CD19+CD24hiCD38hi调节性B细胞在系统性红斑狼疮患者的表达及意义

目的探讨CD19+CD24hiCD38hi调节性B细胞(Bregs)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血的表达,以及该细胞与疾病活动度和其他血清学及免疫学指标的关系,明确其在SLE发病中的意义。方法选取41例SLE患者和39名健康对照为研究对象,流式细胞术测定外周血淋巴细胞亚群绝对计数、CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞绝对数量,分析CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分、补体、免疫球蛋白、尿蛋白定量(24 h)、自身抗体及其他淋巴细胞亚群的关系。结果 SLE患者外周血CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞较健康对照组明显减低,与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.445,P=0.004),与补体C4呈正相关(r=0.322,P=0.040),与补体C3、C1q无相关性,与尿蛋白定量(24 h)呈负相关(r=-0.593,P=0.002)。CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞与免疫球蛋白、抗核抗体(ANA)滴度、抗ds-DNA抗体滴度之间无相关性。抗SSA抗体阳性组SLE患者CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞绝对计数较抗SSA抗体阴性组减少。在Anu A阳性组和阴性组间及AHA阳性组和阴性组间该细胞绝对数量均无明显差异。SLE患者外周血调节性T细胞数量较健康对照组明显减低,Th17细胞数量较健康对照组无明显差异。Th17/Breg比值与SLEDAI评分呈正相关,CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞绝对计数与Th17/Treg比值呈负相关(r=-0.278,P=0.013)。结论 SLE患者外周血CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞绝对计数减少,与疾病活动度、血清学指标及免疫学指标相关,提示CD19+CD24hiCD38hiBregs细胞参与SLE发病。

CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞亚群在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达

目的探讨CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达及临床意义。方法流式细胞术检测SLE患者(S组,36例)和正常对照组(C组,20例)CD19+CD24hi CD38hi、CD19+CD24int CD38int、CD19+CD24hi CD38-B细胞亚群百分比水平。S组中,20例为SLE活动(S1组),16例为SLE稳定(S2组)。结果 S组CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群百分比显著高于C组[(10.93±6.30)%vs.(7.51±2.73)%](P<0.05),且S1组高于S2组(P<0.05)。S组CD19+CD24hi CD38-B细胞亚群百分比显著低于C组[(15.52±9.54)%vs.(26.46±11.07)%](P<0.05)。S组CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群表达水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分正相关(P<0.05)。结论 CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群对效应T细胞分泌促炎症因子缺乏抑制功能与其存在功能缺陷有关,而非因其数量不足。CD19+CD24hi CD38hi B细胞亚群在SLE患者外周血中的表达水平可能与疾病活动相关。

煤工尘肺壹期患者外周血CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞亚群表达及意义

目的探讨外周血CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞亚群在煤工尘肺(CWP)壹期中表达水平的变化及临床意义。方法采用流式细胞技术检测150例CWP壹期患者(CWP组)、50名与CWP组相同接尘条件的健康井下接尘矿工(接尘组)及50名非接尘井上健康体检人员(对照组)外周血CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞亚群水平。结果与接尘组比较,CWP组患者外周血CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(-)B细胞水平降低,CD19^(+)CD24^(int)CD38^(int)、CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,CWP组患者外周血CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(-)B细胞水平降低,CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);接尘组外周血CD19^(+)CD24^(int)CD38^(int)、CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。CWP组岩尘亚组患者外周血CD19^(+)CD24^(int)CD38^(int)、CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞水平高于煤尘亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞亚群水平变化可能与CWP患者肺部损伤程度有关,并参与CWP壹期发生发展过程。

CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞比例预测肝移植术后急性细胞性排斥反应发生的临床研究

目的:分析肝移植术后受者外周血CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞占单个核细胞比例变化情况及其与急性细胞性排斥反应(ACR)之间的关系。方法:回顾性分析2013年12月至2015年12月在浙江大学医学院附属第一医院接受心脏死亡器官捐献肝移植的80例成人受者临床资料,根据术后是否发生ACR,将受者分为ACR组(25例)和非ACR组(55例)。术前、术后各个时间点抽取参加研究者静脉血并分离外周血单个核细胞,加入异硫氰酸荧光素-单克隆鼠抗人CD19抗体、藻红蛋白-单克隆鼠抗人CD24抗体和别藻蓝蛋白-单克隆鼠抗人CD38抗体,流式细胞仪检测各组CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞百分比。采用t检验和单因素方差分析比较正态分布计量资料,采用χ^(2)检验比较计数资料,采用Kaplan-Meier法绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)。P<0.05为差异有统计学意义。结果:ACR组、非ACR组受者术前外周血平均CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞比例分别为(3.13±0.91)%、(3.49±0.83)%,差异无统计学意义(t=1.636,P>0.05)。ACR组术后发生ACR前外周血平均CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞比例为(1.87±0.70)%。非ACR组受者术后3个月、6个月和1年外周血平均CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞比例分别为(1.64±0.52)%、(1.63±0.56)%和(2.04±1.24)%,术后3、6个月平均值均低于术前和术后1年,差异均有统计学意义(P均<0.05)。ACR组受者发生ACR时外周血平均CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞比例为(0.8±0.5)%,低于发生ACR前的平均水平(t=5.752,P<0.05),且低于非ACR组术后3个月、6个月和1年的平均水平(P<0.05)。ACR组受者接受抗排斥反应治疗后,CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞比例也逐渐增加,ACR发生后7 d为(0.84±0.08)%,与ACR发生时相比差异无统计学意义(P>0.05);而发生30 d后达(1.65±0.18)%,与ACR发生时相比差异有统计学意义(P<0.05)。当截断值为1.015%时,CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞比例预测ACR发生的敏感度和特异度分别为0.786和0.702,ROC曲线下面积为0.775(95%CI:0.671~0.879,P<0.05)。结论:CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) B细胞比例下降与肝移植术后ACR反应发生有关,并可作为预测ACR发生的细胞标志物。

外周血miRNA-150与CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi) Breg细胞在儿童免疫性血小板减少症中的变化及意义

目的探讨外周血miRNA-150与CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞在儿童免疫性血小板减少症(ITP)中变化及意义。方法选取南通大学附属妇幼保健院在2017年3月至2020年9月接受诊治的ITP患儿93例,其中新诊断ITP患儿(病程<3个月)56例,持续性ITP患儿(病程3~12个月)37例。另选取本院同期健康体检儿童50例作为对照组。采用实时荧光定量PCR反应测定外周血miRNA-150表达,采用流式细胞术测定CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞表达。结果ITP患儿外周血miRNA-150表达高于对照组,且CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞表达率低于对照组(P<0.05)。持续性ITP组外周血miRNA-150表达高于新诊断ITP组,而CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞表达率低于新诊断ITP组(P<0.05)。全反应(CR)组外周血miRNA-150表达低于反应(R)组和无效(NR)组,且R组低于NR组(P<0.05)。CR组CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞表达率高于R组和NR组,且R组高于NR组(P<0.05)。外周血miRNA-150对ITP诊断敏感度和特异度分别为78.18%和60.53%;CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞表达对ITP诊断敏感度和特异度分别为83.63%和71.05%。miRNA-150与PLT呈负相关(r=-0.738),而CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞与PLT呈正相关(r=0.796)。结论外周血miRNA-150在ITP患儿中高表达,而CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞在ITP患儿中低表达,且外周血miRNA-150和CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)Breg细胞表达与疗效密切相关。

调节性B细胞在免疫性血小板减少症发病过程中的意义

本研究旨在探讨调节B细胞(Breg)在免疫性血小板减少症(ITP)发病中的作用及其临床意义。采用流式细胞术检测35例已确诊的ITP患者及20例正常对照的CD19+CD24hiCD38hiB细胞的表达率,应用RT-PCR检测患者IL-10 mRNA、TGF-β1 mRNA细胞因子的表达水平。结果表明,初诊ITP患者外周血CD19+CD24hiCD38hiB细胞的表达率明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后血小板数升高的ITP患者的CD19+CD24hi CD38hiB细胞的表达率高于治疗前的ITP患者,且差异有统计学意义(P<0.05);初诊ITP患者IL-10 mRNA的表达明显低于正常对照组(P<0.05),治疗后的ITP患者IL-10 mRNA的表达明显升高,且与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05);初诊ITP患者TGF-β1 mRNA的表达高于正常对照组(P<0.05),ITP患者经治疗后TGF-β1mRNA的表达下降,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Breg细胞通过体液免疫及对T淋巴细胞的调节在ITP发病机制中可能有重要作用。

Ⅰ期矽肺患者外周血调节性B细胞和调节性T细胞水平变化

目的探讨外周血调节性B细胞和调节性T细胞在Ⅰ期矽肺患者中的水平变化及意义。方法采用流式细胞术方法,检测82例Ⅰ期矽肺患者(矽肺组)、48例具有与矽肺组相同接尘条件的健康井下接尘矿工(接尘组)及45例井上健康查体人员(正常组)外周血CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞水平。结果与接尘组和正常组比较,矽肺组CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞水平升高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,接尘组CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平减低,差异具有统计学意义(P<0.05)。肺功能轻度障碍组CD4^+CD25^+T细胞水平低于正常组和中重度障碍组,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。接尘年限<20年组CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平明显低于接尘年限20-年组和接尘年限30-年组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。相关性分析显示,正常组外周血CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平与CD4^+CD25^+T细胞水平呈负相关(r=-0.441,P<0.05),CD19^+CD25^+B细胞水平与CD4^+CD25^+T细胞水平呈正相关(r=0.477,P<0.05),矽肺组和接尘组各指标间无相关性。结论Ⅰ期矽肺患者外周血CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞失衡并参与该病发生发展,CD4^+CD25^+T细胞水平可预示早期肺功能损伤,CD19^+CD24hi CD38hi B水平可能与接尘时间有关。

免疫性血小板减少症患者调节性B细胞变化与临床意义

目的:本研究旨在探讨调节B细胞(Breg)在免疫性血小板减少症(ITP)发病中的作用及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测40例ITP患者(ITP组)的Breg、Th1、Th2、Th17以及Treg细胞的细胞量,应用AimPlex流式高通量技术检测IL-10、TGF-β、CD40以及CD40L的水平,选择20例健康正常人作为对照(对照组)。结果:与对照组相比较,ITP患者Breg细胞的细胞数量显著少于对照组(P <0.05),IL-10、TGF-β以及CD40L的水平亦显著低于对照组(P <0.05)。Th1细胞数量显著增多(P <0.05),而Th2、Th17以及Treg细胞量均显著减少(P <0.05)。结论:Breg细胞在ITP发病机制中可能具有重要作用。

类风湿关节炎患者淋巴B细胞表达与疾病进展的关系研究

类风湿关节炎(RA)的发病机制尚不明确[1]。研究显示,在疾病进展中,调节性T细胞发挥重要作用,在免疫反应过程中,调节性B细胞(Breg)具有重要作用,CD19+CD24hiCD38hi Breg细胞的表达率与类风湿性疾病患者的活动度呈现显著相关性,CD20+B细胞、CD5+B细胞在机体的免疫调节以及免疫耐受中发挥重要作用[2-3]。

Expression and Significance of Regulatory B Cells in Patients with Immune Thrombocytopenia

Objective: To detect the expression and significance of regulatory B cells in patients with immune thrombocytopenia. Methods: 73 ITP patients were divided into glucocorticoids treatment group (n = 42) and recombinant human thrombopoietin (rhTPO) treatment group (n = 31). According to the therapeutic effect, it was divided into effective group and ineffective group. The expression of CD19+ CD24hiCD38hi Breg in peripheral blood was detected by flow cytometry before and after treatment. The expression levels of transforming growth factor (TGF)-β1, interleukin (IL-10) and interferon (IFN)-γ were detected by ELISA before and after treatment. 30 volunteers were selected as the control group. Results: The expression of CD19+ CD24hiCD38hi Breg and cytokines IL-10 and TGF-β1 in 73 ITP patients before treatment was lower than that in the control group, while the expression of IFN-γ was higher than that in the control group (p < 0. 05). The expression levels of CD19+ CD24hiCD38hi Breg, IL-10 and TGF-β1 in the effective group were significantly higher than before treatment, while the expression of IFN-γ was significantly lower than before treatment (p < 0. 05). The expression of CD19+ CD24hiCD38hi Breg, IFN-γ, IL-10 and TGF-β1 in the invalid group had no significant change compared with before treatment. Conclusion: Abnormal expression of CD19+ CD24hiCD38hi Breg and related cytokines is involved in the pathogenesis of ITP.

梅毒患者外周血调节性B细胞亚群在治疗前后的变化研究

目的探讨未经治疗的一期梅毒、二期梅毒和隐性梅毒患者外周血调节性B细胞亚群(CD19+CD24hi CD38hi B细胞、CD19+CD24hi CD27+B细胞)的百分比,及其在治疗后的变化情况。方法根据《梅毒诊疗指南(2014)》标准,2016年9月至2017年3月,在北京大学地坛医院教学医院皮肤性病科门诊的43例梅毒患者及8例健康对照。在治疗前及苄星青霉素治疗后2个月进行随访,对每次随访患者利用流式细胞技术检测外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞、CD19+CD24hi CD27+B细胞的百分比。结果 43例梅毒患者中,一期梅毒13例,二期梅毒16例,隐性梅毒14例。与健康对照组相比,未经治疗的一期、二期梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比显著升高,CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);隐性梅毒患者与健康对照之间均无明显差异(P>0.05)。治疗后,一期梅毒、二期梅毒及隐性梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比均无明显改变,差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果:梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比与TRUST滴度呈正相关(P<0.01);CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比与TRUST滴度呈负相关(P<0.01)。结论CD19+CD24hi CD38hi B细胞有可能是一期、二期梅毒患者的重要免疫学变化指标之一。苄星青霉素治疗能快速有效降低一期、二期梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比。

调节性T细胞及调节性B细胞在成人原发免疫性血小板减少症中的表达研究

目的探讨CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)调节性T细胞(Treg细胞)及CD19^(+)CD24^(high)CD38^(high)调节性B细胞(Breg细胞)在成人原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中的表达及其在疾病发展中的意义。方法纳入82例ITP患者(ITP组)和45例同期健康体检者(对照组),收集其年龄、性别、发病时的PLT计数,检测ITP组患者治疗前后及对照组的CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)Treg细胞及CD19^(+)CD24^(high)CD38^(high)Breg细胞水平并比较。根据疗效再将82例ITP患者分为治疗有效组(75例)和治疗无效组(7例),比较两组患者治疗前后CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)Treg细胞及CD19^(+)CD24^(high)CD38^(high)Breg细胞水平。结果治疗前ITP组患者CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)Treg细胞及CD19^(+)CD24^(high)CD38^(high)Breg细胞水平均明显低于对照组(P<0.05)。治疗后治疗有效组患者两种细胞水平均明显高于同组治疗前及同期治疗无效组(P<0.05)。结论CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)Treg细胞及CD19^(+)CD24^(high)CD38^(high)Breg细胞的水平下调可能与ITP的免疫发病相关,增加这两种细胞水平并改善其功能可能是ITP患者新的治疗方法。