造血细胞生长因子对脐血CD_(34)^+细胞短期体外扩增的作用

目的 探讨造血细胞生长因子 (HGF)的不同组合对脐血 CD34 + 细胞短期体外扩增的作用。 方法 用免疫磁珠法分离纯化脐血 CD34 +细胞 ,培养于无血清培养液中。加入不同的细胞因子 ,于第 4 ,7,10 ,14天检测 CD34 +细胞百分率和有核细胞 (NC)总数。 结果 和对照组相比 ,各组的 NC扩增倍数随着培养时间的延长呈不同程度的增加 ,干细胞在 FL、TPO、GM- CSF、SCF、IL - 6、G- CSF、EPO和 IL - 3等因子作用下 ,NC扩增倍数在培养第 14天达高峰 ,为32 8.96倍 ;而 CD34 +细胞扩增倍数在培养第 7天达最高峰 ,但在 FL、TPO、GM- CSF、SCF、IL- 6、G- CSF等因子作用下 ,CD34 + 细胞扩增倍数最大 ,7d后达 2 5 .2 3倍 ,而后随着培养时间的延长而逐渐下降。 结论 脐血 CD34 + 细胞在HGF作用下 ,扩增时间以 7～ 10

慢性髓系白血病病期演变时CD_(34)抗原表达及其临床意义

目的 检测 CD34抗原在慢性髓系白血病 (CML)不同病期中的表达 ,并探讨其与临床化疗疗效及预后的关系。方法 采用流式细胞术检测 CML患者外周血和 (或 )骨髓单个核细胞(MNC) CD34抗原及 P1 70 糖蛋白的表达。结果 CML慢性期、加速期、急变期外周血 MNC CD34抗原阳性率比较差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1) ,随着治疗的有效 CD34阳性率下降 ;P1 70 阴性组与 P1 70 阳性组 CD34阳性率比较差异有非常显著性 (P <0 .0 1) ,治疗有效率比较差异有差异性 (P <0 .0 5 )。结论 CML慢性期患者 CD34抗原表达与临床疗效呈负相关 ,对预测患者进入急变期有一定临床意义 ;CML病期演变时 CD34阳性白血病细胞 P1 70

肾小球肾炎时肾组织CD_(34)的表达

目的 探讨多种类型肾小球肾炎时肾组织中 CD34 的表达及病理学意义。 方法 对 6 6例原发性和继发性肾小球肾炎患者肾活检组织进行 CD34 、α-平滑肌肌动蛋白的免疫组织化学染色 ,探讨二者的关系。 结果 在病理条件下 ,肾小球系膜细胞出现 CD34 的表达 ;肾小球系膜细胞可同时表达 CD34 和α-平滑肌肌动蛋白 ,二者显著相关。 结论 CD34

生长抑素对白血病患者骨髓细胞CD_(34)抗原表达的影响

目的 研究生长抑素八肽类似物奥曲肽 (Octreotide ,SMS ;商品名 :善得定 )对白血病患者骨髓单个核细胞CD3 4 抗原表达的影响 ,探讨生长抑素对白血病细胞的调控作用。方法 采用细胞培养、免疫细胞化学技术及图像分析系统 ,随机计数CD3 4 阳性细胞数 ,观察分析SMS在白血病患者骨髓单个核细胞中CD3 4 抗原表达的分布和含量。结果 在相差倒置显微镜下 ,加入SMS组与对照组比较 ,细胞碎片增多 ,基质细胞减少 ;CD3 4 抗原主要表达于细胞膜和核膜 ;SMS组阳性细胞数显著少于对照组 (P <0 .0 1) ;图像分析光密度值 (OD值 )SMS组明显低于对照组 (P <0 .0 1)。结论 在体外SMS可减少造血干 祖细胞特异抗原 (CD3 4 )的表达。

CD_(34)^+造血干细胞混合CD_3^+ T细胞移植分离移植物抗宿主病和移植物抗白血病效应

目的 探讨在异基因造血干细胞移植中能否采用纯化 CD34 + 造血干细胞混合一定量纯化 CD3+ T细胞移植达到既控制移植物抗宿主病 (GVHD)又保留移植物的抗白血病效应 (GVL )。 方法 (C5 7BL /6× 6 15 ) F1代接种 L 6 15白血病细胞株建立小鼠白血病模型作为移植受鼠 ,利用免疫磁珠纯化骨髓 CD34 + 造血干细胞及脾脏CD3+细胞 ,流式细胞仪分析纯化前后 CD34 +、CD3+细胞百分比 ,观察单纯移植 CD34 +细胞及混合不同数量级 CD3+细胞后受鼠生存时间、GVHD、GVL效应 ,移植后骨髓造血重建细胞来源。 结果 纯化 CD34 + 细胞 1× 10 6 移植组10 0 %死于白血病复发 ;CD34 +细胞 +纯化 CD3+细胞 (1× 10 7)移植组生存期明显延长 ,5 0 %死于白血病复发 ,无GVHD表现 ;CD34 + 细胞 +CD3+ 细胞 (5× 10 7)移植组长期存活 ,无白血病复发 ,无 GVHD表现 ;CD34 + 细胞 +CD3+细胞 (1× 10 8)移植组 6 2 .5 %死于 GVHD,37.5 %长期存活 ;CD34 + 细胞 +CD3+ 细胞 (1.5× 10 8)移植组 10 0 %死于GVHD。移植后生存时间 >6 0 d的受鼠骨髓造血重建细胞 y染色体检出率为 10 0 %。 结论 移植物中 CD3+细胞数量与 GVHD和 GVL效应密切相关 ,通过限定移植物中的 CD3+ 淋巴细胞的含量能够保留

脐血CD_(34)^+细胞体外扩增的实验研究

目的 探讨脐血造血细胞体外扩增及其移植的最佳时期。方法 用免疫磁珠法分离纯化人脐血CD+34细胞 ,从CD+34细胞不同体外培养系中取样检测细胞总数、CD+34细胞百分率和CFC(包括CFU -GM和BFU-E)。结果 A组 (加rhSCF、rhIL - 3、rhG -CSF、rhEpo及rhTPO)与B组 (加rhFL、rhIL - 3、rhG -CSF、rhEpo及rhTPO)对各阶段造血细胞扩增效果无显著差异 ,C组 (加rhSCF、rhFL、rhIL - 3、rhG -CSF、rhEpo及rhTPO)各项结果均显著优于A组 (P <0 0 1)和B组 (P <0 0 1) ,rhCSF与rhFL有明显的协调效应 ;培养 7d时开始增多 ,培养 14d进入高峰 ,培养 2 1d开始下降 ,培养 2 8d明显下降。结论 C组能明显扩增人脐血造血细胞 ,培养 7～ 14d造血细胞达高峰 ,为移植最佳时间。

条件培养液对脐血CD_(34)^+细胞扩增效应的实验研究

目的探讨并分析不同条件培养液对脐血CD+ 34 细胞的体外扩增效应及影响因素。方法利用 4种条件培养液 (胎儿肌肉、胎盘组织、外周血、脐血单个核细胞 )对脐血CD+ 34 细胞进行 2周的体外扩增 ,并和三细胞因子组合 :干细胞因子 (stemcellfactor ,SCF)、血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)、flt 3配基 (flt 3ligand ,FL) ,对脐血CD+ 3 4 细胞扩增结果进行了比较 ;利用ELISA方法检测 4种条件培养液中细胞因子 [白细胞介素 1(interleukin 1,IL 1)、白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )、FL、TPO]的浓度。结果脐血单个核细胞条件培养液及细胞因子组合对脐血CD+ 3 4 细胞均有明显的扩增效应 ,脐血组优于细胞因子组合 ;4种条件培养液中 ,脐血组细胞因子FL的含量明显高于其余条件培养液组。结论脐血条件培养液可作为体外培养扩增脐血CD+ 34 细胞有效而廉价的扩增剂 ;细胞因子FL可能是造成不同条件培养液对脐血CD+ 34

成人急性淋巴细胞白血病髓系抗原和CD_(34)表达研究

目的分析成人急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的髓系抗原、ＣＤ３４表达特点及与Ｐｈ染色体表达、预后的关系。方法采用间接免疫荧光法分析１０２例初治ＡＬＬ患者的免疫表型。结果①成人ＡＬＬ髓系抗原阳性率达２１．６％，其中ＣＤ３３阳性最常见（阳性率为１５．７％）。Ｔ系ＡＬＬ和Ｂ系ＡＬＬ髓系抗原表达差异无显著性。ＡＬＬＬ２中的阳性率高于Ｌ１（Ｐ＝０．０５）。在Ｂ系ＡＬＬ中随细胞分化成熟阳性率逐渐降低。②ＣＤ３４表达阳性率为５３．６％，ＢＡＬＬ阳性率高于ＴＡＬＬ（Ｐ＜０．０１）；ＢＡＬＬ中前Ｂ祖细胞型明显高于普通型、前Ｂ细胞型和成熟Ｂ细胞型，与髓系抗原的表达无关。③髓系抗原阳性病例完全缓解（ＣＲ）率明显低于阴性病例（Ｐ＜０．０２５）；ＣＤ３４表达和治疗缓解率无显著相关性。二者均与治疗达缓解的时间无关。④Ｐｈ染色体和（或）ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因阳性率为３５．９％，阳性病例ＣＲ率明显低于阴性病例（Ｐ＜０．０２５）。⑤髓系抗原和ＣＤ３４表达均与患者年龄、治疗前白细胞计数、肝脾肿大情况无关。结论成人ＡＬＬ髓系抗原表达和ＦＡＢ分型有关，与治疗缓解率呈负相关；ＣＤ３４表达与ＡＬＬ亚型、细胞分化程度有关，和治疗缓解率无显著关系。Ｐ?

CD34^＋造血祖细胞的定向诱导分化研究

加强造血调控的基础与临床研究裴雪涛血细胞的生成及其调控涉及生命科学中的许多热点问题，如细胞的增殖、分化、迁移、发育、成熟、衰老、凋亡、癌变，也涉及细胞因子及其受体的相互作用与信号传导，细胞与细胞、细胞与基质的相互作用等。同时，许多血液恶性肿瘤、造血障...

脐血 CD_(34)^+ 细胞扩增和改善其移植效率的实验研究

目的：探讨脐血ＣＤ３４＋细胞对造血生长因子的扩增效应及其植入成人骨髓基质的能力。方法：利用免疫磁珠法（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＋细胞，在液体培养体系中对其进行体外扩增，并利用铺展贴壁实验研究其移植效率。结果：脐血ＣＤ３４＋ＣＤ３８－细胞亚群的比例明显高于骨髓和外周血；在干细胞因子、白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６、粒细胞集落刺激因子、红细胞生成素存在的情况下，１０～１４天造血祖细胞可扩增近１００倍，细胞总数超过５００倍；但经２小时铺展贴壁后，仅有３６％的脐血ＣＤ３４＋细胞植入经照射预处理的成人骨髓基质，若经粒－巨噬系集落刺激因子和ＩＬ－３预处理６～８小时后则有６８．０％～８９．６％的ＣＤ３４＋细胞植入基质。结论：细胞因子有可能在体外扩增脐血ＣＤ３４＋细胞数量，改善其移植效率，使脐血祖细胞在“质”和“量”上满足临床移植的需要。

骨髓增生异常综合征患者CD_(34)^+细胞凋亡特征

目的 调查骨髓增生异常综合征 (MDS)造血细胞CD34 抗原表达及CD34 阳性细胞凋亡状况。方法 用免疫酶标记 (碱性磷酸酶 抗碱性磷酸酶系统 ,APAAP)检测 36例MDS患者骨髓冷包埋切片中CD34 阳性细胞数量及分布特征 ,结合DNA原位末端标记技术 (ISEL)研究此类细胞的凋亡状况。14例缺铁性贫血 (IDA)患者作对照。结果 ①MDS组CD34 阳性细胞较对照组明显增多 [分别为 (4 9.2± 38.5 ) mm2 和 (10 .2± 9.7) mm2 ,P <0 .0 1]。MDS组凋亡细胞数与对照组比较也增多 [分别为 (6 9.1±2 8.2 ) mm2 和 (17.8± 11.2 ) mm2 ,P <0 .0 1]。②CD34+ 细胞在MDS RAEB组最高 ,与MDS RA RAS和MDS RAEB t组比较 ,差异有显著性 (P值均 <0 .0 5 ) ,而在后两组间无明显差异 ;MDS RA RAS、RAEB组的细胞凋亡数均明显高于RAEB t组 (P值分别 <0 .0 2和 0 .0 5 )。③ 36例MDS患者中未见CD34 阳性细胞发生凋亡。④CD34 阳性细胞及凋亡细胞均多见于骨小梁间区 ,均有成簇成片状分布的趋势 ,但两类细胞很少分布于同一区域。结论 MDS造血细胞过度表达CD34 抗原 ,MDS转化过程中同时存在CD34阳性细胞和凋亡细胞增加。CD34 阳性细胞的凋亡抵抗现象提示其来自恶性造血克隆。

人正常骨髓 CD_(34)^+ 造血细胞的形态学与细胞化学特征

目的：探讨ＣＤ３４＋造血细胞的形态学特征。方法：采用免疫磁珠－流式细胞仪分选二步法获取高纯度的人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞。结果和结论：ＣＤ３４＋造血细胞从形态上可分为３型，Ⅰ型胞体略大于淋巴细胞，各种细胞化学染色阴性，最原始，拟定候选干细胞群；Ⅱ型为典型的小淋巴细胞状，细胞化学亦为阴性，拟定多向祖细胞阶段；Ⅲ型胞体极不均一，依分化方向不同其细胞化学表现为±～＋＋，拟定定向祖细胞阶段。

鼻内翻性乳头状瘤中Ki-67的表达及与微血管密度的关系

1.1临床资料。收集1999年1月～2005年7月手术切除确诊为鼻内翻性乳头状瘤（nasal inverted papilloma,NIP）标本存档蜡块36例,男22例,女8例;鼻息肉（nasal polyps,NP）14例,男9例,女5例：鼻腔鳞状细胞癌（nasal squamous cell caminoma，NSCC）10例，男77例，女3例。

Norplant使用者子宫异常出血的血管变化

目的： 观察 Ｎｏｒｐｌａｎｔ 致子宫不规则出血时内膜血管的变化， 探讨二者的关系。方法：用组织学和免疫组织化学方法对使用 Ｎｏｒｐｌａｎｔ 后 （０５ 、１ ａ 及＞ ２ ａ） 月经规律及有子宫不规则出血者的子宫内膜进行形态学、内膜血管内皮细胞 Ｃ Ｄ３４ 和基膜层粘连蛋白 （ Ｌ Ｎ） 观察。结果： Ｎｏｒｐｌａｎｔ 使用者子宫内膜均无典型的周期特点， 血管内皮变薄； 出血不规则的内膜血管基膜 Ｌ Ｎ 明显减少。结论： Ｎｏｒｐｌａｎｔ 使用者子宫出血不规则与内膜血管内皮变薄和基膜 Ｌ Ｎ减少有密切关系。

体外扩增脐血CD_(34)^+细胞的实验研究

目的 探讨体外扩增脐血干 /祖细胞用于成人脐血移植的可能性。方法 从 10份新鲜的脐血标本中纯化的CD3 4+ 细胞接种于含体积分数为 2 0 %的胎牛血清 (FBS)的IMDM培养基的悬浮培养体系中 ,分别加入由SCF、Flt 3Ligand (FL)与IL 1β、IL 3、IL 6、G CSF、Epo(合称 136GE)组成的 3组细胞因子 (A组 :136GE +FL ;B组 :SCF +136GE ;C组 :FL +SCF +136GE)培养扩增 7d。结果 ①A组与B组对各阶段造血细胞扩增效果差异均无显著性 ,但B组各项结果在一定程度均优于A组 ,C组各项结果均显著优于A组 (P <0 .0 1)和B组 (P <0 .0 5 ) ,FL与SCF有明显的协同效应 ;② 30 %的脐血标本在FL +SCF +136GE的刺激下经过 7d扩增后可以获得 >5 0× 10 6的CD3 4+ 细胞 ,这可能足够用于 5 0kg以上的成人做干细胞移植 ;③从扩增产物中再纯化的CD3 4+ 细胞保留原CD3 4+ 细胞的集落形成率、CD3 4+CD3 8-亚群的比例以及体外扩增潜能。结论 体外扩增脐血CD3 4+ 细胞有可能产生足够供成人移植所需的造血干 /祖细胞。

胃肠道间质瘤病理及免疫组织化学特征与诊断标准探讨

目的 :观察胃肠道间质瘤 (GISTs)的病理形态学及免疫组织化学特征 ,探讨其病理诊断标准。方法 :81例GISTs常规病理检查 ,用 CD1 1 7、CD34 、Vimentin等抗体 ,通过免疫组织化学 S- P法对原发于胃肠道非上皮性梭形细胞肿瘤进行检测。结果 :本组 GISTs均为成年人 ,年龄 2 7～ 87岁 ,≥ 5 0岁 6 0例。男 39例 ,女 4 2例。发生于胃 39例 ,小肠 32例 ,结肠 3例 ,直肠 6例 ,腹膜后 1例。镜下观察 GISTs由梭形细胞和上皮样细胞构成 ,Vimentin、CD1 1 7、CD34 多为弥漫阳性 ,阳性率分别为 98.8%、97.5 %、75 .3% ,SMA、HHF35、S- 10 0、呈局灶或少数细胞阳性表达 ,阳性率分别为 32 .1%、2 5 .9%、8.6 %、,结蛋白均阴性。本组按 L ewin等提出的标准判断 GISTs的良恶性 ,结果良性 16例 ,恶性 4 1例 ,潜在恶性2 4例。结论 :GISTs好发于中老年人 ,该肿瘤具有多向分化特征及较特异的免疫表型 (CD1 1 7、CD34 阳性 ,desmin阴性 ) ,光镜形态易与平滑肌肿瘤 ,神经源性肿瘤混淆 ,免疫组化在 GISTs诊断中起主要作用。 GISTs良恶性判断尚需综合分析。

胃肠道间质瘤的免疫组化诊断及P^(53)和P^(21)表达

目的 探讨胃肠道间质瘤 (GIST)的诊断及鉴别诊断 .方法 GIST患者 5 0例 ,进行常规检查及 P53/P2 1 ,HHF-35 ,vimentin,CD34 免疫组化检测 .结果 本组 5 0例 GIST,恶性 34例 ,交界性 10例 ,良性 6例 ,以胃及小肠为多发(6 8% ) .免疫组化以平滑肌细胞分化为主型占 46 % ,神经源分化型占 18% ,平滑肌和神经双向分化型 18% ,未分化型2 4% .肌肉共同蛋白 HHF- 35为平滑肌细胞分化最敏感的标志物 .未分化型间质瘤的免疫表型为 vim entin和 CD34 阳性 .P53蛋白和 P2 1 蛋白对 GIST的良恶性可资鉴别 .结论 尽管胃肠道间质瘤光镜下形态相似 ,但其免疫表型呈异源性 。

Lin^-CD_(34)^-与Lin^-CD_(34)^+细胞差异表达基因的鉴定

目的 克隆并鉴定Lin-CD3 4-细胞区别于Lin-CD3 4+细胞的可能与其性状相关的基因。方法 以Lin-CD3 4-细胞作为检测对象 ,Lin-CD3 4+细胞作为驱动细胞 ,应用抑制消减杂交技术构建Lin-CD3 4-细胞的cDNA消减文库。选取部分克隆测序 ,测序结果与GenBank进行同源性比较和功能分析。结果 共获得 593个含有插入片段的克隆 ,片段的长度为 30 0～ 50 0bp。随机选取 53条EST进行测序 ,其中 37条EST代表了 1 0个已知基因 ,其余 1 6条EST代表了 4个未知序列。结论 利用抑制消减杂交技术鉴定出部分Lin-CD3 4-细胞特异表达的基因 ,可能与Lin-CD3

PartI儿童及成人LTHMC基质细胞免疫表型的初步研究

目的 观察人长期骨髓细胞培养 (LTHMC)基质细胞免疫表型。方法 取 3例儿童、3例成人骨髓液制成骨髓单核细胞悬液 (BMMNCs)接种于RPMI16 40培养基传代培养 ,每周半量换液 ;8周龄LTHMC基质细胞 ,加入CD34 、CD33 、CD38、CDw90 抗体进行流式细胞仪检测。人胚胎肺成纤维细胞 (WI - 38)作同等条件下对照观察培养。结果 8周龄LTHMC6 1.5 %的细胞处于G0 /G1期 ,细胞表型为CD34 + 、CD38+ 、CDw90 + ;儿童以CDw90 + 为主 ,成人以CDw38+ 为主。结论 LTHMC基质细胞具有部分造血干 /祖细胞抗原 。

体外扩增脐血CD_(34)^+细胞

目的探讨某些造血细胞因子对脐血造血干细胞的扩增效应。方法脐血ＣＤ＋３４细胞经免疫磁珠法分选后，在含有重组人Ｆｌｔ３配基（ｒｈＦｌｔ３Ｌ）、干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素１β（ｒｈＩＬ１β）、ｒｈＩＬ３和ｒｈＩＬ６的液体培养体系中培养７至１４天。采用流式细胞仪、造血细胞集落和长期培养起始细胞（ＬＴＣＩＣ）方法检测扩增后的细胞。结果在上述细胞因子作用下，脐血ＣＤ＋３４细胞明显扩增。细胞总数、ＣＤ＋３４细胞和造血细胞集落总数在第７天分别扩增３１±１９、４±５、１０±６７倍、第９天分别扩增２３６±１０６、２０±２０、５７±６２，第１４天分别扩增７７０±５０５、３０±３０、１８９±１３３。扩增的细胞以髓系祖细胞为主，极少红系祖细胞，无淋巴系细胞，并含有ＬＴＣＩＣ。结论理想的造血细胞因子的组合可以加速体外扩增脐血ＣＤ＋３４细胞。