槲皮素通过抑制MIP-1α/CCR1/CCR5信号通路减轻大鼠带状疱疹后神经痛的机制

目的 探讨槲皮素(Que)对大鼠带状疱疹后神经痛(PHN)及趋化因子配体3(CCL3,即MIP-1α)/C-C趋化因子受体(CCR)1/CCR5信号通路的影响。方法 将60只大鼠分为对照组(Con组)、PHN组、L-Que组(30 mg/kg)、M-Que组(60 mg/kg)、H-Que组(120 mg/kg)以及H-Que+MIP-1α组(120 mg/kg Que+0.4μg/kg重组MIP-1α)。检测各组大鼠机械痛阈值(PWT)、热痛阈值(TWL);试剂盒检测外周组织液腺苷、腺嘌呤核糖核苷酸(AMP)、腺苷二磷酸(ADP)以及脊髓背角样本肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;通过HE染色观察脊髓背角病理切片;免疫荧光染色检测脊髓背角小胶质细胞活化情况;Western blot检测MIP-1α/CCR1/CCR5信号通路蛋白表达。结果 PHN组脊髓背角组织出现破裂现象,神经束排列混乱,炎性细胞浸润、水肿,神经元轻微萎缩现象。与Con组相比,PHN组PWT值、腺苷、AMP、ADP水平降低(P<0.05),TWL值、TNF-α、IL-1β水平、Iba1阳性小胶质细胞数量以及MIP-1α、CCR1、CCR5蛋白水平均升高(P<0.05);Que治疗后,大鼠神经束排列杂乱现象有所改善,炎性细胞浸润减少,神经元萎缩现象减轻;与PHN组相比,L-Que组、M-Que组、H-Que组的PWT值、腺苷、AMP、ADP水平升高(P<0.05),TWL值、TNF-α、IL-1β水平、Iba1阳性小胶质细胞数量以及MIP-1α、CCR1、CCR5蛋白水平均降低(P<0.05),且Que作用效果呈剂量依赖性;与H-Que组相比,H-Que+MIP-1α组的PWT值、腺苷、AMP、ADP水平降低(P<0.05),TWL值、TNF-α、IL-1β水平、Iba1阳性小胶质细胞数量以及MIP-1α、CCR1、CCR5蛋白水平均升高(P<0.05)。结论 Que可能通过抑制MIP-1α/CCR1/CCR5信号通路减轻大鼠炎症反应,进而减轻PHN。

晚期肺腺癌瘤内趋化因子CCR1、CXCR6和CXCL9对免疫治疗的预测及预后作用分析

目的构建能够预测晚期肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)患者免疫检查点阻断(immune checkpoint blockade,ICB)治疗疗效与预后的趋化因子模型。方法从既往研究数据中回顾性收集确诊为晚期LUAD且经过ICB治疗的42例患者(训练队列),取得其ICB治疗前肿瘤组织转录组测序数据,通过生物信息学方法,筛选出显著影响ICB治疗疗效与患者生存预后的趋化因子,通过无进展生存期(progression-free disease,PFS)评价疗效,通过总生存期(overall survival,OS)评价患者的预后。从高通量基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中的数据集(GSE 135222)下载25例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)转录组测序数据和相关的生存数据,将其作为验证队列。结果通过单因素Cox回归分析,筛选出9个与晚期LUAD患者良好OS显著相关的趋化因子,其中CCR1、CXCR6和CXCL9高表达的患者明显具有更长的OS。基于这3个趋化因子的表达量构建风险模型,生存分析结果表明风险分数与患者的PFS和OS呈负相关,即低风险(risk score≤-1.33)的晚期LUAD患者在ICB治疗中明显获益更多。低风险组中位PFS为19.7个月对比高风险组(risk score>-1.33)2.9个月[95%可信区间(confidence interval,CI)为0.12~0.51,P<0.001]。中位OS低风险组未达到对比高风险组6.0个月(95%CI 0.08~0.38,P<0.001)。GEO数据集验证了该结果,中位PFS低风险(risk score≤-1.85)对比高风险(risk score>-1.85)为2.7个月对比1.2个月(95%CI 0.12~0.93,P=0.009)。结论CCR1、CXCR6和CXCL9高表达表明晚期LUAD患者疾病进展的风险较低,与患者良好的PFS和OS相关,可能为晚期LUAD患者的ICB辅助治疗提供新的方向。

骨髓间充质干细胞外泌体miR-126-3p靶向CCR1抑制非小细胞肺癌细胞恶性增殖及转移

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)来源的外泌体中miR-126-3p靶向趋化因子受体1(chemokine receptor 1,CCR1)对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法培养BMSCs,提取外泌体并通过外泌体标志蛋白CD63和TSG101进行鉴定;外泌体共培养A549细胞不同时长(0、24、48、72 h)后,CCK-8检测细胞存活率,q RT-PCR检测miR-126-3p和CCR1 m RNA表达,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blotting检测CCR1、上皮钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、神经钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(Vimentin)相对表达。结果外泌体呈边缘高亮、中间灰暗的圆形或椭圆形杯状结构,粒径分布范围152 nm左右,有CD63、TSG101蛋白表达;外泌体中miR-126-3p表达高于A549细胞,A549细胞中CCR1 m RNA表达高于外泌体,而在A549细胞与外泌体共培养后,A549细胞中miR-126-3p表达升高,CCR1表达降低;A549细胞与外泌体共培养0、24、48、72 h,细胞的存活率、迁移和侵袭能力和CCR1、N-cad和Vimentin蛋白表达及CCR1 m RNA表达均随着培养时间的延长逐渐降低,而miR-126-3p水平和E-cad蛋白表达随着培养时间的延长逐渐升高。结论BMSCs来源的外泌体与A549细胞共培养可提高细胞中miR-126-3p的表达,miR-126-3p通过靶向抑制CCR1表达可降低A549细胞增殖、迁移和侵袭能力。

趋化因子受体CCR1在人大肠癌组织中的表达及其与淋巴结转移的相关性

目的:研究趋化因子受体CCR1在大肠癌中的表达,探讨其与淋巴转移的关系。方法:采用SP免疫组织化学方法检测98例临床新鲜标本,其中包括15例癌旁正常大肠黏膜组织及83例大肠癌组织中CCR1的表达情况,计算大肠癌组织中的微淋巴管密度(LMVD)与微血管密度(MVD),并进行CCR1表达与大肠癌淋巴结转移的相关性分析。结果:CCR1在浸润程度深、分化程度低、有淋巴结转移及Dukes分期较晚的大肠癌组织中的阳性表达率高于浸润程度浅(P<0.05)、分化程度高(P<0.05)、无淋巴结转移(P<0.01)及Dukes分期较早(P<0.05)的大肠癌组织。CCR1表达阳性的大肠癌组织LMVD高于CCR1表达阴性的大肠癌组织LMVD(P<0.01)。而CCR1表达阳性的大肠癌组织与CCR1表达阴性的大肠癌组织中,MVD无统计学差异。结论:趋化因子受体CCR1在大肠癌组织中表达增高,并可能与大肠癌的淋巴结转移增加有关,具有一定的诊断价值。

多发性骨髓瘤骨髓单个核细胞CCR1和CCR5的表达及临床意义

目的:探讨趋化因子受体CCR1和CCR5在多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达及临床意义。方法:半定量RT-PCR检测28例MM患者BMMNC中的CCR1和CCR5 mRNA水平。结果:46.4%患者同时表达CCR1、CCR5,17.86%患者仅表达CCR1,7.1%患者仅表达CCR5;骨质破坏>2级患者的CCR1、CCR5相对灰度值明显高于骨质破坏≤2级的患者(P<0.05);高度危险组中的CCR1、CCR5相对灰度值明显高于中、低度危险组(P<0.05),而中、低度危险组中的CCR1、CCR5相对灰度值无显著性差异(P>0.05)。结论:大部分MM患者均表达CCR1和CCR5受体,监测CCR1、CCR5两种受体在MM中BMMNC的表达可以作为评价患者骨质破坏及预后的指标。

CCR1在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的研究趋化因子受体1(CC chemokine receptor 1,CCR1)在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法运用免疫组化染色法及荧光定量PCR方法检测71例鼻咽癌组织及71例癌旁组织中CCR1的表达水平,分析CCR1表达与鼻咽癌患者临床病理特征之间的关系。结果免疫组化结果显示,CCR1在鼻咽癌组织中的阳性率为77.5%(55/71),在癌旁组织中的阳性率为21.1%(15/71),鼻咽癌组织中CCR1表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);荧光定量PCR检测结果显示,在鼻咽癌组织中CCR1 mRNA的表达水平显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。CCR1的表达与鼻咽癌患者的年龄、性别无显著相关性,而与患者的临床分期、T分期、分化程度、淋巴结转移呈正相关关系。结论 CCR1在鼻咽癌的发生发展中可能起到癌基因的作用,CCR1表达水平可作为判断鼻咽癌临床预后的预测指标。

受激活调节正常T细胞表达和分泌因子及其受体CCR1、CCR5在大鼠附睾的表达与定位

目的：观察受激活调节正常T细胞表达和分泌因子（RANTEs）与其受体CCR1、CCR5在大鼠附睾中的表达和定位。方法：采用免疫组织化学法检测成年大鼠附睾上皮RANTES及其受体的细胞定位，免疫荧光双标染色分别显示RANTES与CCR1、CCR5的细胞共定位情况。RT-PCR检测RANTES及其受体mRNA表达水平，免疫印迹检测RAN—TES及其受体的蛋白量。结果：RANTES与其受体CCR1、CCR5在大鼠附睾各段呈特异性表达。免疫印迹在大鼠附睾各段检测到RANTES及其受体CCR1、CCR5特异性蛋白条带。RANTES与其受体CCR1、CCR5在大鼠附睾上皮主要表达于基细胞。双重免疫荧光显示RANTES与CCR1、CCR5在附睾管基细胞共存。结论：RANTES可能通过自分泌或（和）旁分泌方式在大鼠附睾基细胞功能活动方面起重要作用。

北京黑猪DKK3和CCR1基因多态性检测及其与背膘厚的关联分析

旨在探讨DKK3和CCR1基因多态性及其对北京黑猪背膘厚的影响,以期能够筛选出可用于提高北京黑猪背膘厚性状的分子标记,为北京黑猪优良性状定向选育提供依据。本研究以413头健康的北京黑猪为试验材料,对其进行DNA提取、PCR扩增、基因测序筛选候选基因的SNPs,同时利用SAS 9.2软件对突变位点的不同基因型分别与北京黑猪的六七肋背膘厚和腰荐部背膘厚进行关联分析。结果显示,在北京黑猪DKK3基因的外显子区共检测到10个SNPs,包含1个可变剪切突变、1个错义突变和8个3′UTR突变,其中有4个3′UTR突变位点均与腰荐部背膘厚显著关联(P<0.05),分别为g.47443779 T>C、g.47444258 C>T、g.47444912 G>T和g.47445304 T>C,其余位点与六七肋背膘厚和腰荐部背膘厚均不显著关联(P>0.05)。在CCR1基因的外显子区共检测到3个SNPs,包含2个同义突变和1个错义突变,其中1个同义突变位点g.29229037 G>A与六七肋背膘厚显著关联(P<0.05)。对DKK3的10个SNPs进行连锁不平衡分析,结果显示,g.47443779 T>C和g.47443783 C>T处于完全连锁状态(D’=1),g.47443783 C>T和g.47443858 C>T处于完全连锁状态(D’=1),g.47444258 C>T和g.47444275 C>T呈现高度连锁状态(D’=0.98)。综上所述,DKK3和CCR1基因的SNPs分别与北京黑猪的腰荐部背膘厚和六七肋背膘厚有显著关联性,可为北京黑猪背膘厚的早期分子选育提供参考。

CCL23及其受体CCR1与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的研究

目的研究趋化因子配体23(CCL23)及趋化因子受体1(CCR1)与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法 qRT-PCR法检测人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞C13K及其敏感细胞OV2008中CCL23及CCR1表达;慢病毒转染使OV2008细胞过表达CCL23,嘌呤霉素筛选阳性克隆,倒置荧光显微镜及qRT-PCR观察和检测慢病毒稳定转染效果;BX471(CCR1受体拮抗剂)干预,平板克隆及CCK-8法分别检测细胞增殖活力及顺铂半数抑制浓度(IC50);Western blot检测细胞CCL23、CCR1基因及耐药蛋白YAP表达。结果 qRT-PCR结果显示,C13K中CCL23及CCR1表达均高于OV2008(P<0.01);荧光显微镜下慢病毒转染OV2008细胞满视野绿色荧光表达,CCL23过表达组细胞CCL23 mRNA水平明显上升(P<0.001),成功建立OV2008细胞CCL23稳定表达株,CCL23过表达组细胞CCR1 mRNA表达却无改变;CCL23过表达后OV2008细胞增殖加速,对顺铂耐受性增加,相对于空白对照组及慢病毒空载体组细胞差异有统计学意义(P<0.01);BX471可抑制细胞CCR1及CCL23表达,同时降低细胞增殖活性,增加细胞对顺铂敏感性,抑制细胞中耐药蛋白YAP表达。结论 CCL23/CCR1趋化因子受体轴参与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药,其机制可能与CCL23/CCR1调控下游效应因子YAP表达有关。

CCL23-CCR1趋化因子轴在上皮性卵巢癌疾病进展中的作用

目的研究CCL23-CCR1趋化因子轴在上皮性卵巢癌的疾病进展中的作用。方法首先对6例上皮性卵巢癌组患者及4例成年正常对照组血清中441种细胞因子行抗体芯片检测,筛选出差异表达蛋白CCL23;ELISA方法检测22例成年正常对照组血清及36例上皮性卵巢癌组患者血清中CCL23水平;qRT-PCR方法检测CCL23 mRNA在6例成年女性正常对照组和6例上皮性卵巢癌组组织中的表达;免疫组化方法分别对20例Ⅰ期、20例Ⅱ期,40例Ⅲ期、20例Ⅳ上皮性卵巢癌组原位病灶组织中趋化因子受体CCR1的表达进行检测。结果抗体芯片对血清中441种细胞因子进行比较,其中正常对照组血清CCL23表达水平(21924.20±2647.89)pg/ml,上皮性卵巢癌组患者血清CCL23水平(44902.00±2064.03)pg/ml,差异有统计学意义(t=-2.693,P=0.041);22例成年正常对照组血清CCL23表达水平(1157.80±457.40)pg/ml,36例上皮性卵巢癌组患者血清CCL23表达水平(1654.90±849.00)pg/ml,差异有统计学意义(t=-2.443,P=0.0188);上皮性卵巢癌组CCL23 mRNA表达较正常对照组CCL23 mRNA表达明显增高(t=-7.515,P=0.006)。上皮性卵巢癌组趋化因子CCL23受体CCR1免疫组化提示:CCR1在正常卵巢生发上皮(OSE)呈阴性表达,而在60例Ⅲ/Ⅳ期上皮性卵巢癌组原位病灶中阳性表达较40例Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌明显增强。结论CCL23-CCR1趋化因子轴可能在上皮性卵巢癌疾病进展中发挥作用。

支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL3、CCL2表达及与肺功能和气道炎症的关系

目的探讨支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL3、CCL2表达水平及与肺功能及气道炎症的关系。方法选取2017年1月至2018年4月接受治疗的支气管哮喘患儿123例,其中急性发作期患儿68例,缓解期55例,另选同期来院体检的健康儿童45例为对照组。对受试者进行肺功能检查,RT-PCR检测痰上清液中CXCR2、CCR1 mRNA表达水平,采用ELISA检测痰液中CCL2、CCL3、IL-4、IL-8、IFN-γ水平,分析支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3与肺功能及与炎症相关因子IL-4、IL-8、IFN-γ的相关性。结果支气管哮喘患儿肺功能指标FEV1%及FEV1/FVC均显著降低,哮喘急性期FEV1%、FEV1/FVC显著低于哮喘缓解期和对照组,哮喘缓解期FEV1%、FEV1/FVC显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);哮喘急性期痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3、IL-4、IL-8显著高于哮喘缓解期和对照组,哮喘缓解期痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3、IL-4、IL-8显著高于对照组(P<0.05);哮喘急性期痰液中IFN-γ显著低于哮喘缓解期和对照组,哮喘缓解期痰液中IFN-γ显著低于对照组(P<0.05);相关性分析显示,支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3与肺功能FEV1%、FEV1/FVC均呈显著负相关;支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3与促炎因子IL-4、IL-8呈显著正相关,CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3与抗炎因子IFN-γ呈显著负相关;IL-4、IL-8与抗炎因子IFN-γ均呈负相关。结论支气管哮喘患儿痰液中CXCR2、CCR1、CCL2、CCL3高表达与患儿肺功能和气道炎症相关,其可为疾病的诊治提供一定的理论依据。

趋化因子LKN-1及其受体CCR1和CCR3在妊娠期高血压疾病中的表达

目的:通过测定妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中趋化因子白细胞诱素-1(leukotactin-1,LKN-1)及其受体CCR1和CCR3的表达,以探讨其在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法:收集32例妊娠期高血压疾病患者(研究组)和32例正常足月妊娠孕妇(正常对照组)的胎盘组织;采用Western蛋白印记法进行检测LKN-1及其受体CCR1和CCR3在胎盘组织中的表达;并结合免疫组化法对LKN-1、CCR1和CCR3在胎盘中的表达进行定位。结果:①Western蛋白印记法:在研究组和正常对照组胎盘组织中LKN-1表达均为阴性;研究组胎盘组织中无论是CCR1还是CCR3的水平均明显低于正常对照组(CCR1:0.66±0.06vs0.88±0.03,P<0.01;CCR3:0.17±0.01vs0.27±0.01,P<0.01);②免疫组化法:两组孕妇胎盘组织中LKN-1表达均为阴性;两组孕妇胎盘血管内皮细胞和基质细胞内均有CCR1阳性表达,绒毛滋养细胞中CCR1弱阳性表达;两组孕妇胎盘血管内皮细胞和绒毛滋养细胞内均有CCR3阳性表达。结论:LKN-1在妊娠期高血压疾病患者和正常足月妊娠的胎盘组织中均无阳性表达;但其受体CCR1与CCR3蛋白在研究组胎盘组织中表达下调,可能与人妊娠期高血压疾病的发生、发展有关。

趋化因子受体CCR1及CCR5在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织和癌旁正常组织中趋化因子受体CCR1和CCR5的表达及分布情况,并分析其与临床病理特征的相关性,同时研究上述两种因子在胃癌组织中的表达是否存在联系。方法采用免疫组织化学和Western blot的实验研究方法,检测胃癌组织及其癌旁正常组织中CCR1及CCR5的表达水平,找到两者与各自临床病理特点的相关性,及其表达的相互关联性。结果免疫组织化学结果显示,胃癌组织中CCR1的检出阳性率为52%,癌旁正常组织中CCR1的阳性率为25%,两种组织中CCR1的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中CCR5的阳性率为60%,癌旁正常组织中CCR5的阳性率为28%,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,CCR1和CCR5在胃癌组织中的相对表达量分别为(2.134±0.193)和(2.736±0.125),但二者在癌旁正常组织中的相对表达量为(1.378±0.047)和(0.971±0.027),差异有统计学意义(P<0.05)。CCR1的表达水平与患者的性别、年龄、分化程度及浸润深度均无关(P>0.05),但其与肿瘤分化程度及淋巴结的转移具有相关性(P<0.05);CCR5在组织中的表达与胃癌患者的性别、年龄及分化程度无相关性(P>0.05),与浸润深度及淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。CCR1与CCR5的表达成正相关(P<0.05)。结论组织中CCR1及CCR5的表达水平升高可能与胃癌的发生、发展具有关联性,通过对CCR1及CCR5的检测,可能对临床诊断胃癌具有一定的提示作用。

反应元件CRE和SRE参与猪CCR1和CCR5信号通路的分析

为探明调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)与趋化因子受体1(CCR1)、趋化因子受体5(CCR5)的信号通路关系,采用分子克隆技术、Western blotting技术构建、鉴定猪CCR1和CCR5真核表达载体,通过双荧光素酶报告系统检测RANTES分别作用CCR1和CCR5后萤火虫荧光素酶的表达量间接反映出cAMP反应元件(CRE)和血清反应元件(SRE)的表达水平。结果显示,RANTES作用于CCR1能降低HEK293T细胞内CRE的表达水平,对SRE有激活作用,而作用于CCR5后既能提高CRE的表达水平,也能增强SRE的表达。结果证明,RANTES通过CCR1受体能激活SRE,降低由毛喉素升高的CRE表达水平;RANTES通过CCR5受体对CRE和SRE均有激活作用。

CCR1参与肺癌分泌因子诱导破骨细胞生成

目的建立肺癌细胞与单核/巨噬细胞间接共培养模型,观察在肺癌细胞条件培养基作用下抑制前体破骨细胞(RAW264.7)的CCR1对破骨细胞生成的影响。方法收集肺癌细胞A549的条件培养基,将条件培养基以不同浓度加入RAW264.7培养基中共培养,在共培养体系中加或不加CCR1特异性拮抗剂BX471。细胞培养至第5天进行TRAP染色,提取不同条件作用后RAW264.7细胞的总RNA,采用Real-time PCR检测CCR1及破骨细胞标志基因cathepsin K、TRAP mRNA的表达,使用细胞免疫荧光和Western blot检测不同时期RAW264.7细胞中CCR1及Cathepsin K蛋白的表达量。结果加入A549细胞条件培养基的RAW264.7细胞TRAP阳性细胞显著增多,条件培养基明显上调RAW264.7的CCR1、Cathepsin K、TRAP的表达且呈浓度依赖,CCR1特异性拮抗剂BX471可抑制肺癌分泌因子对破骨细胞的活化。结论肺癌细胞分泌因子可促进破骨前体细胞向破骨细胞分化,CCR1参与了肺癌细胞分泌因子对破骨细胞的活化过程。

肝癌组织CCR1表达与患者预后的关系

目的:研究CC趋化因子受体1(C-C motif chemokine receptor 1,CCR1)蛋白在人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及与临床病理因素和预后的相关性。方法:构建288例HCC组织芯片,应用免疫组化(三步法)检测288例HCC组织中CCR1蛋白的表达情况,对随访资料作单因素和多因素相关生存分析。结果:CCR1在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织,CCR1阳性组的无瘤生存期和总体生存期显著低于阴性组。多因素分析显示CCR1阳性是HCC术后无瘤生存期和总体生存期的独立危险因素。结论:检测HCC中CCR1的表达水平有助于术后复发的预测。

益气补肺解毒法对肺癌放疗所致放射性肺损伤患者肺部氧化应激、细胞免疫平衡及趋化因子CCL3/CCR1影响和肺保护作用研究

目的观察益气补肺解毒法对肺癌放疗所致放射性肺损伤患者肺部氧化应激、细胞免疫平衡及趋化因子CCL3/CCR1影响和肺保护作用。方法选择2019年10月—2020年10月于陕西中医药大学附属医院治疗的130例肺癌放射性肺损伤患者为研究对象,按随机数字表法将患者分为两组,研究组65例,对照组65例,对照组给予醋酸泼尼松片治疗,研究组在对照组基础上给予自拟益气补肺解毒方治疗,两组患者均连续治疗2个月。治疗前、后检测两组患者丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、趋化因子γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)、T细胞表达分泌的活化调节因子(Rantes)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(INF-γ)、趋化因子CCL3、CC趋化因子受体1(CCR1)水平,检测两组患者用力肺活量(FVC)、肺活量(VC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、呼出气一氧化氮(FeNO)水平,评价两组患者生活质量及中医证候积分,比较两组患者临床疗效及不良反应。结果与治疗前比较,治疗后两组患者SOD水平升高(P<0.05),研究组SOD水平高于对照组(P<0.05);治疗后两组患者MDA、IP-10、Rantes水平降低(P<0.05),研究组MDA、IP-10、Rantes水平低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者IL-4、IL-10水平降低(P<0.05),研究组IL-4、IL-10水平低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者IL-2、INF-γ水平升高(P<0.05),研究组IL-2、INF-γ水平高于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者CCR1水平升高(P<0.05),研究组CCR1水平高于对照组(P<0.05);治疗后两组患者CCL3、CCL3/CCR1水平降低(P<0.05),研究组CCL3、CCL3/CCR1水平低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者FeNO水平降低(P<0.05),研究组FeNO水平低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者FVC、VC、FEV1、FEV1/FVC水平升高(P<0.05),研究组FVC、VC、FEV1、FEV1/FVC水平高于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后研究组中医证候积分低于对照组(P<0.05),FACT-L评分高于对照组(P<0.05)。研究组总有效率(96.92%)高于对照组(80.00%)(P<0.05)。研究组不良反应发生率(6.15%)低于对照组(20.00%)(P<0.05)。结论益气补肺解毒法可降低肺癌放疗所致放射性肺损伤患者肺部氧化应激,平衡细胞免疫,降低趋化因子CCL3/CCR1水平,保护肺功能,缓解临床症状,提升生活质量及临床疗效,降低不良反应。

基于CCL3/CCR1轴分析乌司他丁对食管癌患者放射性肺损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁对于食管鳞状细胞癌患者放射性肺损伤的保护作用以及可能的分子机制。方法选取2018年1月至2019年1月在我院进行根治性调强放疗或术后调强放疗的食管鳞状细胞癌患者60例,按照1∶1的比例随机分为对照组和试验组。两组均接受三维适形调强放疗。试验组在放疗前、后连续3d注射乌司他丁,对照组则注射相同体积的5%葡萄糖注射液。采集放疗前和放疗开始后4周、8周、16周、24周时的静脉血样本,检测血浆趋化因子CC基序配体3(CCL3)和C-C趋化因子受体1(CCR1)mRNA表达水平。观察放疗开始后8周和24周肺功能变化和放射性肺损伤的发生情况。结果根据RTOG分级系统,放疗24周后试验组放射性肺损伤的总发生率和损伤严重程度均低于对照组(P<0.05)。两组都没有发现Ⅳ级放射性肺损伤。同时试验组在第24周肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气量(FEV1)、一氧化碳弥散量(DLCO)]降低水平少于对照组(P<0.05)。2组患者放射开始后血浆CCL3和CCR1 mRNA水平逐渐升高,但是在放射后4周、8周、16周、24周时,试验组血浆CCL3和CCR1 mRNA水平均低于对照组(P<0.05)。2组近期临床疗效、随访期间总生存率和生存时间比较无统计学差异(P>0.05)。结论乌司他丁对于食管癌患者放射性肺损伤具有一定的保护作用,可以改善患者的肺功能,降低血浆CCL3、CCR1 mRNA表达。

健脾解毒方对二乙基亚硝胺诱导的肝癌大鼠肝组织CCR1和Cyclin D1 mRNA表达的影响

目的:探讨二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌过程中肝组织CC趋化因子受体1(CCR1)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达规律及健脾解毒中药的干预机制。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为正常组(n=25)、模型组(n=40)及中药组(n=40)。除正常组外,其他组大鼠在1～12周饮用含DEN 80mg/L的饮水以诱癌(8mg.kg-1.d-1),共12周。中药组大鼠同时给予含生药1.75g/ml的健脾解毒方灌胃(10ml/kg),正常组大鼠给予10ml/kg生理盐水灌胃,1次/d,共12周。于4、8、12、16周时相点,各组随机取5只大鼠剖腹取肝,20周时剩余大鼠全部剖腹取肝,观察肝脏外观,计算病死率和腹水生成率,肝组织进行HE染色,应用RT-PCR半定量检测肝组织CCR1、Cyclin D1 mRNA的表达。结果:在20周实验结束时,正常大鼠无死亡,而模型大鼠死亡率为42.5%(17/40),中药组死亡率为17.5%(7/40);16周～20周时模型组大鼠腹水发生率为87.5%(7/8),而中药组腹水发生率为44.4%(8/18),中药组与模型组差异有显著性意义(P<0.05)。肝组织HE染色表明,至第20周成瘤率达到100%。RT-PCR结果显示,与正常组比较,模型组各时段CCR1 mRNA均显著上调(P<0.01),与模型组比较,中药组除第8周外,其余各时段CCR1 mRNA均显著下调(P<0.01);与正常组比较,模型组大鼠除第4周及8周的Cyclin D1表达下调外,其余均出现显著上调,与模型组比较,中药组大鼠第4周、8周及12周的Cyclin D1表达上调,在16周时出现显著下调(P<0.01),第20周时两组差异不明显。结论:CCR1、Cyclin D1的表达上调与二乙基亚硝胺诱导肝癌形成密切相关,健脾解毒中药可以较好延缓肝癌的发生和发展,可能与下调CCR1关系密切,但下调Cylin D1的作用不明显,值得进一步深入研究。

类风湿关节炎血液和关节滑膜液淋巴细胞中CCR1的表达及临床意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血液和关节滑膜液淋巴细胞中CCR1的表达及临床意义。方法选择60例RA患者(RA组),均接受常规RA治疗,另选择30例同期体检健康者为健康组。比较RA组与健康组血液CCR1水平,比较治疗1、3个月RA患者血液、关节滑膜液淋巴细胞中CCR1水平及其与患者病情的相关性。结果与健康组比较,RA组血液CCR1表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。RA组治疗1、3个月的血液和关节滑膜液淋巴细胞中CCR1表达水平、VAS评分和DAS 28评分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson线性相关分析结果显示,RA组血液和关节滑膜液淋巴细胞中CCR1表达水平与VAS评分、DAS 28评分均呈正相关(血液CCR1:r=0.843、0.881,P<0.05;关节滑膜液淋巴细胞中CCR1 mRNA:r=0.826、0.893,P<0.05)。结论RA患者血液和关节滑膜液淋巴细胞中CCR1表达水平均升高,且与病情和预后呈正相关,可作为病情和预后评价的参考指标。