免疫球蛋白κJ区重组信号结合蛋白对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响

目的 探讨免疫球蛋白κJ区的重组信号结合蛋白(RBP-Jκ)对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响及可能的机制。方法 分离孕12 d的美国癌症研究所(ICR)胚胎小鼠(3只)侧脑室室管膜细胞进行原代培养,并使用RBP-Jκ-siRNA干扰RBP-Jκ,以及选用2~3月龄体重为20~25 g的CD133-CreER^(TM)::ROSA26-LacZ::RBP-Jκ^(flox/flox)小鼠(3只),通过腹腔注射他莫昔芬(TAM)敲除RBP-Jκ,通过免疫荧光双标染色检测CD133阳性室管膜细胞的增殖和分化变化的情况,最后通过Real-time PCR、Western blotting检测RBP-Jκ及其上下游相关分子表达情况。结果 干扰或敲除RBP-Jκ后,无论是细胞还是动物水平CD133或β-半乳糖苷酶(β-GAL)/双肾上腺皮质激素(DCX)/β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulinⅢ)、CD133或β-GAL/微管相关蛋白2(MAP-2)或神经元核抗原(NeuN)、CD133或β-GAL/增殖细胞核抗原(PCNA)双阳性细胞数目均明显增加。同时Real-time PCR和Western blotting结果表明,在干扰或敲除RBP-Jκ后RBP-Jκ-和Splity多毛增强子1(Hes1)mRNA及蛋白表达量均显著下降,而Notch1 mRNA及蛋白的表达量反而显著增加。结论 干扰或敲除RBP-Jκ,通过Notch1表达上调、Hes1表达下调,最终引起CD133阳性室管膜细胞的增殖与分化增加。

免疫磁珠体外纯化人胎脑中CD133阳性干细胞的实验研究

为了探讨免疫磁珠体外纯化人胎儿脑内 CD13 3阳性细胞的可行性 ,本研究取人胎儿脑室下区并制备单细胞悬液 ,采用磁珠分选法选择 CD13 3阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力并采用流式细胞仪鉴定纯化前后 CD13 3的阳性表达率。结果显示 ,分选后所得细胞纯度为 ( 85 .5 7± 1.66) % ,回收率为 ( 62 .3± 18) % ,纯化前后细胞活力无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :联合应用CD13 3表面标志及免疫磁珠分选系统可有效地从人胎儿脑组织中直接分离得到高纯度的 CD13 3阳性干细胞 。

Notch/Rbpj对CD133^(+)室管膜细胞增殖和分化的影响

位于侧脑室(LV)的室管膜下区(SVZ)是成体神经干细胞(NSCs)的最大发生区,室管膜细胞紧邻SVZ具有NSCs属性。Rbpj是Notch信号通路中的关键靶点,但Notch信号通路如何影响成体CD133^(+)室管膜细胞的增殖和分化目前并不清楚。通过原代培养的胚胎室管膜细胞和2~3月龄成体Rbpj基因敲除小鼠,分析在干扰或敲除掉CD133^(+)室管膜细胞中的Rbpj基因后其增殖和分化发生的变化。结果发现,无论是细胞还是动物水平,当干扰或敲除掉Rbpj基因后,幼期/早期神经前体细胞和成熟神经元的数目均明显增加,该时段细胞也出现明显增殖。

干细胞标志物CD133在神经母细胞瘤中的表达

背景:神经母细胞瘤是婴幼儿和儿童最常见的实体肿瘤之一,靶向肿瘤干细胞的治疗能够有望从根本上治愈肿瘤,但是肿瘤干细胞数量较少,并具有抗凋亡、抗放化疗能力等,导致其对于放疗、化疗并不敏感。目的:探究干细胞标志物CD133在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义。方法:收集2004年6月至2014年2月新疆医科大学第一附属医院小儿外二科诊治的58例神经母细胞瘤患儿临床资料,其中神经母细胞瘤患儿46例,节细胞母细胞瘤患儿12例,通过免疫组织化学分析法分析所有患儿肿瘤组织中的CD133表达水平,并研究神经母细胞瘤的病理分型、INSS分期、术后存活时长与CD133表达水平之间存在的联系。结果与结论:共有22例(48%)神经母细胞瘤患儿CD133表达为阳性,有4例(33%)节细胞母细胞瘤患儿CD133表达阳性,肿瘤细胞胞浆为CD133主要表达部位。肿瘤组织各临床分期的CD133阳性率差异明显,其中1,2期为21%,3,4期为64%,4S期为36.4%,差异有显著性意义(P=0.011);组织分型为预后良好型患儿CD133阳性率为29%,明显低于预后不良组织型患儿(57%),差异有显著性意义(P=0.031)。CD133阴性患儿生存周期显著长于CD133阳性患儿(P<0.05)。结果表明干细胞标志物CD133的表达与神经母细胞瘤发生、发展、转归有密切联系,在评估患儿术后存活时长、改进该病的诊断和治疗等方面具有重要意义。

CD133、Nestin在成年SD大鼠室管膜下区的表达

目的探讨CD133、Nestin在成年SD大鼠室管膜下区的表达。方法应用免疫组织化学法检测成年SD大鼠室管膜下区CD133和Nestin的表达。结果成年SD大鼠室管膜下区存在大量CD133、Nestin阳性细胞,其主要分布于侧脑室外侧壁,尤其以上外侧壁为甚。侧脑室内侧壁CD133阳性区域厚度为(15.22±1.12)μm,外侧壁厚度为(45.02±1.31)μm,最厚处以侧脑室上外侧壁为甚,为(88.33±5.09)μm。其中侧脑室内侧壁Nestin阳性区域厚度为(17.4±1.31)μm,外侧壁厚度为(48.10±1.37)μm,外侧壁厚度为(101.76±3.75)μm。经统计学分析,室管膜下区各部位CD133阳性区域厚度值显著小于Nestin阳性细胞区域。结论成年SD大鼠室管膜下区存在CD133、Nestin表达阳性的神经干细胞,CD133、Nestin在室管膜下区分布不均,主要聚集于侧脑室外侧壁,尤其上外侧壁。

Notch信号通路对室管膜下区细胞的调控作用

在成年哺乳动物的大脑中,神经干细胞(NSCs)存在于诸多脑区,例如海马齿状回、嗅球、室管膜下区(SVZ)等,而在前脑中大部分神经元和神经胶质细胞的生成是在SVZ.在大脑发育过程中,Notch信号通路从胚胎至成年期对大脑中枢神经系统(CNS)起到重要的调控作用.虽然Notch信号通路在整个大脑中的表达模式不尽相同,但是它们作为重要的调控因子对NSCs的数量、自我更新及其分化水平起着调节作用,因此Notch信号通路对于NSCs的命运起着十分重要的作用.SVZ是人类脑部最大的NSCs池,并且组成SVZ的细胞中许多具有NSCs特性,因此研究Notch信号通路对SVZ细胞的调控作用具有重要意义.本文对Notch信号通路调控SVZ细胞的增殖分化以及这一作用对神经退行性疾病的预防和治疗的影响作一综述.

脑胶质瘤U251细胞CD133阳性与阴性对放射敏感性影响的初步研究

肿瘤干细胞可能是肿瘤的“起始细胞”和治疗失败的根源。但是，仲瘤干细胞和非干细胞放射生物学特性之间的差异仍不十分清楚。为此以CD133为标志物，对脑胶质瘤U251细胞应用流式细胞仪分选出CD133阳性与阴性细胞，观察两者之间放射敏感性差异。一、材料与方法1、细胞培养：应用美国Gibco的无血清DMEM和F12培养液。

CD133阳性和阴性胶质瘤U87细胞基因组学分析

目的分析胶质瘤U87中的CD133阳性(CD133+)和阴性(CD133-)细胞,建立差异性基因文库。方法通过磁珠选择分离U87细胞中的CD133+和CD133-细胞,利用AgilentHuman 1Aoligo芯片检测2种细胞总体基因,分析结果,建立差异性基因文库。结果基因组学研究中,CD133+和CD133-U87细胞比较,差异性基因数为840个;其中,上调基因759个,下调基因81个。在各基因功能分组中,与翻译调控功能相关的基因,差异性基因所占比率最大,为14.9%;各功能组之间差异性基因比率均有统计学意义(P<0.01)。结论通过基因组学研究,建立了CD133+和CD133-U87细胞差异性基因文库,为进一步研究脑肿瘤干细胞提供了线索。

人胆囊癌CD133^+细胞亚群致瘤性的实验研究

目的:研究CD133在人胆囊癌细胞中的表达,初步探讨胆囊癌CD133+亚群的致瘤能力。方法:将人原代胆囊癌组织植入裸鼠皮下形成移植瘤,并同人原代胆囊癌组织分别制成单细胞悬液;FCM法检测CD133的表达情况,并分选出CD133+和CD133-亚群;对不同亚群细胞进行体外克隆形成实验和裸鼠体内移植瘤形成实验,免疫组织化学法验证移植瘤的组织表型。结果:FCM法检测显示,胆囊癌细胞中1.95%~3.24%的细胞CD133呈阳性表达;体外培养显示CD133+亚群比CD133-亚群具有更强的克隆球形成能力,在裸鼠体内也具有更强的肿瘤形成能力(P<0.05);免疫组织化学检测结果提示,胆囊癌CD133+细胞形成的移植瘤同人原代胆囊癌具有相同的组织表型,均表达CA19-9和CD44 s。结论:人胆囊癌CD133+细胞亚群具有高致瘤性,其中可能富含有肿瘤干细胞。

更正

尊敬的《解剖学报》编辑部:发表于《解剖学报》2022年4月第53卷第2期第144~154页的文章“免疫球蛋白kJ区重组信号结合蛋白对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响”(第一作者叶鑫,通讯作者孙臣友)其中图6C,6D的Westernblotting表达结果有两处错误,正确的表达条带见以下附图A和B。

术前放化疗后直肠癌中CD133的表达

在结直肠癌中,CD133阳性细胞具备原始癌细胞表型和抵抗放化疗的特性。为了评估术前放化疗的直肠癌患者的CD133阳性细胞数量变化与位置的改变以及CD133在术前放化疗患者体内表达对预后的重要性。