虎杖苷对CCl_4损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

目的研究虎杖苷（ＰＤ）对ＣＣｌ４损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用。方法原位灌流法分离大鼠肝细胞，培养２４ｈ后加入ＰＤ，同时造成ＣＣｌ４损伤，分别于损伤后６，１２，２４和４８ｈ测培养液中谷丙转氨酶（ＡＬＴ）、丙二醛（ＭＤＡ）和还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）活性，４８ｈ后用ＭＴＴ比色法测肝细胞存活率。结果ＰＤ１×１０－７～１×１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１能不同程度地抑制ＡＬＴ和ＭＤＡ的上升，提高ＧＳＨ水平，显著提高细胞存活率，以１×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１效果最好。

水蓑衣提取物对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:探讨水蓑衣提取物对肝脏的保护作用方法:40只雄性昆明种小鼠,随机分为对照组、CCl4损伤对照组、低剂量水蓑衣(45g/kg)组、高剂量水蓑衣(90g/kg)组和联苯双酯(150mg/kg)组.除正常对照组外,其余动物均采用ipCCl4复制急性肝损伤小鼠模型,CCl4注射后16h处死动物,测定各组小鼠血清ALT、AST的活性以及检查肝组织的病理改变,观察不同剂量水蓑衣对肝脏的保护作用.结果:与正常对照组相比,CCl4损伤对照组动物血清ALT和AST活性显著升高fP<0.01).肝脏出现轻度、中度和重度坏死及变性,低剂量水蓑衣组、高剂量水蓑衣组血清ALT和AST明显低于CCl4损伤对照组(ALT:1485±755,1211±528vs3179±106;AST:2045±293,2052±386vs2583±116,P<0.01),与联苯双酯组相比无显著差异.水蓑衣能明显减轻CCl4引起的肝脏结构损害,高剂量水蓑衣的作用尤为突出,其作用优于联苯双酯.结论:水蓑衣呈剂量依赖性地减轻CCl4引起的肝损害,其作用优于联苯双酯.

小柴胡汤及药群配方含药血清对CCl_4损伤肝细胞凋亡的影响

目的:探察小柴胡汤含药血清对体外CCl4诱导的肝细胞损伤模型的保护作用. 方法:制备小柴胡汤及药群配方的大鼠含药血清,体外10 mmoL/L CCl4诱导肝细胞损伤模型,观察10%药物血清对损伤肝细胞增生率、ALT、细胞形态学以及凋亡率的影响. 结果:与正常组比较,模型组肝细胞增生率显著降低(1.22±1.00,1.11±0.09,1.12±0.18,1.10±0.08,vs 0.78±0.07,P<0.01),细胞培养上清液中ALT含量显著升高(948±162,748 ±278,1081±226,1148±163, vs 2110±377,P<0.01);与模型组比较,小柴胡汤及其药群配方组的肝细胞增生率显著增高(P<0.01),细胞培养上清液中ALT含量显著降低(P<0.01).倒置显微镜、Giemsa 及TUNEL染色观察到,模型组肝细胞存在着明显的坏死和凋亡,小柴胡汤及药群配方的凋亡细胞明显减少.与正常组比较,CCl4模型组细胞凋亡显著增高(2.9 467±1.0 007 vs 16.3 175±4.5 358,P<0.01);与模型组比较,小柴胡汤及药群配方组的细胞凋亡率显著降低(4.2 117±2.3 733, 6.4 800±2.4 052,5.6 200±2.0 573,4.6 440±0.8 825, vs 16.3 175±4.5 358,P<0.01). 结论:CCl4引起的肝损伤同时存在着明显的凋亡和坏死, 小柴胡汤及药群配方含药血清对体外CCl4诱导的肝细胞损伤有保护作用.

消瘢方对体外CCl_4损伤大鼠原代肝细胞保护作用的研究

目的:探讨消瘢方抗肝纤维化作用的机理.方法:采用Ⅳ型胶原酶消化及Ficoll密度梯度离心的方法,分离、培养大鼠肝细胞,先加入5%、10%、20%药物血清干预体外培养的肝细胞24h,再用四氯化碳(CCl4)蒸熏法制造肝细胞损伤模型.分别用MTT法及荧光实时定量RT-PCR法检测CCl4损伤后肝细胞的增殖、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA表达,并检测细胞培养上清中的谷草转氨酶(AST)活性.结果:消瘢方药物血清能显著地促进CCl4损伤后肝细胞的增殖(P<0.05,P<0.01).CCl4损伤模型肝细胞内有一定量的caspase-3mRNA表达(6.96±0.69ng),加5%、10%、20%正常大鼠血清干预后,肝细胞caspase-3mRNA的表达(6.31±0.64,6.01±0.68,5.54±0.58ng)稍低于CCl4损伤模型,加5%、10%、20%消瘢方药物血清干预后,肝细胞caspase-3mRNA的表达(5.51±0.72,4.87±0.45,3.08±0.82ng)显著下调(P<0.05,P<0.01).CCl4损伤模型肝细胞培养上清中AST活性为1203.91±86.85nkat,加5%、10%、20%正常大鼠血清干预后,其培养上清中AST活性降低为1092.39±57.01,1025.54±29.17,996.03±53.68nkat,加5%、10%、20%消瘢方药物血清干预后,其培养上清中AST活性(998.70±30.67,885.51±44.82,753.48±35.17nkat)显著降低(P<0.05,P<0.01).消瘢方药物血清对CCl4损伤后肝细胞增殖的影响、下调肝细胞caspase-3mRNA的表达及降低肝细胞培养上清中AST活性的作用,均呈明显的血清浓度依赖关系.结论:消瘢方抗肝纤维化机理与其保护肝细胞免受损害、抑制肝细胞凋亡有关.

大鼠急性CCl_4损伤肝库普弗细胞对肝星状细胞增殖和Ⅰ型胶原分泌的影响

通过细胞体外培养观察急性CCl4 肝损伤的大鼠肝库普弗细胞对正常肝星状细胞的激活作用。方法 以 5 0 %CCl4 橄榄油一次灌胃复制大鼠急性肝损伤模型 ,分离模型大鼠肝库普弗细胞并原代培养 ,收集条件培养液 ,以其温育正常大鼠分离的原代培养肝星状细胞 ,二苯基四氮唑溴盐 (MTT)法测定细胞增殖 ,ELISA法测定Ⅰ型胶原分泌。结果 损伤肝库普弗细胞条件培养液可显著促进肝星状细胞的增殖及Ⅰ型胶原分泌 ,并具一定量效、时效关系 ;还可促进星状细胞表型向肌成纤维样细胞转化 ,而正常大鼠分离的肝库普弗细胞则无明显作用。

芦荟大黄素对CCl_4损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

目的 :研究芦荟大黄素 (AE)对原代培养大鼠肝细胞的保护作用。研究拟探讨AE对肝细胞的保护作用 ,以CCL4体外损伤的原代培养大鼠肝细胞为实验模型 ,通过测定培养液中谷丙转氨酶 (ALT)、谷胱甘肽 -S转移酶 (GSH)、脂质过氧化物丙二醛 (MDA)水平和MTT法检测细胞增殖活性 ,观察AE对急性肝细胞损伤的影响 ,并探讨其作用机理。方法 :以CCL4体外损伤的原代培养大鼠肝细胞为实验模型 ,通过测定培养液中谷丙转氨酶 (ALT)、谷胱甘肽 -S转移酶 (GSH)、脂质过氧化物丙二醛 (MDA)水平和MTT法检测细胞增殖活性 ,观察AE对急性肝细胞损伤的影响。结果 :AE浓度为 10 -4mol/L - 10 -7mol/L时能显著抑制CCL4所致ALT和MDA水平的上升 ,提高GSH水平及细胞存活率 ,并呈一定的浓度—效应关系。结论 :AE能有效保护CCL4所致肝细胞损伤。

白灵菇多糖对CCl_4损伤的小鼠心脏抗氧化作用研究

目的:探讨白灵菇多糖对CCI4损伤小鼠心脏抗氧化作用。方法:将成年小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组(低、中、高剂量给予的白灵菇多糖每天分别为100、200、500mg/kg共5组,连续灌胃30d后,模型对照组及3个试验组以5mg/kg·d·wt的量,灌以用色拉油配制的1%CCI4溶液,正常对照组灌以等体积的色拉油。24h后将各组动物处死,测定心脏器官的总SOD、Mn-SOD、MDA、GSH-Px几个主要抗氧化指标。结果:与模型对照组相比,给予中、高剂量的白灵菇多糖,可显著提高受损小鼠心脏的总SOD、Mn-SOD及GSH-Px几个主要抗氧化指标。结果:与模型对照组相比,给予中、高剂量的白灵菇多糖,可显著提高受损小鼠心脏的总SOD、Mn-SOD及GSH-Px的活性,降低MDA的含量。结论:对于CCI4损伤的小鼠心脏,白灵菇多糖具有较好的抗氧化作用。

重庆产叶下珠对大鼠肝细胞CCl＿4损伤的保护作用

大鼠肝细胞体外与ＣＣｌ＿４（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）共同孵育后，肝细胞存活率、细胞膜流动性均降低，而ＬＤＨ、ＭＤＡ的释放及细胞内Ｃａ＿２￣＋浓度均增加。预先加入重庆产叶下珠可以明显抑制上述变化，表明该药对ＣＣｌ＿４损伤的肝细胞有保护作用。

水芹总酚酸对小鼠CCl_4肝损伤的保护作用

目的观察水芹总酚酸(OJTPA)对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将180只小鼠随机分为正常组,联苯双酯阳性药物组,CCl4模型对照组和OJTPA高、中、低(500、250、125mg·kg-1)3个剂量组。应用0.1%CCl4腹腔注射致小鼠急性肝损伤模型,通过测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性以及小鼠肝组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,并观察肝脏组织病理学变化,对OJTPA的保肝作用进行研究。结果模型组小鼠肝功能明显异常,肝组织变性、坏死严重;OJTPA组能明显改善CCl4中毒小鼠肝功能,其降酶率(ALT)以高、中、低剂量分别为74.74%、55.87%、7.25%;肝组织切片镜检证实,OJTPA能减轻中毒小鼠肝细胞损伤程度。结论OJTPA对急性肝损伤小鼠有较好的保肝作用。

苯丙氨酸二肽类化合物190对小鼠CCl_4肝损伤的保护作用

目的观察苯丙氨酸二肽类化合物190对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将180只小鼠随机分为正常组,CC l4模型对照组,联苯双酯阳性药物组和PDC190低、中、高(25、50、100mg.kg-1)3个剂量组。应用0.12%CC l4腹腔注射致小鼠急性肝损伤模型,通过测定小鼠血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性以及小鼠肝组织中丙二醛含量和超氧化物歧化酶活力,并观察肝脏组织病理学变化,对PDC190的保肝作用进行研究。结果模型组小鼠肝功能明显异常,肝组织变性、坏死严重;PDC190组能明显改善CC l4中毒小鼠肝功能,其降酶率以低、中、高剂量分别为22.1%、70.2%、78.5%;肝组织切片镜检证实,苯丙氨酸二肽类化合物190能减轻中毒小鼠肝细胞损伤程度。结论苯丙氨酸二肽类化合物190对急性肝损伤小鼠有较好的保肝作用。

CCl_4肝损伤与免疫性肝损伤小鼠模型间差异性比较研究

本文对比研究了CCl_4肝损伤与免疫性肝损伤小鼠模型肝组织病理切片、生理、生化指标及差异基因表达谱的变化,根据两种肝损伤模型的差异表达基因,初步探讨了它们致肝损伤的机理。结果表明,两组模型小鼠的ALT、AST等多项生化指标与正常小鼠相比存在显著性差异;通过表达谱芯片实验,在CCl_4组和免疫组中分别筛选得到379条和293条与正常组差异表达基因;其中有105 条基因在两个模型组中均差异表达(表达下调基因58条,表达上调基因47条)。提示CCl_4肝损伤与免疫性肝损伤小鼠模型间有相似性,但差异亦较明显。

茵陈大孔树脂提取物对CCl_4所致肝损伤的影响

目的建立小鼠肝损伤模型,考察AB-8大孔树脂制备的茵陈提取物对CCl4所致肝损伤的保护作用。方法利用AB-8大孔树脂制备30%醇提取物,作用于0.1%CCl4诱导肝损伤模型,观察不同浓度茵陈提取物对肝损伤小鼠ALT、AST等指标的影响。结果与正常组比较,模型组小鼠血清液ALT、AST含量升高;与模型组比较,给药组中高、中剂量组小鼠血清中ALT、AST含量降低,低剂量组无显著性差异。结论AB-8大孔树脂制备的茵陈提取物对CCl4诱导的肝损伤有保护作用。

猕猴桃根多糖多相脂质体口服液对CCl_4所致实验性急性肝损伤的药效作用

目的:评价猕猴桃根多糖脂质体口服液的抗急性肝损伤作用。方法:采用CCl4所致小鼠急性肝损伤模型,以联苯双酯作为阳性对照药,通过测定肝损伤小鼠的血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、测定肝损伤小鼠肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等指标,观察肝组织病理改变,研究APPS多相脂质体口服液的抗急性肝损伤药效作用;结果:与模型组比较,APPS多相脂质体口服液高剂量(200 mg·kg-1)、中剂量(100 mg·kg-1)可显著降低血清中ALT、AST含量(P<0.05),有效提高肝组织SOD活力、降低MDA含量(P<0.05),与联苯双酯的药效作用无统计学差异。结论:APPS多相脂质体口服液对CCl4所致小鼠急性肝损伤有显著的保护作用。

虎刺提取物对CCl_4致肝损伤的保护作用

目的:研究虎刺提取物对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用及与所含蒽醌类化合物之间的量效关系。方法:小鼠分为模型组,正常组,阳性药组(联苯双酯),石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、水部位组和75%乙醇提取物组。正常组小鼠每日灌胃(ig)生理盐水10 m L·kg^(-1),阳性对照组联苯双酯200 mg·kg^(-1),药物组按300 mg·kg^(-1)(高剂量组)、150 mg·kg^(-1)(低剂量组)剂量给药。连续给药6天后小鼠按剂量10 m L·kg^(-1)腹腔注射(ip)0.1%CCl_4花生油溶液,心脏取血,测血清谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)活性,并取肝脏做组织切片观察其病理学形态变化。采用高效液相(HPLC)法初步分析,采用醋酸-甲醇显色法测定各样品中总蒽醌的含量。结果:与模型组相比,虎刺水部位(300 mg·kg^(-1))能明显降低小鼠血清中ALT、AST的含量(p<0.01),水部位(150 mg·kg^(-1))和75%乙醇提取物(300 mg·kg^(-1))也能降低ALT、AST的含量(p<0.05)。病理切片发现水部位和总提物能明显减轻肝组织病理学症状。结论:虎刺提取物具有明显的肝保护作用,其中水部位活性最强,保护活性可能与蒽醌化合物有关。

丝毛飞廉总黄酮对CCL_4肝损伤的保护作用

目的研究丝毛飞廉总黄酮对CCL4所致小鼠急性肝损伤的保护作用.方法以小鼠为实验对象,腹腔注射0.1% CCl4造模,丝毛飞廉总黄酮为实验药物,最后测定小鼠脏器指数、血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量以及小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.结果模型组脏器指数明显高于空白组,且血清ALT与AST均明显增高,表明CCl4造成的小鼠化学性肝损伤实验模型建立成功;丝毛飞廉总黄酮给药组与造模组比较,小鼠脏器指数、血清中AST、ALT含量以及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量均有显著性差异.结论丝毛飞廉总黄酮对CCL4所致小鼠急性肝损伤具有很好的保护作用.

空心莲子草醇提物抗CCl_4肝损伤的实验研究

目的 :观察空心莲子草醇提物对CCl4 肝损伤的保护作用。方法 :给小鼠腹腔注射CCl4 制成肝损伤模型 ,分为 3组 ,每组 10只。分别经口给予生理盐水、空心莲子草醇提物 (0 0 2g g)和联苯双酯 (0 2mg g)。连续用药6天后 ,第 7天将小鼠断头处死 ,取血和肝脏 ,分别测定空白对照组、空心莲子草组和联苯双酯组小白鼠的血清ALT和血清AST、肝指数及肝细胞镜检 ,并进行比较。结果 :空心莲子草组能明显对抗CCl4 引起的血清ALT和血清AST增高 ,减轻CCl4 对肝细胞的损伤。空白对照组与联苯双酯组和空心莲子草组比较均有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 :空心莲子草醇提物对CCl4

软肝冲剂对CCl_4肝损伤大鼠p21mRNA表达的影响

目的:研究软肝冲剂对CCl_4肝损伤大鼠p21mRNA表达及细胞周期各时相DNA含量的影响,从mRNA、DNA水平探讨软肝冲剂促进肝细胞再生、阻止肝纤维化、肝硬化形成的作用机理。方法:采用RT-PCR及流式细胞计数仪分别检测CCl_4肝损伤大鼠p21mRNA表达、DNA含量。结果:软肝冲剂对复合因子造模大鼠有降低p21mRNA含量的作用,与模型组比较有显著性差异(P<0.01),在实验的12d及45d,大剂量组的疗效要明显好于小剂量组(P<0.01),且呈一定的量效关系;正常肝组织p21mRNA呈相当低水平表达,其表达相对值为0.17±0.06U。定量DNA图像分析发现模型组中处于G_1期的细胞数要明显多于其它各组P<0.01),软肝冲剂大剂量组中处于G_1期的细胞数要明显少于软肝冲剂小剂量组(P<0.01)。结论:软肝冲剂能调节CCl_4肝损伤大鼠p21mRNA基因表达,调节细胞周期,促进肝细胞再生,抑制肝纤维化、肝硬化的形成。

基于抑制斑马鱼血管生成和抗CCl_4肝损伤的藏茵陈活性部位筛选

目的:研究不同极性部位的藏茵陈抑制斑马鱼血管生成作用和抗小鼠CCl_4肝损伤作用。方法:采用斑马鱼动物,以体视荧光和非荧光显微成像法,观察藏茵陈活性成分抑制其体节间血管(ISV)生成的效果;采用CCl_4小鼠急性肝损伤模型,测定血清ALT和AST活性。结果:藏茵陈水部位和正丁醇部位提取物组能够抑制斑马鱼ISV的生长,也可使小鼠血清ALT、AST活性显著降低(P<0.01)。结论:藏茵陈抑制斑马鱼新生血管生成的部位和保肝的有效部位有一致性,活性部位均集中在大极性部位——水部位和正丁醇部位。说明藏茵陈抗肿瘤的活性部位可能在大极性部位。

谷氨酰胺复合胶囊对小鼠CCL_4肝损伤的保护作用

目的:研究了谷氨酰胺复合胶囊对小鼠CCL_4肝损伤的保护作用。方法:选取实验室中心同一批培养的30只SD小鼠,随机分为正常组、对照组与观察组。正常组小鼠不进行任何干预,对照组小鼠以5mL/kg的剂量腹部注射1%CCL_4油溶液建立模型,观察组小鼠在建立模型后每天给予谷氨酰胺复合胶囊治疗。观察三组血清ALT、AST的变化。结果:对照组血清ALT、AST明显高于正常组(P<0.05),观察组ALT、AST虽然高于正常组(P<0.05),但是明显低于对照组(P<0.05)。结论:谷氨酰胺复合胶囊能够有效改善CCL_4肝损伤小鼠的肝功能状况。