结合,以及DCFH-DA活性氧(ROS)荧光探针检测细胞中ROS的累积。采用小干扰核糖核酸(siRNA)沉默P2X7R,并随后通过Real-time PCR检测IL-1β、IL-18、P2X7R、NLRP3、Caspase-1、NF-κB、IκBα mRNA表达情况。结果:Real-time PCR和Western blot分析显示,与空白组比较,模型组IL-1β、IL-18的表达均有所升高(P<0.05);与模型组比较,给药组明显下调了IL-1β、IL-18 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。分子对接结果显示PHI与P2X7R有较好的结合作用。Real-time PCR和Western blot分析显示,与空白组比较,模型组P2X7R的表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,给药组下调了P2X7R mRNA和蛋白表达(P<0.05)。ROS荧光探针分析显示,与空白组比较,ROS的含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,给药组明显降低了ROS的积累(P<0.05)。Real-time PCR和Western blot分析显示,与空白组比较,模型组NLRP3炎性小体,NF-κB的表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,给药组明显降低NLRP3、cleaved-Caspase-1和上调NF-κB、IκBα mRNA及蛋白表达(P<0.05)。Real-time PCR分析显示,与模型组比较,siRNA沉默P2X7R后,IL-1β、IL-18、P2X7R、NLRP3、Caspase-1、NF-κB、IκBα mRNA表达明显降低(P<0.05),PHI具有同样的作用,二者合用后,基因表达进一步下降。结论:P2X7R为NF-κB/NLRP3信号通路的上游,PHI可能是通过下调P2X7R从而抑制NF-κB/NLRP3信号通路的表达从而缓解LPS/ATP诱导的L02细胞炎症,提示P2X7R可能是PHI发挥抗炎作用的靶标。

核因子I-B高表达对肝L02细胞中蛋白磷酸酶2A-B55δ靶向调控研究

目的构建核因子I-B基因(NFIB)真核表达重组质粒,应用于其高表达调控肝细胞中蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B亚基基因转录的功能学验证。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得人NFIB mRNA片段,克隆入真核绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP-N1),构建pEGFP-NFIB重组质粒后,分别给予250、500、1 000 ng转染永生化人正常肝L02细胞建立NFIB高表达细胞模型(相应设为250、500和1 000 ng剂量组),对照组为250 ng pEGFP-N1转染的L02细胞,荧光定量聚合酶链反应检测NFIB mRNA,激光共聚焦和免疫印迹法(WB)检测核因子-1(NF-1)蛋白水平。电泳迁移率实验分析与NF-1相结合的DNA序列的特异性,荧光素酶报告基因检测PP2A-B55δ亚基基因(PPP2R2D)启动子区的转录活力,RT-PCR和WB检测细胞内PPP2R2D mRNA和PP2A-B55δ蛋白水平。结果双向测序证实pEGFP-NFIB重组表达质粒构建成功。与对照组比较,各剂量组L02细胞中NFIB mRNA相对水平增高(P<0.01),增强型绿色荧光蛋白、NFI-B蛋白表达水平均升高(P<0.05)。NF-1可与PPP2R2D基因启动子区(2R2Dp)-462G>A不同多态性序列结合,NFIB高表达使L02细胞中2R2Dp-462G启动子活力下降(P<0.05),PPP2R2D mRNA和PP2A-B55δ蛋白水平均升高(P<0.05)。结论成功构建人NFIB真核表达重组质粒,应用于人肝细胞中证实NF-1靶向PPP2R2D的功能学调控作用。

南黄海EY02-2孔磁性地层及古环境意义

对采自南黄海中部平原的钻孔EY02-2(孔深70 m)进行了岩石磁学和磁性地层学研究. 磁化率随温度变化曲线(k-T)显示, 该钻孔沉积物磁性矿物的居里温度为580～600℃, 即主要磁性物质为磁铁矿. 磁滞回线测定结果表明, 南黄海磁性矿物的粒度随不同沉积环境变化很大, 总趋势是潮下滨岸大于陆相, 陆相大于海相, 与沉积物物源的距离远近和水动力强弱有关. 磁极性地层研究揭示出M/B极性转换界线位于该钻孔的63.29 m, 同时在布容期至少出现7次极性漂移(Nr1-7), 可以与布容期内的6次极性事件对应; 在松山期也出现3次正极性漂移, 最下部的两个正漂移可能是发生于886±3 kaBP的Kamikatsura正极性事件的反映. 磁化率和沉积物的粒度在不同的沉积相表现不同, 因此揭示了一些大的环境转换界面. 通常潮下滨岸和陆相的磁化率和粒度都要大于海相沉积物, 磁化率在10×10-5SI左右的稳定分布和平均粒径接近7φ指示了水深较大的海相层. 但是, 磁化率和粒度不能作为气候变化指标与深海氧同位素δ18O对比. 我们认为, 半封闭陆架海复杂的沉积物源和在冰期-间冰期沉积动力的变化是造成这种不能对比的原因.

PC-B2对AFB_1致肝细胞DNA损伤及修复影响

目的探讨原花青素B2(PC-B2)对黄曲霉毒素B1(AFB1)所致人胚胎肝细胞(L-02)DNA损伤及修复基因表达影响。方法取对数期生长良好的L-02细胞随机分为空白对照组、溶剂对照组、PC-B2处理组(3、10、30μg/m L)、AFB1染毒组(10、20、30、40μg/m L)和PC-B2干预组(3、10、30μg/m L PC-B2+30μg/m L AFB1),利用噻唑蓝法、酶联免疫吸附法和荧光定量PCR技术分别测定细胞增殖活力、细胞上清液8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)含量及细胞h OGG1基因表达水平。结果 AFB1可明显抑制L-02细胞增殖活力(P<0.05),呈剂量-效应关系;与溶剂对照组比较,30μg/m L AFB1组细胞活力[(69.9±2.46)%]明显降低(P<0.05),细胞上清中8-OHd G含量[(2.779±0.089)ng/m L]明显升高(P<0.05);与30μg/m L AFB1组比较,3、10、30μg/m L PC-B2干预组细胞活力[分别为(70.6±2.67)%、(69.7±1.94)%、(82.4±1.58)%]明显升高(P<0.05),细胞上清中8-OHd G含量[分别为(2.550±0.078)、(2.376±0.109)、(1.873±0.065)ng/m L]明显降低(P<0.05);与溶剂对照组比较,30μg/m L AFB1组L-02细胞h OGG1基因表达减少(P<0.05);与30μg/m L AFB1组比较,PC-B2干预组L-02细胞h OGG1表达明显升高。结论 PC-B2可提高肝细胞增殖活力,抑制AFB1所致肝细胞DNA损伤,其机制可能与调控修复基因h OGG1表达有关。

油酸钠致L02肝细胞脂肪变性和炎症效应

目的观察油酸钠导致的L02肝细胞脂肪变性和炎症效应。方法不同浓度油酸钠孵育L02肝细胞24 h,检测细胞活性。选定75、150和300μmol/L油酸钠分别与L02肝细胞培养24 h,油红染色观察细胞脂质蓄积情况,检测细胞中甘油三酯含量和上清液中白介素6(interleukin 6,IL-6)含量,免疫印迹法检测沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)和核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)的表达,流式细胞仪检测细胞表面Toll样受体2(Toll-like receptor,TLR2)和TLR4的表达。结果随着油酸钠浓度增加,细胞活性下降,细胞生长抑制率升高。75、150和300μmol/L油酸钠干预L02肝细胞甘油三酯含量明显高于对照组(P<0.01、P<0.001和P<0.001),上清液中IL-6含量显著升高(P<0.05、P<0.01和P<0.001),细胞内脂质明显蓄积。150和300μmol/L油酸钠干预L02肝细胞TLR2表达显著高于对照组(P<0.05和P<0.001),TLR4表达未见显著上升。油酸钠各剂量组SIRT1蛋白表达低于对照组,NF-κB p65表达高于对照组。结论油酸钠引起L02肝细胞脂肪变性可能与TLR2/NF-κB介导的炎症通路有关。

雷公藤红素提高人白血病细胞化疗敏感性的实验研究

目的探讨雷公藤红素提高人白血病多药耐药细胞株(K562/A02)化疗敏感性的作用及其机制。方法白血病细胞株K562和多药耐药细胞株K562/A02,培养至对数生长期分成6组,分别为K562/A02阴性组、K562/A02+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562/A02+125μmol/L雷公藤红素组以及K562阴性组、K562+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562+125μmol/L雷公藤红素组;设置K562+硼替佐米4nmol/L为阳性对照组。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;采用反转录PCR法检测各组细胞中核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、survivin、死亡受体5(death receptor 5,DR5)mRNA表达水平;应用流式细胞术检测DR5蛋白阳性表达率。结果K562阴性组与K562+62.5μmol/L雷公藤红素组细胞凋亡率[(5.110±0.803)%、(6.283±0.889)%]以及K562/A02阴性组与K562/A02+62.5μmol/L雷公藤红素组细胞凋亡率[(7.203±0.275)%、(8.753±0.951)%]比较差异均无统计学意义(P>0.05);K562/A02阴性组NF-κB mRNA(0.863±0.073)、survivin mRNA(0.989±0.018)、DR5 mRNA(0.114±0.037)表达水平高于K562阴性组(0.262±0.074、0.267±0.056、0.050±0.011)(P<0.05);K562+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562+125μmol/L雷公藤红素组NF-κB mRNA(0.210±0.053、0.128±0.076)、survivin mRNA(0.199±0.064、0.228±0.030)表达水平均低于K562阴性组,DR5mRNA表达水平(0.312±0.075、0.464±0.073)表达水平高于K562阴性组(P<0.05);K562/A02+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562/A02+125μmol/L雷公藤红素组NF-κB mRNA(0.492±0.040、0.359±0.069)、survivin mRNA(0.516±0.042、0.348±0.047)表达水平均低于K562/A02阴性组,DR5mRNA表达水平(0.470±0.034、0.519±0.048)均高于K562/A02阴性组(P<0.05);K562+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562+125μmol/L雷公藤红素组DR5蛋白阳性表达率[(5.438±0.517)%、(6.250±0.897)%]高于K562阴性组[(0.093±0.015)%](P<0.05),K562/A02+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562/A02+125μmol/L雷公藤红素组DR5蛋白阳性表达率[(19.900±0.526)%、(20.703±1.045)%]高于K562/A02阴性组[(6.980±0.925)%](P<0.05)。结论雷公藤红素提高K562/A02耐药细胞株化疗敏感性的作用可能与下调NF-κB、survivin表达,上调DR5表达有关。