系统性红斑狼疮患者外周血CD19^(+)CD25^(+)Breg比例和细胞表面PD-1和PD-L1的表达及其与临床指标的相关性

目的 研究程序性死亡蛋白1(PD-1)与其配体PD-L1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD19^(+)CD25^(+)调节性B细胞(Breg)的表达及临床意义。方法收集50例SLE患者和41例健康人(HC)外周血标本,采用流式细胞仪检测外周血中CD19^(+)CD25^(+)Breg的比例,以及CD19^(+)CD25^(+)Breg的PD-1、PD-L1表达,同时采集患者的临床表现和实验室指标等临床信息。使用免疫磁珠分选CD4^(+)T细胞与CD19^(+)B细胞,体外细胞共培养,检测Breg的分化。结果SLE患者活动组外周血中CD19^(+)CD25^(+)Breg比例低于HC,CD25^(+)B细胞PD-1、PD-L1的表达高于HC;SLE患者有胸腔积液、关节炎、C反应蛋白(CRP)上升的患者Breg频率高于对应阴性组;SLE患者有IgM下降、抗核糖核蛋白(RNP)抗体阳性的患者Breg频率低于对应阴性组;SLE患者有感染、发热、关节炎、IgA上升的患者CD19^(+)CD25^(+)PD-1^(+)细胞频率高于对应阴性组;SLE患者有感染、发热、IgA上升的患者CD19^(+)CD25^(+)PD-L1^(+)细胞频率高于对应阴性组;活化的CD4^(+)T细胞有利于CD19^(+)B细胞表面CD25的表达。结论SLE患者外周血中CD19^(+)CD25^(+)Breg降低,但细胞表面PD-1与PD-L1的表达增加,并且与相关临床表现及实验室参数存在一定的关系。活化的CD4^(+)T细胞促进Breg的分化。

TLR4/9介导牙周炎宿主CD25+B细胞表达IL-10、IL-35及TGF-β的效应及机制

目的分析牙周炎宿主CD25^(+)B细胞中IL-10、IL-35及TGF-β的表达特点,评价TLR4/9的表达活化对上述过程的影响。方法SD大鼠随机分为健康组、早期牙周炎组、晚期牙周炎组,采用结扎法建立牙周炎模型。检测各组动物牙龈及外周血CD25^(+)B细胞内IL-10、IL-35和TGF-βmRNA的表达水平,牙龈CD25^(+)B细胞内TLR 2/4/7/9、MyD88、TRAF6的表达活化水平。建立细胞培养体系,分析TLRs/MyD88信号对CD25^(+)B细胞表达分泌IL-10、IL-35和TGF-β的影响。结果早期牙周炎组牙龈CD25^(+)B细胞内IL-10、TGF-βmRNA表达水平高于健康组(P<0.05)。晚期牙周炎组牙龈CD25^(+)B细胞内IL-10、IL-35及TGF-βmRNA表达水平高于健康组(P<0.05),外周血CD25^(+)B细胞内IL-10 mRNA高于健康组(P<0.05),余差异无统计学意义(P>0.05)。相比健康组,晚期牙周炎组牙龈CD25^(+)B细胞内TLR4/9及MyD88的表达磷酸化水平均升高(P<0.01)。细胞实验结果显示,TLR4激动剂上调IL-10、IL-35、TGF-βmRNA表达及IL-10的浓度(P<0.05),TLR9激动剂上调IL-10、TGF-βmRNA表达及IL-10的浓度(P<0.05),TLR4/TLR9激动剂联合应用上调所有检测指标的表达及浓度(P<0.05),MyD88拮抗抑制上述过程(P<0.05)。结论牙周炎晚期,牙龈CD25^(+)B细胞表达IL-10、IL-35和TGF-β水平升高,这一过程可能受TLR4/9-MyD88信号调控。

Ⅰ期矽肺患者外周血调节性B细胞和调节性T细胞水平变化

目的探讨外周血调节性B细胞和调节性T细胞在Ⅰ期矽肺患者中的水平变化及意义。方法采用流式细胞术方法,检测82例Ⅰ期矽肺患者(矽肺组)、48例具有与矽肺组相同接尘条件的健康井下接尘矿工(接尘组)及45例井上健康查体人员(正常组)外周血CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞水平。结果与接尘组和正常组比较,矽肺组CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞水平升高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,接尘组CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平减低,差异具有统计学意义(P<0.05)。肺功能轻度障碍组CD4^+CD25^+T细胞水平低于正常组和中重度障碍组,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。接尘年限<20年组CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平明显低于接尘年限20-年组和接尘年限30-年组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。相关性分析显示,正常组外周血CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平与CD4^+CD25^+T细胞水平呈负相关(r=-0.441,P<0.05),CD19^+CD25^+B细胞水平与CD4^+CD25^+T细胞水平呈正相关(r=0.477,P<0.05),矽肺组和接尘组各指标间无相关性。结论Ⅰ期矽肺患者外周血CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞失衡并参与该病发生发展,CD4^+CD25^+T细胞水平可预示早期肺功能损伤,CD19^+CD24hi CD38hi B水平可能与接尘时间有关。