癫痫易感大鼠脑内CCK-8肽含量、CCK基因结构及CCK-mRNA表达初探

对听源性癫痫易感大鼠P_(77)PMC及对照Wistar大鼠发育中脑内基础CCK-8肽含量、mRNA表达水平及胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)基因结构进行初探。提示:(1)P_(77)PMC在发育中,成年脑内基础CCK-8肽显著高于对照;(2)Northern印迹杂交示P_(77)PMC组脑CCK-mRNA与对照无显著差异;(3)CCK DNA结构在两组大鼠未发现RFLPs不同。证实两系大鼠脑内CCK系统存在差异,其与癫痫易感性的关系尚待进一步研究。

在尾核痛反应神经元和整体甩尾反射水平上研究CCK-8对抗电针的镇痛作用

目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对抗电针(EA)对大鼠尾核(Cd)中痛反应神经元放电和甩尾潜伏期(TFL)痛阈的同时影响。方法采用同步记录大鼠Cd中痛兴奋神经元(PEN)或痛抑制神经元(PIN)电变化与辐射热照大鼠尾所引起TFL的方法。结果(1)辐射热照大鼠尾可使PEN诱发放电增加或PIN诱发放电减少的同时发生甩尾反射,表现出辐射热致疼痛效应。(2)EA双侧“足三里”15min,可抑制PEN的电活动或加强PIN的电活动,同时使TFL延长,即呈现出EA的镇痛效应。(3)脑室(icv)注射CCK-8(10ng/10μl)能同时对抗EA所引起的PEN或PIN和TFL的镇痛作用。结论CCK-8的抗EA镇痛作用,在中枢痛反应神经元电活动和整体行为反射水平上是协调一致的。揭示,PEN和PIN的电活动作为疼痛和镇痛指标是确实可行的。

“肺病”模型大鼠肺与结肠组织中CGRP,CCK-8表达变化的探讨

目的:通过观察空白对照组、肺病(哮喘)组大鼠肺、结肠等组织切片中降钙基因相关肽(CGRP)、八肽胆囊收缩素(CCK-8)的表达,来探讨"肺"与"大肠"在病理状态下相互影响的物质基础。方法:将大鼠分为空白对照组、肺病组两个组别,每组10只。造模成功后,处死大鼠,分别取肺、结肠等组织,用免疫组化法检测各组织病理切片中CGRP与CCK-8的表达。结果:肺组织中CCK-8的表达与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01);结肠组织中CCK-8的表达与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01);肺组织中CGRP的表达与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01);结肠组织中CGRP的表达与空白对照组比较有差异(P<0.05)。结论:肺与大肠在病理状态下有一定的相关性,CCK-8为其联系的物质基础之一。

针刀松解对腰椎间盘突出症根性神经痛大鼠中枢与外周血CCK-8、5-HT的影响

目的探讨针刀松解对腰椎间盘突出症(LDH)根性神经痛SD大鼠中枢与外周血八肽胆囊收缩素(CCK-8)、5-羟色胺(5-HT)的影响及其作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刀组和电针组,每组10只,假手术组正常造模但不环扎神经根,模型组、针刀组、电针组参照陆志东非压迫性腰椎间盘髓核突出模型造模方法进行造模。在造模3 d后,假手术组正常饲养,针刀组给予针刀干预,每周1次,共3次;电针组进行电针干预,取环跳、委中,隔日治疗1次,每次20 min,1周治疗3次,共治疗3周。在实验过程中检测后肢热刺激缩爪的潜伏期,3周后检测各组大鼠下丘脑与外周血中CCK-8、5-HT含量的变化。结果模型组在术后第1周时开始出现热刺激痛觉过敏现象,与术前及假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05);第3周时潜伏期缩短最明显,与术前及假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01);针刀组、电针组大鼠在治疗第2周时开始出现热刺激痛觉过敏现象减轻,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);假手术组大鼠在各时相点热刺激缩爪潜伏期差值与针刀组、电针组比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组下丘脑及血浆中CCK-8浓度明显高于假手术组(P<0.01);针刀组下丘脑及血浆中CCK-8浓度明显下降,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05);电针组下丘脑及血浆中CCK-8浓度亦有所下降,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。模型组下丘脑及血浆中5-HT浓度明显低于假手术组(P<0.01);针刀组下丘脑及血浆中5-HT浓度明显上升,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05);电针组下丘脑及血浆中5-HT浓度亦有所上升,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论针刀和电针均可降低LDH根性神经痛大鼠中枢与外周血CCK-8含量,提高5-HT的含量,但针刀效果比电针更为明显。

中风星蒌通腑胶囊介导CCK-8调控IL-10/STAT3信号通路改善脑出血小鼠的炎症损伤

目的探讨中风星蒌通腑胶囊介导胆囊收缩素八肽(CCK-8)对白细胞介素10(IL-10)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对脑出血小鼠的脑部炎症反应的调控作用及机制。方法将110只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组、脑出血组及中风星蒌通腑胶囊低、中、高剂量组,每组22只。采用胶原酶法建立脑出血模型,模型复制2 h后进行中风星蒌通腑胶囊混悬液灌胃(10 mL·kg^(-1)),假手术组与脑出血组灌以等量的生理盐水。记录小鼠的神经功能学评分及左转率;于术后72 h采用干湿质量法检测脑含水量;于术后72 h采用Western Blot法检测小鼠血肿周围肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)以及Janus激酶1(JAK-1)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)通路蛋白的相对表达水平;于术后第3、5天采用Elisa法检测小鼠CCK-8的相对表达水平;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测IL-10、STAT3的mRNA的表达水平。结果与脑出血组比较,中风星蒌通腑胶囊低、中、高剂量组干预治疗后,第3天及第5天小鼠改良神经功能缺陷(NDS)评分明显降低(P<0.01),低剂量组第3天及第5天左转率降低(P<0.05),中剂量组第3天(P<0.05)及第5天(P<0.01)左转率降低,高剂量组第3天及第5天左转率明显降低(P<0.01)。低剂量组小鼠脑含水量减少(P<0.05),中、高剂量组小鼠脑含水量明显减少(P<0.01)。低剂量组促炎因子TNF-α、IL-6及JAK-1、STAT3、p-STAT3通路蛋白的表达均明显减少(P<0.01),IL-1β表达减少(P<0.05),抑炎因子IL-10表达明显增加(P<0.01);中、高剂量组促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6及JAK-1、STAT3、p-STAT3通路蛋白的表达均明显减少(P<0.01),抑炎因子IL-10表达明显增加(P<0.01)。低剂量组CCK-8的含量在用药后第3天增加(P<0.05),第5天含量明显增加(P<0.01);中、高剂量组CCK-8的含量在用药后第3天及第5天明显增加(P<0.01)。IL-10的mRNA相对表达水平在用药后均明显增高(P<0.01),STAT3 mRNA相对表达水平在用药后均明显降低(P<0.01)。结论中风星蒌通腑胶囊可以增加脑肠肽CCK-8的表达,调控IL-10/STAT3信号通路,从而减轻小鼠脑出血后的继发性炎症反应及细胞毒性脑水肿。

胆囊收缩素八肽对猪心肺复苏后脑功能的疗效评价

目的本研究制作心肺复苏（CPR）的猪模型，评价胆囊收缩素八肽（CCK-8）对大动物复苏后体温及脑功能的影响。方法12头国产健康巴马小型猪随机分为两组：对照组（Control组）和CCK-8治疗组（CCK-8组）。经右心室电极放电诱导室颤10min，然后CPR5min，复制CPR猪模型。对照组中，复苏后5min静脉注射生理盐水20mL。CCK-8组中，CCK-8的剂量为44．4μg/kg，溶于等量生理盐水并在复苏后5min静脉注射。复苏后4h内全程监测平均动脉压、心率、右房压、心电图及体温。复苏后2、4、12、24h采血检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）、S100B蛋白（S100B）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。复苏后24h进行神经功能学评分（NDS）。结果与Control组比较，CCK-8并未降低体温，但明显降低复苏后NSE、S100B、IL-6和TNF-α（P〈0．05），并改善NDS（P〈0．05）。结论在CPR猪模型中，CCK-8并未产生诱导低温的作用，但抑制复苏后的炎症反应并改善了脑功能。

胆囊收缩素受体在胰腺癌细胞中的表达及胆囊收缩素对胰腺癌细胞周期的影响

目的:观察胆囊收缩素受体(CCKR)在人胰腺癌细胞株SW1990中的表达及胆囊收缩素(CCK)-8肽对胰腺癌细胞周期的影响. 方法:应用RT-PCR方法检测人胰腺癌细胞株SW1990中胆囊收缩素受体(CCKR)mRNA的表达,细胞化学法检测SW1990 细胞中胆囊收缩素受体(CCKR)蛋白水平的表达,流式细胞仪检测不同浓度的CCK-8肽对SW199细胞周期的影响. 结果:在人胰腺癌细胞株SW1990中不表达CCK-A亚型受体,但表达CCK-B亚型受体;CCKR在癌细胞株SW1990 中的表达主要位于细胞膜上,细胞浆内也可见.在10-8g/L- 10-5g/L浓度范围内,CCK-8肽促进SW1990细胞的增殖, 呈剂量依赖性,细胞周期分析发现S期细胞增加,G2/M 期细胞减少. 结论:CCKB受体在人胰腺癌细胞株SW1990中表达, CCK-8肽能促进SW1990细胞的增殖,抑制细胞的凋亡, CCK通过CCKR在胰腺癌细胞的增殖中发挥重要作用.

针刺镇痛的中枢神经递质基础

针刺镇痛是针刺主要功效,5-羟色胺(5-HT)、内源性阿片肽、八肽缩胆囊素(CCK-8)是中枢神经参与针刺镇痛的重要神经递质,其含量变化及相互影响了针刺镇痛的疗效。

基于表面等离子体子共振成像技术研究苏拉明和顺铂对肝癌细胞生长的抑制作用

基于表面等离子体子共振成像(SPRi)技术提出了一种实时、非标记的新型抗癌药物药效评估方法.以聚二甲基硅氧烷(PDMS)为材料,制作了包含微柱结构的微流控芯片作为流通反应池,配合自行设计组装的SPRi生物传感器完成肿瘤细胞的特异性捕获及检测,研究了苏拉明和顺铂对肝癌细胞HepG2的生长抑制作用.同时引入辅助验证实验,即采用常规八肽胆囊收缩素(简称CCK-8)法测定上述药物对肝癌细胞增殖的抑制作用.SPRi检测结果表明,苏拉明和顺铂能抑制肿瘤细胞HepG2增殖并呈现剂量、时间依赖关系.

针刀松解法与电针对膝骨关节炎大鼠中枢啡肽类物质影响的比较研究

目的:观察针刀松解法及电针对膝骨关节炎大鼠中枢β-内啡肽(β-EP)及八肽胆囊收缩素(CCK-8)的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组和针刀组。用4%木瓜蛋白酶溶液与半胱氨酸溶液注入大鼠左膝关节腔复制膝骨关节炎模型。针刀组和电针组分别给予针刀松解法和电针治疗,疗程3周。采用放射免疫法检测脊髓及中脑β-EP及CCK-8的含量。结果:模型组大鼠脊髓及中脑β-EP和CCK-8含量较空白组显著增加(P<0.01);在脊髓水平针刀组及电针组β-EP含量较模型组升高,以电针组明显(P<0.05);针刀组和电针组脊髓和中脑CCK-8含量较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01);两组间β-EP及CCK-8含量无显著性差异(P>0.05)。结论:针刀松解法和电针均可调节膝骨关节炎大鼠脊髓和中脑β-EP和CCK-8的合成和释放。