CCR9/CCL25介导小鼠经生殖道hCGβ避孕疫苗粘膜免疫后B细胞归巢

目的:探讨hCGβ粘膜避孕疫苗体液免疫的分子机制。方法:分别用1010个重组乳酸杆菌Lb.pIlac、Lb.pIlac-hCGβ经小鼠生殖道粘膜途径免疫6～8周龄BALB/c小鼠,3周后相同剂量加强免疫1次。间接ELISA检测加强免疫后2周阴道灌洗液中抗hCGβIgG和IgA抗体滴度;ELISPOT检测分泌抗hCGβIgG和IgA抗体分泌细胞数;RT-PCR筛查小鼠子宫B细胞上18种趋化因子受体和相关趋化因子CCL25;FCM和ELISA分析CCR9/CCL25的表达。结果:经小鼠生殖道粘膜接种1010Lb.pIlac-hCGβ可在生殖道局部诱导产生抗hCGβIgG和IgA抗体,且以IgG抗体为主;局部存在抗hCGβIgG和IgA抗体分泌细胞,而以IgG抗体分泌细胞为主;粘膜免疫后,小鼠生殖道局部B细胞上CCR9表达增高,粘膜局部相应配体CCL25表达亦增高。结论:重组乳酸杆菌活疫苗Lb.pIlac-hCGβ经小鼠生殖道粘膜免疫可诱导有效的免疫应答;粘膜局部CCR9/CCL25可介导B细胞归巢至生殖道局部,这可能增强hCGβ粘膜避孕疫苗的避孕效果。

CCL25和LTBP2在非小细胞肺癌患者血清中的表达及在疾病诊断中的应用价值

目的探讨CCL25和LTBP2在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达及在疾病诊断中的应用价值。方法收集2018年9月至2021年9月本院收治的129例NSCLC患者作为观察组,另将同期129例健康体检者纳入对照组,采用酶联免疫吸附法检测血清CCL25和LTBP2水平,比较两组血清CCL25和LTBP2水平差异性,分析血清CCL25和LTBP2水平与NSCLC患者病理特征的关系及对NSCLC的诊断价值。结果观察组患者血清CCL25和LTBP2水平均明显高于对照组(P<0.05)。不同年龄、性别、病理类型的NSCLC患者血清CCL25和LTBP2水平间无显著性差异(P>0.05),但不同TNM分期、分化程度及是否发生淋巴结转移的NSCLC患者血清CCL25和LTBP2水平间存在显著性差异(P<0.05)。CCL25和LTBP2联合诊断NSCLC的曲线下面积为0.85,检测灵敏度为0.80,特异度为0.83。结论非小细胞肺癌患者血清中CCL25和LTBP2水平明显升高,二者可能是潜在的非小细胞肺癌诊断标志物。

CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白在非小细胞肺癌患者术前血清中的水平及其临床意义

目的:探讨CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)患者术前血清中的水平及其与患者临床病理特征的关系。方法:选取2014年9月至2015年4月在广西壮族自治区人民医院接受治疗的60例NSCLC患者作为观察组,另选取同期于本院行正常体检的60例健康志愿者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9的水平,分析CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白与NSCLC患者临床病理特征的关系。结果:NSCLC患者术前血清中CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白的水平均显著高于对照组(均P<0.001)。CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白水平与NSCLC患者原发肿瘤大小、淋巴结转移、病理类型和TNM分期等存在相关性(均P<0.05),与患者性别、年龄无明显相关关系(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,以血清CCL25水平334ng/L为临界值,诊断淋巴结转移的敏感度为74.2%,特异度为86.2%;以AKT蛋白水平345ng/L为临界值,其敏感度为71.0%,特异度为96.6%;以VEGF-D蛋白水平362ng/L为临界值,其敏感度为90.3%,特异度为96.6%;以MMP-9蛋白水平374μg/L为临界值,其敏感度为71.0%,特异度为89.7%。NSCLC患者术前血清CCL25蛋白水平与AKT、VEGF-D、MMP-9蛋白水平均呈正相关关系(r=0.863、0.785、0.881,均P<0.001)。结论:NSCLC患者术前血清CCL25、AKT、VEGF-D和MMP-9蛋白水平升高,且与肺癌的发生、发展和淋巴结转移有密切联系;AKT通路及其效应细胞因子VEGF-D和MMP-9有可能受CCR9/CCL25生物轴调节。

CCL25/CCR9在口腔扁平苔藓外周血的表达及对T细胞功能的影响

目的:探讨趋化因子25(CCL25)/CC族趋化因子受体9(CCR9)在口腔扁平苔藓(OLP)发病机制中的作用。方法:采用实时定量RT-PCR、WES全自动蛋白印迹法和酶联免疫吸附试验检测OLP患者外周血血浆中CCL25和T细胞中CCR9的表达。体外培养外周血T细胞,采用Transwell、CCK8、流式细胞术检测并分析CCL25/CCR9对OLP患者外周血T细胞功能的影响。结果:与健康对照组比较,OLP外周血T细胞CCR9和CCL25 mRNA及血浆中CCL25蛋白表达显著降低(P<0.01)。CCL25诱导T细胞迁移,OLP外周血T细胞趋化指数(CI)低于对照组(P<0.01),anti-CCR9 mAb阻断后CI降低(P<0.05)。与健康对照组比较,OLP外周血T细胞增殖活性升高、凋亡率下降(P<0.05),但CCL25及anti-CCR9 mAb对增殖活性和凋亡率并无影响(P>0.05)。结论:CCL25和CCR9在OLP外周血中低表达,其相互作用可介导T细胞迁移。CCL25/CCR9在OLP发病过程中可能主要参与炎细胞的募集过程。

CCL25/CCR9和CCL28/CCR10在仔猪胃肠道组织中的表达

【研究目的】旨在探讨CCL25/CCR9、CCL28/CCR10在仔猪胃肠道中的表达规律。【方法】通过常规RT-PCR检测CCL25/CCR9、CCL28/CCR10分别在15日龄和30日龄仔猪胃肠道不同部位的表达。【结果】CCL25mRNA主要在小肠表达,而CCR9mRNA在小肠、大肠及胃中均表达,且表达量较高;CCL28mRNA和CCR10mRNA在小肠、大肠及胃中均表达,并以后段肠道的表达量较高。CCL25/CCR9、CCL28/CCR10在30日龄仔猪胃肠道中的表达高于15日龄仔猪。【结论】初步得出CCL25/CCR9、CCL28/CCR10在仔猪胃肠道中的表达规律,并为进一步揭示在其它组织中的表达及它们的生物学作用奠定了基础。

CCL25/CCR9在溃疡性结肠炎中的表达研究

目的：研究趋化因子CCL25，CCL25的受体CCR9在溃疡性结肠炎（UC）中的表达情况以及与UC病变程度和范围的关系及相关性，探讨其在UC发病机制中的作用。方法用免疫组织化学法检测32例活动期UC及22例正常对照石蜡包埋组织中CCL25及CCR9的表达情况。结果 UC组CCL25及CCR9均为阳性表达。对照组为阴性或弱阳性表达。CCL25及CCR9在UC组的表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0.01）。UC病变范围越广、程度越重，CCL25及CCR9表达阳性率越高，CCL25和CCR9表达具有相关性（r=0.759，P〈0.01）。结论 CCL25/CCR9相互作用参与了UC的发生和发展。CCL25/CCR9高低反映了疾病的炎症程度，且可能作为药物治疗的潜在靶点。

肝纤维化和肝硬化患者肝内趋化因子CCL25和CX3CL1的表达变化

目的:观察趋化因子CCL25和CX3CL1在正常肝组织和肝纤维化与肝硬化病人肝组织中的表达变化。方法:ELISA法测定9例正常肝组织和10例肝纤维化与11例肝硬化病人肝组织中CCL25和CX3CL1的含量。结果:CCL25在正常肝组、肝纤维化组和肝硬化组的含量分别为(4.06±2.23)、(14.46±4.10)和(21.97±2.98)ng/g。肝硬化组的含量显著高于正常肝组和肝纤维化组,肝纤维化组的含量又显著高于正常肝组。CX3CL1在正常肝组、肝纤维化组和肝硬化组的的含量分别为(4.84±3.72)、(13.72±5.59)和(14.70±3.52)ng/g。肝纤维化组和肝硬化组的含量均显著高于正常肝组,但肝纤维化组与肝硬化组的含量差异无统计学意义。结论:趋化因子CCL25和CX3CL1在人的正常肝组织中有表达,但表达的数量水平较低。肝脏发生纤维增生性损伤时,肝内CCL25和CX3CL1的含量都显著增加,随着病变由肝纤维化向肝硬化阶段发展,肝内CCL25和CX3CL1的含量呈现出不同变化,CCL25表现为进一步升高,CX3CL1表现为在高水平维持。

恒河猴胃肠道相关淋巴组织中CCL25、CCR9、CCL20及CCR6转录水平的定量分析

目的:阐明恒河猴胃肠道相关淋巴组织中CCL25、CCR9、CCL20和CCR6转录产物的分布和丰度。方法:建立CCL25、CCR9、CCL20和CCR6转录水平的Taqman探针实时定量PCR检测方法。提取胃肠道相关淋巴组织和非胃肠道相关淋巴组织的总细胞RNA,检测CCL25、CCR9、CCL20和CCR6的mRNA的存在和表达水平。结果:(1)在恒河猴的所有检测组织中CCL25、CCR9、CCL20和CCR6的mRNA均有表达。在胃肠道相关淋巴组织中,CCL25和CCR9的mRNA表达主要在小肠而不是大肠,而CCL20和CCR6的mRNA则表达在胃肠道所有节段中。在非胃肠道相关淋巴组织中,CCL25和CCR9的mRNA在胸腺中的表达水平最高;而CCR6 mRNA在脾脏和腹股沟淋巴结中含量最丰富。(2)相关分析结果显示CCL25与CCR9mRNA的表达具有显著的相关性(P=0.002 0,r2=0.480 2),CCR9与CCR6 mRNA的表达也具有相关性(P=0.003 9,r2=0.436 4)。结论:与人相似,CCL25、CCR9、CCL20和CCR6 mRNA在恒河猴的胃肠道相关淋巴组织中高度且有区别地表达,表明恒河猴适宜用于与这些分子相关的黏膜免疫及人类疾病研究。

免疫毒素CCL25-PE38抗急性T淋巴细胞白血病实验研究

目的探讨免疫毒素CCL25-PE38对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞系MOLT4(天然高水平表达CCR9)的杀伤作用,以期为T-ALL的靶向治疗提供基础。方法通过流式细胞术、共聚焦显微术检测CCL25-PE38与MOLT4细胞的结合及内化,Transwell趋化小室检测其趋化能力,细胞增殖试剂WST-1检测其细胞杀伤能力,Annexin V-FITC/PI染色检测其凋亡诱导效应,建立SCID小鼠白血病细胞异种移植肿瘤(CCR9+肿瘤)模型检测CCL25-PE38的抑瘤效果。结果 WST-1检测结果显示CCL25-PE38能特异性杀伤MOLT4细胞;Annexin V-FITC/PI染色显示CCL25-PE38主要通过凋亡诱导效应引起MOLT4细胞死亡;在SCID小鼠白血病细胞异种移植瘤模型中,注入CCL25-PE38能缓解CCR9+肿瘤的生长。结论CCL25-PE38通过凋亡诱导作用引起MOLT4细胞死亡,缓解异种移植CCR9+肿瘤的生长。

麻杏石甘汤对流感病毒感染小鼠肺组织CCL3、CCL25表达水平的影响

目的从肺组织趋化因子CCL3和CCL25蛋白表达水平探索麻杏石甘汤抗流感病毒的效应机制。方法经鼻腔接种建立流感病毒肺部感染小鼠模型。实验设正常对照组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒口服液组、麻杏石甘汤组。各治疗组小鼠经灌胃给药3、7 d后以常规法检测体质量、肺指数;以HE染色法观察肺组织的病理变化;以Western blot法检测肺组织CCL3和CCL25的蛋白表达水平。结果(1)与正常对照组比较,模型对照组小鼠体质量显著降低(P<0.01),肺指数显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,给药治疗3、7 d后,麻杏石甘汤组及其他药物组小鼠体质量显著升高(P<0.01),肺指数显著降低(P<0.05或P<0.01)。(2)与正常对照组比较,模型对照组小鼠肺组织充血水肿,大量淋巴细胞及巨噬细胞浸润。与模型对照组比较,给药治疗3、7 d后,麻杏石甘汤组及其他药物组小鼠肺组织病理损伤得到明显改善。(3)与正常对照组比较,模型对照组小鼠肺组织CCL3和CCL25蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,给药治疗3 d后,麻杏石甘汤组及其他药物组小鼠肺组织CCL3和CCL25蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论麻杏石甘汤作为有效的抗流感病毒中药复方,能有效减轻肺部炎症,其可能是通过下调趋化因子CCL3和CCL25的表达水平而缓解流感病毒感染小鼠的肺部损伤。

CCR9/CCL25在非小细胞肺癌中的作用机制及预后分析的研究进展

趋化因子是一种相对分子质量较小的结构相关性蛋白,具有定向细胞趋化作用,能促进炎症反应。C-C家族趋化因子受体9(C-C chemokine receptor 9,CCR9)及其配体25(C-C chemokine ligand 25,CCL25)参与调控多种恶性肿瘤的发生、发展,已成为肿瘤相关研究的新热点。CCR9/CCL25可能通过PI3K/AKT信号通路影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发展及转移。多数研究已证实,CCR9/CCL25对NSCLC的预后评估有一定意义。因此,对CCR9/CCL25生物轴的研究不仅可进一步阐明其在NSCLC中的作用机制,还能为临床寻找新的诊断及治疗靶点提供理论依据。该文就CCR9/CCL25在NSCLC中的作用机制及与预后的相关性进行综述。

肝内趋化因子CCL21和CCL25在不同肝组织中的表达变化

目的观察正常肝、肝纤维化和肝硬化患者肝组织内趋化因子CCL21和CCL25的表达变化。方法ELISA方法检测9例正常肝、10例肝纤维化、11例肝硬化患者肝组织中CCL21和CCL25的含量。结果正常组、肝纤维化组、肝硬化组的CCL21含量分别为(0.14±0.21)、(0.92±0.69)和(3.22±1.45)pg/mg;肝硬化组的含量高于正常组和肝纤维化组,肝纤维化组和正常组CCL21的含量差异无统计学意义。正常组、肝纤维化组、肝硬化组的CCL25含量分别为(4.06±2.23)、(14.46±4.10)和(21.97±2.98)pg/mg;肝硬化组的含量高于正常组和肝纤维化组,肝纤维化组的含量高于正常组。结论肝脏发生纤维增生性损伤时,肝内CCL21和CCL25的含量显著增加,随着病变由肝纤维化向肝硬化阶段发展,肝内CCL21和CCL25含量也进一步升高,提示CCL21和CCL25很可能是肝纤维化和肝硬化状态下趋化骨髓源性肝干细胞迁移到肝脏修复损伤的重要因素。

CCR9及CCL25趋化因子轴在口腔鳞癌转移中的作用

目的研究趋化因子受体9(CC chemokine receptor 9,CCR9)及其配体趋化因子25(CC motif chemokine ligand 25,CCL25)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)转移中的作用。方法采用免疫组织化学染色检测CCR9和CCL25在OSCC肿瘤组织和癌旁组织中的表达和定位。细胞实验采用重组CCL25、CCR9抗体以及ERK1/2/P38抑制剂预处理OSCC细胞系(CAL27和SCC-9),通过免疫印迹和免疫荧光检测癌细胞株中血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)和金属基质蛋白酶7(matrix metalloproteinase7,MMP7)的表达,同时检测细胞迁移和侵袭。结果伴有淋巴结转移的OSCC肿瘤组织中CCR9和CCL25的表达显著高于无转移组。细胞实验发现,CCR9/CCL25趋化因子轴通过ERK1/2/p38信号通路刺激VEGF-C和MMP7的表达,从而促进OSCC细胞迁移和侵袭。结论CCR9/CCL25趋化因子轴在促进OSCC转移中起重要作用,有望成为OSCC转移治疗的新靶点。

CCL25/CCR9与骨髓祖细胞胸腺归巢

在骨髓中多种祖细胞有T细胞系潜能,但骨髓祖细胞胸腺归巢具有选择性.骨髓祖细胞胸腺归巢是多级粘附分子和趋化因子的级联过程,趋化因子CCL25及其受体CCR9在这一过程中发挥了重要作用.综述了CCL25/CCR9的结构特征及其对骨髓祖细胞胸腺归巢的作用和调节机制.

CCR9和CCL25蛋白在上皮性卵巢癌中表达及临床意义

目的:探讨CCR9和CCL25蛋白在不同卵巢组织中的表达及其与上皮性卵巢癌患者临床病理因素之间的关系。方法:通过组织芯片结合免疫组织化学法检测78例上皮性卵巢癌组织和30例正常卵巢组织中CCR9和CCL25表达水平,结合上皮性卵巢癌病人的临床病理资料,进行统计分析。结果:CCR9和CCL25在上皮性卵巢癌中高表达,在正常卵巢组织中低表达,二者的表达与上皮性卵巢癌的组织类型、患者年龄无显著相关(P>0.05),而与淋巴结转移、组织学分级和临床分期有显著相关(P<0.05);上皮性卵巢癌组织中CCR9与CCL25表达相关(P<0.05)。结论:CCR9和CCL25在上皮性卵巢癌的发生发展中可能起重要作用,二者可能是上皮性卵巢癌治疗的一个潜在的分子靶点。

细胞因子CCR9/CCL25对鼻咽癌细胞CNE-2增殖的影响

目的:探讨CCR9/CCL25通路对鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响。方法:培养CNE-2细胞,在培养体系中加入不同浓度的CCL25(0,10,25,50和100ng/ml),用MTT法检测各组细胞的增殖率,确定促CNE-2细胞增殖的最佳CCL25浓度。然后在培养体系中同时加入不同浓度的anti-CCR9(0,0.25,0.5,1,2μg/ml),观察此时CNE-2细胞的增殖情况。结果:不同浓度的CCL25均能促进CNE-2细胞的增殖(P<0.05)。而且其促细胞增殖作用呈现浓度依赖性,50ng/ml时达到最高水平。Anti-CCR9能阻断CCL25的促CNE-2增殖作用(P<0.05),而且也呈浓度依赖性。结论:CCL25具有促进CNE-2细胞增殖的作用,并呈现浓度依赖性。Anti-CCR9能阻断CCL25的促CNE-2增殖作用,并呈浓度依赖性。

趋化因子受体CCR9及其配体CCL25在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究趋化因子受体CCR9及其配体CCL25在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达及临床意义。方法:通过免疫组化法检测68例OSCC组织和30例正常口腔黏膜组织(normal oral mucosa,NOM)中CCR9和CCL25的表达情况。结合临床病理资料,分析CCR9和CCL25与口腔鳞癌患者临床病理特征及两者相互之间表达的相关性。结果:1)口腔鳞癌组织中CCR9和CCL25的阳性表达率分别为61.8%(42/68)及58.8%(40/68),显著高于NOM(P<0.05);2)CCR9和CCL25在OSCC中的表达与口腔鳞癌分化程度、TNM分期及是否有淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与年龄、性别及肿瘤直径大小无关(P>0.05);3)在OSCC组织中,CCR9与CCL25蛋白之间的表达呈正相关(P<0.05)。结论:CCR9和CCL25的过表达可能参与口腔鳞癌细胞的发生、发展、侵袭和转移,此发现或可为OSCC的病因学研究提供新的依据。

CCL25和CCL28及其相应受体CCR9和CCR10

CCL25和CCL28是CC趋化因子家族成员,主要表达于胸腺树突状细胞和黏膜上皮细胞,CCL25和CCL28相应的受体分别是CCR9和CCR10,表达于T淋巴细胞和B淋巴细胞。CCL25和CCL28及其相应受体对循环IgA浆母细胞和T淋巴细胞的归巢起重要作用,而且CCL28还具有广谱的抗微生物活性。

人CCL25基因慢病毒表达载体的构建及其对TEC黏附分子表达的影响

通过构建人趋化因子CCL25基因过表达慢病毒载体并转染人原代胸腺上皮细胞(TEC),探讨过表达CCL25对人TEC黏附分子表达的影响,为研究CCL25在重症肌无力患者胸腺异常表达的作用奠定基础。PCR和DNA测序鉴定携带CCL25基因的慢病毒构建成功,病毒滴度约为4×108 Tu/ml,慢病毒对TEC感染效率达80%。Western blotting结果显示感染组细胞CCL25蛋白表达量显著增高。RT-PCR结果显示,与对照组相比,感染组HLA-A、HLA-DR表达无显著变化,P-selectin、VCAM-1和ICAM-1表达显著增高,提示我们人胸腺上皮细胞CCL25基因的过表达可一定程度影响TEC的功能特性,可能以通过增加P-selectin、VCAM-1和ICAM-1的表达量来影响淋巴祖细胞的胸腺归巢或胸腺内胸腺细胞的阳性选择过程,进而引起胸腺细胞发育异常,细胞亚群比例失调。

肝纤维化大鼠肝脏胸腺表达趋化因子和神经趋化蛋白的表达变化

目的:观察趋化因子胸腺表达趋化因子(CCL25)和神经趋化蛋白(CX3CLl)在正常大鼠肝脏组织和肝纤维化大鼠肝脏内的表达变化。方法:研究正常肝组、肝纤维化造模4周组和肝纤维化造模6周组,每组10例,以ELISA法测定大鼠肝脏组织中CCL25和CX3CL1的含量。结果:CCL25在正常肝组、肝纤维化造模4周组和肝纤维化造模6周组的含量分别为(5.1±1.4)ng/g、(11.5±3.3)ng/g、(15.2±3.5)ng/g,肝纤维化组的含量显著高于正常肝组。CX3CL1在正常肝组、肝纤维化造模4周组和肝纤维化造模6周组的含量分别为(3.1±1.3)ng/g、(9.9±2.5)ng/g、(10.4±2.7)ng/g,肝纤维化组的含量均显著高于正常肝组(P<0.01)。结论:趋化因子CCL25和CX3CLl在大鼠的正常肝组织中有表达,但表达的数量水平较低。肝脏发生纤维增生性损伤时,肝内CCL25和CX3CL1的含量都显著增加,随着病变由肝纤维化向肝硬化阶段发展,肝内CCL25和CX3CLl的含量呈现出不同变化,CCL25表现为进一步升高,CX3CL1表现为维持在高水平。