β趋化因子CCL20及其受体CCR6 mRNA在寻常性银屑病患者皮损中的表达

目的:探讨β趋化性细胞因子家族中CC趋化因子配体20(CCL20)及其受体CC趋化因子受体6((3CR6)mRNA在寻常性银屑病患者皮损中的表达情况。方法:应用逆转录-聚合酶链式反应(RT—PCR)方法检测35例寻常性银屑病患者皮损和18例正常人皮肤中CCL20和CCR6mRNA的表达。结果:与正常人皮肤相比,寻常性银屑病患者皮损中CCL20与CCR6mRNA的表达水平均明显增高(P<0.001)。结论:寻常性银屑病患者皮损中CCL20和CCR6 mRNA表达水平的上调可能与银屑病的发病有关。

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中趋化因子及其受体CCR6 mRNA的表达及其临床意义

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中CC型趋化因子配体20(CCL20)和CC型趋化因子受体6(CCR6)mRNA的表达及临床意义。方法采用TaqMan荧光探针技术,建立实时荧光定量PCR的方法,分别检测50例PBC患者、50例乙型肝炎肝硬化患者及50例健康对照者PBMCs中CCL20和CCR6 mRNA的表达水平。结果 PBC患者中CCL20和CCR6的mRNA表达显著高于健康对照组和疾病对照组(P<0.01);并根据临床不同分期检测后发现,PBC患者中Ⅲ、Ⅳ期CCL20和CCR6 mRNA的表达较Ⅰ、Ⅱ期明显升高(P<0.05)。结论 PBC患者CCL20和CCR6 mRNA的表达与PBC的发生发展存在一定的相关性,可能参与PBC的调控机制,从而可能为PBC的诊断和预防提供一定的线索。

寻常性银屑病患者血清CCL20及其受体CCR6水平的变化及阿维A的干预作用

目的观察CC趋化因子配体20(CCL20)及其受体CC趋化因子受体6(CCR6)在寻常性银屑病患者血清中的变化,并探讨阿维A对其血清水平的影响。方法分离并提取30名健康人(正常对照组)及80例阿维A治疗前及治疗后4周、8周寻常性银屑病患者的血清,采用酶联免疫吸附法测定血清CCL20和CCR6浓度,阿维A治疗前及治疗后8周进行皮损面积及严重度指数(PASI)评分,并对寻常性银屑病患者血清CCL20和CCR6浓度与PASI评分进行相关性分析。结果阿维A治疗前血清CCL20和CCR6浓度显著高于健康对照组(P均<0.01),进展期血清CCL20和CCR6浓度较稳定期及正常对照组升高(P均<0.01),稳定期血清浓度亦高于正常对照组(P均<0.05),差异均有统计学意义;治疗组治疗前血清CCL20和CCR6浓度与PASI评分均呈正相关(P<0.05)。阿维A治疗寻常性银屑病有效率为78.75%,治疗后4周、8周血清CCL20和CCR6浓度显著低于治疗前,治疗后8周亦显著低于治疗后4周,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论寻常性银屑病患者血清CCL20和CCR6浓度升高参与其发病过程,降低CCL20及其受体CCR6水平可能是阿维A治疗寻常性银屑病的机制之一。

COPD患者痰液CCR6、CD83、Th1、Th2表达及临床意义

目的:探究CC趋化因子受体6(CCR6)、CD83及辅助性T细胞(Th)1、Th2相关细胞因子在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者痰液中的表达及临床意义。方法:选取2020年8月—2022年11月某院接受治疗的265例COPD患者,根据疾病严重程度将135例急性发作期COPD患者纳入AECOPD组,130例稳定期COPD患者纳入COPD稳定期组,选取同期该院健康体检者100例作为正常对照组。采用流式细胞术和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组痰液样本中CD83、CCR6及Th1[干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、Th2[白细胞介素(IL)-4、IL-6]相关细胞因子表达水平,并分析COPD稳定期组上述因子表达水平与慢性阻塞性肺疾病全球倡议(GOLD)肺功能分级、COPD评估测试(CAT)评分及改良版英国医学研究委员会呼吸问卷(mMRC)分级的关系。结果:AECOPD组患者痰液中CD83/CCR6比值(0.73±0.40)低于COPD稳定期组(1.40±0.53)和正常对照组(2.85±1.86),而IFN-γ[(43.45±14.80)pg/mL]、TNF-α[(59.55±21.48)pg/mL]、IL-4[(16.30±4.62)pg/mL]、IL-6[(38.97±13.41)pg/mL]水平高于COPD稳定期组[(32.53±8.45)pg/mL]、(30.27±13.18)pg/mL、(10.32±4.54)pg/mL、(19.64±7.16)pg/mL]和正常对照组[(25.22±6.31)pg/mL、(20.42±7.61)pg/mL、(5.38±1.14)pg/mL、(8.40±2.27)pg/mL]差异均有统计学意义(P<0.05)。随着稳定期COPD患者GOLD肺功能分级和CAT评分增加,痰液中CD83/CCR6比值逐渐降低,而IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6水平逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。mMRC分级≥2级组患者痰液中CD83/CCR6比值(1.11±0.34)低于mMRC分级<2级组(1.53±0.55),IFN-γ[(37.04±9.55)pg/mL]、TNF-α[(36.85±12.10)pg/mL]、IL-4[(12.33±4.65)pg/mL]、IL-6[(21.57±7.80)pg/mL]水平高于mMRC分级<2级组[(30.66±7.21)pg/mL、(27.55±12.70)pg/mL、(9.49±4.25)pg/mL、(18.84±6.76)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:COPD患者痰CD83/CCR6比值降低,Th1和Th2相关细胞因子水平升高,且与COPD患者肺功能状态、CAT评分及mMRC分级有关,可作为临床评估COPD患者病情程度的参考指标。

凉血解毒汤对银屑病小鼠皮肤组织CCL20/CCR6表达的影响

目的:观察凉血解毒汤对银屑病小鼠皮肤组织中CC趋化因子配体20(CCL20)/CC趋化因子受体6(CCR6)表达的干预作用。方法:24只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组、银屑病模型组、凉血解毒汤中药治疗组和趋化因子CCL20单克隆抗体(阳性药)治疗组。用咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型,采用银屑病皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)评分标准观察银屑病样小鼠皮损的变化情况。光镜下观察皮损组织形态学变化,测量表皮层厚度。采用real-time PCR检小鼠皮肤组织样本中CCL20和CCR6表达的变化。结果:银屑病模型组小鼠皮肤出现大量鳞屑和红斑,表皮增厚;与银屑病模型组小鼠比较,凉血解毒汤组小鼠银屑病样皮损程度较轻,红斑、鳞屑以及表皮增厚程度轻于模型组,PASI分数降低,皮肤组织CCL20以及CCR6的表达明显低于模型组。趋化因子CCL20单克隆抗体治疗组小鼠银屑病皮损程度较轻,红斑、鳞屑以及表皮增厚程度轻于模型组,PASI分数降低,皮肤组织CCL20以及CCR6的表达明显低于模型组。结论:凉血解毒汤可能通过下调CCL20/CCR6的表达来减轻银屑病小鼠的皮肤病变。

移植物中CCR6^+及CCR7^+ T细胞数量与异基因造血干细胞移植受者急性移植物抗宿主病发生的关系

目的:探讨移植物中表达趋化因子受体6(CCR6)或CCR7的T细胞数量与异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)发生的关系。方法:选取行亲缘异基因造血干细胞移植的52对供受者为研究对象,经重组人粒细胞集落刺激因子动员后,测定并比较骨髓和外周血采集物中CCR6+或CCR7+T细胞的数量,分析输注的各亚群T细胞数量与移植后受者发生Ⅱ-Ⅳ度急性GVHD的关系。结果:动员后,外周血采集物中CD4+CCR6+、CD8+CCR6+、CD4+CCR7+及CD8+CCR7+T细胞的绝对数量均较骨髓中增多(P<0.05),是骨髓中的15~25倍,但移植物中上述各亚群细胞的绝对数量不是移植后受者发生急性GVHD的危险因素(P>0.05)。结论:移植后受者急性GVHD的发生可能与移植物中CCR6+或CCR7+T细胞的数量无关。

IL-9抗体对小鼠银屑病样皮损及IL-17和CCR6的影响

目的探讨白介素(IL)-9抗体对小鼠银屑病样皮损及白介素(IL)-17与CC趋化因子受体(CCR)6的影响。方法 Balb/c雌性小鼠随机分为三组:凡士林空白对照组(空白对照组)、咪喹莫特模型组(模型组)以及IL-9抗体实验组(实验组)。通过PASI评分观察银屑病小鼠皮损严重程度变化,免疫组化法检测皮损中IL-17,CCR6的变化,Western blot检测皮损IL-17的表达。结果免疫组化结果表明,与空白对照组相比,模型组小鼠皮损中IL-17,CCR6的含量显著增高(P<0.05);与模型组相比,实验组小鼠的皮损严重程度明显降低,炎症细胞浸润减轻,IL-17,CCR6表达亦明显降低(P<0.05)。而Western blot也显示实验组与模型组皮损IL-17的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-9抗体可能通过抑制CCR6,减少皮损中Th17细胞及树突状细胞的数目,以及抑制IL-17的含量,从而达到改善银屑病样皮损的目的。

CCR6、p38在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的 研究CC趋化因子受体6(CCR6)、p38在鼻咽癌(NPC)组织中的表达水平,并分析二者与NPC患者临床病理特征及预后的关系。方法 选取2015年3月至2017年9月诊治的91例NPC患者为研究对象,收集NPC组织、癌旁正常组织,免疫组化法测定CCR6、p38蛋白表达水平;分析NPC组织CCR6、p38蛋白表达水平与患者临床病理特征的关系;Spearman等级相关性分析NPC组织中CCR6表达水平与p38的相关性;Kaplan-Meier生存曲线分析NPC组织CCR6、p38表达水平与患者预后的关系;COX回归分析NPC患者预后的影响因素。结果 NPC组织CCR6、p38蛋白阳性表达率均显著高于癌旁正常组织(P<0.05);NPC组织CCR6、p38表达水平均与肿瘤淋巴结转移、TNM分期、分化程度明显相关(P<0.05),与性别、吸烟史、年龄无相关性(P>0.05);NPC组织中CCR6表达水平与p38呈正相关(r=0.583,P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线分析显示,CCR6、p38阳性组NPC患者术后36个月累积生存率明显低于CCR6、p38阴性组(P<0.05);淋巴结转移、p38、TNM分期、CCR6是影响NPC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 NPC患者癌组织CCR6、p38阳性表达率较高,两者均与NPC临床病理特征及预后相关,CCR6、p38有望成为评估NPC患者预后的指标。

脓毒症患儿血清趋化因子与炎症因子及预后的关系

目的探讨脓毒症患儿血清趋化因子[CXC趋化因子配体12(CXCL12)及其受体CXC趋化因子受体4(CXCR4)、CC趋化因子配体20(CCL20)及其受体CC趋化因子受体6(CCR6)]与炎症因子和住院期间预后的关系。方法选择2019年2月-2021年6月河北北方学院附属第一医院儿内科收治的309例儿童脓毒症患者(脓毒症组),另选择71名同期于本院体检健康儿童为对照组。收集临床资料,采集静脉血检测血清CXCL12、CXCR4、CCL20、CCR6和炎症因子水平,记录临床结局。多因素logistic回归分析影响脓毒症患儿院内死亡的危险因素。结果脓毒症组血清CXCL12、CXCR4、CCL20、CCR6、降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)水平分别为(1.25±0.21)ng/mL、(1.68±0.31)pg/mL、(225.35±36.98)pg/mL、(2.58±0.65)ng/mL、(1.10±0.23)ng/mL、(7.02±2.19)pg/mL、(21.85±6.27)mg/L,均高于对照组的[(0.53±0.16)ng/mL、(0.63±0.18)pg/mL、(36.31±10.49)pg/mL、(0.51±0.13)ng/mL、(0.02±0.01)ng/mL、(4.72±0.58)pg/mL、(5.04±1.52)mg/L],差异均有统计学意义(t=32.094、37.905、77.333、51.664、82.205、16.667、42.056,P均<0.001)。脓毒症患儿血清CXCL12、CXCR4、CCL20、CCR6水平与PCT(r=0.539、0.492、0.503、0.465)、IL-6(r=0.596、0.633、0.571、0.625)、CRP(r=0.456、0.441、0.402、0.417)水平成正相关,差异均有统计学意义(P均<0.05)。309例患儿中共300例追踪到临床结局,根据患儿院内存活情况将其分为死亡组(n=53)和存活组(n=247),死亡组脓毒症休克、机械通气、电解质紊乱、急性肾损伤比例以及急性生理与慢性健康评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、尿素氮、血肌酐、血清CXCL12、CXCR4、CCL20、CCR6、PCT、IL-6、CRP水平高于存活组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。APACHEⅡ评分、脓毒症休克、PCT、CRP、CXCL12、CXCR4、CCL20、CCR6是影响脓毒症患儿院内死亡的相关因素(OR=2.427、1.206、1.683、2.173、1.142、2.333、2.067、1.079,P均<0.05)。结论脓毒症患儿血清CXCL12、CXCR4、CCL20、CCR6水平均增高,且与血清炎症因子水平增加和脓毒症患儿院内死亡有关。

炎性牙周膜干细胞影响T细胞迁移及活化的初步研究

目的:初步探讨炎性牙周膜干细胞(periodontalligamentstemcells,PDLSCs)在牙周炎中对T细胞免疫的影响及可能机制。方法:使用磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激PDLSCs模拟健康及炎性环境下的PDLSCs,收集2组PDLSCs条件培养液(conditioned medium,CM),即健康PDLSCs条件培养液(CON-CM组)和炎性PDLSCs条件培养液(LPS-CM组),并收集同批次培养液为阴性对照(NC组),分别将其作用于人正常T淋巴细胞系H9细胞,观察不同CM对T细胞增殖和迁移能力的作用。进一步采用植物血凝素-L(phytohemagglutinin-L,PHA-L)刺激T细胞免疫活化,采用CM作用于活化状态下的H9细胞,并检测T细胞免疫活化相关基因白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、CC趋化因子受体6(CC chemokine receptor 6,CCR6)表达的变化,同时观察LPS刺激对PDLSCs分泌CC趋化因子配体20(CC chemokine ligand 20,CCL20)的影响。结果:与NC组和CON-CM组相比,LPS-CM组能促进T细胞的增殖、迁移,及IL-2、IFN-γ、IL-17和CCR6的表达(P<0.05),且在LPS的刺激下,PDLSCs分泌的CCL20含量明显增多(P<0.001)。结论:正常PDLSCs具有一定免疫调节作用,而炎性PDLSCs可能通过CCL20-CCR6轴促进了T细胞的增殖、迁移和活化等免疫生物学行为。

小细胞肺癌组织中MIP-3α和CCR6表达与术后复发转移及预后的关系

目的 探讨小细胞肺癌 (SCLC) 组织中巨噬细胞炎症蛋白3α (MIP-3α) 和CC趋化因子受体6 (CCR6) 表达与术后复发转移及预后的关系.方法 收集陕西省核工业215医院SCLC癌组织标本 (96例)为SCLC组, 癌旁组织标本 (52例) 为正常组.采用qRT-PCR与免疫组化法检测两组MIP-3α与CCR6 mR-NA相对表达量及蛋白表达情况, Western印迹法检测MIP-3α与CCR6 蛋白表达水平, 采用流式细胞术和ELISA分别测定Th17细胞及其细胞因子白细胞介素-17 ( IL-17)、 IL-21、肿瘤坏死因子-α ( TNF-α) 水平.并分析MIP-3α、 CCR蛋白表达情况与SCLC患者临床病理参数、 Th17细胞及其细胞因子的关系.随访结束后分析SCLC患者术后复发转移与MIP-3α、 CCR6表达的关系.采用logistic回归分析影响SCLC患者术后复发转移的相关因素;Kaplan-Meier法分析SCLC患者预后情况.结果 SCLC组MIP-3α与CCR6 mRNA相对表达量及蛋白表达水平均显著高于正常组 ( P<0.05);MIP-3α、 CCR6表达均与淋巴结转移、临床分期显著相关 (P<0.05);MIP-3α、 CCR6 蛋白表达水平分别与 Th17、 IL-17、 IL-21 水平呈显著正相关 ( P <0.05);术后复发转移SCLC患者MIP-3α、 CCR6 mRNA及蛋白表达水平均显著高于未复发转移者 ( P<0.05);logistic回归分析显示病理分期、 IL-17、 MIP-3α与CCR6水平均为影响术后复发转移的独立危险因素;Kaplan-Meier法分析显示 MIP-3α 与 CCR6 阴性表达组患者 PFS、 OS 均显著高于阳性表达组 ( P <0.05).结论 SCLC患者MIP-3α与CCR6表达水平显著升高, 其高表达水平与术后复发转移及患者预后不良密切相关.

泻肝凉血解毒方对豚鼠银屑病模型IL-23/Th17轴的调节作用

目的:探讨泻肝凉血解毒方对豚鼠银屑病模型IL-23/Th17轴的影响。方法:5%普萘洛尔霜剂外涂豚鼠耳背皮肤,使其产生银屑病样皮损,然后分别以泻肝凉血解毒方和阿维A胶囊进行治疗,光镜下观察局部皮损病理变化,免疫组化法检测治疗前后皮损组织白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素23(IL-23)和CC趋化因子受体6(CCR6)、CC趋化因子配体20(CCL20)的水平。结果:豚鼠耳部皮肤HE染色显示:造模部位可见典型的角化过度,角化不全,棘层肥厚,真皮毛细血管扩张,有较明显的单一核细胞浸润,经泻肝凉血解毒方和阿维A胶囊治疗后,皮损组织病理显著改善。免疫组化结果显示:模型组皮损IL-17、IL-23、CCR6、CCL20水平均显著升高,与其余3组比较具有统计学差异(P<0.05);与模型组比较,阿维A胶囊组与泻肝凉血解毒方组IL-17、IL-23、CCR6、CCL20显著降低(P<0.05)。其中,泻肝凉血解毒方组IL-23及CCR6显著低于阿维A组(P<0.05)。结论:泻肝凉血解毒方可有效调节普萘洛尔致豚鼠银屑病样皮损IL-23/Th17轴的平衡。