CD16单抗联合细胞因子体外扩增的NK细胞对K562杀伤功能研究

目的:建立CD16单抗联合细胞因子IL2、IL15、IL18体外扩增NK细胞的方法,并用扩增后的细胞杀伤K562细胞,研究其杀伤功能,确定一种高效的NK细胞体外培养方案。方法:抽取5例健康志愿者外周血,Ficoll分离单个核细胞,分组培养,分别为IL2+IL15组、IL2+IL15+IL18组、IL2+IL15+IL18+CD16单抗免疫包被组。按这三种方案分组培养,分别在第6、9、12、15、18天和21天计算总细胞扩增倍数,流式细胞检测NK细胞的表型,利用各种方案扩增后的NK细胞作为效应细胞,与K562细胞按不同靶效比进行体外杀伤实验,分析各种方案培养的NK细胞对K562细胞的杀伤活性。结果:IL2+IL15+IL18+CD16单抗免疫包被组的扩增倍数和阳性率均高于IL2+IL15组、IL2+IL15+IL18组,P<0.05;而IL2+IL15组、IL2+IL15+IL18组之间在扩增倍数和阳性率上均无显著差异(P>0.05)。杀伤实验显示,在不同效靶比情况下IL2+IL15+IL18+CD16单抗免疫包被组均比其他两组有更强的杀伤活性。而且随着效靶比的增加,NK细胞的杀伤更强。结论:CD16单抗联合IL2、IL15、IL18、可明显促进NK的扩增能力,并提高体外扩增后对K562细胞的杀伤活性。