2型糖尿病患者CD11b/CD18的表达及罗格列酮的干预作用

目的 :探讨在 2型糖尿病 (DM )患者中多形核白细胞粘附分子CD11b/CD18的表达及罗格列酮防止肾脏病变可能机制。方法 :49例无高血压、无临床肾病的 2型DM患者随机分成罗格列酮治疗组 (2 6例 )和常规治疗组 (2 3例 ) ,治疗 3个月。治疗前后观察尿白蛋白排泄率、CD11b/CD18的表达及肿瘤坏死因子 α浓度等指标。结果 :与健康对照组比较 ,2型DM患者的CD11b/CD18表达增高 ,肿瘤坏死因子 α浓度也明显增高 (P <0 0 1)。与常规治疗组比较 ,罗格列酮治疗 3个月后 ,2型DM患者的CD11b/CD18表达、尿白蛋白排泄率和肿瘤坏死因子 α明显降低 (P <0 0 1) ,而常规治疗组无类似的变化。相关性分析提示 ,尿白蛋白排泄率下降与肿瘤坏死因子 α浓度降低和多形核白细胞粘附分子CD11b/CD18表达的下降呈正相关 (r =0 5 6,P <0 0 1andr =0 64 ,P <0 0 1)。结论 :2型DM患者的多形核白细胞粘附分子CD11b/CD18表达增高 ;

下肢动脉硬化闭塞症患者中性粒细胞黏附分子CD11b/CD18表达及血府逐瘀口服液的干预作用

目的观察外周血中性粒细胞黏附分子CD11b/CD18的表达水平与下肢动脉硬化闭塞症(ateriosclerosisobliterans,ASO)的关系及体外血府逐瘀口服液对CD11b/CD18的影响。方法应用流式细胞术直接免疫荧光法,检测ASO患者及健康对照组外周血中性粒细胞黏附分子CD11b/CD18的表达水平;分离培养患者中性粒细胞,用血府逐瘀口服液干预,检测用药后(1h、6h、12h)CD11b/CD18的表达水平的变化。结果ASO患者CD11b/CD18的表达水平显著高于对照组(P<0.05),与病情严重程度一致,随着病情的进展CD11b/CD18的表达增高;体外用血府逐瘀口服液干预6、12h后中性粒细胞CD11b/CD18的表达降低,与未用药组及用药1h组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论CD11b/CD18可能参与了ASO的发病过程,并且与动脉硬化程度有关,血府逐瘀口服液治疗和预防ASO的机制之一,可能是通过降低外周血中性粒细胞CD11b/CD18的表达,干预中性粒细胞黏附。

CD11b^+ NKT细胞抑制Poly I:C诱导小鼠肝损伤中CD8^+T细胞增殖反应

目的:研究Poly I:C诱导的肝损伤模型中肝脏内上调的CD11b+NKT细胞对CD8+T细胞增殖反应的作用。方法:经腹腔注射Poly I:C(20μg/g)制备Poly I:C诱导小鼠肝损伤模型,流式细胞术检测CD11b+NKT细胞的比例、T细胞增殖反应和CD8+T细胞的杀伤功能,ELISA法检测细胞培养上清中的细胞因子浓度。结果:Poly I:C诱导的肝损伤模型小鼠的肝脏中CD11b+NKT细胞的比例显著上升[(71.7±5.3)%vs(12.4±3.6)%,P<0.01]。细胞因子表达谱分析发现,CD11b+NKT细胞分泌IFN-γ、IL-4和IL-10的能力显著低于CD11b-NKT细胞。功能分析发现,CD11b+NKT细胞能够显著抑制anti-CD3/CD28单抗诱导非特异性的和OVA特异性的CD8+T细胞增殖反应,而CD11b-NKT细胞没有此抑制功能;进一步分析发现,CD11b+NKT细胞并不影响CD8+T细胞的杀伤功能。结论:Poly I:C诱导的肝损伤模型小鼠肝脏中CD11b+NKT细胞比例升高,该细胞能够负反馈抑制CD8+T细胞的增殖反应,但是并不影响CD8+T细胞的杀伤功能。

IL-6、IL-8、CD64和CD11b检测对新生儿感染性疾病的诊断价值

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、CD64和CD11b在新生儿感染性疾病早期诊断中的价值。方法选取2013年3月至2014年3月上海市第一人民医院儿科和产科收治的新生儿,分为感染组(50例)、非感染对照组(30例)、健康对照组(50例);采用定量夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清IL-6和IL-8水平,采用全血三色荧光标记法流式细胞术检测外周血中性粒细胞表面CD64和CD11b分子表达水平,比较分析3组新生儿的IL-6、IL-8、CD64和CD11b水平及阳性率。结果对于血清IL-6、IL-8两项检测指标,感染组分别为(187.3±25.1)ng/L、(1.05±0.32)pg/mL,非感染对照组分别为(60.9±5.2)ng/L、(0.35±0.12)pg/mL,健康对照组分别为(53.2±9.3)ng/L、(0.30±0.05)pg/mL;感染组分别高于非感染对照组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。并且感染组中性粒细胞表面CD64、CD11b分子表达水平分别高于非感染对照组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论临床检测新生儿血清IL-6、IL-8水平及外周血中性粒细胞表面CD64和CD11b分子的表达水平,可更加及时、准确、灵敏地诊断新生儿早期感染性疾病。

髓过氧化物酶、CD11b和IL-8在哮喘大鼠模型中表达增加

目的观察哮喘模型大鼠中性粒细胞(PMN)CD11bI、L-8和髓过氧化物酶(MPO)的表达,探讨PMN在哮喘中的作用及其可能的机制。方法复制哮喘大鼠模型,随机分成哮喘组和对照组,分离纯化血PMN;免疫组化法检测MPO表达,ELISA法测定IL-8蛋白,流式细胞术测定血PMN CD11b表达,支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞计数。结果哮喘组肺组织和血PMN中MPO、CD11b及血PMN和BALF中IL-8的水平显著高于对照组(P<0.01)。哮喘组BALF中PMN和嗜酸性粒细胞计数显著高于对照组(P<0.01)。结论BALF中PMN数量增加及血中PMN和肺组织中CD11bI、L-8和MPO在哮喘时表达增加,他们可能参与了哮喘的炎症过程。

粘附分子CD11b/CD_(18)白介素-8与慢性阻塞性肺疾病

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是世界范围内危害人类健康的疾病,发病率和病死率都很高,其确切发病机制仍不十分清楚,涉及多种炎症细胞和细胞因子、蛋白酶和抗蛋白酶系统、氧化和抗氧化等.而以中性粒细胞、巨噬细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CD8+ T淋巴细胞)为主的气道壁、肺泡壁的炎症和进行性发展的气流阻塞是COPD的两大特点[1,2].

CD11b+细胞诱导CD8+T细胞表达PD-1研究

目的探究肿瘤微环境中CD8+T细胞免疫抑制性受体PD-1的表达。方法使用小鼠肺癌细胞系3LL建立荷瘤小鼠模型,流式细胞术检测分析肿瘤微环境中各类免疫细胞的比例以及CD8+PD-1+T细胞比例;使用免疫磁珠细胞分选法MACS分别分选CD11b+细胞以及CD8+T细胞,两种细胞按照1∶1比例共培养,并加入3LL肿瘤细胞培养上清,培养48 h,流式细胞术检测分析CD8+T细胞PD-1表达水平。结果(1)肿瘤微环境中存在大量CD11b+细胞,此外还包含16.4%左右CD3+T细胞,肿瘤实质的重量与肿瘤微环境中T细胞比例呈负相关。(2)荷瘤小鼠淋巴结中CD8+PD-1+T比例升高(P<0.05);肿瘤微环境中CD8+PD-1+T细胞比例显著升高(P<0.01),占CD8+T细胞的40%左右,肿瘤微环境中CD8+T细胞还表达其他免疫抑制分子如TIM-3、LAG-3;(3)相比单独使用肿瘤细胞培养上清,CD11b+细胞加肿瘤细胞培养上清可诱导CD8+T细胞表达PD-1(P<0.05)。结论在肿瘤微环境中,CD11b+细胞可诱导CD8+T细胞表达免疫抑制性受体PD-1。

肿瘤环境影响抗感染CD8^+T细胞应答启动的初步研究

目的探讨肿瘤环境下,机体对非肿瘤来源的外来微生物抗原特异性CD8+T细胞应答的变化及其可能机制,为肿瘤患者免疫调节治疗提供理论依据。方法在建立小鼠荷瘤模型的基础上,尾静脉感染李斯特菌(OVA-Listeria Monocytogenes,OVA-LM),观察其生存曲线的变化;在荷瘤后感染小鼠模型中,通过流式胞内细胞因子染色和Pentamer染色技术检测小鼠抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答的变化;通过标记CFSE的OT-Ⅰ细胞过继转移小鼠,观察体内抗原特异性CD8+T细胞增殖和抗原呈递情况;FACS分析荷瘤情况下小鼠脾脏CD11b+Gr-1+细胞及Treg细胞比例和数量变化。结果荷瘤小鼠感染OVA-LM菌后生存期明显缩短;荷瘤小鼠脾脏抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答显著下调;抗原特异性CD8+T细胞增殖速率没有显著变化,但是细胞总数明显下降;荷瘤小鼠脾脏调节性T细胞比例未见明显变化,但CD11b+Gr-1+细胞显著上调。结论荷瘤小鼠抗感染CD8+T细胞免疫反应下降,其脾脏CD11b+Gr-1+细胞显著上调,提示肿瘤环境下脾脏CD11b+Gr-1+细胞升高可能是影响抗感染CD8+T细胞应答的重要因素。

肺腺癌浸润CD8^(+)T细胞表达CD39的机制

目的:探讨肿瘤浸润CD8^(+)T细胞表达CD39的可能机制。方法:通过TCGA数据库的肺腺癌(LUAD)组织及正常肺组织转录组数据分析CD39在LUAD组织和正常肺组织中的表达差异及其对患者预后的影响,分析CD39表达与T细胞浸润、激活的关系。用小鼠LUAD Lewis细胞建立小鼠皮下移植瘤模型,FCM检测淋巴结、脾脏以及移植瘤组织中CD8^(+)CD39^(+)T细胞。收集Lewis细胞培养上清液作为条件培养基(CCM),免疫磁珠法(MACS)分选CD8^(+)T细胞、CD11b^(+)细胞;在培养基中分别加入CCM、IL-6和采取非接触或接触培养方式进行培养,探索CD8^(+)T细胞表达CD39的可能机制。结果:CD39在LUAD组织中呈低表达(P<0.01),其表达水平与LUAD患者OS、T细胞浸润和激活水平均呈正相关(P<0.05或P<0.001)。FCM检测结果显示,在移植瘤组织中CD8^(+)CD39^(+)T细胞的比例明显高于淋巴结及脾脏(P<0.01);CCM及IL-6不能直接诱导CD8^(+)T细胞表达CD39,非接触共培养CD11b^(+)细胞与CD8^(+)T细胞也不能诱导CD8^(+)T细胞表达CD39,CD11b^(+)细胞与CD8^(+)T细胞直接接触共培养可诱导CD8^(+)T细胞表达CD39(P<0.01)。结论:CD11b^(+)细胞通过直接接触方式诱导肿瘤浸润CD8^(+)T细胞表达CD39,CD39可能是LUAD特异性CD8^(+)T细胞的分子标志。

红霉素对慢性阻塞性肺病患者CD_(11b)及白细胞介素8的影响

慢性阻塞性肺病 (COPD)急性发作期患者 45例 ,随机分成A组综合治疗加红霉素治疗 10d ,B组综合治疗 10d ,收集A、B两组治疗前后及健康对照组 (C组 )的外周血 ,分离出中性粒细胞和血浆 ,并制作中性粒细胞涂片。用桥联酶免疫法测定CD11b表达阳性的中性粒细胞百分率 ;用放免法测定血浆IL -8的水平。结果A组及B组治疗前 ,患者外周血中性粒细胞CD11b表达阳性率 ,血浆IL -8的水平均显著高于健康对照组 (P <0 0 5 ) ,并且CD11b同IL -8呈显著正相关 (r =0 3 8)。治疗前 ,A组同B组相比 ,CD11b表达阳性率 ,IL -8的水平无显著差异 (P >0 0 5 ) ;治疗后 ,A组同B组相比 ,CD11b的表达阳性率 ,IL -8的水平差异均有显著性。红霉素能抑制COPD患者外周血中性粒细胞CD11b的表达 ,降低血浆IL -8的水平。

缺氧缺血性脑病新生儿血清白细胞介素-8水平和中性粒细胞表面黏附分子CD_(11b)表达的变化

目的观察缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿外周血IL-8和中性粒细胞表面黏附分子CD11b表达水平的变化,探讨其在HIE发病中的临床意义。方法选取HIE 94例患儿为HIE组。其中轻度25例,中度31例,重度38例;另选同期本院出生的32例健康新生儿为健康对照组。分别采用ELISA和流式细胞术检测2组新生儿血清IL-8、CD11b表达水平。并对HIE患儿IL-8与CD11b的相关性进行分析。结果 HIE组血清IL-8水平和CD11b表达水平均显著高于健康对照组(Pa<0.01)。轻度、中度、重度HIE患儿血清IL-8水平和CD11b表达量均较健康对照组明显增高(Pa<0.05),组间两两比较,差异均有统计学意义(Pa<0.05),其中重度HIE患儿表达最高。HIE患儿血清IL-8水平与CD11b表达量呈显著正相关(r=0.84,P<0.01)。结论 IL-8和CD11b可能在HIE发病机制中起重要作用,可作为病情判断及预后评估的观察指标之一。

乳脂球上皮生长因子-8在大鼠神经层视网膜小胶质细胞中的表达

背景神经层视网膜小胶质细胞在视网膜胚胎后期发育过程中起“清道夫”的作用，可清除凋亡细胞。乳脂球上皮生长因子18（MFG—E8）能特异性地与凋亡细胞表面的磷酯酰丝氨酸相结合，增强巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬作用。目的观察MFG—E8及相关细胞因子在正常大鼠神经层视网膜胚胎后期发育过程中的表达。方法取清洁级鼠龄为0、3、7、14、30、45d的正常皇家外科学院（RCS）大鼠各5只。免疫荧光双标染色标记MFG—E8和小胶质细胞标志物CD11b，荧光实时定量聚合酶链反应（real—time PCR）检测正常大鼠各组视网膜中MFG—E8、整合素135、CD11b、白细胞介素-6（IL-6）mRNA的表达变化。结果MFG—E8免疫阳性细胞分布于视网膜内层，主要为视网膜节细胞层和外丛状层，与CD11b染色部位相同。Real—time PCR检测发现，在出生后即可检测到MFG-E8、整合素β5、CD11b及IL-6 mRNA的表达，其表达量在出生后早期较低，然后逐渐增加，鼠龄14d组的mRNA表达最强烈，然后逐渐下降。鼠龄14d组的各因子mRNA表达水平明显高于其他鼠龄组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论MFG—E8特异地表达于正常RCS大鼠神经层的视网膜小胶质细胞，表达量出生后呈先升高后降低，14d为高峰的规律。

新生儿细菌性感染对CD11b、CD64、PAF、PAF-AH和IL-8表达的影响

目的探讨新生儿细菌性感染对中性粒细胞粘附因子CD11b、CD64、血小板活化因子(PAF)、PAF乙酰水解酶(PAF-AH)和白细胞介素-8(L-8)表达的影响,为新生儿细菌性感染临床诊治提供参考。方法选取2015年6月-2016年2月在医院住院50例细菌性感染新生儿(感染组)和50例非感染性疾病新生儿(非感染组),检测静脉血CD11b、CD64、和IL-8,动脉血PAF、PAF-AH。结果感染组CD11b、CD64、PAF和IL-8为(305.30±140.29)MFI、(23.10±14.56)MFI、(8.06±5.33)μg/L、(172.39±31.85)ng/L,高于对照组(231.21±84.68)MFI、(8.12±3.05)MFI、(4.27±2.31)μg/L、(40.21±16.92)ng/L,PAF-AH为(6.22±2.34)μmol/L/min低于对照组(9.74±2.13)μmol/L/min,比较差异有统计学意义(P<0.05);全身感染组CD11b、CD64、PAF和IL-8高于局部感染组,PAF-AH低于局部感染组,比较差异有统计学意义(P<0.05);感染组治疗7d时CD11b、CD64、PAF和IL-8低于治疗前,PAF-AH高于治疗前,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生儿细菌性感染时可引起血CD11b、CD64、PAF和IL-8的表达升高,PAF-AH活性下降,以上指标表达程度与感染严重程度关系密切。

增殖性肾小球肾炎肾组织IL-8、CD_(11b)检测

目的 :观察增殖性肾炎 (PGN)肾组织中IL 8、CD11b生成与分布 ,探讨其意义。方法 :免疫组织化学方法检测 17例不同类型的PGN临床患者肾穿刺组织中IL 8、CD11b抗原蛋白 ,以 8例正常人肾组织及 7例膜性肾病 (MN)临床患者肾穿组织作对照检测。结果 :IL 8、CD11b在PGN肾组织大量检出 ,分布较广 ,检出率显著增高于正常对照组 (P <0 0 5、P <0 0 1)和MN对照组 (P <0 0 5、P <0 0 1)。结论 :PGN肾组织存在IL 8介导的有关炎症 ;IL 8、CD11b肾组织检测可予较好反映 ,IL 8及其炎症在PGN发病与病理中具促进作用。

内毒素作用中的蛋白质和信号通路

综述内毒素作用中有关的蛋白及其传导通路。脂多糖结合蛋白 (LBP)可以结合内毒素并把它传递给受体 ,如CD14和CD11/CD18。Toll样受体 (TLRs)的功能与信号向胞内传递有密切的关系 ,清道夫受体则与肝脏清除内毒素的功能有关。胞内信号转导涉及多种途径 。

气血并治方及方中理气药、活血药对高脂血症血瘀大鼠炎症因子的干预作用

目的 探讨动脉粥样硬化初期炎症反应机制和气血并治复方及方中理气药、活血药对其干预作用。方法 采用高脂应激造成大鼠高脂血症血瘀模型 ,观察各组大鼠脂质代谢、白介素 - 6、白介素 - 8和白细胞粘附活化分子表达率 (CD11b)的变化。结果 和模型组比较 ,全方组对TC、TG、TC HDL C、LDL C、IL 6、wCD11b和zCD11b有显著降低作用 ,理气药组对TC、TG、LDL C、IL 6、IL 8和wCD11b有显著降低作用 ,活血药组对TC、LDL C、IL 6和wCD11b有显著降低作用 (P <0 0 5和P <0 0 1)。结论 气血并治方可干预AS炎症反应 ,是抗AS的作用机制之一 ,方中理气药和活血药作用机制不尽相同 ,有协同作用。

中性粒细胞在子痫前期发病中的作用

目的:明确中性粒细胞在子痫前期患者中的状态,了解中性粒细胞与子痫前期发病的关系。方法:采用流式细胞术检测20例子痫前期患者和20例正常妊娠孕妇肘静脉血中性粒细胞黏附分子CD11b的表达,同时采用酶联免疫吸附实验检测两组孕妇肘静脉血浆中性粒细胞的趋化因子IL-8和中性粒细胞释放的弹性蛋白酶的浓度。结果:①子痫前期组CD11b的平均对数荧光强度指数、血浆IL-8和弹性蛋白酶的浓度〔分别为(19.519±9.281)、(23.665±6.017)、(148.475±97.227)pg/ml〕均高于正常妊娠组〔分别为(13.871±6.872)、(18.831±3.472)、(87.102±58.545)pg/ml〕;②子痫前期孕妇的中性粒细胞CD11b平均对数荧光强度指数、血浆IL-8和弹性蛋白酶的浓度与中性粒细胞绝对数,入院血压、新生儿的出生体重无相关关系。结论:子痫前期患者中性粒细胞CD11b的表达增强,趋化因子IL-8浓度及中性粒细胞释放的弹性蛋白酶浓度升高,表明中性粒细胞在子痫前期中活性增强,可能与内皮细胞的损伤有关,在子痫前期的发病中起重要作用。