结直肠癌组织中CD151表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌组织中CD151的表达及其与结直肠癌发生、发展和转移的关系。方法采用实时荧光定量PCR技术检测22例肠癌组织及癌旁组织中CD151mRNA的表达,采用免疫组化SP法检测此22例及另67例石蜡包埋肠癌组织及癌旁组织中CD151蛋白的表达,并分析其与肠癌临床病理因素之间的关系。结果CD151mRNA和蛋白在结直肠癌中的表达明显高于癌旁组织,其蛋白的表达与结直肠癌浸润深度、淋巴结转移和TNM分期密切相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论CD151可望成为与结直肠癌浸润、转移有关并提示预后不良的指标。

CD151对脐静脉内皮细胞Akt-Ser^(473)位点磷酸化和细胞增殖的影响

目的:研究CD151对脐静脉内皮细胞(HUVEC)丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化Akt-Ser473(p-Akt-Ser473)表达和细胞增殖的影响。方法:通过构建pAAV-CD151质粒并转染HUVEC,HUVEC分为正常对照组、绿色荧光蛋白(GFP)组和CD151组。Western Blot检测CD151及Akt、p-Akt-Ser473表达,MTT法测定脐静脉内皮细胞的增殖能力。结果:①CD151组CD151及p-Akt-Ser473表达明显增加,CD151组与正常对照组和GFP组比较有显著性差异(P<0.05),而总Akt三组间无明显差异(P>0.05)。②MTT法检测正常对照组、pAAV-GFP转染组、pAAV-CD151转染组的A值分别为0.1663±0.0095、0.169±0.0085和0.2457±0.0044,pAAV-CD151转染组较pAAV-GFP转染组和正常对照组细胞增殖能力增强,且有显著性差异(P<0.05)。结论:CD151具有促进内皮细胞增殖的作用。CD151可能是通过激活p-Akt-Ser473,增加Akt活力,达到促进细胞增殖的作用。

CD151通过ERK促进体外血管生成

目的探讨p38MAPK信号通路及ERK信号通路激活在CD151促进体外基质胶(matrigel)上类微血管结构形成的机制。方法包装CD151、anti CD151和GFP的重组腺相关病毒并转染人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)。将转染后的细胞种植在Matrigel上,观察其管型结构的形成。Western Blot法检测CD151、ERK、p38MAPK蛋白的表达;给予ERK抑制剂、p38 MAPK抑制剂,分别观察其对CD151促进管型结构形成的影响。结果 CD151高表达组较对照组及GFP组显著促进HUVECs matrigel上管型结构形成。高表达的CD151能够促进p-ERK的表达,但是对p-p38MAPK的蛋白表达影响不明显。ERK抑制剂能显著减弱CD151对管型结构形成的促进作用,但p38 MAPK抑制剂则对CD151促进管型结构的形成无显著影响。结论高表达的CD151通过激活ERK信号通路促进HUVECs在matrigel上管型结构形成,其作用与p38 MAPK信号通路的激活无明显关系。

整合素β1在CD151促HUVEC迁移增殖中的机制研究

目的研究整合素β1在CD151促脐静脉内皮细胞迁移增殖中的机制。方法通过构建PAAV-CD151质粒及其pAAV-CD151-AAA194-196突变体(QRD)并转染HUVEC,HUVEC分为正常对照组、绿色荧光组(GFP组)、CD151组,QRD组。SRB法检测细胞的增殖,划痕试验检测细胞的迁移能力,Western blot检测CD151、Akt、P-Akt、PI3K及β1的表达。结果1、CD151组与对照组及GFP组相比具有明显促进细胞增殖的能力,而QRD组则显著抑制细胞的增殖,具有显著的统计学意义(P<0.05)。2、CD151组与对照组及GFP组相比具有明显促进细胞迁移的能力,而QRD组则显著抑制细胞的迁移,具有显著的统计学意义(P<0.05)。3、CD151组β1、PI3K、P-Akt蛋白表达量明显增高,与对照组、GFP组和QRD组相比具有显著差异(P<0.05),QRD组蛋白表达量明显降低具有显著差异(P<0.05),而总的Akt四组之间无明显差异(P>0.05)。结论CD151具有促进血管形成的作用,通过整合素β1上调PI3K的表达,进一步促进Akt的磷酸化,增加Akt的活力,达到促进内皮细胞的迁移和增殖及管状结构的形成,进而促进血管形成。

CD151蛋白胃癌组织中表达情况与中医证型及胃癌转移相关性初探

目的:研究不同中医症型胃癌患者癌变组织CD151蛋白表达差异,探讨胃癌患者中医证候临床分型与CD151蛋白表达情况的相关性;初探CD151蛋白表达水平与胃癌转移相关性。方法:以主诉"胃脘痛"并确诊为"胃癌"患者91例为研究对象,中医四诊对其进行中医辨证分型;应用Western Blot检测标本CD151蛋白表达情况,划痕实验及流式细胞术研究不同CD151蛋白表达对MGC803细胞迁移及增殖影响。结果:91例患者中医证型以"痰瘀互结"为主,占38.5%;胃癌组织CD151蛋白过表达(P<0.01);痰瘀互结证型患者胃癌组织CD151蛋白表达水平较其他证型高(P<0.01);远端转移患者CD151蛋白表达量较高(P<0.01);CD151蛋白高表达组12h后划痕距离明显缩短(P<0.01);CD151蛋白高表达细胞组凋亡率较低(P<0.01)。结论:"痰湿"与"瘀血"可能导致CD151蛋白高表达间接参与胃癌发生及发展;CD151蛋白高表达可能是导致胃癌远端转移的因素之一,临床上可尝试把CD151蛋白表达水平作为一项胃癌病情发展的评估指标。

CD151对心肌梗死血流动力学的影响及其信号机制

目的探讨CD151对大鼠心肌梗死模型血流动力学的影响及其分子学机制。方法制作大鼠心肌梗死模型，将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒（rAAV）载体注入缺血心肌。4周后，心导管测定心脏功能，用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测外源性CD151mRNA的表达，Western blot检测CD151、P13K、Akt的表达。结果心肌梗死后左室功能明显下降，CD151高表达能够明显改善左室功能，并可上调磷脂酰肌醇3-激酶和磷酸化的蛋白激酶B的表达。结论CD151基因的导入能够改善心室功能，其分子机制与P13K／Akt信号通路的激活有关。

MiR-22靶向调控CD151促进胃癌血管新生的机制研究

目的探讨MiR-22通过调控CD151胃癌增殖、侵袭、迁移及血管新生的可能机制。方法以胃癌细胞系SGC-7901为研究对象,随机分为空白组(MOCK)、miR-22慢病毒实验组(miR-22组)、慢病毒对照组(miR-22/Con),对细胞进行转染。转染后qRT-PCR来验证miR-22情况;Western-blot检测CD151及下游Akt、ERK1/2、mTOR蛋白表达状况;MTT法、细胞克隆形成实验、Transwell迁移检测细胞增殖、侵袭、迁移能力。构建裸鼠移植瘤模型,观察移植瘤生长状况;免疫荧光法检测微血管密度(MVD),并记录远处转移情况。结果miR-22组CD151、Akt、ERK1/2、mTOR蛋白表达明显低于miR-22/Con及MOCK组,CD151蛋白与下游蛋白水平呈正相关。miR-22组细胞的生长速度及细胞侵袭能力较miR-22/Con组及MOCK组明显下降。MOCK组及miR-22/Con组裸鼠体重下降,而miR-22组体重下降不明显。miR22/Con组及MOCK组肿瘤呈浸润性生长,伴有丰富的微血管,而miR-22组肿瘤体积较小,细胞分布排列均匀,仅可见少量微血管生成,未见明显坏死区域。结论miR-22通过调控CD151的表达从而影响Akt/ERK/mTOR信号通路介导的胃癌增殖、侵袭、迁移及血管新生。