aFGF和genistein对大肠癌细胞株CCL229 PKC及ERK活性的影响

目的:观察aFGF及TPK抑制剂genistein对大肠癌细胞株CCL229细胞内PKC及ERK活性的影响,探讨其信号传导途径.方法:以不同浓度的aFGF(0.15 mg/L,0.30 mg/L,0.60mg/L,1.20 mg/L)和genistein(6.00mg/L,12.00mg/L,24.00mg/L,48.00mg/L)诱导CCL229细胞,利用[γ-^(32)P]ATP掺入外源性底物的方法,液体闪烁测定PKC及ERK活性.结果:随着aFGF浓度的增加,PKC及ERK活性随之升高,与aFGF浓度呈显著正相关(P<0.05).当aFGF浓度为1.20mg/L时,PKC(胞质),PKC(胞膜)和ERK活性分别为对照组的2.60,2.79,1.77倍.genistein抑制细胞内PKC及ERK活性,且与 genistein 浓度呈剂量依赖效应(P<0.05).当genistein浓度为48.00mg/L时,PKC(胞质),PKC(胞膜)和ERK活性分别为对照组的0.41,0.36,0.50倍.genistein对aFGF诱导的PKC及ERK活性抑制更显著.结论:大肠癌细胞株CCL229中aFGF受体具有TPK活性,TPK激活后促进蛋白质和酶磷酸化,导致PKC和ERK活性升高,进一步证明PKC及ERK确是TPK的下游信号分子.