葡萄膜炎患者外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞的表达

目的:通过检测葡萄膜炎患者外周血中CD4+CD25high调节性T细胞的表达水平,初步探讨其在葡萄膜炎发病中的作用。方法:取16例正常健康对照及30例不同类型活动期葡萄膜炎患者,采取抗凝外周血,进行三色免疫荧光染色、流式分析。结果:葡萄膜炎患者外周血中CD4+CD25highT细胞的百分率与正常健康对照(8.56%±4.22%vs5.72%±3.11%)相比,显著升高(P=0.022),而且与患者病情严重程度明显相关(P=0.007)。另外CD4+CD25highCTLA4+T细胞在葡萄膜炎患者外周血中比例较正常对照明显升高(P=0.012)。结论:葡萄膜炎患者外周血中CD4+CD25highTreg细胞的异常表达可能参与疾病的发生发展,并与疾病的活动密切相关。

肝癌患者外周血CD4^＋CD25^highT淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的探讨原发性肝细胞癌(肝癌)患者外周血调节性T细胞亚群变化及其临床意义。方法应用流式细胞仪检测34例肝癌患者及30例同龄健康人群外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25high T细胞占CD4+T细胞的比例;MTT法用于检测部分病人外周血PBMC的增殖情况。结果肝癌组CD4+CD25high/CD4+的比率较健康对照组显著增加(P<0.01);肝癌Ⅲ期患者CD4+CD25high/CD4+T比例高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.01);肝癌组PBMC增殖水平较健康对照组明显下降(P<0.01)。结论肝癌患者CD4+CD25high调节性T细胞比例显著升高,外周血PBMC增殖水平较健康人群明显下降,可能与肝癌导致机体免疫功能异常有关。

慢性HBV感染者外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞初步分析

目的分析不同临床乙型肝炎病毒（HBV）慢性感染者外周血中CD4^＋CD25^high调节性T细胞（Treg）的水平及其与各种临床指标的关系。方法采集35例不同临床表现成年慢性HBV感染者（HBsAb^＋组5例、非活动肝炎组8例、活动肝炎组12例、免疫耐受期组10例）及12例健康成人外周血标本，流式细胞仪分析外周血中CD4^＋CD25^highTreg含量，ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，RT—PCR法检测HBVDNA载量，同时进行肝脏生化功能检测，并进行统计学分析。结果HBV慢性感染者[（12．35±6．48）个／ul；（1．82±0．87）％）]及健康成人外周血标本[（8．91±3．11）个／ul，（1．35±0．39）％]中CD4^＋CD25^highTreg绝对计数和其占CD4^＋T细胞百分含量差异均无统计学意义（P〉0．05）；分组分析发现，免疫耐受期组CD4^＋CD25^highTreg占CD4^＋T细胞百分含量高于HBsAb^＋组、活动肝炎组及健康对照组（P〈0．05）；免疫耐受期组CD4^＋CD25^highTrge绝对计数高于健康对照组（P〈0．05）；余各组间差异无统计学意义（P〉0．05）。分析CD4^＋CD25^highTreg含量与临床指标间相关性发现，CD4^＋CD25^highTreg占CD4^＋T细胞百分含量与丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平呈负相关（r=-0．418，P=0．038），与CD4／CD8比值呈正相关（r=0．344，P=0．021），与HBVDNA水平无相关性（r=0．118，P〉0．05）；CD4^＋CD25^highTreg绝对计数与CD4／CD8比值呈正相关（r=0．360，P=0．015），与ALT水平及HBVDNA水平无相关性（r=-0．211，r=0．060，P〉0．05）。结论CD4^＋CD25^highTreg在HBV慢性感染的免疫发病机制中可能发挥一定作用。

伴有区域淋巴结转移食管癌患者外周血CD4＋CD25^high调节性T细胞在放疗前后的变化

放疗是局部晚期食管癌的主要治疗方法，但又可能抑制机体的免疫功能，导致肿瘤复发或转移。准确评估患者的免疫状态，有利于正确选择治疗方案。但目前尚无理想的指标评估免疫功能状态。

CD4^＋CD25^high调节T细胞及FOXP3基因在慢性移植物抗宿主病患者外周血中的表达及意义

移植物抗宿主病（GVHD）是异基因造血干细胞移植后最常见的并发症和主要致死原因之一，目前治疗GVHD的主要药物是非特异性免疫抑制剂，不良反应较大。CD4^＋CD25^＋调节T细胞是一群免疫调节（抑制）细胞，在自身免疫疾病和肿瘤免疫中均发挥着重要作用。FOXP3是一个转录抑制因子，它特异地表达于CD4^＋CD25^＋调节T细胞。为了探讨CD4^＋CD25^＋调节T细胞和FOXP3在GVHD发生中的作用，

肺癌患者CD4^+ CD25^(high) Foxp3^+调节性T细胞的格局变化及意义

目的:研究肺癌患者外周血(PBMC)及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25h ighFoxp3+调节性T细胞(Treg)的比例改变,探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法:分离肺癌患者PBMC及TIL,FACS分析CD4+/CD8+T细胞的比值及CD4+CD25h ighT细胞占CD4+T细胞的比例。Real-tim e PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果:肺癌患者PBMC及TIL中CD4+/CD8+比值降低;而CD4+CD25h ighT细胞在CD4+T细胞中所占比例升高;Foxp3基因仅在TIL中高表达,而在PBMC中低或不表达,表明肿瘤局部的CD4+CD25h ighT细胞主要是CD4+CD25h ighFoxp3+Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论:CD4+CD25h ighFoxp3+Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高,可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8+T细胞的杀伤效应,最终发挥免疫抑制效应相关。

非霍奇金淋巴瘤患者外周血CD4^+CD25^(high)调节性T细胞研究

本研究分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血T细胞亚群及CD4+CD25high调节T(Tr)细胞比例及其变化规律,初步探讨B-NHL免疫抑制机制,以及化疗对此免疫抑制功能的影响。采用流式细胞术检测42例初治B-NHL患者、36例化疗后达CR/PR患者及15例正常健康者(对照组)外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD4+CD25highT细胞的比例。结果显示:B-NHL患者CD3+及CD4+T细胞比例、CD4/CD8比值均低于正常对照组,它们依次为(68.33±15.27)%,对照(72.06±9.26)%;(34.47±12.84)%,对照(42.45±9.2)%;1.36±0.26,对照1.92±0.20,但CD4+CD25highTr细胞比例明显高于正常对照组,为(4.10±1.21)%,对照(2.04±1.03)%,(P<0.001)。化疗后组CD4/CD8比值低于化疗前组(P<0.05);而外周血CD4+CD25highTr细胞比例,显著高于化疗前组和对照组(P<0.01)。结论:B-NHL初治化疗前及化疗后患者外周血CD4+CD25highTr细胞比例都显著升高,提示CD4+CD25highTr细胞可能是B-NHL患者免疫抑制的重要原因之一。

淋巴结核患者外周血CD4^+CD25^(high)FoxP3^+调节性T淋巴细胞以及血浆IFN-γ和IL-10水平及其临床意义

目的研究淋巴结核患者外周血CD4+CD25highFoxP3+调节性T淋巴细胞(Treg)和干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化及临床意义。方法采用流式细胞仪对100例淋巴结核患者及30名正常人外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10水平进行检测。结果淋巴结核患者组与正常对照组比较,外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IL-10水平均升高(P<0.05),而IFN-γ水平则降低(P<0.05)。在干酪样型、增殖型和混合型3种类型的淋巴结核病之间各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论淋巴结核患者细胞免疫功能明显异常。CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10在淋巴结核的发病过程中发挥了重要作用。

不同病程寻常型银屑病患者外周血中CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的比较与分析

目的:检测和分析不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(CD4+CD25highTreg)水平特点和意义。方法:选取进行期(70例)、稳定期(64例)和消退期(38例)寻常型银屑病患者,知情同意后,取外周抗凝全血,分离单一核细胞,采用流式细胞术检测不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25highTreg的水平,并统计分析其特点与意义。结果:进行期、稳定期和消退期寻常型银屑病患者组外周血CD4+CD25highTreg与CD4+淋巴细胞的百分比分别为(2.86±0.9)%、(3.95±0.6)%和(4.77±0.1)%。稳定期和消退期寻常型银屑病患者组明显高于进行期组(t’=8.312,P<0.01;t=10.126,P=0.000),而消退期组明显高于稳定期组(t’=4.588,P<0.01)。值得注意的是,消退期寻常型银屑病患者组与正常对照组比较,差异显著,消退期组仍低于正常对照组(t=2.281,P=0.0264)。结论:不同病程寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25highTreg水平存在显著差异,提示CD4+CD25highTreg与寻常型银屑病发生和病程发展关系密切。本研究为深入研究寻常型银屑病免疫学发病机制做出了初步的尝试与探索。

非小细胞肺癌外周血CD4^+CD25^(high)调节T细胞分析

目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD4+CD25high调节T细胞(Tr)比例及变化规律,初步探讨其临床意义。方法:采用流式细胞仪检测61例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者(对照组)外周血中CD3+、CD4+、CD8+及CD4+CD25highTr细胞比例,并进行分层分析。结果:NSCLC患者CD4+CD25highTr细胞比例明显高于正常对照组,分别为(4.36±2.07)%、(2.04±1.03)%,(P<0.01)。而且,随疾病进展外周血CD4+CD25highTr细胞比例逐渐升高,分别为Ⅰ+Ⅱ期(2.26±0.6)%;Ⅲ期(3.28±1.38)%,(P<0.05);Ⅳ期(6.06±4.08)%,(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,外周血CD4+CD25highTr细胞比例较高者预后较差(P=0.0026)。结论:NSCLC患者外周血CD4+CD25highTr细胞比例升高,提示与肺癌免疫逃逸有关。去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫,为NSCLC治疗提供一种新的方法。

儿童AITP治疗前后CD_4^+CD_(25)^(High)Foxp3^+Treg细胞与Foxp3基因表达的变化

目的探讨CD4+CD25HighFoxp3+Treg细胞在儿童急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)发病中的作用及对丙种球蛋白、激素治疗的效应关系。方法流式细胞仪检测AITP患儿治疗前后CD4+CD25HighFoxp3+Treg细胞比例变化,RT-PCR法检测外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA的表达。结果单用激素或联用激素和丙种球蛋白治疗后AITP患儿CD4+CD25HighFoxp3+Treg细胞比例和Foxp3基因表达水平较治疗前和正常对照组明显增高(P<0.01),其中联用丙种球蛋白和激素组的增高水平更为明显(P<0.01)。结论CD4+CD25HighFoxp3+Treg细胞比例下降及Foxp3基因表达降低是AITP的发病机制之一,丙种球蛋白和激素可以通过诱导其扩增及活化发挥治疗AITP的作用。

脐带血、成人外周血中CD4^+CD25^(high)调节性T细胞分布的比较

目的比较成人外周血及新生儿脐带血中CD4+CD25+调节性T细胞(Tr细胞)的数量。方法采集成年人外周血和新生儿的脐带血,以荧光素分别标记的抗CD4/抗CD25/抗CD3和抗CD4/抗CD8/抗CD3mAb染色后,流式细胞术进行分析。结果成人外周血中CD4+CD25highTr细胞的数量为(9.09±3.05)个/μL,占CD3+CD4+T细胞的(1.40±0.37)%。新生儿脐带血中CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25highTr细胞的绝对数及其占CD3+CD4+T细胞的百分率,均明显高于成人外周血(P<0.01);而CD4+CD25intT细胞的绝对数及其占CD3+CD4+T细胞的百分率,则明显低于成人外周血(P<0.01)。结论新生儿脐带血中CD4+CD25highTr细胞、CD4+CD25intT细胞及CD4+CD25-T细胞的数量明显有异于成人外周血。

CD4^+ CD25^(high)调节性T细胞在异基因造血干细胞移植后的重建及其与aGVHD的相关性

目的:研究CD4+CD25high调节性T细胞在异基因造血干细胞移植后的重建情况及其与aGVHD相关性。方法:应用流式细胞技术及实时定量PCR技术检测22例异基因造血干细胞移植物中及移植后不同时期外周血中CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25highT细胞占CD4+T细胞的比例(CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25high/CD4+)、CD4+CD25highT细胞与CD4+CD25+T细胞之比(CD4+CD25high/CD4+CD25+)以及FOXP3基因的表达。结果:①aGVHD组移植物中CD4+CD25high/CD4+及CD4+CD25high/CD4+CD25+比例均显著低于无aGVHD组(P<0.05)。②移植后早期,两组外周血中的CD4+CD25+/CD4+比例均较移植物中者显著升高,在aGVHD组CD4+CD25high/CD4+及CD4+CD25high/CD4+CD25+比例亦较移植物中者显著升高,而在无aGVHD组两者无显著升高,且低于aGVHD组。③移植后两组的FOXP3的表达均逐渐升高,但至移植后6个月仍低于健康对照组(P<0.05)。aGVHD组移植后外周血FOXP3的表达低于无aGVHD组(P<0.05)。结论:①移植后早期外周血CD4+CD25high调节性T细胞发生活化和增殖,有利于维持免疫稳态和控制aGVHD;②移植物中CD4+CD25high调节性T细胞的比例及其与活化的CD4+效应性T细胞之比可能影响aGVHD的发生;③aGVHD可影响CD4+CD25high调节性T细胞的数量或FOXP3的表达。

恶性肿瘤患者CD4^+CD25^+/CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的研究

目的:探讨恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+/CD4+CD25high调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)水平的特点及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测Treg水平,并进行分层分析。结果:62例恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25+Treg、CD4+CD25high Treg占T细胞的百分比分别为19.61%±8.17%和4.20%±1.90%,高于正常对照组(分别为P<0.05和P<0.001),它们与NK细胞呈负相关(r分别为-0.2361和-0.306)。随疾病进展,CD4+ CD25+Treg水平升高,肿瘤进展期(IV期)与前3期比较有极显著差异(P<0.001)。CD4+CD25high Treg占CD4+T细胞的百分比率逐渐升高,中期(Ⅲ期)患者与早期患者、正常对照组比较有极显著差异(P<0.001);晚期患者与中期患者比较有极显著差异(P<0.001)。结论:恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+/CD4+CD25high Treg水平的升高,与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生发展密切相关。

中国恒河猴(Macaca mulatta)外周血CD4^+CD25^+T淋巴细胞的研究

目的:研究中国恒河猴外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞亚群及其分布频率。方法:利用流式细胞术对50只中国恒河猴外周血CD4+CD25+T淋巴细胞进行了分析。结果:发现所有被检测的恒河猴个体中均存在明显的CD4+CD25+T淋巴细胞亚群;CD4+CD25+T淋巴细胞大约占CD4+T淋巴细胞的9.1%(变化范围为2.6%～18.1%);其中CD4+CD25highT淋巴细胞约占2.5%(0.3%～5.5%)。对不同年龄和性别个体中CD4+CD25+T淋巴细胞频率的初步分析未发现统计学上有年龄或性别差异。结论:中国恒河猴可用于与CD4+CD25+T细胞相关的人类疾病的研究中。

重型再生障碍性贫血CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞的变化

应用流式细胞术检测重型再生障碍性贫血(SAA)患者外周血CD4+CD2+5T细胞、CD4+CD2h5ighT细胞的数量。结果10例初治SAA患者外周血CD4+CD2+5T细胞占CD4+T细胞的(6.23±1.82)%,明显低于正常对照组(9.20+2.95)%(P<0.01),CD4+CD2hi5ghT细胞比例为(1.02±0.11)%,亦明显低于正常对照组(1.43±0.41)%;10例造血恢复SAA患者CD4+CD2+5T细胞和CD4+CD2h5ighT细胞比例分别为(8.92±1.22)%和(1.41±0.64)%,与正常对照组无明显差异(P>0.01)。认为CD+CD+、CD+CDhighT细胞水平与SAA密切相关。

CD4^+CD25^(high)调节性T细胞与器官免疫耐受

已经证明器官移植受者体内存在抑制性或调节性细胞，能下调抗原特异性的T细胞反应，进而有利于移植物特异性免疫耐受。1995年Sakaguchi^[1]首次报道，表达IL-2受体α链（CD25）的CD4^＋T细胞亚群的数量的减少和功能的缺陷可引起自身免疫性疾病，具有免疫调节作用。这群高表达CD25的细胞被命名为调节性T细胞（regulatory T cells,Treg），它们在器官移植耐受的诱导和维持中起重要作用。本文主要阐述CD4^＋CD25^high调节性T细胞的研究进展及其与临床器官移植的关系。

慢性乙型肝炎患者外周血CD4^+CD25^(+high)调节性T细胞对免疫状态的影响

目的探讨CD4+ CD25+high调节性T(Tr)细胞在慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血的变化及其对免疫状态的影响。方法用流式细胞仪技术分析比较42例CHB患者及20例正常健康人外周血中CD4+CD25+highTr细胞,同时检测CD4+T细胞和CD8+T细胞。结果与健康对照组相比,CHB组CD4+CD25+highTr细胞百分率显著升高(P<0.05),而CD4+T细胞显著下降(P<0.05);CD8+T细胞虽有增加趋势,但无差异(P>0.05)。CHB组CD4+CD25+highTr细胞百分率与HBV DNA载量有一定的关系,但与血清ALT水平无相关(P>0.05)。结论CHB患者外周血CD4+CD25+highTr细胞升高可能是导致机体免疫功能下降的原因之一。

非霍奇金淋巴瘤患者外周血CD4^+CD25^(high)CD127^(low)调节T细胞水平及其与临床特点的关系

背景与目的:有关非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)与免疫抑制状态的研究引起人们的关注。调节T细胞(regulatory T cell,Treg)是免疫抑制细胞,Treg与淋巴瘤之间的关系存在争议。本研究检测初诊NHL患者及正常人外周血Treg水平,探讨外周血Treg与NHL的关系。方法:选取中山大学肿瘤防治中心2006年12月至2008年3月收治的99例初诊NHL患者及31例体检正常的健康成人的外周血标本,采用流式细胞仪联合标记CD4、CD25、CD127检测NHL患者及健康成人外周血CD4+CD25highCD127low Treg水平并进行分析。结果:正常人外周血CD4+CD25highCD127low Treg水平为8.07±1.90,初诊NHL患者外周血CD4+CD25highCD127low Treg水平为11.20±4.40,差异具有统计学意义(P<0.001)。NHL患者外周血Treg水平在男性患者中比在女性患者中高,差异具有统计学意义(P=0.030);在有吸烟和/或嗜酒组比在无吸烟和/或嗜酒组高,差异具有统计学意义(P=0.045);而NHL患者外周血Treg水平与年龄、分期、IPI评分、B症状、巨大包块、LDH水平、病理亚型、近期疗效、HBV感染等之间的相关检验无统计学意义。在弥漫大B细胞性淋巴瘤中分析结果亦相似。结论:初诊NHL患者体内存在免疫抑制,有吸烟和/或嗜酒等不良嗜好的NHL患者Treg水平较无不良嗜好者高,Treg水平与NHL的疾病状态无关。

CD4^+CD25^(high) Tr细胞在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:比较非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25high Tr细胞比例的变化与肺癌分期的关系,探讨患者局部肿瘤微环境和全身免疫状态与CD4+CD25+Tr细胞的关系。方法:分离NSCLC患者和健康人外周血单个核细胞(PBMC),取NSCLC患者新鲜肺癌组织抽提TIL。用流式细胞仪检测CD4+T细胞和CD4+CD25high Tr细胞。结果:NSCLC患者PBMC中CD4+CD25high Tr/CD4+T细胞比例较健康人显著升高(P<0.01)。Ⅱ～ⅢA期NSCLC患者PBMC和TIL中CD4+CD25high Tr/CD4+T细胞比例较Ⅰ期患者显著升高。结论:CD4+CD25high Tr细胞可能参与肿瘤产生的宿主免疫抑制反应及其发展。