拮抗CC趋化因子受体5信号诱导肿瘤细胞凋亡并调节肿瘤微环境抑制肿瘤生长

目的探索拮抗CC趋化因子受体5(CCR5)信号通路对肿瘤生长和肿瘤微环境的影响。方法采用CCK8细胞毒试验研究CCR5选择性拮抗剂Maraviroc体外对小鼠Lewis肺腺癌细胞增殖的影响,并运用流式细胞术和RT-PCR检测肿瘤细胞凋亡和Caspase 8基因的表达。然后采用免疫荧光组织化学染色法研究了Maraviroc对小鼠体内肿瘤生长和肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)以及Foxp3^(+)细胞比例的影响。结果拮抗CCR5信号在体内外均能够抑制癌细胞的生长。体外研究发现:CCR5拮抗剂可通过增强凋亡基因Caspase 8表达而诱导肿瘤细胞凋亡。在小鼠体内,CCR5拮抗剂可明显增加肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)细胞的浸润而减少Foxp3^(+)细胞的浸润。结论拮抗CCR5信号可能通过诱导肿瘤细胞凋亡,逆转免疫抑制性肿瘤微环境而抑制肿瘤生长。

信号转导和转录激活因子3/CC趋化因子配体2信号通路对乳腺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响实验研究

目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)/CC趋化因子配体2(CCL2)信号通路对乳腺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养人乳腺癌细胞株(HCC1937、MCF-7、MDA-MB-231、ZR-75-1)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)。采用蛋白印迹法检测HCC1937、MCF-7、MDA-MB-231、ZR-75-1和MCF-10A细胞磷酸化STAT3(p-STAT3)、STAT3、CCL2蛋白表达。选取p-STAT3/STAT3蛋白比值、CCL2蛋白表达最高的人乳腺癌细胞进行后续实验。将MCF-7细胞分为对照组、STAT3抑制剂(WP1066)Ⅰ组(2μmol/L WP1066)、Ⅱ组(4μmol/L WP1066)、Ⅲ组(8μmol/L WP1066)。分别采用细胞计数试剂盒-8、划痕实验、Transwell实验检测MCF-7细胞活力、迁移率及侵袭能力。采用蛋白印迹法检测MCF-7细胞p-STAT3、STAT3、CCL2、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果:与MCF-10A细胞比较,HCC1937、MCF-7、MDA-MB-231、ZR-75-1细胞p-STAT3/STAT3蛋白比值、CCL2蛋白表达升高(均P<0.05)。其中MCF-7细胞p-STAT3/STAT3蛋白比值、CCL2蛋白表达最高,因此选用MCF-7细胞进行后续实验。与对照组比较,STAT3抑制剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组MCF-7细胞活力、迁移率、侵袭数目依次降低(均P<0.05)。与对照组比较,STAT3抑制剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组MCF-7细胞p-STAT3/STAT3蛋白比值、CCL2、MMP-2及MMP-9蛋白表达依次降低(均P<0.05)。结论:乳腺癌细胞中STAT3/CCL2呈高表达,抑制STAT3/CCL2信号通路能够降低乳腺癌细胞活力,减少迁移和侵袭。

牛let-7a与CC趋化因子受体7基因靶向关系的验证

为了验证小分子RNA let-7a与其预测靶基因CC趋化因子受体7(CCR7)之间的关系,采用生物信息学软件预测CCR7的3′非编码区(3′UTR)是否存在与let-7a的靶向结合位点;利用PCR扩增出包含靶向结合位点区域的CCR7-3′UTR,并构建其荧光素酶表达载体;将验证后的阳性重组子瞬时共转染人胚胎肾细胞293(293T),进行双荧光素酶报告基因检测;通过将合成的let-7a模拟物和let-7a抑制剂分别转染奶牛乳腺上皮细胞MAC-T,利用qRT-PCR和ELISA检测let-7a与CCR7基因mRNA和蛋白表达水平的变化,验证两者之间的靶向调控关系。菌液PCR和双酶切结果表明,成功构建了重组双荧光素酶报告质粒pMIR-REPORTTM-CCR7-3′UTR。双荧光素酶报告基因检测结果表明,let-7a与CCR7基因之间确实存在靶向调控关系。qRT-PCR和ELISA进一步证实了过表达let-7a能显著下调MAC-T细胞中CCR7基因mRNA和蛋白的表达量(P<0.05),两者存在负调控关系。本研究结果证实了let-7a与CCR7基因之间存在靶向调控关系,为进一步探究其分子机制提供参考。

CC趋化因子与银屑病

银屑病是一种由免疫介导的自身免疫性皮肤病。其主要特征为表皮过度增厚和异常分化,伴有全身性炎症反应。银屑病发病机制伴随着大量免疫细胞浸润,这些炎症细胞及其释放的细胞因子在银屑病发生发展中起到重要的作用。目前大量研究提示,在银屑病皮损部位皮肤中存在多种CC趋化因子,通过参与银屑病炎症部位T淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的募集和激活,积极参与到银屑病炎症循环中。因此,了解CC趋化因子及其受体在银屑病中作用,将有助于银屑病发病机制的探索,并为银屑病治疗靶点的开发提供新的思路。本文综述了目前已报道与银屑病相关的CC趋化因子,并探讨它们在银屑病发病机制中可能发挥的作用。

结直肠癌中CC趋化因子受体4的表达及临床意义

目的探讨CC趋化因子受体4(CCR4)在结直肠癌组织中表达情况及临床意义。方法收集2016年1月至2017年6月浙江省嘉兴市第一医院经病理确诊的80例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织蜡块标本,采用免疫组织化学法检测CCR4在结直肠癌及癌旁组织中的表达,分析其与临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织与癌旁组织CCR4阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同侵犯深度、脉管/神经浸润、淋巴结转移的结直肠癌组织中CCR4阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CCR4阳性表达患者总生存期、无病生存期短于阴性表达患者(P<0.05)。结论结直肠癌组织中CCR4表达的增强与其发生、发展有关,可能作为结直肠癌潜在预后评估指标。

CC趋化因子配体2在乳腺癌中的作用机制研究进展

CC趋化因子配体2(CCL2)是存在于肿瘤微环境(TME)中的一种趋化因子,可以直接作用于肿瘤细胞,也可以通过调控TME来影响肿瘤进展,参与肿瘤的血管生成、转移、耐药以及免疫调节等。乳腺癌是威胁女性健康的主要疾病之一,尽管综合治疗可大大改善乳腺癌患者的预后,但仍有部分患者出现复发转移,最终导致患者死亡。深入研究趋化因子和趋化因子受体为乳腺癌的治疗提供了新的方向。全面研究CCL2在乳腺癌发生发展中的作用机制将为乳腺癌的早期诊断及靶向治疗提供更丰富的理论依据,并为临床治疗提供新的思路。

血清CC趋化因子配体和炎症因子对抑郁症患者自杀意念的影响

目的 探讨血清CC趋化因子配体2(CCL2)、CCL8和炎症因子对抑郁症患者自杀意念的影响。方法 选取2017年8月至2020年8月河北医科大学第一医院收治的抑郁症患者154例(抑郁症组),根据是否有自杀意念将患者分为自杀意念组(74例)和无自杀意念组(80例),另选择同期于我院体检健康者71名为健康对照组。比较有无自杀意念组和健康对照组血清CCL2、CCL8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平,分析自杀意念组血清CCL2、CCL8水平与炎症因子表达的相关性。比较有无自杀意念组的一般临床资料,分析抑郁症患者产生自杀意念的影响因素。结果 自杀意念组和无自杀意念组血清CCL2、CCL8、TNF-α、IL-6、IL-1β水平均高于健康对照组,且自杀意念组均高于无自杀意念组[(1 022±326)ng/L比(623±169)ng/L、(90±25)ng/L比(71±18)ng/L、(9.2±3.2)μg/L比(6.2±2.0)μg/L、(96±30)ng/L比(72±19)ng/L、(87±16)ng/L比(43±12)ng/L](均P<0.05)。自杀意念组患者血清CCL2和CCL8水平与TNF-α、IL-6、IL-1β水平均呈正相关(均P<0.001)。自杀意念组抑郁症病程长于无自杀意念组,自杀未遂史、睡眠质量差、合并慢性疾病比例,17项汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)评分,最近1周和最抑郁时的Beck自杀意念量表中文版(BSI-CV)总分、自杀意念强度评分、自杀危险性评分均高于无自杀意念组(均P<0.05)。CCL2、CCL8、TNF-α、抑郁症病程、睡眠质量、HAMD-17评分、最抑郁时BSI-CV总分为抑郁症患者产生自杀意念的影响因素(均P<0.05)。结论 抑郁症患者血清CCL2、CCL8和炎症因子水平均升高,CCL2、CCL8和TNF-α为抑郁症患者自杀意念产生的影响因素,CCL2、CCL8可能通过诱导神经炎症反应参与抑郁症患者自杀意念的产生过程。

鱼类CC趋化因子基因及其系统进化分析

CC趋化因子(CC Chemokine)是一类能够促进动物体内炎症部位的各种白细胞的补充、激活和黏附的趋化性细胞因子家族,是鱼类天然免疫系统的重要组成部分。趋化因子也是当今国际鱼类分子免疫学研究的热点之一。本研究通过比较基因组学和生物信息学的方法,分析了虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)和斑点叉尾(Ictalurus punctatus)等重要经济鱼类的CC趋化因子基因结构特点和功能,并采用Clustal X的NJ法对所有新的CC趋化因子和先前发表的鱼类趋化因子与其他动物的CC趋化因子进行系统进化分析,建立了3个独特的包含非鱼类CC趋化因子的直向进化同源组。第1个直向进化同源组建立于人的CCL27和CCL28,有丽鱼科(Cichlidae)Melanochromisauratus和Paralabidochromis chilotes的SCYA101、SCYA101a、大西洋鲑(Salmo salar)的CB510320、斑马鱼(Danio rerio)的BI839410、虹鳟的CK11、斑点叉尾的BM027974和BM029630;第2个直向进化同源组是以人类CCL20建立的,包括虹鳟的CK8a、CK8b、斑点叉尾的SCYA112和鸡(Gallus gallus)AAK84434,其中鸡的序列与人的CCL20最相近(与其他鱼类CC趋化因子相比);第3个直向进化同源组是以鸡的XP_424980和蓝(Ictalurus furcatus)的SCYA109建立的。所有其他鱼类CC趋化因子都没有归类到非鱼类CC趋化因子的同源组中。为了进一步分析鱼类CC趋化因子和哺乳类CC趋化因子间的关系,采用Clustal W的非自举检验(Bootstrapping)启发式搜索(heuristic search)比对法对这些CC趋化因子进行归类分析,结果得到7个潜在的直向进化同源组,包括含有4个鱼类CC趋化因子的CCL20直向进化同源组、5个鱼类CC趋化因子的CCL24直向进化同源组、8个鱼类CC趋化因子的CCL22直向进化同源组、4个鱼类CC趋化因子的CCL17直向进化同源组、15个鱼类CC趋化因子的CCL25直向进化同源组,7个鱼类CC趋化因子的CCL27/CCL28和17个鱼类CC趋化因子的CCL19/CCL21直向进化同源组。趋化因子的研究将有助于更好地了解鱼类抗病性与天然免疫性的关系。[中国水产科学,2006,13(1):119-127]

miR-106调控CC趋化因子配体2对增生型糖尿病视网膜病变中人视网膜微血管内皮细胞增殖、血管生成和炎症反应的影响

目的探讨miR-106调控CC趋化因子配体2(CCL2)对增生型糖尿病视网膜病变(PDR)中人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)增殖、血管生成、炎症反应的影响。方法GEO数据库筛选PDR中差异表达的miRNAs。高糖(25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖,HG)诱导HRMEC建立PDR细胞模型,qRT-PCR检测miR-106和CCL2在正常葡萄糖(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖,NG)和HG培养条件下HRMEC中的表达。将PDR患者的血清外泌体做miR-106过表达处理后与HG处理的HRMEC共培养,同时干预HRMEC中CCL2的表达以探讨血清外泌体miR-106和CCL2在PDR中的功能。采用MTT法、小管形成实验和ELISA法分别检测各组HRMEC增殖、血管生成和炎症因子的表达。双荧光素酶报告实验用以验证miR-106和CCL2的靶向关系。结果与NG组细胞中miR-106表达(1.04±0.10)、CCL2表达(1.02±0.09)相比,HG培养的HRMEC中miR-106表达(0.68±0.06)降低,CCL2表达(1.38±0.11)升高(均为P<0.05)。PDR患者血清外泌体中miR-106表达较NDR患者血清外泌体中表达降低(P<0.05)。与HG+PDR-exo+miR-NC组相比,HG+PDR-exo+miR-106 mimic组HRMEC活力降低,血管生成被抑制,细胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低,而SOD、CAT和GSH水平升高(均为P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实了CCL2是miR-106的一个靶点。与HG+PDR-exo+miR-106 mimic+oe-NC组相比,HG+PDR-exo+miR-106 mimic+oe-CCL2组HRMEC活力提高,血管生成被诱导,TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高,而SOD、CAT和GSH水平降低(均为P<0.05)。结论血清外泌体miR-106能够抑制CCL2表达,进而对PDR中的HRMEC增殖、血管生成和炎症反应起抑制作用。

CC趋化因子配体2与肝疾病

近年来CC趋化因子配体2(chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2)在肝脏疾病发病机制中的作用越来越受到重视.大量研究表明,CCL2在各种肝损伤中表达上调.CCL2是炎症反应的主要调节因子,通过与其受体CCR2相互作用,使血液中的单核细胞穿过血管内皮向炎症部位迁移.白色脂肪组织分泌的CCL2能直接诱导肝细胞的脂肪聚集,与非酒精性肝病的发病机理密切相关.肝实质细胞分泌的CCL2能激活并募集肝星形细胞,参与肝纤维化甚至肝硬化的形成.CCL2能介导肝癌细胞的转移和浸润,刺激肿瘤血管生成,其与肿瘤的关系也成为研究的热点.本文将阐述CCL2与病毒性肝炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝癌的研究进展.

血清微小RNA-205-5p、CC趋化因子受体3对非小细胞肺癌患者复发转移的预测能效

目的探讨血清微小RNA(microRNA,miR)-205-5p、CC趋化因子受体3(CC chemokine receptor 3,CCR3)的表达水平与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者复发转移的关系及预测能效。方法选取江苏省盐城市第三人民医院2016年1月至2017年12月收治的156例接受胸腔镜下肺癌根治术治疗的NSCLC患者为观察组,另选取同期62例来院体检的健康者为对照组。比较分析观察组和对照组的血清miR-205-5p、CCR3表达水平。分析NSCLC患者血清miR-205-5p与CCR3的相关性以及血清miR-205-5p、CCR3表达水平与NSCLC患者临床病理特征的关系。根据miR-205-5p和CCR3表达水平的高低将观察组患者分为miR-205-5p高表达组(≥1.18ng/L,79例)、miR-205-5p低表达组(<1.18ng/L,77例)和CCR3高表达组(≥311.60ng/L,82例)、CCR3低表达组(<311.60ng/L,74例),比较分析各组间患者的3年复发转移率。分析NSCLC患者3年复发转移的影响因素以及血清miR-205-5p、CCR3表达水平对NSCLC患者3年复发转移的预测价值。结果观察组血清miR-205-5p和CCR3的表达水平均显著高于对照组(t=7.947,P<0.05;t=15.059,P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,NSCLC患者血清miR-205-5p与CCR3呈正相关(r=0.310,P<0.001)。血清miR-205-5p、CCR3的表达水平与NSCLC患者的性别、年龄、吸烟史、肿瘤直径无关(P>0.05),与NSCLC患者的分化程度、TNM分期显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析结果显示,miR-205-5p高表达组、CCR3高表达组的3年复发转移率显著高于miR-205-5p低表达组、CCR3低表达组(χ^(2)=11.330,P<0.05;χ^(2)=14.825,P<0.05)。单因素分析结果显示,TNM分期、miR-205-5p、CCR3与NSCLC患者3年复发转移显著相关(P<0.05)。Cox回归分析结果显示,TNM分期Ⅲa期、miR-205-5p、CCR3为NSCLC患者3年复发转移的独立危险因素(P<0.05)。miR-205-5p联合CCR3预测NSCLC患者3年复发转移的效能优于单一指标预测(P<0.05)。结论NSCLC患者血清miR-205-5p、CCR3的表达水平显著升高,为3年复发转移的独立危险因素,且二者呈正相关,联合预测NSCLC患者术后3年复发转移的效能较高,值得临床应用。

草鱼CC趋化因子基因CCL24及其可变剪接

CC趋化因子是一类能够促进动物体内炎症部位的各种白细胞的补充、激活和黏附的趋化性细胞因子家族,是鱼类天然免疫系统的重要组成部分。分析了从草鱼肠道cDNA文库中筛选到的CC趋化因子基因CCL24,并克隆了阅读框区域内的基因组序列。序列分析表明,CCL24基因由4个外显子和3个内含子组成;外显子拼接的序列与CCL24cDNA序列完全一致,编码95个氨基酸,有2个相邻的半胱氨酸(CC),为典型的CC趋化因子亚家族成员。此外,还发现草鱼CCL24基因存在可变剪接现象,第1内含子没有被剪切掉的非正常转录本翻译后可能产生没有CC趋化因子活性的24个氨基酸的短肽,而且这种转录本在精巢、头肾、皮肤、肝胰脏、肠道、肌肉、肾脏等组织均检测到;而正常剪接的CCL24转录本,仅在肾脏和肠道中检测到,且其表达量要明显低于非正常剪接的转录本。

反义肽核酸阻断CC趋化因子受体5途径延长同种异体胰岛移植物存活

目的探讨CC趋化因子受体5(CCR5)反义肽核酸对同种异体胰岛移植急性排斥反应的影响。方法建立小鼠胰岛移植模型用于检测以CCR5为靶位的PNA CCR5在体内对急性胰岛移植排斥的效应。通过混合淋巴细胞培养(MLR)来评估体外T细胞增殖应答能力。应用RT-PCR和Western blot检测mRNA和蛋白表达水平。结果与生理盐水对照组[(6.5±0.58)d]和随机PNA错配组[(6.5±0.50)d]相比,PNA CCR5处理组有功能胰岛移植物存活时间明显延长[(12.0±1.75)d](P均<0.01)。移植后第7天,PNA CCR5组的CCR5 mRNA表达水平(0.56±0.05)明显低于对照组和错配组(1.68±0.07和1.80±0.14)(P均<0.01)。PNA CCR5组移植物CCR5蛋白水平亦较对照组和错配组明显下降(P均<0.01)。PNA CCR5组小鼠淋巴细胞增殖能力亦明显降低。结论PNA CCR5能延长同种异体胰岛移植物的存活时间,在抑制同种异体急性排斥反应中具有潜在的治疗效应。

CC趋化因子7研究进展

CC趋化因子7(CCL7)广泛表达于单核细胞、T淋巴细胞、树突状细胞等免疫细胞中。起初多作为炎性因子研究,但随着研究的深入,人们发现CCL7在免疫调节、组织损伤修复、与肝素结合、促纤维化等方面均发挥重要作用。因此,了解CCL7对于研究疾病的分子机制及治疗均有重要意义。随着多功能干细胞临床应用的进展,CCL7作为可诱导其迁徙的重要因子可能会提高细胞治疗的效率和疗效。本文将对CCL7的结构和作用进行综述。

转化生长因子-β1、可溶性CD105、CC趋化因子配体20水平与三阴性乳腺癌患者术后复发的关系

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)、可溶性CD105(s-CD105)、CC趋化因子配体20(CCL20)水平与三阴性乳腺癌患者术后复发的关系。方法共纳入90例三阴性乳腺癌患者,依据术后6个月复发情况分为复发组(n=19)和未复发组(n=71),依据年龄匹配原则选取同期40例健康者为对照组。比较3组受试者血清TGF-β1、s-CD105、CCL20水平,三阴性乳腺癌患者术后复发的影响因素采用多因素Logistic回归分析;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估血清TGF-β1、s-CD105、CCL20单独及联合检测对三阴性乳腺癌患者术后复发的预测价值。结果复发组和未复发组患者血清TGF-β1、s-CD105、CCL20水平均明显高于对照组(P﹤0.01),且复发组患者血清TGF-β1、s-CD105、CCL20水平均明显高于未复发组(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄﹥50岁、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、病理类型为浸润性导管癌、术前淋巴结转移、术后未辅助治疗、TGF-β1过表达、s-CD105过表达、CCL20过表达均是三阴性乳腺癌患者术后复发的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线显示,血清TGF-β1、s-CD105、CCL20联合检测预测三阴性乳腺癌患者术后复发的AUC为0.879,均高于三者单独检测,此时灵敏度、特异度分别为84.21%、91.55%。结论血清TGF-β1、s-CD105、CCL20水平与三阴性乳腺癌患者的术后复发风险密切相关,可作为预测三阴性乳腺癌患者术后复发的有效指标。

CC趋化因子受体5在滤泡状甲状腺癌中的表达

目的:研究CC趋化因子受体5(CCR5)在滤泡状甲状腺癌中的表达,并检测血清中CCR5配体的含量,为进一步探讨CCR5在滤泡状甲状腺癌演进和转移中的作用奠定基础。方法:采用免疫组化方法检测15例滤泡状甲状腺癌患者以及17例甲状腺腺瘤患者,12例癌旁甲状腺组织中CCR5的表达情况,同时应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清中CCL3、CCL4、CCL5的浓度。结果:滤泡状甲状腺癌组织中,CCR5表达阳性率(11/15)明显高于甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织(P<0.01)。滤泡状甲状腺癌患者血清中CCL3、CCL5的浓度显著高于对照组(P<0.05)。结论:滤泡状甲状腺癌组织中存在着CCR5高表达,且外周血CCL3,CCL5浓度明显升高,提示CCR5可能在滤泡状甲状腺癌发病进程中发挥着重要的作用。

类风湿关节炎患者外周血及滑液CC趋化因子配体5的表达

目的探讨CC趋化因子配体5(CCL5)在类风湿关节炎(RA)患者外周血及滑液中的表达。方法用酶联免疫吸附法测定28例RA患者血清、滑液、外周血白细胞和滑液炎性细胞CCL5水平,并与骨关节炎(OA)进行对照;RA患者滑膜组织CCL5表达采用免疫组织化学法。结果RA患者血清和滑液CCL5水平均明显高于OA患者,且RA患者滑液CCL5水平又明显高于其血清。RA患者滑液炎性细胞CCL5水平较其外周血白细胞高,滑膜组织表达CCL5亦增高,并与滑膜炎程度呈显著性正相关。结论滑液炎性细胞及滑膜组织是RA患者CCL5的主要来源,CCL5在RA滑膜炎病理过程中发挥着重要作用。

CC趋化因子配体2在系统性硬化症患者中的表达

目的探讨 CC 趋化因子配体2(CCL2)在系统性硬化症(SSc)患者中的表达情况。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测31例 SSc 患者血浆 CCL2水平。并与21例年龄和性别相匹配的正常人进行比较。同时采用 ELISA 和免疫组织化学染色方法检测 CCL2在体外培养的5例 SSc 患者和3例正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况。结果 SSc 患者的血浆 CCL2水平[(783±387)pg/ml]明显高于正常人[(426±266)pg/ml,P<0.05],并与皮肤病变程度呈正相关(r=0.575,P<0.001);而且弥漫型 SSc 患者的血浆 CCL2水平明显高于局限型 SSc 患者(P<0.05);并发有肺间质纤维化的 SSc 患者也明显高于无肺间质纤维化的患者(P<0.05)。体外培养的5例 SSc 患者皮肤成纤维细胞分泌 CCL2的浓度平均为(376.0±97.4)pg/ml,明显高于3例正常皮肤成纤维细胞的(72.0±43.2)pg/ml(P<0.005)。免疫组织化学染色结果证实,SSc 患者病变皮肤成纤维细胞有 CCL2高表达。结论 SSc 患者血浆 CCL2水平显著升高,并与皮肤受累程度和肺间质纤维化相关。SSc 患者皮肤成纤维细胞有 CCL2高表达,提示CCL2可能在 SSc 病程中发挥重要作用。

特应性皮炎小鼠模型中白细胞介素-21、CC趋化因子配体20的表达分析

目的测定白细胞介素-21(IL-21)和CC趋化因子配体20(CCL20)在2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的特应性皮炎小鼠模型中的表达情况,探讨二者在特应性皮炎发病中的作用。方法将12只BALB/c雌性小鼠,随机分为模型组和对照组,每组6只,使用DNCB构建小鼠特应性皮炎模型。造模成功后采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中IL-21和CCL20的水平。结果特应性皮炎模型组小鼠血清中IL-21和CCL20的表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),并且二者表达成正相关(r=0.59,P<0.05)。结论IL-21和CCL20在特应性皮炎小鼠模型中表达升高,且成正相关,可能协同参与了特应性皮炎的发生发展。

CC趋化因子配体2在肝纤维化进展中的作用及黄芪总皂苷的干预效应

目的探讨CC趋化因子配体2(CCL2)在肝纤维化进展及肝星状细胞(HSC)活化中的作用及黄芪总皂苷对其的干预效应。方法体内实验:制备四氯化碳(CCl4)小鼠肝纤维化模型,分别给予黄芪总皂苷及CCL2特异性抑制剂(Bindarit)进行干预,采集肝组织制作石蜡切片,行HE染色和Masson染色,观察组织炎症和胶原增生情况;q PCR和Western blot检测-平滑肌肌动蛋白(-SMA)、CCL2在肝组织的表达情况;免疫荧光染色后共聚焦显微镜观察-SMA、CCL2两者的共染情况。体外实验:培养小鼠HSC细胞系JS1细胞,予黄芪总皂苷及Bindarit干预24 h后,观察细胞-SMA、CCL2的表达变化。结果组织病理检测显示:Bindarit及黄芪总皂苷干预后肝组织炎症明显减轻,胶原沉积明显减少,肝组织-SMA、CCL2蛋白表达均低于模型组比较(均P<0.05);激光共聚焦观察显示:正常组CCL2与-SMA无明显共表达,模型组两者可见在汇管区和纤维间隔有较多共表达,Bindarit及黄芪总皂苷组共表达明显减少。体外实验显示:Bindarit及黄芪总皂苷均能抑制JS1细胞-SMA、CCL2的表达(均P<0.05)。结论 CCL2具有促进HSC活化及肝纤维化进展的作用,黄芪总皂苷抗肝纤维化的机制可能与抑制HSC内CCL2的表达有关。