单核细胞趋化因子-1受体CCR2基因190A/G、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶p22phox亚基基因C242T多态性与吸烟的交互作用增加非酒精性脂肪性肝病的发病风险

目的探讨单核细胞趋化因子-1（MCP-1）受体CCR2基因190A/G、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶p22phox亚基基因C242T多态性与吸烟的交互作用与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的关系。方法采用病例-对照研究的方法,以600例NAFLD患者及600例健康对照者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术分析了MCP-1受体CCR2基因190A/G和NADPH氧化酶p22phox亚基基因C242T多态性。结果 190A/G（GG）基因型和C242T（TT）基因型频率分布在病例组分别为50.17%、50.00%,在对照组分别为23.83%、24.17%,二者经χ^2检验差异有统计学意义（χ^2=88.8462,P=0.0031;χ^2=85.8100,P=0.0039）。190A/G（GG）基因型者患NAFLD的风险显著增加（OR=3.2171,95%CI 1.9351-5.2184）。C242T（TT）基因型者患NAFLD的风险也显著增加（OR=3.1379,95%CI 1.7973-5.2362）。基因突变的协同分析发现190A/G（GG）/C242T（TT）基因型者在NAFLD组和对照组中的分布频率分别为39.67%和13.00%,二者经χ2检验差异有统计学意义（χ^2=118.3021,P=0.0017）。190A/G（GG）/C242T（TT）基因型者患NAFLD的风险显著增加（OR=5.0211,95%CI 3.1853-7.7926）。病例组的吸烟率显著高于对照组（χ^2=92.2234,P=0.0025）,吸烟者患NAFLD的风险显著增加（OR=3.3032,95%CI 1.9147-5.7413）,吸烟与190A/G（GG）/C242T（TT）基因型均有交互作用（r=3.9983;r=3.8553）。结论 190A/G（GG）、C242T（TT）基因型和吸烟是NAFLD的易患因素,基因多态性与吸烟的交互作用增加了NAFLD的发病风险。

传染性法氏囊病病毒VP2基因在多杀性巴氏杆菌弱毒株中的表达及免疫原性研究

将重组质粒pET28 a-VP2转化禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40,探讨该转化菌表达的VP2是否具有免疫原性,以及重组表达质粒在转化菌内的稳定性。该转化菌在体外经IPTG或乳糖诱导,表达产物经AGP检测,VP2滴度可达1/4;经间接ELISA检测,VP2滴度可达1/512;经SDS-PAGE分析,出现VP2蛋白条带。结果表明,诱导表达的提取液中有一定量可溶性VP2。将pET28 a-VP2转化的禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40经诱导后,接种爱维茵肉仔鸡,21日龄及35日龄时,分别肌肉注射菌液0.1、0.2 m l/只(3×108个/m l活菌)。49日龄时,感染IBDV标准强毒株BC6/85。IBDVVP2血清抗体检测结果,不接种组(B)、0.1 m l接种组(C)、0.2 m l接种组(D)及空质粒转化菌接种组(E)的AGP抗体检测阳性率分别为0、65%、70%、0;间接ELISA抗体检测阳性率分别为0、80%、85%、0;IBDV强毒感染的免疫保护率分别为5%、75%、75%、5%。经t检验,B组与C组、B组与D组、E组与C组、E组与D组,P<0.05,差异均显著,但B组与E组、C组与D组,P>0.05,差异均不显著。免疫试验结果表明,诱导表达产物VP2可有效地刺激鸡体产生体液免疫应答,刺激鸡体建立的免疫力可以抵抗一定剂量强毒的攻击。在质粒稳定性测定中,第9代次及以后的3个代次,20个菌落的VP2目的基因PCR检测结果均为阴性,表明该质粒在禽多杀性巴氏杆菌弱毒株G190E40内是不稳定的。