梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3和Toll样受体4表达与Th1/Th2相关细胞因子的相关性研究

目的探究梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)表达与辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)相关细胞因子的相关性。方法选取2021年2月至2022年4月川北医学院附属三台医院收治的197例梅毒患者作为研究对象。将进行驱梅治疗后血清转阴者纳入转阴组(n=88),未进行驱梅治疗者纳入梅毒组(n=45),接受驱梅治疗后血清固定者纳入固定组(n=64)。另选取同期进行体检的健康人作为对照组(n=53)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞(PBMCs)中NLRP3、TLR4 mRNA相对表达水平;采用酶联免疫吸附试验法检测Th1/Th2相关细胞因子的表达水平;采用Pearson法分析TLR4、NLRP3 mRNA与Th1/Th2相关细胞因子的相关性。结果各组PBMCs中TLR4、NLRP3 mRNA表达水平比较,梅毒组>转阴组>对照组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组白介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)水平比较,对照组>转阴组>梅毒组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组IL-1β、IL-4、IL-10及IL-18水平比较,对照组<转阴组<梅毒组<固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);梅毒血清固定患者TLR4、NLRP3 mRNA表达与IFN-γ、IL-2呈正相关,与IL-1β、IL-4、IL-10、IL-18呈负相关(P<0.05)。结论梅毒血清固定患者NLRP3、TLR4 mRNA表达水平显著降低,且与Th1/Th2相关细胞因子密切相关。

vMDV感染鸡CD^(4+)与CD^(8+)T细胞动态变化

人工感染１日龄ＳＰＦ雏鸡马立克氏病强毒株（ｖＭＤＶ），在不同的感染期，以流式细胞仪分析感染鸡脾脏和外周血淋巴细胞中ＣＤ４＋和ＣＤ８＋细胞的动态变化。结果表明，感染鸡脾脏和外周血中ＣＤ８＋Ｔ细胞异常增高，而ＣＤ４＋Ｔ细胞表现为暂短的升高，其后迅速下降。ＣＤ４＋与ＣＤ８＋Ｔ细胞的这种异常变化是ｖＭＤＶ感染雏鸡后Ｔ细胞表型变化的重要特征之一。

血必净注射液对脓毒症大鼠Claudin4蛋白和辅助性T淋巴细胞1型表达的影响

目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肺组织Claudin4蛋白表达的影响。方法健康成年Sprague-Dawley大鼠100只,体重(250±25)g,随机分入4组,每组25只:假手术组大鼠只开腹、关腹和复苏,不行盲肠结扎穿孔术(CLP);脓毒症组大鼠行CLP;血必净3h组大鼠于CLP后3h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg;血必净12h组大鼠于CLP后12h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg。每组随机留取8只大鼠进行生存率分析。假手术组、脓毒症组、血必净3h组大鼠在术后6、15和24h,血必净12h组大鼠在术后15和24h各随机处死5只,分别留取血液和肺组织标本,测定肺组织湿/干质量比(肺水肿指数),对肺组织进行病理学观察并进行肺损伤病理学评分,测定血清促炎细胞因子IL-6和TNF-α水平,采用免疫组织化学方法测定肺组织骨架蛋白Claudin4蛋白表达情况,采用流式细胞术检测辅助性T淋巴细胞1型(Th1)在外周血单核细胞中的表达情况。结果假手术组、脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠的术后72h存活率分别为8/8、0、1/8和0,血必净3h组显著高于脓毒症组(P<0.01),血必净12h组与脓毒症组的差异无统计学意义(P>0.05)。假手术组大鼠术后各项检测指标均基本不变。脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数,以及术后6、15和24h的肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6、15和24h,以及血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数、肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于血必净3h组同时间点(P值分别<0.05、0.01);脓毒症组与血必净12h组术后同时间点间上述指标的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。脓毒症组和血必净3h组大鼠术后各时间点的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6和15h的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于血必净3h组同时间点(P值均<0.01),术后24h的外周血单核细胞中Th1的表达率显著低于血必净3h组同时间点(P<0.05)。结论早期使用血必净治疗可以有效地抑制脓毒症大鼠肺组织的炎性反应,减轻肺损伤,提高大鼠存活率,其可能机制与抑制肺组织Claudin4蛋白表达,降低肺泡通透性有关。

CD4^+T辅助细胞及细胞因子在儿童肺炎支原体肺炎中的表达

目的探讨儿童肺炎支原体肺炎发病机制,指导临床。方法选取我院呼吸科30例肺炎支原体肺炎患儿为实验组,30例细菌性肺炎患儿为普通组;30例健康儿童为对照组;检测血清T淋巴细胞亚群(CD4^+、CD8^+及CD4^+/CD8^+)、细胞因子(INF-γ/IL-4、INF-γ、IL-4)和IgE含量。结果治疗前,实验组CD4^+/CD8^+、CD4^+水平均低于对照组及普通组,CD8^+水平高于对照组及普通组,差异有统计学意义(Pb<0.05);治疗前,实验组患儿血清INF-γ、IL-4、IgE水平明显增高,INF-γ/IL-4下降,与对照组比较差异显著(Pa<0.05)。结论肺炎支原体肺炎患儿存在CD4^+T辅助细胞水平下降及以IL-4为代表的Th2细胞过度表达。

CD^(4+)CD^(25+)T细胞在牙周炎发生时的免疫调节作用研究

目的:探讨CD4+CD25+Treg在牙周炎发生时的免疫调节作用。方法:取成年SPF级Wistar大鼠35只,用丝线结扎加高糖饮食法建立牙周炎动物模型;分别于术前(正常对照)以及结扎后第2、4、8、12周不同时间摄取各大鼠牙龈组织和外周血,用流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例变化;用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析,组间比较用独立样本t检验。结果:结扎后牙龈组中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例(%)第2、4、8、12周各组分别为9.19±0.79、13.41±1.04、15.06±0.48、9.05±0.44,分别与正常对照组(6.69±1.22)相比P<0.05;2周与12周、4周与8周组间比较P>0.05,其他各组间比较P<0.05。外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比例(%)在结扎后2、4、8、12周分别为6.34±1.32、8.02±1.35、9.12±0.24、9.34±0.56;各组间两两相比,结扎4、8、12周组明显高于正常对照组(5.90±0.71)(P<0.05),4、8、12周组间比较P>0.05。结论:CD4+CD25+Treg可能在牙周炎的发生、发展过程中起免疫调节作用。

吉西他滨对宫颈癌患者辅助性T细胞17/CD4+CD25+调节性T细胞及肿瘤相关巨噬细胞的影响及意义

目的分析吉西他滨对宫颈癌患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)及肿瘤相关巨噬细胞的影响,为完善其药理机制提供数据支撑。方法将陕西中医药大学第二附属医院2014年12月至2016年12月收治的59例拟行手术治疗的宫颈癌患者采用随机数字表法分为观察组30例和对照1组29例,两组均给予三维适形放疗和手术切除,观察组在此基础上给予吉西他滨新辅助化疗。另取11例同期入院体检的健康志愿者为对照2组,观察组和对照1组分别于治疗前后取患者空腹肘静脉血,对照2组于体检时取空腹肘静脉血,采用流式细胞法测定Th17与CD4+CD25+Treg的外周血细胞计数,采用酶联免疫吸附测定试剂盒测定白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-17F(IL-17F)、白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子(TGF-β1)的血清水平。并于手术时留取病灶组织与癌旁健康组织,采用免疫组织化学实验测定肿瘤相关巨噬细胞表达水平。结果 (1)治疗前,观察组、对照1组和对照2组的Th17细胞计数分别为(4.75±0.63)%、(5.14±0.66)%和(12.02±1.85)%;CD4+CD25+Treg细胞计数分别为(13.41±1.52)%、(12.05±1.45)%和(7.52±0.88)%;治疗后,观察组、对照1组的Th17细胞计数分别为(16.52±3.02)%和(11.02±2.06)%,CD4+CD25+Treg细胞计数分别为(3.08±0.44)%和(6.11±0.74)%,与治疗前相比,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗后,观察组、对照1组血清IL-17A、IL-17F、IL-10及TGF-β1水平与治疗前相比,IL-17A与IL-17F水平有所升高,IL-10与TGF-β1水平有所下降,且观察组变化幅度高于对照1组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。(3)观察组和对照1组病灶组织的肿瘤相关巨噬细胞表达量为(1.82±0.14)和(2.25±0.46),健康组织分别为(0.38±0.17)和(0.35±0.16),病灶组织高于健康组织,观察组高于对照1组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论吉西他滨能够抑制宫颈癌患者Th17/CD4+CD25+Treg漂移和肿瘤相关巨噬细胞活性,可能是其发挥抗癌作用的重要机制之一。

腹腔镜切除术配合FOLFOX4新辅助化疗对直肠癌患者血清FAS、Tu M2-PK及T细胞亚群的影响

目的探讨腹腔镜切除术配合FOLFOX4新辅助化疗对直肠癌患者血清脂肪酸合成酶(FAS)、肿瘤型M2丙酮酸激酶(Tu M2-PK)及T细胞亚群的影响。方法前瞻性选择2011年1月至2013年1月在自贡市第四人民医院接受治疗的98例直肠癌患者,根据随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组各49例。观察组患者采取FOLFOX4新辅助化疗方案配合腹腔镜手术治疗及术后化疗方案。对照组采取腹腔镜手术及术后化疗。观察两组患者的手术时间、术中出血量、术后下床时间以及肛门首次排气时间。两组患者入院时、术后化疗结束后1个月、3个月、6个月内对癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)转阴率。比较两组患者入院时、术后化疗1个月、3个月、6个月血清FAS、Tu M2-PK水平、T细胞亚群等变化。结果两组患者手术时间、术后首次下床时间、肛门排气时间以及术中出血量,差异均无显著性(P> 0. 05)。观察组患者在术后化疗结束后1个月、3个月、6个月的CEA和CA199转阴率分别均显著高于对照组(P <0. 05)。与对照组相比,观察组术后化疗结束后1个月、3个月、6个月的血清FAS和Tu M2-PK水平均显著更低,差异具有统计学意义(P <0. 05)。术后化疗1个月、3个月、6个月后两组患者组间血清T细胞亚群水平比较,差异均无统计学意义(P> 0. 05)。与本组化疗前相比,观察组术前化疗结束后,患者血清CD4+细胞比率显著下降,CD8+细胞比率明显升高,CD4+/CD8+值明显降低,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论腹腔镜切除术配合FOLFOX4新辅助化疗有利于增加直肠癌患者的疗效,并降低患者术后血清FAS、Tu M2-PK水平,患者的T淋巴细胞亚群功能在术后将会逐渐改善,是一种安全、有效的治疗方法。

复合通用CD4^+T辅助细胞表位基因克隆载体的构建及测序

目的构建复合通用CD4+T辅助细胞表位基因克隆载体,并进行测序。方法由DNA work2.0软件设计并人工合成20条55个碱基的寡核苷酸序列,利用套叠PCR技术人工合成全基因序列,并克隆至pUC19载体,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,酶切鉴定并进行测序。结果经PCR扩增出645bp的目的DNA片段。酶切鉴定筛选出8个阳性克隆,经测序获得一个序列完全正确的克隆。结论已成功构建了复合通用CD4+T辅助细胞表位基因克隆载体,为研究表位疫苗和细菌多糖结合疫苗提供了新的载体表位。

中药调控CD^(+)_(4)T细胞干预湿疹炎症应答的研究进展

湿疹是一种变态反应性炎症性皮肤病,近期研究表明以CD^(+)_(4)T细胞亚群如Th1/Th2、Th17/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞分化失衡导致湿疹发病中出现过度炎症应答,而中药以改善CD^(+)_(4)T细胞亚群分化平衡干预湿疹免疫微环境具有较好的调节作用。以湿疹炎症应答前沿研究动态,探讨中药在改善调控CD^(+)_(4)T细胞亚群分化干预湿疹致病的作用优势,为中药在改善湿疹临床症状及机制研究提供一定的理论指导。

三种荧光色素标记的CD4抗体在流式细胞术研究T辅助细胞中的有效性评价

探讨三种荧光色素标记的CD4抗体在流式细胞术检测培养刺激前后的T辅助(Th)细胞中的有效性,从而确定Th细胞研究时优选且有效的CD4抗体。将佛波脂(PMA)和离子霉素(Ion)培养刺激前后的正常人外周血单个核细胞(PBMC)分别用CD3-APC和CD8-PerCP确定Th细胞(CD3+CD8-T细胞)百分率,用CD4-PerCP、CD4-FITC和CD4-APC确定Th细胞(CD4+T细胞)百分率。并用免疫磁珠分选后的CD4+T细胞验证CD4-APC抗体在Th细胞研究中的有效性。结果显示:Th细胞(CD3+CD8-T细胞)百分率在培养刺激前后基本无差别(P>0.05),而Th细胞(CD4+T细胞)百分率有所下降,其中CD4-PerCP下降的最明显(P<0.05),CD4-FITC和CD4-APC轻微下降(P>0.05)。就平均荧光强度(MFI)而言,CD4-APC在三种荧光色素的CD4抗体中最强,且与培养刺激前相比,培养刺激后的CD4-APC下降不明显(P>0.05),而CD4-PerCP和CD4-FITC平均荧光强度明显下降(P<0.05)。免疫磁珠分选后的细胞亦证实培养刺激对于CD4-APC表达的影响很小。结论:三种荧光色素抗体中,优选的CD4-APC抗体在流式细胞术中用于Th细胞研究是有效的。

Sema 4D基因在原发免疫性血小板减少症的表达及与T辅助细胞因子关系

目的:探讨Sema 4D基因在原发免疫性血小板减少症的表达及与T辅助细胞因子关系。方法:分别采用实时定量聚合酶链反应和微量样本多指标流式蛋白定量技术(CBA)分别检测外周血单核细胞Sema 4D mRNA水平和Th1/Th2细胞因子水平,分析Sema 4D mRNA水平和Th细胞因子水平的相关性分析。结果:(1)ITP患者外周血单核细胞Sema 4D mRNA水平显著高于健康对照志愿者(P<0.01),外周血清Th1细胞因子IL-2和IFN-γ水平显著低于健康对照受试者(P<0.05或P<0.01),Th2细胞因子IL-4、IL-6和IL-10水平显著高于健康对照受试者(P<0.01);(2)Th1细胞因子IL-2水平与Sema 4D mRNA水平负相关(P<0.01),Th2细胞因子IL-4、IL-6和IL-10水平与Sema 4D mRNA水平呈正相关(P<0.01)。结论:Sema4D mRNA在原发免疫性血小板减少症患者中呈高表达,并且分别与Th1和Th2细胞因子水平呈负相关和正相关。

滤泡辅助性T细胞CD4^(+)T细胞的表达与子宫内膜异位症伴不孕症患者发病及自身抗体的相关性

目的探讨滤泡辅助性T细胞(CXCR5^(+))CD4^(+)T细胞的表达与子宫内膜异位症伴不孕症患者发病及自身抗体的相关性。方法选取2017年4月至2020年10月中国人民解放军联勤保障部队第九○一医院诊治的120例子宫内膜异位症伴不孕症患者作为研究对象,设为观察组,进行前瞻性研究。另选取同期120例进行健康体检的志愿者作为对照组。比较两组的CXCR5^(+)CD4^(+)T细胞表达水平、性激素水平、自身抗体水平,分析CXCR5^(+)CD4^(+)T细胞表达水平与自身抗体水平的相关性。结果观察组CXCR5^(+)CD4^(+)T细胞比例显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组血清抗卵巢抗体(AoAb)、抗精子抗体(AsAb)、抗绒毛膜促性腺激素抗体(HCGAb)、抗心磷脂抗体(AcAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)阳性率均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E_(2))水平均显著高于对照组,卵泡刺激素(FSH)水平显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,子宫内膜异位症伴不孕症患者CXCR5^(+)CD4^(+)T细胞比例与AoAb、AsAb、HCGAb、AcAb、EmAb阳性率均呈正相关(P<0.05)。结论CXCR5^(+)CD4^(+)T细胞的表达与子宫内膜异位症伴不孕症患者发病密切相关,与自身抗体呈正相关。

乳酸对类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞亚群的调控作用

目的:研究类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清乳酸水平及其与疾病活动度的关系,分析乳酸对RA患者外周血中CD4+T细胞的活化、分泌细胞因子能力以及对CD4+T细胞亚群的作用。方法:选择大连医科大学附属第二医院风湿免疫科2019年10月至2021年9月连续收治的RA患者作为病例组,同期与RA患者性别年龄相匹配的大连医科大学附属第二医院体检中心健康人(healthy control,HC)作为对照组,收集两组外周血,乳酸检测试剂盒检测上清液中乳酸含量,并分析其与RA患者疾病评分的相关性。用乳酸刺激后,通过流式细胞术检测所有病例组RA患者外周血中CD4+T细胞的活化水平、CD4+T细胞亚群的比例以及CD4+T细胞分泌的细胞因子。结果:RA患者(n=66)的血清乳酸水平[(5.13±1.01)mmol/L vs.(1.72±0.91)mmol/L,P<0.001]明显高于HC(n=60),且与RA患者DAS28(disease activity score in 28 joints)-C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)评分有相关性(r=0.273,P=0.029),乳酸浓度>5 mmol/L较浓度≤5 mmol/L的类风湿因子(rheumatoid factor,RF)[197.50(26.03,783.00)IU/mL vs.29.30(0.00,102.60)IU/mL,P<0.01]和CRP[37.40(11.30,72.60)mg/L vs.5.83(2.36,12.45)mg/L,P<0.001]的表达均升高,而红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)[42.00(19.00,77.00)mm/h vs.25.00(12.50,45.50)mm/h,P>0.05]和抗环瓜氨酸多肽(cyclic citrullinated peptied,CCP)抗体[82.35(17.70,137.00)RU/mL vs.68.60(25.95,119.70)RU/mL,P>0.05]的表达差异无统计学意义。与对照组HC相比,乳酸处理组的RA患者CD4+T细胞表面PD-1(46.15%±8.54%vs.41.67%±9.98%,P<0.001)、诱导共刺激分子(inducible costimulatory molecule,ICOS)(25.77%±8.60%vs.18.65%±7.94%,P<0.01)和CD25(25.89%±5.80%vs.22.25%±4.59%,P<0.01)的表达明显升高;乳酸处理组的RA患者CD4+T细胞中Th17(4.62%±1.74%vs.2.93%±1.92%,P<0.05)、外周辅助性T(peripheral helper T,Tph)细胞(28.02%±6.28%vs.20.32%±5.82%,P<0.01)的比例升高;乳酸处理组的RA患者CD4+T细胞中IL-21(5.73%±1.59%vs.4.75%±1.71%,P<0.05)的表达上调。结论:RA患者血清乳酸水平升高,促进了RA患者CD4+T细胞活化和分泌IL-21,以及上调了RA患者Th17、Tph细胞的比例。

CD4^(+)T细胞亚群在皮肌炎发病机制中的研究进展

目的探讨皮肌炎(DM)的免疫学发病机制,特别关注CD4^(+)T细胞亚群在其发病过程中的作用。方法从免疫失衡的角度,通过分析近10年来的文献,深入探讨了DM与CD4^(+)T细胞亚群的关联,全面梳理了细胞因子及相关信号分子等方面的信息。结果主导免疫反应的CD4^(+)T细胞亚群,在DM的发病过程中有显著影响。其中,辅助性T细胞1型(Th1)与Th2和Th17与调节性T细胞(Tregs)比值的不平衡在DM的病理过程中起着核心作用。新发现的CD4^(+)T细胞亚群,Tph细胞(PD-1hiCXCR5−CD4^(+))可能也参与DM的发病过程。结论CD4^(+)T细胞因子的异常表达及其网络失衡参与了DM的免疫学发病机制,为治疗DM提供了新的视角。

抗体封闭CD4分子对辅助性T细胞活化的影响

目的了解抗体封闭CD4分子后对辅助性T细胞活化的影响。方法用佛波酯(Phorbol12-myristate 13-Ac-etate,PMA)作刺激剂,与抗CD4分子抗体结合和未结合的正常人全血共培养,用流式细胞仪检测CD4细胞CD69的表达。结果培养2h后抗体结合组CD4细胞CD69的表达率低于未结合组,差异有统计学意义(P<0.01),培养4h后抗体结合组CD4细胞CD69的表达率高于培养2h后抗体结合组(P<0.01)。结论抗体封闭CD4分子后可使辅助性T细胞活化延迟。

CD4^(+)T淋巴细胞亚群与心肌梗死关系的研究进展

心肌梗死(MI)是全球致死、致残的主要原因之一,严重危害人们的生命健康。进一步探索MI的相关病理机制有利于促进AMI的诊断、治疗和预后。MI设计复杂的病理过程,罪犯血管中往往含有大量可以诱导炎性反应的免疫细胞,其中以CD4^(+)T细胞亚群中的1型辅助性T(Th1)细胞最多见,此外还包括含量较低的Th2细胞、Th17细胞、调节性T细胞(Treg)、Th9细胞、Th22细胞及滤泡辅助性T(Tfh)细胞等。这些CD4^(+)T细胞通过自分泌或旁分泌方式释放多种细胞因子,并通过作用于炎性细胞调节动脉粥样硬化斑块的发生、发展。从而促进了MI的发生、发展,影响患者预后,本文就CD4^(+)T细胞亚群在MI的发生、发展、梗死后炎性反应及心室的不良重构等方面的研究进展进行综述,以期进一步阐明MI的病理过程,同时为MI预防、治疗及改善预后提供新的潜在靶点。

乳腺癌病灶内CD4^+、CD8^+T淋巴细胞浸润对预测新辅助化疗敏感性的研究

目的:分析乳腺癌病灶内CD4^+、CD8^+T淋巴细胞浸润对预测新辅助化疗敏感性的价值。方法:选取2014年1月至2016年10月在惠州市第三人民医院确诊的60例乳腺浸润性癌患者作为研究对象,通过免疫组化评估肿瘤病灶内CD4^+、CD8^+T淋巴细浸润情况,将其分为CD4^+阳性和阴性组,CD8^+阳性和阴性组,TEC方案化疗4个周期后行乳腺磁共振(MRI)检查评估肿瘤缩小情况。结果:CD4^+、CD8^+T阳性组肿瘤的对化疗更敏感,差异具有统计学意义(P<0.05),Spearman秩相关分析显示,CD4^+、CD8^+浸润与否与化疗敏感性呈正相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌原发灶内CD4^+、CD8^+T淋巴细胞浸润可用于预测乳腺癌TEC方案新辅助化疗的敏感性。

乌司他丁对脓毒症患者CD^(4+)CD^(25+)调节性T细胞变化的影响及其与预后的关系

目的探讨乌司他丁对脓毒症患者CD^(4+)CD^(25+)调节性T细胞(Treg)的影响及其与预后的关系。方法脓毒症患者随机分为乌司他丁治疗组和对照组,对照组给予常规的脓毒症治疗,乌司他丁治疗组在对照组的基础上加用乌司他丁治疗。分别于确诊后第1天、第3天、第5天比较两组间CD^(4+)CD^(25+)细胞/CD^(4+)细胞比例、白介素(IL-10)水平以及28 d死亡率。结果乌司他丁治疗组患者的病死率和ICU住院时间均低于对照组,差异均有统计学意义(χ~2=4.21,t=3.12,P均<0.05)。乌司他丁治疗组患者的CD^(4+)CD^(25+)细胞/CD^(4+)细胞比例和血清IL-10值在第1、3、5天组内比较,差异均有统计学意义(Hc分别=114.58、45.93,P均<0.05);乌司他丁治疗组第3天CD^(4+)CD^(25+)细胞/CD^(4+)细胞比例和IL-10值均高于第1天,第5天比例较第3天明显下降,差异均有统计学意义(t分别=10.57、6.43、3.73、5.08,P均<0.05)。在第3天,乌司他丁治疗组CD^(4+)CD^(25+)细胞/CD^(4+)细胞比例低于对照组,在第5天CD^(4+)CD^(25+)细胞/CD^(4+)细胞比例和IL-10值明显低于对照组,差异均有统计学意义(t分别=2.38、7.97、5.79,P均<0.05)。结论乌司他丁能抑制脓毒症患者CD^(4+)CD^(25+)Treg及IL-10的持续上升,避免出现免疫麻痹,降低病死率。

颗粒蛋白前体衍生物Atsttrin对骨关节炎的保护作用及对CD^(+)_(4)T细胞的调节作用

目的揭示颗粒蛋白前体衍生物Atsttrin对骨关节炎的保护作用及对CD^(+)_(4)T细胞的调节作用。方法本研究起止时间为2018年10月至2019年12月,60只5周龄SD雄性大鼠购自西安交通大学医学部实验动物中心。采用膝关节前交叉韧带横断法建立骨关节炎大鼠模型,通过关节内注射15μL Atsttrin(1μg/μL)对模型大鼠进行治疗,每周注射1次,连续注射4周。通过番红O固绿染色检测软骨损伤程度,采用OARSI评分系统评价软骨退化情况。ELISA法检测大鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。流式细胞仪分析血清Th1、Th2、Th17和Treg细胞比例。应用终浓度为10μg/L的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导滑膜细胞和软骨细胞48 h,并分别用终浓度为10μg/L、20μg/L、50μg/L的Atsttrin处理滑膜细胞和软骨细胞48 h。通过5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)细胞增殖测定试剂盒检测滑膜或软骨细胞的增殖。通过RT-PCR和Westernblotting检测软骨细胞中解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β的信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达。结果与模型组相比,Atsttrin组大鼠的膝关节软骨破坏情况明显减轻(P<0.05)。与模型组相比,Atsttrin组大鼠国际骨关节炎研究学会(OARSI)评分显著降低[(2.56±0.21)比(1.08±0.11),P=0.001]。Atsttrin组大鼠的血清IFN-γ和IL-17水平显著低于模型组,而IL-4和TGF-β水平显著高于模型组(P<0.05)。Atsttrin组大鼠的血清Th1和Th17细胞比例显著低于模型组,而Th2和Treg细胞比例显著高于模型组(P<0.05)。Atsttrin处理显著降低了TNF-α诱导的滑膜细胞的增殖能力,并提高了TNF-α诱导的软骨细胞的增殖能力(P<0.05)。Atsttrin显著下调了TNF-α诱导的软骨细胞中ADAMTS-4、MMP-13、IFN-γ和IL-17的mRNA和蛋白表达水平,并上调了IL-4和TGF-β的表达水平(P<0.05)。结论Atsttrin可有效抑制骨关节炎大鼠模型的软骨病变并提高关节功能。Atsttrin可通过抑制滑膜细胞增殖、促进软骨细胞增殖、抑制软骨机制降解来维持关节内微环境的稳定。此外,Atsttrin的关节软骨保护作用与纠正Th1/Th2细胞以及Th17/Treg细胞的失衡有关。

CD4+CD29+辅助性T细胞在脊髓损伤患者的表达与临床意义

目的探索CD4+CD29+辅助性T细胞在脊髓损伤患者的表达与临床意义。方法收集脊髓损伤患者75例,以50例健康人作为对照组,采用流式细胞术检测外周血CD4+CD29+辅助性T细胞及其胞内细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及白介素4(IL-4)含量;分别在伤后第3及7天复查三者,并分析三者与Frankel分级的相关性。结果与正常人比较,脊髓损伤患者CD4+CD29+T细胞及IL-4含量明显升高,而IFN-γ含量明显降低(P<0.05);治疗第3天,CD4+CD29+T细胞及IL-4较受伤第1天均有不同程度下降,而IFN-γ不同程度回升,其中以D及E级的改变明显(P<0.05)。治疗第7天,CD4+CD29+T细胞及IL-4继续下降,IFN-γ继续回升,其中D及E级患者的CD4+CD29+T细胞、IFN-γ及IL-4均较day3有显著性差异(P<0.05)。相关性分析提示CD4+CD29+T细胞及IL-4均与Frankel分级具有显著正相关性,而IFN-γ与Frankel分级呈显著负相关性。结论 CD4+CD29+辅助性T细胞及IL-4升高,而IFN-γ降低是脊髓损伤的重要免疫特征,与病情转归相关,且与损伤程度呈相关性,因此具有重要临床意义。