靶向CD19的CAR-NK92细胞构建及其对相关肿瘤细胞的杀伤作用观察

目的构建靶向分化群抗原19(CD19)的嵌合抗原受体(CAR)-NK92细胞,并观察其对相关肿瘤细胞的杀伤作用。方法用XhoI/NotI限制性内切酶将靶向CD19的单链抗体序列与pMFG逆转录病毒载体进行双酶切,回收纯化片段后用连接酶进行连接,构建CAR001、CAR002质粒,进行NK92细胞的转导和逆转录病毒载体的包装,构建靶向CD19的CAR-NK92细胞,分别为CAR001-NK92细胞、CAR002-NK92细胞。构建表达CD19抗原的Rajiluc、SW620-EGFP、RPMI-hCD19-copGFP细胞。分别将NK92细胞、CAR001-NK92细胞、CAR002-NK92细胞与表达CD19抗原的肿瘤细胞共培养,分别采用流式细胞术(靶细胞为RPMI-hCD19-copGFP细胞)、荧光素酶报告基因法(靶细胞为Raji-luc细胞)和IncuCyte法(靶细胞为SW620-EGFP细胞)观察CAR-NK92细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,采用流式细胞术观察CAR-NK92细胞对Daudi细胞增殖的影响。结果CAR001-NK92细胞、CAR002-NK92细胞的CAR表达率分别为99.0%、98.4%,CD19抗原表达率分别为99.6%、99.3%,成功构建靶向CD19的CAR-NK92细胞。Daudi、Raji-luc、SW620-EGFP、RPMI-hCD19-copGFP细胞的CD19抗原表达率分别为99.0%、100%、100%、99.5%,表达CD19抗原的肿瘤细胞构建成功。NK92细胞、CAR001-NK92细胞、CAR002-NK92细胞在不同效靶比下对RPMIhCD19-copGFP细胞和SW620-EGFP细胞的杀伤效率依次增高(P均<0.05)。CAR002-NK92细胞在不同效靶比下对Raji-luc细胞的杀伤效率均高于CAR001-NK92细胞(P均<0.01)。NK92组和CAR002-NK92组细胞增殖能力低于CAR001-NK92组(P均<0.05)。结论成功构建的靶向CD19的CAR-NK92细胞,其对多种表达CD19抗原的肿瘤细胞具有明显的杀伤作用。

伊布替尼联合CD19嵌合抗原受体T细胞治疗难治复发弥漫大B细胞淋巴瘤的临床研究

目的评估伊布替尼联合CD19 CAR-T细胞方案与CD19 CAR-T细胞方案治疗复发难治弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma, DLBCL)患者的疗效和安全性。方法回顾性分析2018年1月—2019年1月在同济大学附属同济医院血液科26例接受CD19 CAR-T细胞治疗的DLBCL患者。根据患者既往是否口服伊布替尼治疗,分为对照组和伊布替尼组,对照组10例,伊布替尼组16例。统计患者治疗期间血常规、血生化、电解质、细胞因子、肝肾功能,疗效评估,不良反应事件,比较两组的完全缓解率、总有效率、总生存时间,细胞因子表达水平变化及不良反应情况。采用t检验、Fisher确切概率法比较两组患者临床特征差异;采用Kaplan-Meier分析两组患者生存率。结果伊布替尼组患者总体缓解率高于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05);完全缓解率高于对照组患者,但无统计学意义(P>0.05)。两组患者总体生存率(overall survival, OS)和无进展生存率(progression-free survival, PFS)差异无统计学意义(P>0.05)。伊布替尼组患者与对照组患者细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome, CRS)发生率差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者神经系统、肝肾功能等不良反应事件发生率差异无统计学意义(P>0.05)。伊布替尼组患者输注CD19 CAR-T细胞后,血清中IL-6、IL-8、TNF-α和CRP水平均高于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论伊布替尼联合CD19 CAR-T治疗难治复发DLBCL与单用CD19 CAR-T相比,能显著提高总有效率,同时不增加CART治疗的毒副反应。

嵌合抗原受体修饰的CD19-CAR-T的体外构建、扩增及初步功能鉴定

目的:探索一种特异性靶向CD19分子的嵌合抗原受体修饰的CD19-CAR-T的构建方法 ,并明确其体外杀伤靶细胞的效果。方法:运用分子克隆技术,将PCR获得的CD19-CAR片段构建到p CDH-GFP慢病毒载体上,利用包装的慢病毒颗粒转染供者CD3^+T细胞,通过流式细胞术及PCR鉴定转染效率,并通过7-AAD染色鉴定扩增得到的CD19-CAR-T细胞体外杀伤CD19^+Ramos靶细胞的效果。结果:经慢病毒转染T细胞在体外培养10 d后,CD3^+T扩增达(78.8±23.2)倍,(58.3±5.4)%的CD3^+T细胞表达GFP,CD19-CAR-T体外杀伤CD19^+Ramos靶细胞在效靶比5∶1时效率为(57.4±9.3)%。结论:本实验成功建立了一种有效的体外构建及扩增CD19-CAR-T的方法,且具有明显靶向性,为CD19^+B细胞肿瘤临床治疗提供实验依据。

抗CD19嵌合抗原受体-T细胞疗法在难治/复发性B细胞急性淋巴母细胞白血病中应用效果的Meta分析

目的系统评价抗CD19嵌合抗原受体(CD19CAR)-T细胞疗法治疗难治性/复发性B细胞急性淋巴母细胞白血病(r/r B-ALL)的疗效及安全性。方法计算机检索PubMed、Cochrane图书馆、EMbase等数据库,筛选有关CD19CAR-T细胞治疗r/r B-ALL的队列研究。对纳入文献进行数据提取及质量评价,采用R 3.5.1软件进行Meta分析。结果共纳入12个队列研究。Meta分析结果显示:(1)CD19CAR-T细胞治疗r/r B-ALL的总反应率为81%,≥3级细胞因子释放综合征发生率为26%,复发率为33%。(2)嵌合抗原受体-T细胞来源、治疗前肿瘤负荷情况以及治疗前接受异基因造血干细胞移植(HSCT)情况均是总反应率的影响因素(均P<0.05)。结论 CD19CAR-T细胞疗法在r/r B-ALL中具有较好的疗效,严重不良反应率及复发率低,其中治疗前未接受HSCT、治疗前肿瘤负荷低、输注自体来源T细胞的患者可获得更高的总反应率。

抗CD19嵌合抗原受体T细胞治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤不良反应的研究进展

美国食品与药品监督管理局(FDA)已批准抗CD19嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞axicabtagene cilo⁃leucel、tisagenlecleucel用于复发/难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤(recurrent/refractory diffuse large B-cell lymphoma,r/r DLBCL)的治疗,但该疗法易发生一系列不良反应,包括急性毒性细胞因子释放综合征、免疫效应细胞相关神经毒性综合征和噬血细胞综合征,长期毒性如血细胞减少症和B细胞发育不全,以及少见不良反应。本文主要介绍细胞因子释放综合征及免疫效应细胞相关神经毒性综合征的发病机理、临床表现、分级与处理、危险因素与预防措施,同时对血细胞减少症、B细胞耗竭在内的延迟毒性及少见不良反应做出综述。

类风湿关节炎患者外周血CD23^+/CD19^+细胞表达状况的研究

目的研究外周血CD19+及CD23+/CD19+细胞的表达在类风湿关节炎(RA)发病机制和病情进展中的意义。方法RA组和正常对照组各20例,应用流式细胞术检测外周血中CD19+及CD23+/CD19+细胞的表达率,比较两组的差异,并分析其与血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)的相关性。结果RA组外周血CD19+及CD23+/CD19+细胞表达率均高于对照组,(10.236±2.212)%vs(6.870±1.052)%,(5.134±1.069)%vs(2.100±0.652)%(P<0.05或<0.01)。CD23+/CD19+细胞的表达率与实验室指标ESR、CRP均呈正相关(P<0.01),CD19+细胞表达率与ESR、CRP无明显相关关系(P>0.05)。结论RA患者外周血存在CD19+及CD23+/CD19+细胞的表达增高,检测CD23+/CD19+细胞的表达情况可能对RA病情监控具有一定的应用价值。

CD19和CD27标记系统性红斑狼疮患者外周血B细胞的亚群分析

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)外周血中B淋巴细胞亚群的分化状态及其与体液免疫的关系。方法选择SLE患者32例,SLEDAI分为≥10分组和<10分组;健康献血者14例作为对照。采用流式细胞仪检测研究对象外周血中CD19+CD27-、CD19+CD27+和CD19+CD27++细胞,并分析各亚群比例、CD19平均荧光强度的差异和体液免疫的关系。结果两组SLE患者与正常对照相比,CD19平均荧光强度明显降低。SLEDAI≥10分组的CD19+CD27++细胞比率较正常对照明显升高。SLEDAI<10分组的CD19+CD27-细胞较正常对照明显升高,CD19+CD27+细胞明显降低。IgG与浆母细胞比率呈正相关。CD19+CD27++细胞比率在抗dsDNA抗体阳性组较阴性组明显升高。结论SLE患者外周血CD19+CD27+及CD19+CD27++亚群存在异常,可能与SLE患者体内的体液免疫异常有关,并在其中发挥重要作用。

CD19 CAR-T细胞治疗复发难治性急性B淋巴细胞白血病1例并文献复习

目的:观察以CD19为靶点的嵌合抗原受体T细胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy,CAR-T)治疗复发难治性急性B淋巴细胞白血病的疗效并文献复习。方法:37岁女性,急性B淋巴细胞白血病多次化疗后复发,合并中枢神经系统白血病,化疗效果差。2016年5月28日在河南中医药大学第二附属医院回输CD19 CAR-T细胞每千克1.0×106个细胞。通过观察回输后的临床症状,评价是否存在细胞因子风暴及神经系统反应;通过检测骨髓象、免疫表型、微小残留病变等评估临床疗效;通过检测体内CD19+细胞比例和T细胞中CAR+细胞比例以及脱氧核糖核酸(DeoxyriboNucleic Acid,DNA)和血中嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor,CAR)的拷贝数,探讨CAR-T细胞在体内的作用过程以及患者长期缓解可能存在的原因。结果:CAR-T细胞回输后,白血病微小残留病变始终为阴性,脑脊液中始终未检测到白血病细胞;回输后初期CD19+细胞比例保持比较低的比例,但至第380天CD19+细胞有扩增趋势;DNA和血浆中CAR的拷贝数均在第9天达到高峰。回输后达完全缓解(CR)34个月。结论:CD19 CAR-T细胞是治疗复发难治性急性B淋巴细胞白血病的有效方法,同时对于中枢神经系统白血病的缓解有较好的疗效,但本病长期缓解的机制仍需进一步探讨。

冠心病患者外周血中CD19^+细胞表达水平的意义

目的观察冠心病患者外周血中CD19+的表达水平,并探讨CD19+与炎症反应和脂质过氧化反应的关系。方法按美国心脏病学会/美国心脏学会冠心病处理指南的诊断标准并经冠状动脉造影检查确诊的冠心病患者60例,分为稳定型心绞痛(SA)组20例,急性冠状动脉综合征(ACS)组40例;并选择冠状动脉造影正常的20例非冠心病患者作为对照组。应用流式细胞术检测所有研究对象外周血中淋巴细胞表面CD19+的表达水平,比较各组CD19+的表达情况。同时检测C反应蛋白(CRP)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度。并对CD19+细胞的表达率与CRP滴度和LDL-C进行Pearson直线相关分析。结果 ACS组患者B淋巴细胞CD19+表达率明显高于对照组(10.16±3.63)%vs(4.25±0.96)%(P<0.01),亦明显高于SA组(10.16±3.63)%vs(5.39±1.36)%(P<0.01);SA组CD19+细胞表达率和对照组患者CD19+细胞表达率相近(5.39±1.36)%vs(4.25±0.96)%(P>0.05)。所研究对象外周血中CD19+细胞的表达水平与CRP滴度(r=0.661,P<0.01)和LDL-C(r=0.351,P<0.01)呈正相关。结论随着冠心病病情加重,冠心病患者外周血中B淋巴细胞CD19+的表达水平升高,CD19+的表达水平可反映冠心病危险分层,CD19+与炎症反应和脂质过氧化反应有关系。

CD19-CAR-T细胞治疗复发/难治急性B淋巴细胞白血病的临床观察

目的探讨CD19嵌合抗原受体T(CD19-CAR-T)细胞治疗复发/难治急性B淋巴细胞白血病(R/R B-ALL)的疗效及并发症。方法回顾性分析2016年1月至2018年1月14例接受CD19-CAR-T细胞治疗的R/R B-ALL患者的临床资料。监测CD19-CAR-T细胞回输后细胞因子水平(IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A、IL-18)以及C反应蛋白和铁蛋白水平,观察近期和远期疗效及细胞因子释放综合征(CRS)的发生情况。结果14例患者回输CD19-CAR-T细胞总量的中位数为0.6×10^(6)/kg。13例患者可进行d28疗效评价,获完全缓解7例,部分缓解2例,无效4例,有效率为92.3%。体内CD19-CAR-T细胞数在d_(10)~d_(21)达到高峰,在d_(90)时能检测到较低水平的CD19-CAR-T细胞。全组中位总生存时间(OS)为10.2个月。14例患者均出现CRS,其中1级2例,2级6例,3级3例,4级2例,5级1例。CRS发生时,IL-6、IFN-γ、IL-10、C反应蛋白和铁蛋白水平明显升高。14例患者均出现发热,出现肝功能异常9例、心血管功能障碍3例、肾功能异常3例、胰腺炎1例、神经毒性7例以及呼吸衰竭2例。结论CD19-CAR-T细胞治疗R/R B-ALL的近期疗效较好,但是CD19-CAR-T细胞体内维持时间短,早期容易复发。IL-6、IFN-γ、IL-10、C反应蛋白和铁蛋白水平升高有助于CRS的诊断。

抗CD19 CAR-T对K562^(CD19+)肿瘤细胞特异性杀伤作用的研究

目的构建表达抗CD19分子的嵌合抗原受体,制备抗CD19 CAR-T细胞,研究其对CD19表型细胞的特异性识别和杀伤效果。方法通过分子克隆方法,构建能够自剪切EGFP荧光报告的抗CD19 CAR分子,将其重组到慢病毒载体中并包装获得慢病毒。通过慢病毒递送的方式,将抗CD19 CAR过表达于primary-T细胞,流式细胞术分析确认表达后,通过ELISA检测CAR-T细胞IL-2分泌情况,最后用LDH释放法评价靶向杀伤作用。结果成功获得抗CD19 CAR的慢病毒递送载体;流式细胞术表明CAR分子在T细胞表面高效稳定表达;ELISA结果显示CAR-T细胞在靶细胞刺激下IL-2分泌水平显著升高(P<0.01);LDH结果显示CAR-T细胞特异性杀伤CD19表型细胞,且杀伤效果在E:T=10:1时达到50%以上,显著高于对照组(P<0.05)。结论成功获取了具有靶向CD19表型细胞的CAR-T细胞,能高效特异性杀伤肿瘤细胞。

Graves病不同阶段病程中CD3^-CD19^+B细胞含量变化

目的探讨CD3-CD19+在Graves病(GD)各阶段病程中的含量变化及临床意义。方法采用流式细胞术检测GD未治疗组(初发组)、甲状腺缓解组、完全缓解组、复发组及正常对照组CD3-CD19+比值,将各组结果进行统计学分析。结果初发组结果明显高于正常对照组、缓解组、完全缓解组及复发组,差异有统计学意义(P分别为0.002、0.023、0.002、0.026),其余各组别比较虽有差异,但没有统计学意义。结论 CD3-CD19+的结果与GD整个病程的免疫反应相一致,体液免疫反应在GD病程中都起到很重要的作用,CD3-CD19+结果对GD各阶段病程的诊断、治疗及预后有临床意义。

原发难治老年B-ALL患者CD19 CAR-T联合来那度胺治疗后长期生存1例

急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是常见的造血系统恶性肿瘤,其发生于老年患者可因老年人群机体功能减退等导致治疗更为困难,预后更差,且一旦复发或难治(R/R),常规化疗再缓解率极低。本例老年B细胞-ALL(B-ALL)患者原发耐药,CD19嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫治疗后采用来那度胺联合白介素-2(IL-2)维持治疗,目前已持续微小残留病(MRD)阴性完全缓解(CR)超过45个月。现报告如下。

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞表达BLyS和CD38的变化

目的 :研究系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋巴细胞表达BLyS和CD38的变化。方法 :收集 2 2名SLE患者和 14名健康人外周血淋巴细胞 ,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞表达BLyS和CD38的变化。结果 :SLE患者外周血BLyS+ 淋巴细胞、CD19+ 淋巴细胞和CD19+ CD38+ 淋巴细胞显著增加 ,BLyS+ 淋巴细胞增加与CD19+CD38+ 淋巴细胞增加呈正相关 (r=0 .4 34,P <0 .0 5 )。结论 :SLE患者外周血淋巴细胞表达BLyS和CD19+ B淋巴细胞表达CD38均显著增加 ,且二者增加呈正相关。

MIC分型评价成人急-性髓系白血病中的淋系抗原表达

目的:研究成人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中淋系抗原的表达及其与预后的关系。方法:对275例成人AML进行细胞形态学、流式细胞免疫表型分析和染色体细胞遗传学(MIC)分型实验研究并对其中的64例M2进行临床治疗结果观察研究。结果:①AML淋系抗原阳性率31．3％,其中t(8;21)者为48．3％,无t(8;21)者为26．5％(P< 0．001)。②CD19+在t(8;21)中占38．3％,无t(8;21)中占1．9％(P<0．001);而其他淋系抗原两组比较均为P>0．05．③治疗结果(CR率):t(8;21)和无t(8;21)M2分别为66．7％和41．9％,CD19+和CD19-M2分别为76．5％和46．8％,CD19+／t(8; 21)和CD19-／无t(8;21)分别为80．0％和41．4％,以上均为P<0．05。而CD19-／t(8;21)和CD19+／无t(8;21)分别为55．6％和50．0％(P>0．05)。结论:成人AML中淋系抗原表达与核型密切相关,t(8;21)AML高表达CD19。t(8;21)和CD19都是M2预后好的标志之一。

系统性红斑狼疮患者外周血CD4^+和CD8^+细胞端粒长度及端粒酶活性的研究

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD 4+、CD 8+和CD 19+细胞端粒长度和端粒酶活性变化及其在发病中的作用。方法:用免疫磁珠法,从外周血单个核细胞分离CD 4+、CD 8+和CD 19+淋巴细胞,提取细胞蛋白后,用PCR为基础的端粒酶测定法(T e lom eric repeats am p lification protoco l,TRAP)测定端粒酶活性;Sou thernB lot测定细胞端粒长度。结果:SLE患者CD 4+、CD 8+和CD 19+细胞端粒酶活性均高于正常对照,但只有CD 19+细胞端粒酶活性与正常对照相比差异有显著性(P<0.05)。SLE患者CD 4+和CD 8+淋巴细胞的端粒长度均较正常对照明显缩短,CD 19+淋巴细胞的端粒长度无明显缩短。结论:SLE患者CD 19+细胞端粒酶活性显著增高,维持了细胞端粒长度;而CD 4+和CD 8+细胞端粒酶活性可能不足以维持由于细胞分裂所导致的细胞端粒缩短。

不同信号肽对嵌合抗原受体T细胞杀伤作用的影响研究

背景与目的:信号肽(signal peptide,SP)是一段存在于前体蛋白N-端的短肽链,能够调节前体蛋白的折叠和转移,在蛋白质的分泌过程中扮演着极其重要的角色。近年来,靶向CD19的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞在白血病治疗中取得了重大突破,关于CAR结构的胞内域改造方面也有诸多研究,而对单链可变片段(scFv)的N端SP研究进展缓慢。探讨4种不同SP的CD19-CAR在T细胞表面表达及对CD19+靶细胞的杀伤作用。方法:通过基因合成和分子克隆技术,构建含4种不同SP(SP1、SP2、SP3、SP4)的靶向CD19抗原的CAR载体,进行慢病毒包装,将得到的慢病毒转染T细胞,利用流式细胞术检测细胞转染效率,采用钙黄绿素释放法检测该细胞对靶细胞的杀伤作用,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞因子IFN-γ和TNF-α的分泌水平。结果:成功构建4种不同SP的重组慢病毒载体,将4种慢病毒转导T细胞后,结果显示,分别有20.9%、22.6%、31.5%、38.6%的T细胞表面能够表达CD19-CAR(分别命名为SP1-CD19、SP2-CD19、SP3-CD19和SP4-CD19细胞),进一步杀瘤实验证明,SP4-CD19细胞对CD19+肿瘤细胞的杀伤作用显著高于SP1-CD19、SP2-CD19和SP3-CD19细胞(P<0.01),并且当效靶比为10∶1共培养24 h后,与SP1-CD19、SP2-CD19和SP3-CD19细胞相比,SP4-CD19细胞的IFN-γ和TNF-α的分泌水平显著升高(P<0.05)。此外,4种不同SP的CAR-T对CD19-肿瘤细胞K562的杀伤作用差异无统计学意义(P>0.05)。结论:SP4-CD19细胞的转染效率、细胞因子分泌水平及对CD19+肿瘤细胞的杀伤作用均显著高于SP1-CD19、SP2-CD19和SP3-CD19细胞,该研究成果为CAR-T优化改造及其高效的临床应用奠定了科学基础。

CD19嵌合抗原受体T细胞治疗后急性B淋巴细胞白血病的复发机制及对策防治

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法是近年来发展迅速的一种新型细胞免疫疗法。多项临床试验均证实,CAR-T疗法可有效治疗多种复发/难治性(R/R)血液系统恶性疾病,其中CD19CAR-T治疗R/R急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者的完全缓解(CR)率达70%~90%。但部分患者可在缓解后再次复发,这已成为影响CAR-T疗效的重要障碍之一。笔者拟就CD19CAR-T治疗R/RB-ALL后复发的可能机制及对策进行阐述。

治疗B细胞淋巴瘤的抗CD19 CAR-T细胞药物:axicabtagene ciloleucel

axicabtagene ciloleucel (商品名:YESCARTA)一种由凯特制药公司开发的抗CD19嵌合抗原受体(CAR)-T细胞药物。2017年10月18日,美国食品和药物管理局通过加速评审,批准axicabtagene ciloleucel用于经二线及以上系统治疗失败后的难治/复发性B细胞淋巴瘤。axicabtagene ciloleucel是首个针对非霍奇金淋巴瘤基因治疗的CAR-T细胞药物。本文主要对axicabtagene ciloleucel的制备方法、作用机制、药动学、临床疗效及安全性作一综述。

儿童阻塞性睡眠呼吸暂停综合征外周血CD19^(+) B淋巴细胞检测及其临床意义

目的探讨儿童阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)外周血CD19+B淋巴细胞与睡眠呼吸障碍相关参数的关系。方法 OSAS患儿45例,根据呼吸暂停低通气指数(AHI)分为轻、中、重度病例组各15例,对照组为非OSAS儿童15例。采用流式细胞仪检测外周血CD19+B淋巴细胞,并将结果进行统计学处理,分析该指标的变化情况及其与氧减指数(ODI)的关系。结果 OSAS组和对照组的CD19+B淋巴细胞百分率分别为(18.38±5.42)%和(14.07±2.76)%,差异有统计学意义(t=2.94,P=0.0047)。轻、中、重度病例组的CD19+B淋巴细胞百分率分别为(15.47±3.09)%、(16.87±5.36)%和(22.80±4.65)%,与对照组比较差异有统计学意义(F=13.12,P=0.000)。进一步两两比较显示,重度病例组的CD19+B淋巴细胞百分率明显高于轻度病例组(q=8.73,P=0.000)、中度病例组(q=5.93,P=0.000)和对照组(q=7.93,P=0.000),而轻、中度病例组与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。CD19+B淋巴细胞百分率与ODI呈正相关(r=0.507,P=0.000)。结论重度OSAS患儿外周血CD19+B淋巴细胞数目增加,提示体液免疫可能因缺氧而代偿性增强。