CCL2-2518位点基因多态性与重症肠道病毒71型感染相关性研究

目的研究CCL2-2518位点基因多态性与儿童重症肠道病毒71型(EV71)感染的相关性。方法收集2014年5月至2015年9月在青岛大学附属医院儿科检测为EV71阳性的手足口病合并中枢神经系统感染患儿188例,根据病情轻重分为轻症组和重症组。同时选择正常体检儿童235例作为正常对照组。提取患儿外周血白细胞基因组DNA,用多重高温连接酶技术(i MLDR)检测EV71感染患儿及正常对照组CCL2-2518位点基因多态性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清CCL2浓度。结果 EV71感染患儿与对照组相比,CCL2-2518位点各基因型分布及等位基因频率间差异无统计学意义(P>0.05)。重症组与轻症组相比,GG基因型和G等位基因频率更高(P<0.001)。EV71感染组血清CCL2浓度明显高于对照组(P<0.05),其中重症组CCL2浓度较轻症组及对照组均明显升高(P<0.05)。EV71感染组CCL2-2518位点各基因型间血清CCL2浓度比较:GG型高于AG型,AG型高于AA型,含G等位基因者(GG+AG)高于非G等位基因携带者(AA)(P<0.05)。结论 CCL2-2518位点G等位基因与EV71感染的严重程度相关,可能是EV71感染的易感因素。

HRM-非标记探针法检测CCL2-2518T>C突变方法的建立

目的建立一种高分辨率熔解曲线(HRM)-非标记探针的方法用于检测CCL2-2518T>C的单核苷酸多态性(SNP)。方法针对CCL2-2518 T>C,分别设计出针对野生型和突变型的两个非标记探针,采用HRM-非标记探针法对71名健康人群CCL2-2518位点的SNP进行检测,并采用TaqMan分型法进行验证。结果 HRM-非标记法的两个探针与TaqMan分型法分型结果一致,准确率100%;针对突变型(C)的探针明显好于针对野生型(T)的探针,其检测野生纯合型和突变纯合型的探针峰的温度之差分别为5.5℃和2.1℃。结论本研究建立的CCL2-2518 T>C位点突变检测的HRM-非标记探针方法是一种简单、廉价、灵敏、准确和快速的技术,适用于临床检测。