生孢噬纤维菌内切葡聚糖酶的异源表达及CBM6对其酶学性质的影响

内切葡聚糖酶是纤维素酶系的重要组分之一,但大部分内切葡聚糖酶酸碱耐受性较差。为挖掘新型内切葡聚糖酶,本研究从生孢噬纤维菌CX11基因组中克隆了一个内切葡聚糖酶基因Sm_1350。该基因大小为2 196 bp,编码732个氨基酸,编码蛋白包含一个分泌信号肽、GH5催化结构域、6家族碳水化合物结合模块(CBM6)和一个C末端结构域(CTD)。利用实时荧光定量PCR技术对Sm_1350在不同碳源条件下的相对表达水平进行了分析,结果表明,Sm_1350在纤维二糖和滤纸培养基中的表达水平均显著高于在葡萄糖培养基中的表达水平,推测其在CX11降解纤维素过程中发挥一定作用。本研究构建了Sm_1350及其3种截短突变体,分别为Sm_1350、Sm_1350-GH5-CBM6、Sm_1350-GH5和Sm_1350-CBM6,并在大肠杆菌中进行异源表达。结果表明,去除CTD结构域明显提高了目的蛋白的可溶性表达水平。以CMC为底物时,Sm_1350-GH5-CBM6与Sm_1350-GH5酶活力分别为(7 000.00±50.00)U/g和(2 542.73±35.03)U/g,表明去除CBM6降低了Sm_1350-GH5对可溶性多糖的水解能力。酶学性质分析结果显示,Sm_1350-GH5-CBM6与Sm_1350-GH5均有较好的pH稳定性,去除CBM6结构域只改变了Sm_1350-GH5的最适温度,对最适pH以及温度稳定性没有产生影响。此外,Sm_1350-CBM6具有较强的几丁质结合能力,在蛋白纯化方面具有良好的应用前景。

基于CBM的共用信息系统装备维修保障体系分析与架构设计

随着信息化和数字化技术的不断发展,企业和组织之间信息共享和协作的迫切需求驱使着共用信息系统的产生。企业和组织可以通过共用信息系统装备实现资源的共享和互通,避免信息孤岛和资源浪费,提高信息协同和决策效率。然而环境、人为等因素会导致共用信息系统装备出现故障,使系统无法正常工作。虽然已有相应的装备维修体系,但针对共用信息系统的装备维修方法落后,架构老旧且维修可扩展性低。为解决该问题,以基于状态的维修理论(CBM)为基石,结合模糊理论、灰色模型以及现有共用信息系统维修体系,分析基于CBM的共用信息系统维修保障体系所需功能和流程,构建基于CBM的全新共用信息系统装备维修架构。所提出架构优化了传统装备维修保障模式,为维修管理工作提供了科学的参考依据。

煤矿采动稳定区煤层气开发区块经济评价技术

针对我国煤矿采动稳定区煤层气开发区块评价技术缺乏,难以有效指导经济开发应用这一问题,基于煤层气开发效果与综合效益,分析了采动稳定区煤层气开发区块评价关键参数,构建了考虑技术进步等动态影响因素的煤层气开发区块经济评价指标体系,采用层次分析方法获得了各单项指标的相对权重,并提出了开发区块最大隶属原则经济评价方法。应用试验表明,该经济评价方法可为煤矿采动稳定区煤层气开发决策提供可靠指导。

黑曲霉耐热型葡聚糖酶纤维素结合结构域的替换与融合体酶性质

该文旨在通过更换纤维素结合结构域(cellulose binding domain, CBD)的方式探索获得具有纤维素水解能力的耐热型葡聚糖酶的方法。黑曲霉(Aspergillus niger)来源的葡聚糖酶AnEglA6具有优越的耐热性能,在禽类饲料生产中具有应用前景。通过更换不同家族来源的碳水化合物结合结构域(carbohydrate binding module, CBM)编码区,构建了融合体葡聚糖酶基因,分别在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中进行异源表达。AnEglA6催化结构域与分别来源于嗜热菌(Caldicellulosiruptor kristjanssonii)和荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的木聚糖酶的底物结合结构域CBM9、CBM10结合获得的融合体酶AnEg-CBM9和AnEg-CBM10均具有较高的纤维素水解能力,并且底物范围进一步扩大,对微晶纤维素也具有一定的水解能力。AnEg-CBM10热稳定性有显著的提高,在85℃下酶活力半衰期达到40 min左右,能短时耐受90℃高温。融合体酶AnEg-CBM10是一种热稳定性提高、具有纤维素水解能力的新型葡聚糖酶。

CBM标准化研究现状及发展趋势

基于状态的维护(CBM)是一种新的设备维护模式,建立CBM方式的设备维护系统是一个复杂的系统工程,为规范相关软硬件产品的研制开发、提高不同厂商产品的可互换性与可互操作性,IEEE、ISO、OSA-CBM、MIMOSA等组织相继制定了一些标准,对CBM技术的发展起到了很好的促进作用。本文介绍了国际上CBM标准化研究的现状及相关成果,分析了CBM标准化研究的发展趋势,介绍了作者在CBM研究方面的成果,并对我国CBM标准化研究工作提出了建议。

我国公路桥梁管理系统(CBMS)的开发与推广应用

以我国公路桥梁管理系统 （ＣＢＭＳ） 的研究开发为背景， 阐述了 Ｗｉｎｄｏｗｓ 环境下的ＣＢＭＳ＿ Ｗｉｎ Ｖ４－０ 版的开发环境、系统构成、数据库设计、各功能模块设计、输入输出要求， 以及近年来ＣＢＭＳ 在国内各省市的推广应用情况；此外， 还简单介绍了天威ＧＩＳ （ 地理信息系统） 和桥梁动态多媒体处理技术在ＣＢＭＳ 中的应用。

CBMS在高速公路桥涵养护管理中的应用

中国公路桥梁管理系统(CBMS)为交通部"八五"计划项目,目前在公路交通系统正得到广泛推广应用,该系统对实现中国公路桥梁涵洞科学化、标准化和智能化管理具有很大的促进作用。论文简要介绍CBMS的结构层次,结合CBMS2007版在广东某高速公路桥梁涵洞养护管理中的应用实践,探讨了系统应用的不足之处,并提出了改进建议。

CBM在线文献分析功能探讨

以"文献计量学"为主题词实施检索,从作者、出版时间、发文机构、来源期刊、主题等方面介绍CBM的在线文献分析功能,探讨存在的不足并提出改进建议,包括提高数据标引规范性、增加数据清洗功能等方面。

基于CBM的军机持续适航管理

基于状态的维修CBM(Condition-Based Maintenance)是当今世界维修界影响巨大的维修方式,不仅成功应用于国外工程机械领域,也为民航飞机适航和维修工作提供了可靠的技术支撑。通过分析CBM的技术方法和实施步骤,将其与军机持续适航管理工作特点结合在一起,试图通过借鉴其在民航领域的成功来推动军机适航工作。

CBM2蛋白的高密度自诱导

为提高外源蛋白表达量,以pET20b载体、BL21(DE3)E.coli宿主细胞,比较了乳糖和IPTG对CBM2(碳水化合物结合结构域)蛋白表达量的诱导效果。ZYM-5052自诱导培养基菌体OD600是IPTG LB培养基菌体的4.4倍。SDS-PAGE显示200μL ZYM-5052菌体细胞含有82.3μg CBM2,占细胞总蛋白55.3%;等量IPTG LB菌体细胞含有16.6μg CBM2,占细胞总蛋白25.7%。取不同培养时间等量等同OD600的ZYM-5052菌体进行SDS-PAGE,结果显示单位细胞中蛋白量随着培养时间而增加。所以高密度自诱导不仅提高了细胞生长密度、而且提高了单位细胞中蛋白表达量。自诱导方案用于表达葡聚糖酶,与IPTG LB菌体相比,自诱导菌体OD600是其2.3倍,酶活性是其4.5倍。该研究为提高外源蛋白表达量提供了较为简单、普适的高密度自诱导方案。

CBM与MEDLINE标引的比较研究

通过比较CBM与MEDLINE两个数据库对中文生物医学文献标引一致性和标引深度等指标，对CBM的标引质量进行分析和评价，并提出对CBM的改进意见。

基于CORBA的多库系统CBMS

多数据库系统是数据库方向的一个研究热点，而分布式对象技术是当今分布异构环境下，建立应用系统集成框架和标准构件的核心技术。基于CORBA的多库系统CBMS把多库系统与分布式对象技术有机地结合在一起，克服了传统的多库系统中存在的问题。本文详细阐述了CBMS系统的系统结构和实现中的关键技术。

对CBM数据库及其收录高原医学文献的计量分析

利用CBM光盘数据库对1978-2004年收录的27年医学文献和高原医学文献进行计量分析。

医学科技查新中常用词的CBM检索策略标准化实现及应用

结合实例论述建立常用词CBM标准化检索策略的作用和意义,指出其可提高医学科技查新中检索策略制定的质量和效率,对提升与规范查新报告质量具有重要意义。

基于OSA-CBM的盾构故障诊断系统数据库设计与实现

研究了基于OSA-CBM的盾构故障诊断系统数据库设计方案。数据库是系统的数据存储中心,是进行分析工作的基础。通过对系统功能与需求分析的研究,设计和实现了系统的数据库,并使用XPO对数据库进行各项访问操作。

CBM数据库作者机构非规范著录数据自动检测研究

对CBM数据库中作者机构非规范著录情况进行分析、归纳总结,依据已有的作者机构著录标准,开发非规范著录数据自动检测程序。结果表明该程序在显著提高工作效率的同时,保证较高的检测准确性,有助于提高CBM机构数据的标准化水平。

基于CBM的气动系统故障诊断技术研究

基于气动系统维修需求和CBM开放系统架构,分析了CBM的特点、技术标准和开放系统结构,研究了基于CBM的气动系统故障诊断技术,设计了故障诊断系统结构和工作流程。针对某典型气动实验系统故障诊断需求,以压力和流量为状态监测信号,实现了离线和在线监测相结合的全自动监控与故障诊断。

基于OM与CBM的医疗设备维修决策研究

本文基于医院医疗设备工作对象的特殊性与维修人力资源的匮乏性,针对医疗设备维修的时效性、可靠性和安全性三个要素,从理论上比较了机会维修策略(OM)与视情维修策略(CBM)的优缺点,结合"P—F"曲线,分析医疗设备维修的故障类型、现场要求和维修难度,对医疗设备的维修策略选择进行了研究和探讨,以期达到医疗设备维修的最优化。

现浇混凝土CBM内模空心楼盖的施工实践

现浇混凝土CBM自稳型内模空心楼盖具有轻质高强、抗振动性能及保温隔音性能好的优点,而且施工方便,经济实用。工程实践表明,抗浮是混凝土空心楼盖施工的关键技术,施工过程中只要加强对CBM管安装固定、混凝土浇筑等关键工序的质量控制,空心楼盖施工质量就可以得到有效保障。

苏联芳纶纤维APMOC和CBM性能的测试分析研究

本文全面测试、分析、研究了苏联的APMOC芳纶纤维和CBM芳纶纤维的性能,包括:力学性能,热物理性能、热分析、X射线衍射分析、扫描电镜表面形态与缺陷分析,红外光谱分析等,并与美国杜邦公司生产的Kevlar 49芳纶纤维进行了全面对比。研究表明APMOC芳纶纤维和CBM芳纶纤维在力学性能和热性能上都优于Kevlar 49芳纶纤维。