miR-124通过抑制TLR4/NF-κB/CCL2对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-124 agomir)组、TLR4过表达质粒组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组,另取12只大鼠只分离颈动脉,作为假手术组。分组干预后,评测大鼠神经功能缺损情况,比较各组神经功能缺损评分;采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠CI情况,比较各组CI面积;采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,比较各组海马神经元凋亡率;采用试剂盒测量各组血清活性氧(ROS)及炎症因子环氧合酶(COX)-2、白细胞介素(IL)-17水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测各组脑组织miR-124表达;采用Western印迹实验检测各组脑组织凋亡及TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组分别比较,miR-124 agomir组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组各指标水平无显著变化(P>0.05)。结论miR-124可通过下调TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达,抑制炎症,减轻脑组织梗死及海马神经元凋亡,修复CI大鼠神经功能。

血清CC型趋化因子2、CC型趋化因子18与声门型喉癌患者临床病理参数和预后的关系

目的研究血清CC型趋化因子2(CC type chemotactic factor 2,CCL2)、CCL18与声门型喉癌患者临床病理参数和预后的关系。方法选择邯郸市中心医院和河北工程大学附属医院2015年8月~2018年12月收治的168例声门型喉癌患者为研究对象,受试者工作特征(ROC)曲线确定血清CCL2、CCL18最佳截点,将患者分为CCL2高表达组和低表达组、CCL18高表达组和低表达组,分析血清CCL2、CCL18水平与声门型喉癌患者临床病理参数的关系,采用Kaplan-Meier曲线和Log-Rankχ^(2)检验分析血清CCL2高表达组和低表达组、CCL18高表达组和低表达组的5年无病生存率,采用Cox回归模型分析声门型喉癌预后的影响因素,并分析血清CCL2和CCL18表达与肿瘤复发/转移的关系。结果根据ROC曲线计算得出CCL2、CCL18的最佳截点分别为100.81、218.99 pg/ml。相较于CCL2、CCL18低表达组,CCL2、CCL18高表达组T3~T4a级、N1~N3级、肿瘤低分化占比明显升高(P<0.05)。168例声门型喉癌患者随访5年失访8例,完成随访160例。67例发生复发/转移,39例因复发/转移而死亡,肿瘤复发/转移率为41.88%(67/160),无病生存率为58.13%(93/160)。Kaplan-Meier生存曲分析显示,血清CCL2、CCL18高表达组5年无病生存率均明显低于血清CCL2、CCL18低表达组(P<0.05)。Cox回归分析显示,T分级升高、颈淋巴结复发、N分级升高、咽喉部复发、CCL2高表达、CCL18高表达是声门型喉癌预后不良的危险因素(P<0.05)。分析血清CCL2和CCL18表达与肿瘤复发/转移的关系发现,CCL2和CCL18均高表达时其复发/转移率明显高于CCL2和CCL18均低表达、CCL2低表达且CCL18高表达、CCL2高表达且CCL18低表达,差异比较有统计学意义(χ^(2)=10.450,P=0.015)。结论声门型喉癌患者血清CCL2、CCL18高表达与T分级、N分级、肿瘤低分化和预后不良显著相关。

注意缺陷多动障碍患儿血清ACE2,TWEAK和CCL5水平检测及诊断价值研究

目的 探究血清血管紧张素转换酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2),细胞因子肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)和CC趋化因子配体5(CC motif chemokine ligand 5,CCL5)水平在注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)患儿诊断、病情严重程度评估中的价值。方法 选取2022年10月~2023年10月在河北省儿童医院就诊的125例ADHD患儿记为ADHD组,另选105例在河北省妇幼保健中心体检的健康儿童为对照组,根据临床总体印象严重程度量表(CGI-S)将患儿分为轻中度组(n=83)和重度组(n=42)。ELISA方法检测血清ACE2,TWEAK,CCL5,促黄体生成素(LH)和催乳素(PRL)水平,联合型瑞文测验(CRT)和Conners父母症状问卷(PSQ)对患儿认知和行为状况进行评分。Spearman相关性分析重度组血清ACE2,TWEAK,CCL5与CGI-S,CRT,PSQ评分的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析ACE2,TWEAK,CCL5对ADHD及严重程度的诊断价值。结果 ADHD患儿血清ACE2(284.35±92.34 pg/ml),TWEAK(2.56±0.76 pg/ml)水平低于对照组(379.23±106.28 pg/ml,3.52±1.12 pg/ml),CCL5水平(7.36±2.37ng/ml)高于对照组(5.24±1.63 ng/ml),差异具有统计学意义(t=7.244,7.703,7.753,均P<0.05);重度组患儿CRT,血清ACE2,TWEAK水平低于轻中度组(t=5.318,6.686,6.490),而PSQ,CCL5水平较高于轻中度组(t=5.220,6.134),差异具有统计学意义(均P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,重度组患儿血清ACE2,TWEAK水平与CGI-S,PSQ评分负相关(r=-0.432,-0.453;-0.421,-0.426,均P<0.001),与CRT评分呈正相关(r=0.427,0.418,均P<0.001);CCL5与CGI-S,PSQ评分呈正相关(r=0.421,0.433,均P<0.001),与CRT评分呈负相关(r=-0.446,P<0.001)。血清ACE2,TWEAK和CCL5诊断ADHD发生的AUC分别为0.814,0.803和0.807,三者联合诊断的AUC为0.945,优于各自单独诊断(Z=5.439,4.258,5.576,均P<0.001);血清ACE2,TWEAK,CCL5诊断重度ADHD的AUC分别为0.853,0.796和0.805,三者联合诊断的AUC为0.930,优于各自单独诊断(Z=2.604,3.851,3.567,均P<0.001)。结论 血清ACE2,TWEAK在ADHD患儿血清中低表达,而CCL5高表达,三者表达水平具有相关性,并且诊断ADHD发生和严重程度具有较高的价值。

鄂尔多斯盆地CCS-EOR项目CO_(2)泄漏环境风险评估

以鄂尔多斯盆地乔家洼CCS-EOR项目为例,通过工程活动指标分解及选项设计,形成涵盖油区特征、储盖层特征、工程设计、工程监管4大类20个指标的环境风险可能性判定指标体系,利用问卷调查和专家打分法,界定驱油工程环境风险可能性。结合国内外文献分析,开展项目对空气、土壤和微生物、作物、动物及人群等环境风险受体的影响程度界定,基于界定结果,按照风险评估矩阵,对该工程CO_(2)泄漏环境风险水平的评估结论为低风险,在后期运行过程中应强化风险防范与监测。

木犀草素对神经性疼痛模型大鼠MCP-1/CCR2信号轴的影响

目的:探讨木犀草素调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/CC趋化因子受体2(CCR2)信号轴,对神经性疼痛(NP)模型大鼠神经胶质细胞激活和免疫炎症的影响。方法:采用坐骨神经慢性压迫损伤法构建大鼠NP模型。将大鼠按随机数字表法分为模型组、阿魏酸钠组及木犀草素低、中、高剂量组,每组12只;另选择同期12只大鼠为假手术组。各组大鼠腹腔注射及灌胃相应药物,每天1次,连续14 d。测定大鼠机械性缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(TWL);实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及免疫组织化学法检测脊髓中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)mRNA及蛋白表达;流式细胞仪检测大鼠外周血中CD4^(+)、CD8^(+)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脊髓病理损伤情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脊髓中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;蛋白质印迹法(Western blotting)检测脊髓中MCP-1、CCR2蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠MWT、TWL、CD4^(+)T细胞比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值降低,Iba-1、GFAP mRNA及蛋白表达、CD8^(+)T细胞比例、炎症因子水平(IL-6、IL-1β、TNF-α)、MCP-1及CCR2蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,木犀草素低、中、高剂量组及阿魏酸钠组大鼠MWT、TWL、CD4^(+)T细胞比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值升高,Iba-1、GFAP mRNA及蛋白表达、CD8^(+)T细胞比例、炎症因子水平(IL-6、IL-1β、TNF-α)、MCP-1及CCR2蛋白表达降低,且木犀草素作用效果呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:木犀草素具有抗炎、增强免疫、抑制胶质细胞活化,缓解NP的作用,其作用机制可能与抑制MCP-1/CCR2信号轴的激活有关。

非小细胞肺癌患者血清CCL11、LCN-2水平及其诊断价值

目的探究非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清嗜酸性粒细胞趋化因子(CCL11)、脂质转运蛋白-2(LCN-2)水平及其对NSCLC的诊断价值。方法选取2019年10月至2022年12月该院收治的NSCLC患者为NSCLC组(80例),另选取同期在该院进行诊治的80例肺部良性病变患者及80例健康志愿者为良性对照组和健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清CCL11、LCN-2水平;比较3组受试者一般资料及血清CCL11、LCN-2水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CCL11、LCN-2对NSCLC的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析NSCLC发生的影响因素。结果NSCLC组血清CCL11、LCN-2水平均显著高于良性对照组和健康对照组(P<0.05),而良性对照组与健康对照组间差异无统计学意义(P>0.05);不同性别、年龄、病理类型NSCLC患者血清CCL11、LCN-2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),有吸烟史、从事高油烟、粉尘等相关工作、中低分化程度、肿瘤最大径>3 cm、淋巴结发生转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期的NSCLC患者血清CCL11、LCN-2水平均显著高于无吸烟史、未从事高油烟、粉尘等相关工作、高分化程度、肿瘤最大径≤3 cm、淋巴结未转移、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期的NSCLC患者(P<0.05);ROC曲线结果显示,CCL11、LCN-2单独及二者联合评估诊断NSCLC的曲线下面积分别为0.849、0.841、0.926,灵敏度分别为73.8%、75.0%、85.0%,特异度分别为70.1%、70.0%、75.0%,二者联合诊断NSCLC的效能高于二者单独诊断(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,吸烟、从事高油烟、粉尘等相关工作及血清CCL11、LCN-2水平均是NSCLC发生的影响因素(P<0.05)。结论在NSCLC患者中,血清CCL11、LCN-2水平均显著增加,且与NSCLC患者临床病理特征密切相关,二者在诊断NSCLC中具有一定的临床价值。

CC类趋化因子受体2、Th1/Th2细胞在IgA肾病大鼠肾间质纤维化中的表达及意义

目的检测IgA肾病大鼠肾间质纤维化中CC类趋化因子受体2(C-C motif chemokine receptor 2,CCR2)的表达和辅助性T细胞1/2(helper T cell 1/2,Th1/Th2)的含量,并观察其在肾脏纤维化中的作用。方法40只SD雄性大鼠,随机分为模型组和对照组,每组20只。采用脂多糖+改良牛血清白蛋白+四氯化碳法构建免疫球蛋白A(IgA)肾病模型。观察大鼠肾组织病理改变和IgA沉淀,计算胶原纤维占肾组织百分比,采用Katafuchi评分标准评估肾小管间质损伤程度。蛋白质印迹测定肾组织CCR2水平。双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。流式细胞术检测Th1/Th2细胞比例。结果模型组大鼠肾组织胶原纤维面积百分比和Katafuchi评分显著高于对照组(P<0.05);模型组大鼠肾组织CCR2、血清IL-4水平、Th2细胞含量及IL-4/IFN-γ比值显著高于对照组,血清IFN-γ水平、Th1细胞含量显著低于对照组(P<0.05);CCR2和IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值与胶原纤维面积百分比、Katafuchi评分呈正相关(P<0.05);IFN-γ水平与胶原纤维面积百分比、Katafuchi评分呈负相关(P<0.05)。结论CCR2和Th1/Th2失衡参与IgA肾病大鼠肾间质纤维化发生和发展,拮抗CCR2和调节Th1/Th2平衡有可能减轻IgA肾病大鼠肾脏纤维化改变。

脊髓背根神经节ZXDC介导CCL2对慢性压迫性 神经损伤小鼠神经性疼痛的作用

目的探讨脊髓背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中转录因子锌指X连锁复制C(zinc finger X-linked duplicated C,ZXDC)介导CCL2/CCR2信号通路对慢性压迫性神经损伤(chronic construction injury model,CCI)诱导神经性疼痛的作用及机制。方法构建小鼠坐骨神经慢性压迫性损伤模型,免疫荧光染色、Western blot法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测正常情况和CCI造模后DRG中ZXDC及CCL2表达变化;将实验动物分为假手术(Sham)组、CCI+AAV-NC组和CCI+AAV-ZXDC siRNA组;Western blot法和免疫荧光染色检测各组小鼠CCI造模后各时间点DRG中ZXDC、CCL2和CCR2表达,RT-qPCR检测DRG中促炎性细胞因子TNF-α和IL-1βmRNA表达,机械性缩足反射测试检测神经性疼痛行为改变。结果ZXDC表达定位在DRG大、中、小神经元。CCI损伤后1~3天DRG中ZXDC和CCL2蛋白和mRNA表达显著增高,CCI后7天二者表达显著降低,ZXDC和CCL2mRNA表达量呈正相关(P均<0.05)。CCI后3天,与Sham组比较,CCI+AAV-NC组和CCI+AAV-ZXDC siRNA组ZXDC、CCL2、CCR2蛋白表达、TNF-α和IL-1βmRNA表达显著增高,其中CCI+AAV-ZXDC siRNA组较CCI+AAV-NC组ZXDC、CCL2、CCR2蛋白表达、TNF-α和IL-1βmRNA显著降低(P均<0.05)。与Sham组比较,CCI+AAV-ZXDC siRNA组和CCI+AAV-NC组CCI后各时间点机械缩足阈值均显著降低,其中CCI后7天,CCI+AAV-ZXDC siRNA组机械缩足阈值显著高于CCI+AAV-NC组(P均<0.05)。结论脊髓背根神经节ZXDC基因敲减通过抑制CCL2/CCR2信号通路介导CCI诱导的神经性疼痛。

血清Th1/Th2趋化因子CXCL10、CCL22水平与溃疡性结肠炎患者疾病活动度的关系

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者血清1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)趋化因子配体10(CXCL10)、CC类趋化因子22(CCL22)表达水平及其与疾病活动度的关系。方法选择2019年1月至2022年6月河南中医药大学第一附属医院收治的157例UC患者作为UC组,43例同期健康体检者作为对照组。采用UC内镜下严重程度指数(UCEIS)评分评估UC疾病的活动度,采用改良梅奥(Mayo)评分评估UC病情程度。UC组患者根据疾病活动度分为缓解组90例和活动组67例。比较三组受检者的血清CXCL10、CCL22、红细胞沉降率(ESR)、血清C反应蛋白(CRP)、中性粒细胞计数和白蛋白(Alb)。采用Pearson相关性分析法分析上述各项指标与改良Mayo评分、UCEIS评分的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清CXCL10、CCL22对UC疾病活动度的预测价值。结果活动组患者的血清CXCL10、CCL22、ESR、CRP、中性粒细胞计数分别为(64.06±11.57)ng/mL、(189.15±36.11)ng/mL、(10.95±1.42)mm/h、(15.74±2.56)mg/L、(9.71±0.93)×10^(9)/L,明显高于缓解组的(49.05±11.75)ng/mL、(149.27±27.17)ng/mL、(7.61±0.89)mm/h、(11.53±1.45)mg/L、(5.67±0.82)×10^(9)/L,缓解组的上述各项指标明显高于对照组的(21.21±6.21)ng/mL、(138.22±23.72)ng/mL、(4.98±0.65)mm/h、(7.76±1.48)mg/L、(3.81±0.75)×10^(9)/L,但活动组患者的Alb为(7.21±1.42)g/L,明显低于缓解组的(9.39±1.38)g/L和对照组的(13.26±2.43)g/L,且缓解组明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);活动组患者的改良Mayo评分、UCEIS评分分别为(7.06±0.88)分、(4.39±0.47)分,明显高于缓解组的(3.58±0.72)分、(2.17±0.36)分,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析结果显示,UC患者CXCL10、CCL22、ESR、CRP、中性粒细胞计数与改良Mayo评分、UCEIS评分均呈正相关(P<0.05),Alb与改良Mayo评分、UCEIS评分均呈负相关(P<0.05);经ROC分析结果显示,血清CXCL10、CCL22及两者联合检测预测UC疾病活动度的曲线下面积(AUC)分别为0.813、0.810和0.888,联合预测较单一指标预测的准确度更高。结论UC患者血清CXCL10、CCL22水平升高程度与疾病活动度情况具有密切的关系,两者联合检测对UC患者疾病活动度情况具有较高的预测价值。

妊娠糖尿病患者血清LRG1和CCL2水平对产后血糖转归的预测价值

目的 观察血清富亮氨酸α2-糖蛋白(LRG1)和CC趋化因子配体2(CCL2)水平对妊娠糖尿病(GDM)患者产后血糖转归的预测价值。方法 回顾性选取2020年1月至2023年6月邯郸市第一医院收治的110例GDM患者作为研究对象,根据产后6周血糖转归情况将患者分为正常组(n=65)与异常组(n=45)。比较两组患者孕晚期及产后的糖脂代谢指标[糖化血红蛋白(GHb)、空腹血糖、餐后2 h血糖(2 hPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]和血清LRG1、CCL2水平。采用多因素Logistic回归分析对患者产后血糖转归的影响因素进行分析,应用受试者工作特征(ROC)曲线评估LRG1、CCL2水平及两者联合对GDM患者产后血糖转归的预测价值。结果 两组患者孕晚期及产后的GHb、总胆固醇、HDL-C、LDL-C水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);正常组患者孕晚期及产后的空腹血糖、2 hPG、HOMA-IR、甘油三酯水平均低于异常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常组孕晚期及产后的LRG1、CCL2水平均低于异常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistci回归分析显示,空腹血糖、HOMA-IR、LRG1、CCL2与GDM患者产后血糖转归密切相关(P<0.05)。血清LRG1、CCL2水平联合检测对GDM患者产后血糖转归预测的曲线下面积为0.879。结论 GDM患者产后血糖正常者的孕晚期及产后的血清LRG1、CCL2水平均明显低于异常者。LRG1、CCL2联合检测能够有效预测GDM患者产后血糖转归情况。

替诺福韦对肝星状细胞活化及CCR2表达水平的影响

目的:研究药物替诺福韦(TDF)对人肝星状细胞(LX-2)的CC趋化因子受体2(CCR2)表达的影响,探讨TDF在肝纤维化疾病发展中发挥抗纤维化的作用机制。方法:以LX-2作为体外实验研究对象,使用HE染色观察用药后细胞增殖情况。利用蛋白质印迹法检测使用不同浓度TDF和CCR2小干扰RNA(siRNA)对LX-2细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及CCR2蛋白表达水平的影响。结果:siRNA沉默CCR2表达可显著下调肝纤维化相关蛋白α-SMA表达(P<0.01);TDF抑制LX-2细胞的增殖活化,明显降低细胞CCR2及α-SMA的蛋白表达水平(P<0.01)。结论:TDF可通过抑制CCR2表达抑制肝星状细胞活化,发挥抗肝纤维化作用。

甲基莲心碱通过调节CCL2-CCR2信号通路对缺血性脑卒中大鼠血脑屏障的影响

目的:探究甲基莲心碱(NEF)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-趋化因子受体2(CCR2)信号通路对缺血性脑卒中(IS)大鼠血脑屏障的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为模型组(Model组)、低剂量NEF组(NEF-L组,25 mg/kg NEF)、高剂量NEF组(NEF-H组,50mg/kgNEF)和高剂量NEF+CCR2拮抗剂组(NEF-H+RS102895组,50mg/kgNEF+10mg/kg RS102895)和假手术组(Sham组),每组15只。比较各组大鼠神经功能评分。伊文思蓝(EB)渗透法评价各组大鼠血脑屏障通透性。采用干湿重法测定各组大鼠脑组织含水量。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定大鼠脑组织CCL2、CCR2 mRNA表达。Western blot检测大鼠脑组织CCL2、CCR2、ZO-1、Claudin-5蛋白表达。结果:与Sham组相比,Model组大鼠神经功能评分、右脑组织EB含量、含水量、脑组织CCL2、CCR2 mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05),ZO-1、Claudin-5水平显著降低(P<0.05)。相较于Model组,NEF-H组神经功能评分、脑含水量、EB含量、CCL2、CCR2 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05),ZO-1、Claudin-5表达水平显著升高(P<0.05)。RS102895增强了NEF对IS大鼠血脑屏障的保护作用。结论:NEF可能通过抑制CCL2-CCR2信号通路对IS大鼠血脑屏障起保护作用。

血清KLK6、CCR2、ox-LDL水平与帕金森病的相关性研究

目的分析血清激肽释放酶6(KLK6)、CC趋化因子受体2(CCR2)、氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)与帕金森病的相关性。方法将2020年7月至2022年12月于该院诊治的帕金森病患者150例纳入研究作为患者组,按照Hoehn-Yahr(H-Y)分期进一步分为Ⅰ期27例、Ⅱ期42例、Ⅲ期47例、Ⅳ期34例。另外,选取同期健康体检者150例作为对照组。采用简易精神状态检查(MMSE)量表评估患者精神障碍情况。比较患者组与对照组及不同H-Y分期帕金森病患者血清KLK6、CCR2、ox-LDL水平。分析血清KLK6、CCR2、ox-LDL对帕金森病的诊断价值。分析血清KLK6、CCR2、ox-LDL与H-Y分期、MMSE评分的相关性。结果患者组血清KLK6、CCR2、ox-LDL水平高于对照组(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,KLK6、CCR2、ox-LDL诊断帕金森病的曲线下面积(AUC)分别为0.813、0.847、0.826,最佳临界值对应的灵敏度、特异度:KLK6为66.7%、90.0%,CCR2为68.0、91.3%,ox-LDL为59.3%、100.0%。不同H-Y分期患者血清KLK6、CCR2、ox-LDL比较:Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期;MMSE评分比较:Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期;两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。血清KLK6、CCR2、ox-LDL水平与H-Y分期均呈正相关(r=0.559、0.716、0.722,P<0.05);血清KLK6、CCR2、ox-LDL水平与MMSE评分均呈负相关(r=-0.276、-0.448、-0.457,P<0.05)。结论血清KLK6、CCR2、ox-LDL对帕金森病患者具有一定的诊断价值,并且与帕金森病患者的病情严重程度和认知功能有关。

扁蒴藤素调节CCL2-CCR2信号轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响

目的 探究扁蒴藤素(PT)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-CC趋化因子受体2(CCR2)信号轴对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响。方法 常规培养肺泡上皮细胞A549,将其随机分为Control组(正常培养)、LPS组(10μg/mL LPS处理)、PT-L组(1μmol/L PT)、PT-H组(2μmol/L PT)和PT-H+RS504393组(2μmol/L PT+50 ng/mL CCL2抑制剂RS504393)。采用CCK-8法检测细胞活力;采用EdU实验测定细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;采用Western Blot检测各组细胞中CCL2、CCR2和凋亡相关蛋白表达水平。结果 与Control组比较,LPS组A549细胞吸光度(A)450(48、72 h)、细胞增殖率、Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,CCL2、CCR2、Bax蛋白表达水平上升(P<0.05)。与LPS组比较,PT-L组、PT-H组A549细胞A450(48、72 h)、细胞增殖率、Bcl-2蛋白表达水平上升(P<0.05),细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,CCL2、CCR2、Bax蛋白表达水平下降(P<0.05)。CCL2抑制剂RS504393促进了PT对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的改善作用。结论 PT可能通过下调CCL2-CCR2信号轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤具有改善作用。

脑卒中患者CCR2和CRP水平与卒中相关性肺炎严重程度的关系及临床意义

目的检测脑卒中患者血清CC趋化因子受体2(CCR2)、C-反应蛋白(CRP)水平,分析二者与卒中相关性肺炎严重程度的关系及临床意义。方法选取2022年10月至2023年2月于该院诊治的78例卒中相关性肺炎患者作为研究组,根据肺炎严重程度将研究组患者分为轻度组(31例)、中度组(29例)和重度组(18例),另选取78例未并发肺炎的脑卒中患者作为对照组。采用Pearson法分析卒中相关性肺炎患者血清CCR2、CRP水平的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响卒中相关性肺炎发生的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CCR2、CRP对卒中相关性肺炎的诊断价值。结果研究组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及血清CCR2、CRP水平均高于对照组(P<0.05);血清CCR2、CRP水平均随肺炎严重程度的增加而升高(P<0.05);研究组血清CCR2与CRP水平呈正相关(r=0.799,P<0.05);NIHSS评分、CCR2、CRP水平为脑卒中患者发生卒中相关性肺炎的危险因素(P<0.05);血清CCR2、CRP单独检测诊断卒中相关性肺炎的曲线下面积(AUC)分别为0.873、0.888,二者联合检测的AUC为0.936,二者联合检测优于血清CCR2、CRP单独检测(Z二者联合-CCR2=1.987、Z二者联合-CRP=1.832,P=0.041、0.047)。结论血清CCR2、CRP与卒中相关性肺炎的严重程度密切相关,二者联合检测对卒中相关性肺炎具有较高的诊断价值。

联合凉膈散治疗脓毒症ARDS的疗效及其对血清CC-16、Ang-2、vWF的影响

目的研究联合凉膈散治疗脓毒症急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的疗效及其对血清Clara细胞分泌蛋白-16(CC-16)、血管生成-2(Ang-2)、血管性血友病因子(vWF)的影响。方法前瞻性选择2021年7月至2023年6月在河北省沧州中西医结合医院治疗的脓毒症ARDS患者98例,按照随机数字表法将其分为试验组与对照组,每组各49例。对照组行常规对症治疗,试验组行常规对症治疗+凉膈散治疗。比较两组治疗7 d后临床疗效;两组治疗7 d后机械通气时间、入住ICU时间;治疗前及治疗7 d后病情严重程度[急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)]、血气分析指标[动脉血氧分压(PaO_(2))、氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))及动脉血氧饱和度(SaO_(2))]、血清CC-16、Ang-2、vWF水平。结果试验组总有效率为91.84%,高于对照组(73.47%),差异有统计学意义(P<0.05)。试验组机械通气时间、入住ICU时间分别为(5.62±0.58)、(8.76±0.90)d,均小于对照组[(8.94±0.92)、(13.87±1.53)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗7 d后,试验组APACHEⅡ评分为(9.79±1.04)分,低于对照组[(13.59±1.57)分],PaO_(2)、PaO_(2)/FiO_(2)、SaO_(2)分别为(94.29±9.65)mmHg、(326.08±35.86)mmHg、1.03±0.12,均高于对照组[(80.38±8.42)mmHg、(268.69±28.75)mmHg、0.88±0.09],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗7 d后,试验组血清CC-16、Ang-2、vWF水平分别为(42.73±4.45)ng/L、2083(1879,2205)pg/mL、(4.95±0.52)μg/mL,均低于对照组[(49.35±5.14)ng/L、2749(2562,3075)pg/mL、(5.53±0.58)μg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论联合凉膈散治疗脓毒症ARDS可改善患者症状,缩短其恢复时间,改善患者血气分析指标,降低血清CC-16、Ang-2、vWF水平,疗效显著。

毛兰素调节CCL2⁃CCR2轴对关节软骨细胞炎性损伤的影响

目的探讨毛兰素调节CC趋化因子配体2(CCL2)/CC趋化因子受体2(CCR2)轴对关节软骨细胞炎性损伤的影响。方法将人关节软骨细胞分为control组(正常培养)、LPS组、毛兰素低(10 nmol/L)、中(25 nmol/L)、高(50 nmol/L)剂量组、pcDNA组(转染pcDNA3.1)、pcDNA⁃CCL2组(转染pcDNA3.1⁃CCL2),实时荧光定量PCR(qRT⁃PCR)检测细胞中CCL2、CCR2 mRNA表达水平;MTT法、平板克隆实验与流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况;qRT⁃PCR和ELISA检测IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃α水平;Western blot法检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞抗凋亡因子B细胞淋巴瘤蛋白2(Bcl⁃2)、Bcl⁃2相关X蛋白(Bax)及CCL2/CCR2通路蛋白表达。结果与control组比较,LPS组细胞凋亡率、IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃αmRNA表达水平、CCL2、CCR2 mRNA及Bax、CCL2、CCR2蛋白表达水平显著升高,OD490值、集落形成数、PCNA、Bcl⁃2蛋白表达水平降低(P<0.05);与LPS组比较,毛兰素低、中、高剂量组细胞凋亡率、IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃αmRNA表达水平、CCL2、CCR2 mRNA及Bax、CCL2、CCR2蛋白表达水平逐渐降低,OD490值、集落形成数、PCNA、Bcl⁃2蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05);过表达CCL2减弱了毛兰素对LPS诱导的关节软骨细胞的影响(P<0.05)。结论毛兰素可抑制LPS诱导的关节软骨细胞凋亡和炎症反应,其机制可能与抑制CCL2/CCR2通路有关。

信号转导和转录激活因子3/CC趋化因子配体2信号通路对乳腺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响实验研究

目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)/CC趋化因子配体2(CCL2)信号通路对乳腺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养人乳腺癌细胞株(HCC1937、MCF-7、MDA-MB-231、ZR-75-1)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)。采用蛋白印迹法检测HCC1937、MCF-7、MDA-MB-231、ZR-75-1和MCF-10A细胞磷酸化STAT3(p-STAT3)、STAT3、CCL2蛋白表达。选取p-STAT3/STAT3蛋白比值、CCL2蛋白表达最高的人乳腺癌细胞进行后续实验。将MCF-7细胞分为对照组、STAT3抑制剂(WP1066)Ⅰ组(2μmol/L WP1066)、Ⅱ组(4μmol/L WP1066)、Ⅲ组(8μmol/L WP1066)。分别采用细胞计数试剂盒-8、划痕实验、Transwell实验检测MCF-7细胞活力、迁移率及侵袭能力。采用蛋白印迹法检测MCF-7细胞p-STAT3、STAT3、CCL2、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果:与MCF-10A细胞比较,HCC1937、MCF-7、MDA-MB-231、ZR-75-1细胞p-STAT3/STAT3蛋白比值、CCL2蛋白表达升高(均P<0.05)。其中MCF-7细胞p-STAT3/STAT3蛋白比值、CCL2蛋白表达最高,因此选用MCF-7细胞进行后续实验。与对照组比较,STAT3抑制剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组MCF-7细胞活力、迁移率、侵袭数目依次降低(均P<0.05)。与对照组比较,STAT3抑制剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组MCF-7细胞p-STAT3/STAT3蛋白比值、CCL2、MMP-2及MMP-9蛋白表达依次降低(均P<0.05)。结论:乳腺癌细胞中STAT3/CCL2呈高表达,抑制STAT3/CCL2信号通路能够降低乳腺癌细胞活力,减少迁移和侵袭。

血清几丁质酶-3类蛋白-1、CC趋化因子受体2水平与急性缺血性脑卒中患者病情严重程度的关系及对预后的评估价值

目的探讨血清几丁质酶-3类蛋白-1(CHI3L1)、CC趋化因子受体2(CCR2)水平与急性缺血性脑卒中(AIS)病情严重程度的关系及对预后的评估价值。方法选取2021年6月至2022年12月于邯郸市第一医院就诊的AIS患者129例作为AIS组,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估病情严重程度,将患者分为轻度组63例、中度组39例和重度组27例,随访3个月后依据改良Rankin量表(mRS)分为预后良好组97例和预后不良组32例。另选取同期97例体检者作为对照组。检测并比较AIS组与对照组、不同严重程度和不同预后AIS患者血清CHI3L1、CCR2水平。利用二元Logistic回归法分析AIS患者预后的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线评估CHI3L1、CCR2水平对AIS患者预后的预测价值。结果AIS组血清CHI3L1、CCR2水平高于对照组(t=38.958、21.382,P<0.05);轻度组、中度组和重度组血清CHI3L1、CCR2水平差异有统计学意义(F=31.538、34.760,P<0.05);预后良好组患者血清中的CHI3L1、CCR2水平低于预后不良组(t=6.226、8.694,P<0.05);Logistic回归结果显示,CHI3L1、CCR2水平均是AIS患者预后不良的危险因素(OR=1.493、2.593,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清CHI3L1、CCR2及两者联合预测AIS患者预后的曲线下面积分别为0.869、0.882、0.965,敏感度为70.10%、86.60%、87.63%,特异度为93.75%、90.62%、96.87%,两者联合预测优于血清CHI3L1、CCR2单独预测(Z=2.990、2.931,P<0.05)。结论AIS患者病情越严重血清CHI3L1、CCR2水平越高,两者均可预测AIS患者预后不良,两者联合预测效能更佳。

根皮素调节CCL2-CCR2信号轴对肺癌细胞恶性进展的影响

目的:探讨根皮素调节CC趋化因子配体2(CCL2)-CC趋化因子受体2(CCR2)信号轴对肺癌细胞恶性进展的影响。方法:将A549细胞分为对照组(未进行任何处理的A549细胞)、低剂量根皮素组(500μmoL/L根皮素处理A549细胞)、中剂量根皮素组(750μmoL/L根皮素处理A549细胞)、高剂量根皮素组(1000μmoL/L根皮素处理A549细胞)、高剂量根皮素+GW0742组(1000μmoL/L根皮素与1.0μmoL/L CCL2-CCR2信号通路激活剂GW0742处理A549细胞)。CCK-8法和流式细胞术分别检测A549细胞增殖及凋亡;Transwell法检测细胞迁移和侵袭;Western blot测定CCL2-CCR2信号轴相关蛋白表达。结果:低、中、高剂量根皮素组细胞OD450值、迁移及侵袭数量、CCL2、CCR2蛋白表达均低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),且呈剂量依赖性。高剂量根皮素+GW0742组细胞OD450值、迁移及侵袭数量、CCL2、CCR2蛋白表达均高于高剂量根皮素组(P<0.05),细胞凋亡率低于对照组(P<0.05)。结论:根皮素可能通过调节CCL2-CCR2信号轴介导的免疫反应进而抑制肺癌细胞的恶性进展。