趋化因子受体CCR6及其配体CCL20的表达与结直肠癌肝转移关系的实验研究

背景与目的:趋化因子受体及其配体在肿瘤特异性转移中发挥重要作用,本研究旨在探讨人趋化因子受体6(human chemokine receptor 6,CCR6)及其配体(CC chemokine ligand 20,CCL20)的表达与结直肠癌肝转移的关系。方法:取液氮保存的50例结直肠癌标本,运用实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测不同组织中CCR6、CCL20 mRNA和蛋白表达情况,分析其差异。结果:CCR6及CCL20 mRNA和蛋白在结直肠癌和肝转移灶中高表达,并且均显著高于癌旁组织。CCR6 mRNA和蛋白在结直肠癌病灶中的表达比在肝转移灶中高。相反,CCL20 mRNA和蛋白在肝转移灶中的表达比在结直肠癌组织中高。结直肠癌组织中CCR6及CCL20 mRNA和蛋白表达与患者的性别、年龄和病理类型无明显关系。结论:CCR6与其配体CCL20特异性结合,可能参与调节介导结直肠癌向肝脏特异性转移过程。

趋化因子受体CCR6及其配体CCL20与结肠癌肝转移关系的实验研究

目的:探讨人趋化因子受体6(CCR6)及其配体CCL20的表达与结肠癌肝转移的关系。方法:选择2012年10月-2014年10月在本院行结肠癌根治术的患者93例作为研究对象,采用实时荧光定量PCR检测93例患者的结肠癌组织、正常肠黏膜组织及其中14例结肠癌肝转移组织、肝转移灶旁肝组织中CCL20及CCR6 m RNA表达情况,分析比较其差异。结果:CCR6及CCL20 m RNA在结肠癌和肝转移灶中高表达,并且均显著高于癌旁组织,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组织中CCR6及CCL20 m RNA表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小及组织学类型无明显关系(P>0.05),与TNM分期有关(P<0.05)。结论:CCR6及其配体CCL20可能参与调节结肠癌向肝脏特异性转移过程。

CCR8在肿瘤免疫治疗中的研究进展

目前针对肿瘤的治疗方法不断进步,免疫治疗已成为遏制肿瘤进展的有效手段。但目前的免疫治疗仍有局限性,只有较少的一部分特定患者可以从免疫治疗中完全获益。由于复杂的肿瘤微环境取决于不同的个体,所以免疫靶向药物在不同的肿瘤微环境中会受到不同程度的免疫抑制,从而无法发挥全部作用。在肿瘤微环境中,调节性T(regulatory T,Treg)细胞起到免疫抑制的作用,在许多瘤种中Treg细胞大量浸润从而造成肿瘤组织的免疫逃逸,会对治疗和预后产生不良影响。CC族趋化因子受体8(CC chemokine receptor 8,CCR8)属于CC族趋化因子受体家族,其主要在肿瘤微环境中的Treg细胞上特异性高表达,而在周围正常组织和外周血中低表达,因此CCR8可以作为Treg细胞的一种特异性标志物,是一种有潜力的治疗靶点和生物标志物。本文对近年来CCR8在不同瘤种中的研究进展进行了归纳和总结,以期为后续研究提供参考。

胆囊癌淋巴转移和预后与CC族趋化因子受体7表达的关系

目的探讨CC族趋化因子受体7(CCR7)在胆囊癌组织的表达及其与胆囊癌淋巴转移和预后的关系.方法免疫组织化学染色(IHC)检测CCR7表达水平,结果以平均吸光度值(IA)表示;Kaplan-meier法进行生存分析、COX回归分析独立预后因素.结果47例胆囊癌组织CCR7 IA值(0.329±0.116)显著高于20例癌旁正常组织CCR7 IA值(0.165±0.107,P<0.01).TNM0-Ⅱ期组CCR7 IA值(0.306±0.116)显著低于Ⅲ~Ⅳ期组IA值(0.423±0.102,P<0.01);淋巴结转移阳性组CCR7 IA值(0.424±0.103)显著高于淋巴结转移阴性组(0.356±0.123,P<0.05).年龄<60岁组(0.363±0.114)较≥60岁组(0.414±0.116)、男性(0.406±0.118)较女性(0.381±0.116)、肿瘤<5 cm组(0.384±0.125)较≥5 cm组(0.402±0.107)、腺癌组(0.402±0.116)与其他类型组(0.337±0.112)的CCR7 IA值差异均无统计学意义(均P>0.05);组织学分级低(0.404±0.108)、中(0.419±0.109)、高(0.328±0.126)分化组CCR7 IA值差异亦无统计学意义(P>0.05).CCR7高表达组中位生存时间4.75个月,明显低于CCR7低表达组(22个月,P<0.01).单因素分析显示肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期和CCR7表达水平与胆囊癌预后有关(P<0.05).多因素分析结果显示淋巴结转移、TNM分期和CCR7表达水平是影响胆囊癌预后的独立危险因素(P<0.05).结论CCR7在胆囊癌组织呈高表达,其表达强度与TNM分期和淋巴结转移呈正相关,与生存时间呈负相关.

针灸“肺俞”“大椎”“风门”对哮喘大鼠肺组织中CC趋化因子配体1、CC趋化因子受体8表达的影响

目的:观察针灸对哮喘大鼠肺组织中CC趋化因子配体1(CCL1)、CC趋化因子受体8(CCR8)表达的影响,探讨针灸"肺俞""大椎""风门"治疗哮喘的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组和艾灸组,每组10只。采用卵白蛋白腹腔注射致敏法制备哮喘大鼠模型。针刺组和艾灸组分别针刺"肺俞""大椎""风门"穴20 min或回旋灸10 min进行治疗,每天1次,共治疗7 d。HE染色法观察各组大鼠肺组织形态学改变;荧光定量PCR法检测肺组织中信号转导和转录激活因子6(STAT6)mRNA的表达;免疫组织化学法检测肺组织中CCL1和CCR8蛋白表达。结果:空白组大鼠支气管管腔规则,支气管周围未见炎性细胞浸润,肺泡排列规律;模型组大鼠支气管周围有大量炎性细胞浸润和聚集,支气管管腔狭窄、管壁增厚,肺泡结构紊乱;针刺组和艾灸组支气管周围有少量炎性细胞,支气管管腔狭窄、管壁增厚程度均较模型组轻,肺泡排列较规则。模型组肺组织中CCL1、CCR8蛋白及STAT6 mRNA表达明显高于空白组(P<0.05);针刺组、艾灸组CCL1、CCR8蛋白及STAT6 mRNA表达较模型组明显减少(P<0.05)。结论:针灸能通过抑制肺组织中CCL1、CCR8蛋白及STAT6 mRNA的表达干预气道炎性反应,这可能是针灸治疗哮喘的作用机制之一。

CCL1/CCR8在哮喘小鼠肺组织中的表达及地塞米松对其作用的研究

目的观察哮喘小鼠肺组织CCL1/CCR8 mRNA的表达及糖皮质激素对其表达的影响,探讨CCL1/CCR8在哮喘发病机制中的作用。方法30只小鼠随机分为对照组、哮喘组和地塞米松组,每组10只。哮喘组和地塞米松组用卵白蛋白致敏激发建立哮喘模型,地塞米松组给予腹腔注射地塞米松(2mg/kg),对照组均以生理盐水替代。测定BALF中细胞总数和分类计数,采用酶联免疫法检测BALF中IL-4水平,RT-PCR检测肺组织CCR8 mRNA和CCL1 mRNA的表达。结果对照组、哮喘组和地塞米松组BALF中嗜酸粒细胞百分比[(0.6±0.1)%、(32.4±3.4)%和(8.9±0.9)%,P<0.01]、淋巴细胞百分比[(2.9±0.5)%、(14.0±3.0)%和(6.3±0.6)%,P<0.01]、IL-4浓度[(5.16±1.23)pg/mL、(47.67±11.67)pg/mL和(19.76±4.72)pg/mL,P<0.01]差异均有统计学意义,其中哮喘组较对照组显著增高(P<0.01),地塞米松组较哮喘组显著降低但仍显著高于对照组(P<0.01)。对照组、哮喘组和地塞米松组CCL1mRNA表达(0.11±0.06、0.76±0.16和0.53±0.13,P<0.01)、CCR8 mRNA表达(0.18±0.09、1.26±0.13和0.79±0.12,P<0.01)差异均有统计学意义,其中哮喘组较对照组显著增高(P<0.01),地塞米松组较哮喘组显著降低但仍显著高于对照组(P<0.01)。结论CCL1/CCR8在哮喘小鼠肺组织中的基因表达增强。糖皮质激素可能通过减少CCL1/CCR8的基因表达,减轻哮喘气道炎症。

三阴性乳腺癌(TNBC)组织中CCR4和CCR7的表达及意义

目的探讨三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)组织中CC族趋化因子受体4(ccchemokine receptor 4,CCR4)和CCR7的表达意义及其与临床病理特征和预后之间的相关性。方法应用免疫组织化学染色SP法检测TNBC、HER-2过表达型乳腺癌、TNBC癌旁组织及乳腺良性肿瘤(3组,各38例)和管腔型乳腺癌组织(40例)中CCR4和CCR7的表达。结果在TNBC组织中,CCR4和CCR7的表达率分别为47.4%(18/38)和50%(19/38),与非TNBC组相比,差异有统计学意义(P值分别为0.001和0.004)。CCR4表达与TNBC肿瘤直径(P=0.023)、腋窝淋巴结转移(P=0.006)、肿瘤分期(P=0.016)和远处转移(P=0.028)相关。Kaplan-Meier生存分析显示CCR4表达与TNBC患者总生存率(overall survival,OS)相关(P=0.018)。CCR7表达和TNBC患者的腋窝淋巴结转移相关(P=0.038),而与TNBC患者无病生存率(disease freesurvival,DFS)和OS无关。多因素分析显示腋窝淋巴结转移是TNBC患者DFS的独立预测因素(P=0.025),而CCR4是TNBC患者OS的独立预测因素(P=0.022)。结论 TNBC中CCR4和CCR7的表达与腋窝淋巴结转移相关;CCR4可作为TNBC患者预后的独立预测指标。

CCR7和VEGF在缺氧时视网膜血管内皮细胞中的表达及意义

目的:探讨CC族趋化因子受体7(CC chemokine receptor7,CCR7)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在缺氧状态下视网膜血管内皮细胞(retinal endothelial cell,REC)中的表达及意义。方法:恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)分别在常氧和低氧环境中培养,分为正常对照组、低氧对照组和治疗组。低氧对照组和治疗组分别采用脂质体LipofectamineTM2000(LF2000)介导转染空载体质粒和CCR7siRNA表达质粒。CCK8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot和RT-PCR法检测三组RF/6A内CCR7、VEGF蛋白及mRNA的表达情况。结果:低氧对照组较正常对照组比较及治疗组较正常对照组和低氧对照组比较细胞生长速度明显减慢,增殖能力减弱,细胞凋亡率显著增加(均为P<0.05);低氧对照组与正常对照组比较,RF/6A内CCR7、VEGF蛋白及mRNA表达显著增高,均有统计学意义(tCCR7蛋白=3.38,tVEGF蛋白=4.75,tCCR7 mRNA=4.27,t VEGFmRN A=5.34,均为P<0.05),且二者表达呈正相关(r蛋白=0.71,rmRNA=0.83,均为P<0.05)。治疗组CCR7和VEGF的蛋白及mRNA表达较正常对照组和低氧对照组明显下降(均为P<0.05)。结论:缺氧时REC中CCR7可上调VEGF的表达,CCR7-VEGF信号途径在视网膜新生血管(retinal neovascularization,RNV)形成的过程中可能具有潜在功能,CCR7siRNA有望成为防治RNV的一种有效方法。

CCR9及其配体CCL25在肿瘤中的作用及其作用机制研究进展

癌症严重威胁人类的生命健康,放射治疗、化学治疗和手术治疗是目前主流的治疗方式,但其弊端也是不可忽视的。近年来,趋化因子与肿瘤的相关研究越来越深入。趋化因子受体9(CCR9)在多种恶性肿瘤中过度表达,而CC族趋化因子配体25(CCL25)是CCR9的唯一配体,CCL25/CCR9与肿瘤的发生及进展关系密切。本文围绕CCL25/CCR9的现阶段研究成果进行综述。

CCR7通过上调VEGF-D表达诱导肺癌淋巴管形成促进转移

目的探讨CC族趋化因子受体7(CCR7)诱导肺癌组织淋巴管形成、促进转移的分子机制。方法应用免疫组织化学染色S-P法检测90例非小细胞肺癌组织中CCR7和血管内皮生长因子D(VEGF-D)的表达及淋巴管(D2-40染色显示淋巴管)的密度,并联合运用质粒转染技术上调肺癌细胞BE1中CCR7表达,采用RT-PCR和Western blot方法观察VEGF-D的变化情况,分析VEGF-D与CCR7表达的关系。结果CCR7主要表达于肺癌细胞胞质和(或)胞膜,VEGF-D主要表达于肺癌细胞胞质;非小细胞肺癌中CCR7、VEGF-D表达阳性率分别为70%(63/90)和60%(54/90),χ2检验显示CCR7和VEGF-D表达与非小细胞肺癌的临床病理分期(P=0.003;P=0.005)、淋巴管密度(P=0.001;P<0.01)和淋巴结转移(P=0.004;P=0.01)有密切关系,而与年龄、性别、组织学类型无关(P>0.05);此外,CCR7和VEGF-D表达呈正相关(r=0.455,P<0.01)。向BE1细胞中转染CCR7基因,CCR7表达上调后发现VEGF-D的mRNA和蛋白水平均上调(P<0.05)。结论CCR7可通过上调VEGF-D表达诱导肺癌组织淋巴管形成、促进淋巴结转移。

外周血CXCR3、CCR4基因表达与自身免疫性肝病的关系及对免疫应答水平的影响

目的探究外周血CXC亚族趋化因子受体3(CXCR3)、CC趋化因子受体4(CCR4)基因表达与自身免疫性肝病(ALDS)的关系及对免疫应答水平的影响。方法将2019年6月—2021年1月收治的ALDS 46例作为研究组,选择同期收治的病毒性肝炎30例为对照组。比较2组外周血CXCR3、CCR4基因表达水平、肝功能指标、免疫应答指标水平,评估外周血CXCR3、CCR4基因表达、肝功能指标对ALDS的诊断效能,分析研究组外周血CXCR3、CCR4基因表达水平与免疫应答指标的相关性。结果研究组外周血CXCR3、CCR4基因表达水平及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(Alb)、总胆红素(TBIL)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-17、IL-22水平均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。外周血CXCR3、CCR4基因表达、肝功能指标对ALDS的诊断效能较高(P<0.05)。研究组外周血CXCR3、CCR4基因表达水平与IL-2、IL-17、IL-22水平均呈正相关(r=0.615、0.532、0.496,P<0.05;r=0.553、0.569、0.508,P<0.05)。结论外周血CXCR3、CCR4基因表达水平与ALDS存在一定联系,ALDS患者机体免疫应答水平受外周血CXCR3、CCR4基因表达水平的影响。

单核细胞趋化蛋白-1及其受体在肝癌和肝硬化患者中的表达

近期研究表明单核细胞趋化蛋白-1（MCP1）及受体CC族趋化因子受体2（CCR2）和肿瘤的血管生成有关^[1]。但在肝癌中的表达及其意义少见报道。本研究检测42例肝癌、25例肝硬化、33例肝炎患者和15名正常人的外周血和（或）腹水中MCP-1及其受体CCR2的水平，