CCL23/骨髓抑制因子1(MPIF-1)对于U937细胞的增殖、凋亡和分化的影响

CCL23/MPIF-1是人类趋化因子CC家族的一员,在血细胞中仅在单核细胞源的树突状细胞中持续表达,在体内和体外实验中对人、鼠的髓系祖细胞的增殖和分化均有明显的抑制作用。最近的研究发现,CCL23在儿童急性髓系白血病骨髓和外周血样本均有高表达。为了了解CCL23的高表达在白血病进展、治疗和预后中的意义,选用白血病细胞系U937细胞作为研究对象,加入人类重组CCL23培养72小时,用CCK-8试剂盒测细胞增殖,FITC-AnnexinV/PI法检测细胞凋亡率,并观察不同处理条件下细胞分化情况及CCL23受体CCR1的表达水平。结果发现:单独的CCL23对于U937细胞的增殖、凋亡和分化无明显作用(P>0.05);但在U937受PMA诱导分化的过程中,CCL23有明显的促分化作用,同时发现此过程中CCR1表达显著升高(P<0.05)。结论:CCL23对U937细胞无明显抑制作用,但可能与PMA产生协同诱导分化作用,而且该作用的出现可能与CCL23受体CCR1表达升高有关。

CCL23-CCR1趋化因子轴在上皮性卵巢癌疾病进展中的作用

目的研究CCL23-CCR1趋化因子轴在上皮性卵巢癌的疾病进展中的作用。方法首先对6例上皮性卵巢癌组患者及4例成年正常对照组血清中441种细胞因子行抗体芯片检测,筛选出差异表达蛋白CCL23;ELISA方法检测22例成年正常对照组血清及36例上皮性卵巢癌组患者血清中CCL23水平;qRT-PCR方法检测CCL23 mRNA在6例成年女性正常对照组和6例上皮性卵巢癌组组织中的表达;免疫组化方法分别对20例Ⅰ期、20例Ⅱ期,40例Ⅲ期、20例Ⅳ上皮性卵巢癌组原位病灶组织中趋化因子受体CCR1的表达进行检测。结果抗体芯片对血清中441种细胞因子进行比较,其中正常对照组血清CCL23表达水平(21924.20±2647.89)pg/ml,上皮性卵巢癌组患者血清CCL23水平(44902.00±2064.03)pg/ml,差异有统计学意义(t=-2.693,P=0.041);22例成年正常对照组血清CCL23表达水平(1157.80±457.40)pg/ml,36例上皮性卵巢癌组患者血清CCL23表达水平(1654.90±849.00)pg/ml,差异有统计学意义(t=-2.443,P=0.0188);上皮性卵巢癌组CCL23 mRNA表达较正常对照组CCL23 mRNA表达明显增高(t=-7.515,P=0.006)。上皮性卵巢癌组趋化因子CCL23受体CCR1免疫组化提示:CCR1在正常卵巢生发上皮(OSE)呈阴性表达,而在60例Ⅲ/Ⅳ期上皮性卵巢癌组原位病灶中阳性表达较40例Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌明显增强。结论CCL23-CCR1趋化因子轴可能在上皮性卵巢癌疾病进展中发挥作用。

CCL23及其受体CCR1与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的研究

目的研究趋化因子配体23(CCL23)及趋化因子受体1(CCR1)与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法 qRT-PCR法检测人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞C13K及其敏感细胞OV2008中CCL23及CCR1表达;慢病毒转染使OV2008细胞过表达CCL23,嘌呤霉素筛选阳性克隆,倒置荧光显微镜及qRT-PCR观察和检测慢病毒稳定转染效果;BX471(CCR1受体拮抗剂)干预,平板克隆及CCK-8法分别检测细胞增殖活力及顺铂半数抑制浓度(IC50);Western blot检测细胞CCL23、CCR1基因及耐药蛋白YAP表达。结果 qRT-PCR结果显示,C13K中CCL23及CCR1表达均高于OV2008(P<0.01);荧光显微镜下慢病毒转染OV2008细胞满视野绿色荧光表达,CCL23过表达组细胞CCL23 mRNA水平明显上升(P<0.001),成功建立OV2008细胞CCL23稳定表达株,CCL23过表达组细胞CCR1 mRNA表达却无改变;CCL23过表达后OV2008细胞增殖加速,对顺铂耐受性增加,相对于空白对照组及慢病毒空载体组细胞差异有统计学意义(P<0.01);BX471可抑制细胞CCR1及CCL23表达,同时降低细胞增殖活性,增加细胞对顺铂敏感性,抑制细胞中耐药蛋白YAP表达。结论 CCL23/CCR1趋化因子受体轴参与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药,其机制可能与CCL23/CCR1调控下游效应因子YAP表达有关。

CCL23在成人急性髓系白血病中的表达研究

目的探讨成人急性髓系白血病(AML)患者中CCL23表达与疾病的关系。方法收集67例成人骨髓标本(AML患者62例,正常人5例)和40例外周血血清标本(AML患者22例,正常人18例),分别采用实时定量PCR方法和ELISA法分析骨髓细胞中CCL23mRNA和外周血血清中CCL23蛋白的表达。结果成人AML患者骨髓CCL23mRNA和血清CCL23蛋白表达水平均显著高于正常人(均P<0.05),且CCL23mRNA表达与疾病进程变化有显著关联。结论成人AML中CCL23呈显著高表达,可作为AML患者临床特征性的观察指标之一。