CCKB型受体与μ型阿片受体异源聚合增强CCKB型受体的功能

目的:研究CCK B型受体(cholecystokinin B receptor,CCKBR)与μ型阿片受体(mu opioid receptor,MOR)的异源聚合体对CCKBR功能的调控作用。方法:建立稳定单独转染CCKBR、共同转染CCKBR和MOR的细胞系,通过细胞免疫荧光及Western blotting的方法验证细胞系建立成功,利用不同浓度的CCK-8刺激细胞,检测两种细胞系中受体活化后胞浆钙离子浓度的变化、ERK激酶的活化及细胞增殖活性的检测。结果:相对于单转CCKBR的细胞,稳定双转CCKBR和MOR的细胞中,CCKBR受CCK-8刺激后引起的胞浆钙离子释放增加,ERK活化增强,细胞增殖速度加快。结论:CCKBR与MOR的异源聚合可增强CCKBR的功能。

大鼠胃壁细胞胃泌素受体的放射配基结合法

目的 建立大鼠胃壁细胞胃泌素受体放射配基结合实验方法。方法 以12 5I [Leu15] gastrin17 I为标记配基 ,以大鼠胃壁细胞悬液为受体制备 ,反应体系总体积为 2 0 0 μl,37℃恒温水浴振荡孵育 30min ,以 49型玻璃纤维滤膜分离结合和游离配基。结果 胃泌素受体结合符合简单单位点结合模型 ,Scatchard作图求出胃泌素受体结合参数Bmax=4 46 0 4× 10 -12 mol·L-1,Kd=1 2 49× 10 -10 mol·L-1。单点法求出特异结合位点数 70 3 2sites·cell-1。细胞浓度在0 2 5× 10 9～ 2× 10 9cells·L-1范围内 ,与标记配基特异性结合容量成正比。同一样品特异结合测定方法变异系数为7 0 4%。竞争抑制实验证明12 5I Gastin与大鼠胃壁细胞结合特异性良好。

胃泌素/胆囊收缩素受体环对胃癌细胞增殖迁移的影响

目的探索胃泌素/胆囊收缩素受体环对胃癌细胞增殖迁移的影响。方法用免疫细胞化学方法检测人胃癌细胞SGC-7901、AGS和胃黏膜上皮细胞GES-1细胞中胆囊收缩素-B(CCKB)受体的表达。分别培养这3种细胞,用不同终浓度胃泌素(10、100 nmol/L)处理细胞,以未加胃泌素的细胞为对照,用细胞划痕实验和四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞的增殖迁移能力。结果胃癌细胞SGC-7901、AGS中CCKB受体表达强阳性,而GES-1细胞中CCKB受体表达弱阳性;不同浓度胃泌素处理细胞后,SGC-7901、AGS细胞的增殖迁移能力明显增强,而GES-1细胞无明显改变;对照组、10 nmol/L胃泌素处理组及100 nmol/L胃泌素处理组中SGC-7901细胞的相对增殖率分别为100%、191.13%、212.65%,AGS细胞的相对增殖率分别为100%、189.27%、209.19%,各组间差异均有统计学意义(P均<0.01);而GES-1细胞的相对增殖率分别为100%、113.01%、116.12%,各组间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 CCKB受体表达水平的高低对胃泌素/CCKB受体环促进胃癌细胞的增殖和迁移起重要作用。

脾气虚大鼠焦虑样行为及其初步机制研究

目的研究脾气虚大鼠焦虑程度的变化并探讨其可能机制。方法选取雄性SD大鼠16只,体质量(200±10)g,将其随机分为对照组和脾气虚组(模型组),每组8只。旷场实验评价大鼠焦虑程度;ELISA法测定海马组织ATP和缩胆囊素-8(CCK-8)含量;免疫组化法检测海马CCKB型受体(CCKBR)表达。结果与对照组比较,模型组的焦虑程度显著降低(P<0.01),海马组织的ATP含量降低(P<0.05),海马CCK-8水平变化不明显(P>0.05),但其受体表达下降(P<0.05)。结论脾气虚时焦虑程度下降,其初步机制与海马能量不足和CCKBR表达减少有关。