CCNB1基因通过调控PI3K/Akt信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的探讨细胞周期蛋白B1(CCNB1)基因对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人正常口腔上皮细胞系HOK和人口腔鳞癌细胞系SCC-15、SCC-4、Cal-27中CCNB1基因的表达量,将CCNB1 siRNA(si-CCNB1)和阴性对照(si-NC)转染至SCC-15细胞,同时设置空白对照(Control),qRT-PCR和Western blot检测各组SCC-15细胞中CCNB1的表达,MTT实验、Transwell实验和划痕实验分别检测沉默CCNB1对SCC-15细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9、PI3K、Akt和p-Akt蛋白的表达。结果CCNB1在口腔鳞癌细胞系中的表达显著高于正常口腔上皮细胞(P<0.05),si-NC组SCC-15细胞中CCNB1 mRNA和蛋白的表达与Control组无统计学差异(P>0.05);si-CCNB1组中CCNB1 mRNA和蛋白的表达明显低于si-NC组和Control组(P<0.05),si-NC组SCC-15细胞增殖、侵袭和迁移能力及MMP-2、MMP-9、PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达与Control组无统计学差异(P>0.05);si-CCNB1组细胞增殖、侵袭和迁移能力及MMP-2、MMP-9、PI3K、p-Akt蛋白表达均明显低于si-NC组和Control组(P<0.05),两组间Akt蛋白表达无统计学差异(P>0.05)。结论CCNB1在口腔鳞癌细胞系中呈高表达,沉默CCNB1基因能够抑制人口腔鳞癌SCC-15细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的激活有关。

基于生物信息学分析CCNB1在肺腺癌组织中的表达及其与预后的关系

目的评估细胞周期蛋白B1(cyclin B1,CCNB1)基因表达与肺腺癌预后的相关性。方法使用Oncomine、STRING、人类蛋白质图谱、癌症基因组图谱等数据库以及Kaplan-Meier、Cox回归分析、受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线、Spearman相关分析等方法来验证CCNB1对肺腺癌患者的影响。结果CCNB1在肺腺癌组织中高表达,且与肺腺癌患者的T分期(P=0.001)、N分期(P<0.001)、病理分期(P<0.001)以及性别(P=0.008)等临床特征相关。单因素Cox回归分析结果显示CCNB1的表达、T分期、N分期、M分期、病理分期是影响肺腺癌患者总生存率的因素(P<0.05),多因素Cox回归分析显示CCNB1的表达、T分期是肺腺癌患者总生存率的独立危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier分析得出,CCNB1高表达与较短的总生存期[风险比(hazard ratio,HR)=1.60,95%置信区间(confidence interval,CI)(1.20,2.14),P=0.002]、疾病特异性生存期[HR=1.68,95%CI(1.16,2.44),P=0.006]、无进展间期[HR=1.42,95%CI(1.09,1.85),P=0.009]相关。ROC曲线表明CCNB1可能是肺腺癌的诊断分子[曲线下面积=0.980,95%CI(0.967,0.993)]。Spearman相关分析显示,CCNB1的表达与T辅助细胞2(r_(s)=0.805,P<0.001)及T辅助细胞(r_(s)=0.103,P=0.017)的浸润呈正相关,与自然杀伤细胞(r_(s)=-0.195,P<0.001)、巨噬细胞(r_(s)=-0.134,P=0.002)、T细胞(r_(s)=-0.092,P=0.033)的浸润呈负相关。结论与正常组织相比,CCNB1在肺腺癌中高表达,与不良预后具有相关性,可能为肺腺癌患者提供潜在的治疗靶点。