MicroRNA调节免疫性血小板减少症CD4^(+)T细胞亚群免疫功能的研究进展

MicroRNA(miRNA)是一种小分子非编码单链RNA,可广泛参与多种生物学过程,对调节机体的免疫功能具有重要作用。免疫性血小板减少症(ITP)是一种自身免疫性疾病,其发生和进展与miRNA介导CD4^(+)T细胞亚群的异常免疫调节密切相关。ITP患者miRNA的不同表达情况可影响CD4^(+)T细胞亚群的免疫功能,导致Th1/Th2、Th17/Treg的调节失衡和TFH的过度分化,引起细胞因子分泌异常。本文就ITP中miRNA介导的CD4^(+)T细胞亚群免疫功能失衡机制进行总结,以期为探索ITP的免疫机制和免疫治疗提供启发。

急性痛风性关节炎患者外周血脂联素与CD4^(+)T细胞亚群的分析及相关性研究

目的比较急性痛风性关节炎患者与健康对照组外周血脂联素及CD4+T细胞亚群的差异,并探究痛风患者脂联素与血尿酸、疾病活动度、CT4^(+)T细胞亚群及部分细胞因子的相关性。方法收集急性痛风组(n=90)及健康对照组(n=72)的临床资料(包括一般资料、中性粒细胞、红细胞沉降率、C反应蛋白、血尿酸、CT4^(+)T细胞亚群及部分细胞因子);检测两组外周血脂联素水平,比较两组间外周血脂联素及CD4+T细胞亚群的差异;分析脂联素与各临床资料的相关性。结果与健康对照组比较,急性痛风组外周血脂联素水平明显降低(P<0.001),且Th2、Th17、Th17/Treg均升高(P<0.05),Treg、Th1/Th2均降低(P<0.05)。急性痛风组外周血脂联素与中性粒细胞、红细胞沉降率及C反应蛋白均呈负相关(r=-0.244,P<0.05;r=-0.311,P<0.05;r=-0.506,P<0.001),而与血尿酸无相关性。急性痛风组外周血脂联素与Th1和Th1/Th2均呈正相关(r=0.252,P<0.05;r=0.218,P<0.05)。急性痛风组外周血脂联素与白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)均呈正相关(r=0.323,P<0.05;r=0.377,P<0.05;r=0.359,P<0.05);而与白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)呈负相关(r=-0.265,P<0.05;r=-0.299,P<0.05)。多元线性回归分析显示,急性痛风组外周血脂联素与红细胞沉降率、C反应蛋白、IL-6及TNF-α均呈负相关(B _(ESR)=-12.541,P=0.003;B_( CRP)=-8.256,P=0.024;B_( IL-6)=-15.907,P=0.037;B _(TNF-α)=-79.770,P=0.040),而与Th1呈正相关(B _(Th1)=2.959,P=0.006)。结论急性痛风性关节炎患者外周血脂联素水平降低,Th2和Th17升高,而Treg降低,脂联素降低与急性痛风性关节炎患者免疫紊乱及免疫炎症相关。

CD93^(+)B淋巴细胞亚群在炎症及炎症相关疾病中的研究进展

CD93表达于原B(pro-B)细胞、前B(pre-B)细胞以及各种不成熟B细胞,CD93可以和膜突蛋白(moesin)、多聚素2(MMRN2)等分子相互作用参与细胞迁移、黏附和吞噬过程,进而在炎症以及血管生成过程中发挥着重要的作用。检测CD93+B细胞亚群对炎症及炎症相关疾病,如幽门螺杆菌相关性的胃炎、脓毒症、非肥胖型糖尿病以及牙周炎等疾病的诊断、治疗及预后监测具有重要的作用。

CD4^(+)T淋巴细胞亚群与心肌梗死关系的研究进展

心肌梗死(MI)是全球致死、致残的主要原因之一,严重危害人们的生命健康。进一步探索MI的相关病理机制有利于促进AMI的诊断、治疗和预后。MI设计复杂的病理过程,罪犯血管中往往含有大量可以诱导炎性反应的免疫细胞,其中以CD4^(+)T细胞亚群中的1型辅助性T(Th1)细胞最多见,此外还包括含量较低的Th2细胞、Th17细胞、调节性T细胞(Treg)、Th9细胞、Th22细胞及滤泡辅助性T(Tfh)细胞等。这些CD4^(+)T细胞通过自分泌或旁分泌方式释放多种细胞因子,并通过作用于炎性细胞调节动脉粥样硬化斑块的发生、发展。从而促进了MI的发生、发展,影响患者预后,本文就CD4^(+)T细胞亚群在MI的发生、发展、梗死后炎性反应及心室的不良重构等方面的研究进展进行综述,以期进一步阐明MI的病理过程,同时为MI预防、治疗及改善预后提供新的潜在靶点。

CD4^(+)T细胞亚群在皮肌炎发病机制中的研究进展

目的探讨皮肌炎(DM)的免疫学发病机制,特别关注CD4^(+)T细胞亚群在其发病过程中的作用。方法从免疫失衡的角度,通过分析近10年来的文献,深入探讨了DM与CD4^(+)T细胞亚群的关联,全面梳理了细胞因子及相关信号分子等方面的信息。结果主导免疫反应的CD4^(+)T细胞亚群,在DM的发病过程中有显著影响。其中,辅助性T细胞1型(Th1)与Th2和Th17与调节性T细胞(Tregs)比值的不平衡在DM的病理过程中起着核心作用。新发现的CD4^(+)T细胞亚群,Tph细胞(PD-1hiCXCR5−CD4^(+))可能也参与DM的发病过程。结论CD4^(+)T细胞因子的异常表达及其网络失衡参与了DM的免疫学发病机制,为治疗DM提供了新的视角。

CD8^(+)T细胞亚群对小鼠动脉粥样硬化形成的影响及其机制研究

目的 探索CD8^(+)T细胞亚群对小鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)形成的影响。方法 通过Lasso回归和随机森林法筛选AS血管关键免疫浸润细胞。构建载脂蛋白E基因(Apolipoprotein E,ApoE)/重组激活基因1(recombination activating gene-1,Rag1)双基因敲除(double knockout, DKO)小鼠,通过高脂喂食构建AS模型。将ApoE基因敲除小鼠分为对照组(Con组)、高脂喂食组(HFD组),每组3只;将ApoE/Rag1 DKO小鼠分为DKO+S组[高脂喂食+磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline, PBS)]、DKO+效应记忆型T细胞(effective memory T cell, Tem)组(高脂喂食联合CD8^(+)Tem回输)及DKO+终末分化Tem(terminal effector memory T cell, Temra)组(高脂喂食联合CD8^(+) Temra回输),每组3只。用油红O染色及苏木精-伊红染色观察Con组、HFD组、DKO+S组、DKO+Tem组及DKO+Temra组小鼠血管壁AS斑块形成情况。结果 Lasso回归和随机森林法结果提示,CD8^(+)Tem是参与班块形成的关键CD8^(+)T细胞类型。油红O染色和苏木精-伊红染色显示,与Con组比较,HFD组AS斑块面积显著增加(P<0.05);HFD组与DKO+S组AS斑块面积比较无显著差异(P>0.05);与DKO+S组比较,DKO+Tem组及DKO+Temra组AS斑块均显著增加(P<0.05)。结论 CD8^(+)T细胞亚群与小鼠AS形成密切相关,CD8^(+)Tem和CD8^(+)Temra显著诱导AS斑块形成。

富含萝卜硫素的西兰花提取物对小鼠外周血CD8^(+)T淋巴细胞活化及肠道菌群的影响

目的:探讨富含萝卜硫素(SFN)的西兰花提取物对小鼠肠道菌群及外周血CD8^(+)T淋巴细胞活化的影响。方法:将15只C57BL/6N小鼠随机分为空白对照(CON)组、阴性对照(NC)组和SFN组,每组5只小鼠,分别给予蒸馏水、不含SFN的西兰花提取物、含0.3 g/L SFN的西兰花提取物125μL灌胃,连续4周。每2 d测量1次体重。实验结束前采集小鼠外周血检测活化的CD8^(+)T淋巴细胞百分比以及CD8^(+)T淋巴细胞中IL-2、TNF-α的含量。收集小鼠粪便,进行肠道菌群分析。结果:3组小鼠不同时间点体重差异无统计学意义(P>0.05)。SNF组小鼠外周血活化的CD8^(+)T淋巴细胞百分比、CD8^(+)T淋巴细胞中IL-2和TNF-α含量高于CON组和NC组(P<0.05)。3组小鼠肠道菌群组成存在差异,SFN组小鼠肠道中疣微菌门及阿克曼菌属的相对丰度高于CON组和NC组(P<0.05)。肠道中阿克曼菌属的相对丰度与CD8^(+)T淋巴细胞中IL-2和TNF-α含量呈正相关(r=0.934和0.664,P<0.05)。结论:长期连续服用富含SFN的西兰花提取物能增加小鼠肠道中阿克曼菌属等有益菌的丰度,同时可增强外周血CD8^(+)T淋巴细胞的功能。

辐照红细胞与普通悬浮红细胞输注对肝癌患者CD4+T细胞亚群水平的影响

目的分析辐照红细胞与普通悬浮红细胞输注对肝癌患者CD4+T细胞亚群水平的影响。方法回顾性分析100例肝癌患者,根据输血红细胞类型,将以辐照红细胞输注治疗的65例患者纳入辐照组,以普通悬浮红细胞输注治疗的35例患者纳入普通组。比较输血前和输血后14 d时,2组患者外周血CD4+T细胞亚群水平(Th1、Th2、Th17、Treg)、细胞因子水平[白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)、干扰素(IFN-γ)]。比较输血后3个月内2组患者感染发生率。输血后随访3年,比较2组患者无进展生存期(PFS)。结果输血后14 d时,辐照组患者Th1、IL-2、IFN-γ水平显著高于普通组,Th2、Treg、IL-10、IL-17水平显著低于普通组(P<0.05),2组Th17水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。输血后3个月内辐照组患者感染发生率低于普通组,比较差异无统计学意义(P>0.05)。输血后随访3年,2组患者PFS比较无统计学意义(P>0.05)。结论异体普通悬浮红细胞输注将抑制肝癌患者细胞免疫功能,而辐照红细胞输注可减轻异体输血引起的细胞免疫抑制反应,后者在肝癌手术中具有较高推广应用价值。

干扰素-γ、CD47和淋巴细胞亚群在脓毒症患者中的表达及其与预后的关系

目的探讨脓毒症患者血清干扰素-γ(IFN-γ)、CD47和淋巴细胞亚群水平及其与预后的关系。方法选取180例脓毒症患者为观察组,选择同期180例健康体检志愿者为对照组。根据患者入院28 d的生存情况,将患者分为生存组120例和死亡组60例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脓毒症患者血清IFN-γ、CD47水平,流式细胞术检测血清淋巴细胞亚群水平,并对影响脓毒症患者的预后因素进行Logistic回归分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IFN-γ、CD47、淋巴细胞亚群水平预测脓毒症患者预后的价值。结果与对照组比较,观察组血清IFN-γ、T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞水平降低,CD47水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与生存组比较,死亡组血清IFN-γ、T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞水平降低,急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭(SOFA)评分、C反应蛋白、降钙素原、内毒素、CD47水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。SOFA评分与血清IFN-γ、T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞水平呈负相关(r=-0.469、-0.572、-0.521、-0.505,P<0.05),与血清CD47水平呈正相关(r=0.539,P<0.05)。APACHEⅡ评分、SOFA评分、C反应蛋白、降钙素原、内毒素和CD47水平升高是脓毒症患者预后的危险因素,IFN-γ水平、T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞增高是患者预后的保护因素(P<0.05)。IFN-γ、CD47、T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞单独检测和联合检测预测脓毒症患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.805、0.808、0.888、0.846、0.854、0.984,联合检测的AUC优于单独检测(P<0.001)。结论脓毒症患者血清IFN-γ、T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞水平降低,CD47水平升高,其水平变化对预测脓毒症患者的预后具有一定价值。

CD14反向辅助设门法在淋巴细胞亚群检测中的应用

目的建立CD14反向辅助设门法(简称CD14反向法),并探讨其在淋巴细胞亚群检测中的应用。方法在常规6色流式细胞术检测方案(常规法)中加入CD14-BV421抗体,建立CD14反向法。采用常规法和CD14反向法分别检测质控品、不同放置时间(4、24、48、72 h)的样本和不同疾病(系统性红斑狼疮、病毒性肺炎和肾移植术后)患者的淋巴细胞亚群,比较2种方法检测结果的差异和偏移情况。结果CD14反向法检测细胞低值质控品的淋巴细胞百分比(LYMPH%)和自然杀伤(NK)细胞百分比(NK%)低于常规法(P<0.05);细胞中值质控品2种方法之间所有项目差异均无统计学意义(P>0.05)。与放置4 h比较,CD14^(+)单核细胞与淋巴细胞的区分度随样本放置时间的延长而变小。与全血样本室温放置4 h比较,放置24 h后CD14反向法和常规法各项目的相对偏移均<5%,差异无统计学意义(P>0.05);放置48 h,CD14反向法各项指标相对偏移均<5%,常规法细胞毒性T淋巴细胞(CTL)(CD3^(+)CD8^(+))、B细胞(CD3-CD19^(+))百分比及其绝对数的相对偏移均>5%;放置72 h,2种方法所有项目的相对偏移均>10%,为临床不可接受。采用CD14反向法检测系统性红斑狼疮、病毒性肺炎、肾移植术后患者外周血淋巴细胞亚群,可较好地区分淋巴细胞和单核细胞,同时减少非典型单核细胞对NK%和NK细胞绝对数的影响。结论CD14反向法可减少流式细胞术检测中淋巴细胞门的误圈,有助于提高检测结果的准确性。

AECOPD患者T淋巴细胞亚群及血清CD64、TLR2与出院后再次发作的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者T淋巴细胞亚群及血清CD64、Toll样受体2(TLR2)与出院后再次发作的关系。方法回顾性分析2020年1月至2023年10月西安市中心医院收治的120例AECOPD患者,其中男70例、女50例,年龄51~84(69.01±11.09)岁,COPD病程6~12(8.95±2.29)年。根据所有患者出院后90 d内电话或门诊随访是否再次发作(急性恶化加重),分为复发组(40例)与未复发组(80例)。比较两组一般资料[性别、年龄、COPD病程、基础疾病、吸烟史、饮酒史、COPD患者自我评估测试(CAT)评分]以及T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、CD64、TLR2水平。通过多因素非条件logistic逐步回归分析明确AECOPD患者出院后再次发作的影响因素,最后通过受试者操作特征曲线(ROC)分析第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)、T淋巴细胞亚群、CD64、TLR2水平预测AECOPD患者出院后再次发作的价值。采用独立样本t检验、χ^(2)检验。结果复发组FEV1/FVC、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)低于未复发组,CD8^(+)、CD64、TLR2水平高于未复发组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,FEV1/FVC、T淋巴细胞亚群、CD64、TLR2水平是AECOPD患者出院后再次发作的影响因素(均P<0.05)。ROC分析证实,FEV1/FVC、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、CD64、TLR2水平均可用于AECOPD患者出院后再次发作的预测,曲线下面积分别为0.810、0.639、0.912、0.793、0.945、0.632、0.908(均P<0.05)。结论AECOPD患者出院后再次发作受FEV1/FVC、T淋巴细胞亚群、CD64、TLR2水平影响,临床应予以密切关注。

补脾益肠丸重塑CD4^(+)T细胞亚群稳态缓解溃疡性结肠炎的机制研究

目的探究补脾益肠丸(BPYCP)对实验性溃疡性结肠炎(UC)小鼠CD4^(+)T细胞亚群的调控作用。方法48只C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为对照组(Control组,10只)、模型组(DSS组,13只)、模型+补脾益肠丸组(DSS+BPYCP组,13只)、模型+5-ASA组(DSS+5-ASA组,12只);采用自由饮用2.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液诱导小鼠UC模型,DSS+BPYCP组和DSS+5-ASA组分别采用BPYCP或美沙拉嗪(5-ASA)连续灌胃2周。观察小鼠粪便黏稠度及便血情况,测量结肠长度,结肠称质量并计算结肠质量指数及单位结肠质量指数;苏木素-伊红(HE)染色法观察结肠病理变化,并进行病理损伤评分;流式细胞术检测肠系膜淋巴结中的CD4^(+)T细胞亚群水平;酶联免疫吸附试验检测干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-17A、IL-10及IL-21表达水平;实时荧光定量PCR检测结肠组织T-框蛋白21(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-3)、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、B细胞淋巴瘤-6(Bcl-6)及大鼠叉头蛋白P3(Foxp3)mRNA表达水平。结果与DSS组比较,DSS+BPYCP组和DSS+5-ASA组UC小鼠腹泻、便血等症状得到改善,小鼠体质量及结肠长度均增加,且结肠质量、结肠质量指数及单位结肠质量指数均下降,黏膜上皮较完整,腺体排列更规整,炎性细胞浸润更少,病理组织损伤评分显著降低,肠系膜淋巴结中的Th2细胞比例降低,Th17细胞比例及IL-17A水平降低,结肠组织T-bet、GATA-3、RORγt、Bcl-6 mRNA水平降低(P<0.05);DSS+BPYCP组的Th1细胞比例降低,CD4^(+)CD25^(+)Treg、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例及IL-10水平均升高,CD4^(+)CXCR5^(+)Tfh细胞比例和IL-21水平降低,Foxp3 mRNA水平升高(P<0.05);DSS+5-ASA组的Th1细胞比例及IFN-γ水平降低(P<0.05)。结论BPYCP可能通过重塑肠道组织的CD4^(+)T细胞亚群稳态缓解实验性UC。

CD64指数PCT和CD4^(+)T淋巴细胞亚群联合预测模型对高甘油三酯血症性急性胰腺炎早期感染的预测价值

目的 探讨多指标联合预测模型对高甘油三酯血症性急性胰腺炎(HTG-AP)患者早期继发感染的临床应用价值。方法 收集2021年1月至2023年5月在安徽医科大学第一附属医院、合肥市第二人民医院就诊的248例HTG-AP患者的临床资料,并根据早期是否继发感染分为感染组和非感染组。分析并比较两组的一般资料、感染指标等。应用单因素分析及二分类Logistic回归分析筛选HTG-AP患者早期继发感染的独立影响因素,建立多指标联合预测模型。通过受试者工作特征(ROC)曲线、Hosmer-Lemeshow拟合优度和决策曲线分析(DCA)评估模型的区分度、准确性和临床实用性。结果 248例HTG-AP患者分为感染组70例,非感染组178例。两组患者空腹血糖、感染相关指标包括中性粒细胞百分比、CRP、CD4^(+)T淋巴细胞亚群、PCT、CD64指数比较差异有统计学意义(P<0.05);CD64指数、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞亚群为HTG-AP早期继发感染的独立预测因子。三者联合预测模型(AUC为0.865)对HTG-AP早期继发感染的诊断价值优于单个指标,敏感度(78.5%)和特异度(87.7%)均较高,阳性预测值71.83%,阴性预测值91.08%。校准后联合预测模型的预测结果与临床实际观察结果一致性较高;通过Bootstrap内部验证,联合预测模型校准后的AUC值为0.865,其预测效能曲线与临床实际发生的曲线具有良好的一致性;DCA分析显示阈概率为12%~88%时,可预测HTG-AP早期继发感染。结论 基于CD64指数、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞亚群建立的多指标联合预测模型可早期诊断HTG-AP继发感染。

抑制KLF8基因对CD133^+肝癌干细胞亚群比例、裸鼠体内成瘤和肺转移能力的影响

目的观察抑制KLF8基因对肝癌干细胞CD133^+表型细胞亚群比例、裸鼠体内成瘤和肺转移能力的影响。方法收集肝癌患者的肺转移灶,分离培养原代肝癌细胞,无血清悬浮培养形成肝癌细胞球,经流式分选筛选出CD133^+表型的肝癌干细胞细胞亚群(LCSCs)。将KLF8基因的RNA干扰重组慢病毒质粒(sh-KLF8)及其阴性对照空载体质粒(sh-control)分别感染LCSCs,经2. 0μg/m L嘌呤霉素筛选,成功构建稳定敲除KLF8基因的CD133^+表型肝癌干细胞株LCSCs_(sh-KLF8)及对照细胞株LCSCs_(sh-control),qRT-PCR法检测KLF8 mRNA,流式细胞术检测CD133^+表型细胞亚群比例。分别注射LCSCs_(sh-KLF8)和LCSCs_(sh-control)构建肝癌干细胞裸鼠移植瘤模型,观察敲除KLF8基因对肝癌干细胞裸鼠体内成瘤能力的影响(成瘤重量)。另将LCSCs_(sh-KLF8)和LCSCs_(sh-control)分别经尾静脉注射到裸鼠体内,构建肝癌干细胞的裸鼠肺转移模型,观察敲除KLF8基因对肝癌干细胞裸鼠体内肺转移能力的影响(肺转移灶个数、KLF8蛋白)。结果与LCSCs_(sh-control)比较,LCSCs_(sh-KLF8)中KLF8 mRNA相对表达水平降低,分选时CD133^+表型干细胞亚群的比例显著降低,裸鼠体内的成瘤重量和肺转移的数量降低,KLF8蛋白阳性着色较少(P均<0. 05)。结论抑制KLF8基因可降低肝癌干细胞CD133^+表型细胞亚群比例及体内成瘤、肺转移能力,KLF8基因可能是抑制肝癌发生和进展的关键分子。

外周血CD8^(+)T淋巴细胞亚群检测对过敏性鼻炎临床疗效的评估价值

目的探讨外周血CD8^(+)T淋巴细胞亚群检测对过敏性鼻炎(AR)临床疗效的评估价值。方法前瞻性选取2021年3月~2022年2月温州市中西医结合医院耳鼻咽喉科门诊治疗的120例AR患者和40例健康志愿者,分别设为研究组和对照组,比较两组外周血CD8^(+)T细胞、CD8^(+)CD28^(+)T细胞、CD8^(+)CD28-T细胞比率;研究组接受鼻用激素联合口服抗组胺药物治疗方案,根据治疗效果分为有效组(n=107)和无效组(n=13),比较有效组和无效组治疗前CD8^(+)T细胞、CD8^(+)CD28^(+)T细胞、CD8^(+)CD28-T细胞比率;Pearson相关性分析法分析外周血CD8^(+)T淋巴细胞亚群水平与鼻部症状总评分(totalnose symptomscore,TNSS)的相关性;以受试者工作特征(ROC)曲线分析治疗前CD8^(+)T淋巴细胞亚群对AR临床疗效的预测价值。结果研究组治疗前外周血CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率高于对照组,CD8^(+)CD28-T细胞比率低于对照组(P<0.05)。研究组总有效率为89.17%;有效组治疗前CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率低于无效组,CD8^(+)CD28-T细胞比率高于无效组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率与TNSS评分呈正相关(r=0.324,P=0.006),CD8^(+)CD28-T细胞比率与TNSS评分呈负相关(r=-0.541,P=0.000)。ROC曲线结果显示,CD8^(+)T细胞、CD8^(+)CD28^(+)T细胞、CD8^(+)CD28-T细胞比率评估AR治疗无效的曲线下面积(AUC)(95%CI)分别为0.647(0.555~0.732)、0.683(0.592~0.765)、0.911(0.845~0.955),其中CD8^(+)CD28-T细胞的评估效能优于CD8^(+)T细胞、CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率(P<0.05)。结论AR患者外周血CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率升高,CD8^(+)CD28-T细胞比率降低,CD8^(+)T细胞比率相对稳定,治疗前CD8^(+)CD28-T细胞比率可作为预测AR患者的临床疗效的参考指标。

外周血T淋巴细胞亚群、CD147及VWF水平与短暂性脑缺血发作患者早期临床转归的关系

目的研究外周血T淋巴细胞亚群、细胞外基质金属蛋白酶诱导子(CD147)及血管性血友病因子(VWF)水平对短暂性脑缺血发作(TIA)患者的临床意义。方法选择河北省沧州中西医结合医院2020年7月至2022年9月期间诊治的102例TIA患者作为实验组,根据卒中风险系数ABCD3⁃I评分表将TIA患者分为高危组、中危组、低危组,根据TIA患者发病72 h内是否发生脑梗死将患者分为脑梗死组(发生脑梗死)、无脑梗死组(未发生脑梗死),另选取98名健康志愿者作为对照组。分别比较实验组与对照组、不同危险程度TIA患者、不同早期临床转归TIA患者的外周血T淋巴细胞亚群、CD147及VWF水平;采用Spearman分析该些指标与TIA患者脑梗死发生率的相关性。结果实验组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)明显低于对照组,CD8^(+)、CD147、VWF水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);三组不同危险程度TIA患者CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈现:高危组<中危组<低危组,CD8^(+)、CD147、VWF水平呈现:高危组>中危组>低危组,差异有统计学意义(P<0.05);脑梗死组TIA患者CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)明显低于无脑梗死组,CD8^(+)、CD147、VWF水平显著高于无脑梗死组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman分析结果显示,TIA患者脑梗死发生率与CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关,与CD8^(+)、CD147、VWF水平呈正相关(P<0.05)。结论外周血T淋巴细胞亚群、CD147及VWF水平与TIA患者早期临床转归有明显的关联,可作为TIA患者是否会发生脑梗死的重要评估指标。

循环CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞与接受EGFR-TKI治疗的转移性非小细胞肺癌预后相关

目的探索外周血循环淋巴细胞的基线水平及动态变化与接受表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗的EGFR突变阳性的转移性非小细胞肺癌患者预后之间的相关性。方法设计一个回顾性队列,包括在北京协和医院接受EGFR-TKI治疗的40例非小细胞肺癌患者。在EGFR-TKI治疗期间,使用流式细胞仪测量术收集外周血循环淋巴细胞亚群进行动态监测,并通过电话随访每位患者的生存情况,分别比较基线以及治疗1月后外周血循环淋巴细胞亚群与无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)的关系。结果在接受EGFR-TKI治疗的患者中,更高的基线循环CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数与更高的肿瘤治疗应答相关(P<0.001)。整个人群的PFS为27.1个月,而OS未达到。然而,基线CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数与中位PFS无相关性。此外,在EGFR-TKI治疗期间,CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数稳定或升高的患者的PFS明显长于CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数降低的患者(29.1个月对比9.4个月;P<0.001)。结论更高的基线循环CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数与更好的EGFR-TKI治疗应答相关,CD4^(+)CD45RA^(+)CD62L^(+)T细胞计数的动态变化与PFS延长有关。

结直肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群与肿瘤进展的关系

目的 探讨结直肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群与肿瘤进展的关系。方法 选取2023年1—12月复旦大学附属肿瘤医院初诊结直肠癌患者100例(结直肠癌组),其中TNM分期Ⅰ期8例、Ⅱ期47例、Ⅲ期34例、Ⅳ期11例;有淋巴转移55例、无淋巴转移45例。以健康体检者80名作为正常对照组。采用流式细胞术检测CD3^(+)T细胞百分比(CD3^(+)%)、CD3^(+)CD4^(+)T细胞百分比(CD3^(+)CD4^(+)%)、CD3^(+)CD8^(+)T细胞百分比(CD3^(+)CD8^(+)%)、CD3^(+)CD4~-CD8~-T细胞[双阴性T细胞(DNT)]百分比(DNT%)、CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)调节性T细胞百分比(CD4^(+)Treg%)、CD3^(+)PD-1^(+)T细胞百分比(CD3^(+)PD-1^(+)%),计算CD4^(+)/CD8^(+)比值。同时检测肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)19-9、CA72-4、CA50、CA242]。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标判断结直肠癌患者淋巴转移的效能。结果 与正常对照组比较,结直肠癌组CD3^(+)CD8^(+)%显著升高(P<0.05),CD3^(+)CD4^(+)%、DNT%、CD4^(+)/CD8^(+)比值均显著降低(P<0.05);2个组之间CD3^(+)%差异无统计学意义(P>0.05)。不同TNM分期的结直肠癌患者之间CD4^(+)/CD8^(+)比值、CD4^(+)Treg%和CD3^(+)PD-1^(+)%差异均有统计学意义(P<0.05)。与无淋巴转移的结直肠癌患者比较,有淋巴转移的结直肠癌患者CD4^(+)/CD8^(+)比值显著降低(P<0.001),CD4^(+)Treg%和CD3^(+)PD-1^(+)%显著升高(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,CD4^(+)/CD8^(+)比值、CD4^(+)Treg%和CD3^(+)PD-1^(+)%单项检测和联合检测判断结直肠癌患者淋巴转移的曲线下面积(AUC)分别为0.762、0.775、0.765、0.825。以CEA、CA19-9、CA72-4、CA50、CA242任意1项阳性为肿瘤标志物阳性,TNMⅠ期患者肿瘤标志物均为阴性,Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期患者肿瘤标志物的阳性率分别为48.9%(23/47)、52.9%(18/34)、90.9%(10/11)。在TNMⅡ期和Ⅲ期患者中,肿瘤标志物阳性者CD4^(+)/CD8^(+)比值显著低于阴性者(P<0.001),CD4^(+)Treg%显著高于阴性者(P<0.001),CD3^(+)PD-1^(+)%差异无统计学意义(P>0.05)。结论 结直肠癌患者免疫抑制功能增强,T淋巴细胞亚群与肿瘤进展和肿瘤标志物表达密切相关。

免疫细胞亚群与前列腺癌患者预后的关联性研究

目的:探讨外周淋巴细胞亚群与前列腺癌(PCa)患者生存之间的关系。方法:本研究纳入了100例PCa患者,采用Kaplan-Meier曲线和log-rank检验比较不同淋巴细胞水平PCa患者总生存期(OS)和无进展生存期(PFS);同时,通过单因素和多因素Cox回归分析来探索预后的影响因素。外周淋巴细胞亚群的计数采用流式细胞术进行。结果:在淋巴细胞≥747/μl、CD3^(+) T细胞≥528/μl、CD4^(+) T细胞≥315/μl、CD8^(+) T细胞≥226/μl、B细胞≥105/μl、NK细胞≥168/μl的PCa患者中,OS和PFS显著延长(P<0.01)。单因素和多因素Cox回归分析表明,CD4^(+) T细胞≤315/μl是PCa患者不良预后的独立因素(HR=12.58,95%CI,3.00~52.73)。结论:本研究揭示了外周淋巴细胞亚群绝对计数较低与PCa患者不良预后相关。

白藜芦醇通过促进Apaf-1/caspase-9复合物的形成增强5-氟尿嘧啶对骨肉瘤CD133^+细胞亚群凋亡的诱导

目的:探讨白藜芦醇联合化疗药物5-氟尿嘧啶对骨肉瘤CD133^+细胞亚群的协同杀伤效应及机制。方法:将人骨肉瘤细胞系MG-63 CD133^+细胞亚群及相应CD133^-细胞亚群用5-氟尿嘧啶及白藜芦醇进行体外处理。MG-63细胞的相对细胞活力用MTT法进行检测;细胞凋亡率用流式细胞术进行检测;用Western blot实验检测caspase-9和caspase-3的活化、Apaf-1的表达水平及细胞色素C的释放;用免疫共沉淀法检测Apaf-1与caspase-9前体的相互作用。结果:5-氟尿嘧啶对MG-63 CD133^+细胞亚群的杀伤活性和凋亡诱导活性均显著低于MG-63 CD133^-细胞亚群。但联用白藜芦醇能显著提高5-氟尿嘧啶对MG-63 CD133^+细胞亚群的细胞活力抑制率。白藜芦醇处理能显著上调MG-63 CD133^+细胞亚群中Apaf-1的表达水平,在MG-63 CD133^+细胞亚群中转染Apaf-1siRNA后,5-氟尿嘧啶联用白藜芦醇的协同效应受到显著抑制。另外,免疫共沉淀实验结果表明白藜芦醇联合5-氟尿嘧啶能显著诱导MG-63 CD133^+细胞亚群中Apaf-1/caspase-9复合物的形成,从而诱导caspase-9发生活化。结论:白藜芦醇通过促进Apaf-1/caspase-9复合物的形成,增强5-氟尿嘧啶对骨肉瘤CD133^+细胞亚群凋亡的诱导。