乌司他丁调节CCL2-CCR2信号轴对胃癌细胞上皮-间质转化和免疫逃逸的影响分析

目的:探讨乌司他丁(UTI)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-C-C趋化因子受体2(CCR2)信号轴对胃癌(GC)细胞上皮-间质转化(EMT)和免疫逃逸的影响。方法:qRT-PCR、Western blot分别检测GC组织/细胞中CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达水平;以不同浓度的UTI(0、100、200、400、800 U/ml)干预细胞,MTT法检测细胞增殖情况;将AGS细胞分为control组、UTI组、pcDNA组、pcDNA-CCL2组,平板克隆和Transwell小室分别检测细胞增殖、迁移、侵袭。AGS细胞和CD8+T细胞共培养后,将CD8+T分为T细胞组、共培养组、UTI组、pcDNA组、pcDNA-CCL2组,流式细胞仪检测CD8+T细胞凋亡,ELISA检测CD8+T细胞上清中IFN-γ、IL-2、TNF-α水平;Western blot检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、程序性死亡配体1(PD-L1)及CCL2-CCR2信号通路蛋白表达。结果:在GC组织/细胞中,CCL2、CCR2蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05);UTI显著抑制AGS细胞的增殖、迁移、侵袭及EMT,降低AGS细胞中MMP-2、Vimentin、PD-L1、CCL2、CCR2蛋白表达,升高E-cadherin蛋白表达(P<0.05);过表达CCL2可逆转UTI对细胞增殖、迁移、侵袭及EMT的抑制作用;与T细胞组比较,共培养组CD8+T细胞IFN-γ、IL-2、TNF-α水平降低,细胞凋亡率升高(P<0.05);与共培养组比较,UTI组CD8+T细胞IFN-γ、IL-2、TNF-α水平升高,细胞凋亡率降低(P<0.05);与pcDNA组比较,pcDNA-CCL2组CD8+T细胞上述指标变化均显著逆转(P<0.05)。结论:UTI可能通过抑制CCL2-CCR2信号通路抑制AGS细胞的EMT和免疫逃逸。

花旗松素调节MCP-1/CCR2轴对急性淋巴细胞白血病细胞恶性进展的影响

目的:研究花旗松素(Taxifolin)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞恶性进展的影响及单核细胞趋化蛋白-1(CCL2)/CC趋化因子受体2(CCR2)轴发挥的作用。方法:体外培养ALL-T淋巴细胞CCRF-CEM;CCK-8法检测不同浓度Taxifolin对CCRF-CEM细胞活力影响,筛选本实验用Taxifolin浓度;将CCRF-CEM细胞分为control组、Taxifolin-L组、Taxifolin-M组、Taxifolin-H组、Taxifolin+rCCL2组;EDU法检测各组CCRF-CEM细胞增殖;流式细胞术检测各组CCRF-CEM细胞凋亡;Transwell检测各组CCRF-CEM细胞侵袭能力;平板克隆形成实验检测各组CCRF-CEM细胞集落形成能力;RT-PCR检测各组CCRF-CEM细胞CCL2、CCR2基因表达水平;Western blot检测各组CCRF-CEM细胞CCL2、CCR2、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果:选择25、50、100μmol/L三个Taxifolin浓度进行后续实验;与control组相比,Taxifolin-L、M、H组CCRF-CEM细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著升高,CCRF-CEM细胞EDU阳性细胞率、侵袭细胞数量、细胞克隆集落数、CCL2、CCR2基因表达水平、CCL2、CCR2、Bcl-2蛋白表达水平均显著性降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与Taxifolin-H组相比,Taxifolin+rCCL2组CCRF-CEM细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著性降低,CCRF-CEM细胞EDU阳性细胞率、侵袭细胞数量、细胞克隆集落数、CCL2、CCR2基因表达水平、CCL2、CCR2、Bcl-2蛋白表达水平均显著性升高(P<0.05)。结论:Taxifolin可能通过抑制CCL2/CCR2轴,从而抑制CCRF-CEM细胞恶性进展。

基于CCL2/CCR2信号轴的肿瘤免疫治疗药物的研究进展

趋化因子配体2(C-C motif chemokine ligand 2,CCL2)及其受体CCR2与肿瘤的发生、发展密切相关。CCL2/CCR2信号轴通过多种机制促进肿瘤进展,一方面CCL2与肿瘤细胞表面的CCR2结合促进肿瘤的生长/存活和转移;更为重要的是CCL2可以招募多种免疫抑制细胞在肿瘤微环境中聚集,抑制免疫细胞的功能和活性,促进肿瘤进展。本文综述了CCL2/CCR2信号轴以及其在肿瘤及肿瘤微环境中的作用,并重点介绍了靶向CCL2/CCR2信号轴药物的临床研究进展,以期深入并全面了解CCL2/CCR2信号轴在肿瘤进展中的作用机制,开发更有效的肿瘤免疫治疗药物。

毛兰素通过CCL2-CCR2信号轴介导的免疫逃避抑制食管癌细胞的恶性进展

目的:探讨毛兰素对食管癌(EC)细胞恶性进展的影响及其作用机制。方法:收集2021年3月至2022年12月期间在本院根治手术治疗EC患者(40例)的癌组织及距离癌组织3cm处的癌旁组织;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot分别检测EC组织及细胞中CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达水平;以不同浓度的毛兰素(0、10、20、40、60、80、160nmoL/L)干预ECA109细胞48h,MTT法检测细胞增殖,筛选最佳干预浓度;将ECA109细胞分为control组(正常培养)、毛兰素低、中、高剂量组(20、40、60nmoL/L)、pcDNA组(转染pcDNA3.1)、pcDNA-CCL2组(转染pcDNA3.1-CCL2),MTT法、平板克隆实验、Transwell小室和流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡;ECA109细胞和CD8^(+)T细胞共培养后,分为T细胞组、共培养组、毛兰素组、pcDNA组、pcDNA-CCL2组,MTT、流式细胞仪检测CD8^(+)T细胞增殖、凋亡,酶联免疫吸附(ELISA)法检测CD8^(+)T细胞上清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、程序性死亡配体1(PD-L1)及CCL2-CCR2信号通路蛋白表达。结果:在EC组织和EC细胞中CCL2、CCR2蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05);与control组比较,毛兰素低、中、高剂量组ECA109细胞中OD_(490)值、集落形成数、迁移与侵袭细胞数、CCL2、CCR2 mRNA及PCNA、PD-L1、CCL2、CCR2蛋白表达水平显著降低,凋亡率、Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与pcDNA组比较,pcDNA-CCL2组ECA109细胞上述指标变化均显著逆转(P<0.05);与T细胞组比较,共培养组CD8^(+)T细胞OD_(490)值、IFN-γ、IL-2、TNF-α水平降低,细胞凋亡率增加(P<0.05);与共培养组比较,毛兰素组CD8^(+)T细胞OD490值、IFN-γ、IL-2、TNF-α水平升高,细胞凋亡率降低(P<0.05);与pcDNA组比较,pcDNACCL2组CD8^(+)T细胞上述指标变化均显著逆转(P<0.05)。结论:毛兰素可能通过抑制CCL2-CCR2信号通路,抑制EC细胞的恶性进展。

CCL2/CCR2轴在早产发生中的作用

早产是指妊娠满28周而不足37周的分娩,是临床上最常见的病理性妊娠之一,其发生率约为5%~15%[1],是围产期新生儿发病及死亡的首要原因。研究表明,约60%~80%无先天性异常的婴儿死亡和早产有关[2]。多种异常因素的存在将会导致分娩提前发生,从而引发早产,如母系遗传变异、生殖系统感染或孕妇体内其它组织器官感染、蜕膜老化和出血、母胎界面免疫调控失衡、功能性孕激素撤退和精神心理因素等[3]。

靶向CCL2-CCR2轴的肿瘤治疗研究进展

单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1/CCL2)是CC类趋化因子家族成员之一。CCL2作用广泛,主要结合CC类趋化因子受体2(CCR2)趋化单核细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞。许多研究表明CCL2-CCR2轴参与肿瘤细胞生长存活、血管生成、肿瘤侵袭和转移的调控。本文综述了CCL2-CCR2轴在前列腺癌、乳腺癌、肝癌等肿瘤发生、发展、转移的作用和临床前动物模型实验以及靶向CCL2-CCR2轴的肿瘤治疗临床试验的进展、前景和挑战。

趋化因子CCL20及其受体CCR6在肺腺癌组织中的表达及与复发转移的关系研究

目的通过观察复发和非复发肺腺癌患者癌组织中CCL20和CCR6的表达情况,探讨CCL20和CCR6在肺腺癌发生发展中的作用。方法选取2009年2月—2011年12月河北省人民医院收治的肺腺癌患者162例,根据随访期间的复发转移情况分为复发组(n=50)和非复发组(n=112)。采用免疫组织化学染色检测CCL20和CCR6的表达;采用实时荧光定量PCR检测CCL20、CCR6 mRNA的表达,采用蛋白质印迹(Western blot)法检测CCL20、CCR6蛋白的表达。结果 CCL20在肺腺癌组织中主要表达于细胞膜和细胞质,CCR6在肺腺癌组织中主要表达于细胞质,二者在肺腺癌癌旁组织中均无明显表达。复发组CCL20、CCR6高表达率〔CCL20:38(76.0%)比9(8.0%);CCR6:33(66.0%)比7(6.3%)〕和染色指数〔CCL20:(150.4±10.2)比(62.5±8.5);CCR6:(134.4±11.3)比(58.0±9.5)〕均高于非复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。复发组CCL20、CCR6 mRNA表达较非复发组分别增加82.3%、56.4%,CCL20、CCR6蛋白表达较非复发组分别增加292.0%、188.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CCL20和CCR6在肺腺癌组织中呈高表达,且与肺腺癌的发生发展相关。

CCR2、CCL5、CCR5和CCL1基因多态性与中国汉族儿童结核病易感性的关联研究

目的探讨CCR2、CCL5、CCR5和CCL1的基因多态性与中国汉族儿童结核病易感性的关系。方法收集353例汉族儿童结核病患者,以同期查体的400名儿童作为对照,采用病例对照研究,应用高通量MassARRAY技术对于CCR2、CCL5、CCR5和CCL1基因的SNP位点进行基因分型研究。结果 CCR2、CCL5、CCR5和CCL1基因SNP位点的等位基因、基因型以及单体型在结核病组和对照组的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CCR2、CCL5、CCR5和CCL1的基因多态性与中国汉族儿童结核病易感不存在相关性。

早孕期人蜕膜趋化因子CCL2及其受体CCR2的表达及意义

目的:分析人早孕蜕膜及蜕膜基质细胞趋化因子受体CCR2及其配体CCL2在人早孕蜕膜组织及蜕膜基质细胞的表达和分泌,以探讨CCR2/CCL2在母-胎界面的生物学作用。方法:收集早孕期蜕膜组织,分离蜕膜基质细胞,分别用半定量RT-PCR、免疫化学方法分析正常人早孕蜕膜组织和培养的人蜕膜基质细胞CCR2/CCL2表达;并且用流式细胞术和ELISA法分别检测蜕膜基质细胞表面CCR2的表达和培养的蜕膜基质细胞上清中CCL2的分泌。结果:人早孕蜕膜组织和蜕膜基质细胞均高水平转录和翻译CCR2/CCL2,培养的基质细胞能分泌大量的CCL2,其分泌量呈时间依赖性。结论:早孕蜕膜高表达和分泌CCR2/CCL2可能参与早孕期母-胎免疫调节。

CCR2^(+)巨噬细胞与病理性心肌重构的研究

心肌重构被认为是导致临床心力衰竭(heart failure,HF)的决定因素,心肌重构是指心脏的大小、形状、功能和(或)结构因负荷或损伤而发生变化,即基因组表达、分子、细胞和间质的改变。这种重构可以是生理性的(如运动训练可引起),也可以是病理性的(如心脏在MI后、高血压或梗阻性主动脉瓣疾病引起的压力超负荷而发生重构)。心脏损伤后,单核细胞和组织驻留巨噬细胞发生了显著的表型和功能变化,在组织修复、再生和纤维化过程中具有关键调节作用。心肌重构的过程中,免疫细胞亚群的积累导致心脏细胞成分的改变,并促进心力衰竭的发展。本综述将围绕CCR2^(+)巨噬细胞的起源、在心脏中的浸润以及在病理性心肌重构中的作用展开阐述。

以肿瘤浸润巨噬细胞为靶点通过CCL2/CCR2信号途径治疗肝细胞癌

【据《Cut》2015年10月报道】题：以肿瘤浸润巨噬细胞为靶点通过CCL2/CCR2信号途径治疗肝细胞癌（作者Li X等）肝细胞癌（HCC）是一种具有侵袭性的恶性肿瘤,缺乏有效的治疗手段。替代策略是针对HCC肿瘤微环境中的靶细胞,如肿瘤浸润的巨噬细胞。CCL2/CCR2（趋化因子2及其受体）的作用是使单核细胞/巨噬细胞聚集并且其与肝脏病理学（包括HCC）的各个方面密切相关。为了研究CCL2/CCR2作为HCC治疗靶点的可行性,

支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL3、CCL2表达及与肺功能和气道炎症的关系

目的探讨支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL3、CCL2表达水平及与肺功能及气道炎症的关系。方法选取2017年1月至2018年4月接受治疗的支气管哮喘患儿123例,其中急性发作期患儿68例,缓解期55例,另选同期来院体检的健康儿童45例为对照组。对受试者进行肺功能检查,RT-PCR检测痰上清液中CXCR2、CCR1 mRNA表达水平,采用ELISA检测痰液中CCL2、CCL3、IL-4、IL-8、IFN-γ水平,分析支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3与肺功能及与炎症相关因子IL-4、IL-8、IFN-γ的相关性。结果支气管哮喘患儿肺功能指标FEV1%及FEV1/FVC均显著降低,哮喘急性期FEV1%、FEV1/FVC显著低于哮喘缓解期和对照组,哮喘缓解期FEV1%、FEV1/FVC显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);哮喘急性期痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3、IL-4、IL-8显著高于哮喘缓解期和对照组,哮喘缓解期痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3、IL-4、IL-8显著高于对照组(P<0.05);哮喘急性期痰液中IFN-γ显著低于哮喘缓解期和对照组,哮喘缓解期痰液中IFN-γ显著低于对照组(P<0.05);相关性分析显示,支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3与肺功能FEV1%、FEV1/FVC均呈显著负相关;支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3与促炎因子IL-4、IL-8呈显著正相关,CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3与抗炎因子IFN-γ呈显著负相关;IL-4、IL-8与抗炎因子IFN-γ均呈负相关。结论支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3高表达与患儿肺功能和气道炎症相关,其可为疾病的诊治提供一定的理论依据。

CCR9/CCL25在非小细胞肺癌中的作用机制及预后分析的研究进展

趋化因子是一种相对分子质量较小的结构相关性蛋白,具有定向细胞趋化作用,能促进炎症反应。C-C家族趋化因子受体9(C-C chemokine receptor 9,CCR9)及其配体25(C-C chemokine ligand 25,CCL25)参与调控多种恶性肿瘤的发生、发展,已成为肿瘤相关研究的新热点。CCR9/CCL25可能通过PI3K/AKT信号通路影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发展及转移。多数研究已证实,CCR9/CCL25对NSCLC的预后评估有一定意义。因此,对CCR9/CCL25生物轴的研究不仅可进一步阐明其在NSCLC中的作用机制,还能为临床寻找新的诊断及治疗靶点提供理论依据。该文就CCR9/CCL25在NSCLC中的作用机制及与预后的相关性进行综述。

CCR2/CCL2对脑缺血再灌注损伤影响的研究进展

CC趋化因子受体2(CCR2)是趋化因子受体中的重要一员,与其配体CC趋化因子配体2(CCL2)在神经炎症中发挥着重要的作用。本文综述了CCR2/CCL2的表达及功能,并探讨抑制CCR2/CCL2对脑缺血再灌注损伤的影响及其机制。抑制CCR2/CCL2可降低血脑屏障通透性,并通过影响单核/巨噬细胞、小胶质细胞和星形胶质细胞抑制炎症反应,进而减轻脑缺血再灌注损伤。因此,抑制CCR2/CCL2可能是治疗脑缺血损伤的潜在靶点,为相关药物研发提供依据。

眼针对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑组织趋化因子CCR2/CCL2表达的影响

目的观察眼针对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia referfusion injury, CIRI)大鼠缺血半暗带脑组织趋化因子CCR2(CC chemokine receptor 2)/CCL2(CC chemokine ligand 2)表达的影响,探讨眼针治疗脑缺血再灌注损伤的机制。方法应用线栓法复制脑缺血再灌注损伤大鼠模型,采用眼针治疗,将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、眼针组、非穴区组,每组10只,于再灌注后24 h进行神经功能缺损评分,采用ELISA法测定大鼠脑组织CCR2/CCL2表达的变化。结果与模型对照组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分明显下降,并显著降低脑组织CCR2/CCL2的表达(P<0.01)。结论眼针可明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经炎症反应,其机制可能与下调脑组织中CCR2/CCL2表达有关。

CCL2/CCR2信号通路在慢性肾脏病中的研究进展

慢性肾脏病(CKD)是一类肾脏结构和功能进行性恶化或不可逆损伤的慢性疾病,研究发现趋化因子CCL2及其受体CCR2参与CKD的发生发展,靶向CCL2/CCR2信号通路已逐渐成为CKD治疗领域的研究热点。本文围绕CCL2/CCR2信号通路在CKD中的作用和机制进行综述,以期进一步阐明CKD的发病机制,为以CCL2/CCR2为靶点的免疫治疗提供新的研究依据。

CCL2和CCR2在唾液腺腺样囊性癌中的表达及意义

目的:研究CCL2和CCR2在唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)中的表达及其与临床病理特点之间的关系。方法:采用免疫组织化学染色方法检测CCL2、CCR2在60例SACC及12例正常唾液腺组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征之间的关系。采用SPSS 19.0软件包对实验结果进行统计学分析。结果:与正常唾液腺组织相比,CCL2和CCR2在SACC组织中均呈现高表达,阳性表达率分别为91.7%和88.3%。CCL2和CCR2的表达与肿瘤临床分期、神经侵袭、肿瘤转移显著相关(P<0.05);与性别、年龄、病理分型无显著相关性(P>0.05)。结论:CCL2、CCR2的表达与SACC的临床病理特征密切相关,检测两者的表达对SACC的诊断和临床病理研究具有重要的参考价值。

CCL2-2518 A/G and CCR2 190 A/G do not influence the outcome of hepatitis C virus infection in the Spanish population

瞄准：估计在这 chemokine 和它的受体(CCR2 ) 之间的 CCL2 或相互作用是否与长期的丙肝的结果并且与对抗病毒的治疗的回答被联系。方法：有长期的丙肝和 193 非感染的匹配的控制的 284 个病人在这研究被包括。病人们作为 F0-F2 根据他们肝的纤维变性的 Scheuer 分数被分类( n = 202 )或 F3-F4 ( n = 82 )并且根据他们对反肝炎 C 的反应支撑了反应的病毒( HCV )治疗( SR ， n = 101 )或非支撑的反应( NSR ， n = 98 )。-2518 (A/G ) 的 Genotyping CCL2 用 PCR-RFLP 被执行， genotyping 190 (A/G ) 用 PCR 手臂的 CCR2 rs3138042 (G/A ) 的系统，和 genotyping CCR2 使用 Taqman 探针。结果： Univariate 分析识别了趋于影响纤维变性的 4 个参数(感染持续时间时间，病毒的遗传型，性和著名计算机生产厂商层次)和 7 个参数( CCL2G ， CCL2ACCR2A ，病毒血层次，纤维变性舞台，病毒的遗传型，感染持续时间时间和著名计算机生产厂商层次)显著地影响了或趋于影响反应到治疗。Multivariate 分析作为独立地影响了纤维变性舞台和病毒的遗传型的参数识别了性和著名计算机生产厂商层次，感染持续时间时间是独立地影响了反应到处理的二个参数。结论：我们变化在基因对 CCL2/CCR2 学习了的结果 indicate 不在西班牙的人口为 HCV 感染在到处理的结果和反应起一个主要作用。

依那西普缓解腰椎间盘突出模型大鼠的痛觉过敏并减少趋化因子CCL2和受体的表达

目的观察鞘内注射肿瘤坏死因子(TNF-α)抑制剂依那西普(etanercept)对腰椎间盘突出模型大鼠痛觉过敏的影响及背根神经节(DRG)和脊髓中趋化因子CCL2和其受体CCR2的表达变化。方法将大鼠随机分为:正常组(control组);假手术组(sham组)、自身髓核植入组(NP组)、NP+vehicle(vehicle组)、NP+etanercept(10μg)(10μg组)和NP+etanercept(100μg)(100μg组)。测定术前1 d及术后不同时间点左后爪机械性缩爪阈值(MWT)。实时荧光定量PCR法检测TNF-α、CCL2/CCR2 mRNA表达;免疫组化检测DRG中ED-1和ATF3的表达。结果 1)与sham组相比,NP组MWT在术后1 d明显降低(P<0.001),持续21 d以上(P<0.001);2)鞘内注射依那西普(100μg),在2,3,4 d都能缓解NP诱导的机械触痛觉过敏(P<0.001);3)术前鞘内注射依那西普(100μg),抑制了DRG和脊髓中CCL2和CCR2 mRNA的上调。结论鞘内注射依那西普能抑制自体髓核移植所致的神经病理性疼痛,其机制可能与抑制CCL2/CCR2的上调有关。

趋化因子受体CCR2拮抗剂在大鼠骨癌痛治疗中的可能机制

目的观察脊髓单核细胞趋化蛋白受体CCR2在大鼠骨癌痛形成过程中的可能机制。方法大鼠左侧胫骨骨髓腔内接种Walker256乳腺癌细胞制备骨癌痛模型。观察并测量各组大鼠术前1 d,术后3、6、9、10、11、12 d的机械痛阈值。术后12 d取材,免疫组织化学法检测脊髓背角星形胶质细胞标志物(GFAP)的平均光密度值(MOD),观察脊髓小胶质细胞增殖活化情况。结果与对照组相比,鞘内给予CCR2拮抗剂后大鼠机械痛阈值明显升高,脊髓GFAP表达明显降低(P<0.01)。结论鞘内注射CCR2特异性拮抗剂可能通过抑制脊髓星形胶质细胞的活化而缓解大鼠骨癌痛,CCR2可能是治疗骨癌痛新的靶点。