骨髓间充质干细胞通过上调CD8^+CD28^-T细胞抑制T细胞的增殖

本研究旨在探讨CD8+ CD2 8- T细胞在间充质干细胞 (MSC)抑制T细胞增殖中的作用。应用尼龙毛柱分离T淋巴细胞 ,再经CD8磁珠分选出CD8+ T淋巴细胞 ;用植物血凝素 (PHA)刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞 ,应用MTT法测定T细胞的增殖 ;应用流式细胞术分别检测与或未与MSC共培养 8天的CD8+ T细胞亚群的变化及用PHA刺激与或未与MSC共培养 3天的CD8+ T细胞亚群的变化。结果表明 ,MSC抑制PHA刺激引起的CD8+ T细胞的增殖 ,且这种抑制作用是剂量依赖性的 ;流式细胞术结果显示 ,与未经MSC处理的CD8+ T细胞相比 ,MSC显著上调共培养 8天的CD8+ T细胞中的CD8+ CD2 8- 亚群 ,及经PHA作用 72小时后的CD8+ T细胞中的CD8+ CD2 8- 亚群。结论 :MSC通过上调CD8+ CD2 8- T细胞发挥抑制作用。

咳嗽合剂对老年感染后咳嗽病人外周血CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA表达的影响

目的探讨咳嗽合剂对感染后咳嗽疾病老年病人外周血CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA的表达作用。方法选取2016年11月至2017年10月感染后咳嗽病人50例,随机分成2组。对照组不予干预治疗;试验组口服咳嗽合剂20 mL,3次/d,疗程7 d;分别检测治疗前1 d与治疗7 d后的CD8^+CD28^-T细胞含量、占单核细胞的百分比及CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA的表达。结果对照组CD8^+CD28^-T细胞含量、CD8^+CD28^-T细胞占单核细胞的百分比及CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA表达在治疗前后比较差异无统计学意义。试验组CD8^+CD28^-T细胞含量、CD8^+CD28^-T细胞占单核细胞的百分比及CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA的表达在治疗前后比较差异具有统计学意义。结论咳嗽合剂抗炎作用可能与CD8^+CD28^-T细胞Foxp3 mRNA表达有关,可能通过抑制CD8^+CD28^-T细胞产生,减少免疫抑制,加快炎症消退。

晚期恶性肿瘤患者化疗前后CD8^+、CD8^+CD28^+、CD8^+CD28^-T细胞的变化观察

目的 :分析 6 4例晚期恶性肿瘤患者化疗前后CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 的变化 ,并探讨其与病情的关系。方法 :采用流式细胞术检测 6 4例晚期恶性肿瘤患者治疗前后T淋巴细胞亚群 ,并与健康体检者作比较。结果 :实验组晚期恶性肿瘤患者化疗前CD4 + 低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而化疗前后CD4 + CD8+ 明显低于对照组 (P <0 0 1) ,CD8+ 、CD8+ CD2 8- 明显高于对照组 (P <0 0 1)。治疗后 ,化疗有效者CD4 + 、CD4 + CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 升高 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,而CD8+ CD2 8- 降低 (P <0 0 5 ) ;化疗无效者CD4 + CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 降低 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,CD8+ CD2 8- 升高 (P <0 0 1)。结论 :晚期恶性肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能低下 ,有效的治疗能提高患者的T淋巴细胞免疫功能 ,临床上检测CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 对恶性肿瘤的治疗和预后有一定的监测作用。

慢性荨麻疹患者外周血中CD8^+CD28^-T细胞检测结果分析

目的:探讨CD8^+CD28^-T细胞在慢性荨麻疹患者致病机制中的作用。方法:收集临床慢性荨麻疹(CU)病例83例,同时设立对照组64例进行比较。应用ELISA法检测研究对象血清中抗Ig E抗体、抗FcεRⅠ抗体浓度,流式细胞仪检测外周血中CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD8^+CD28^-、CD4^+CD25^+T细胞比例,分析检测结果。结果:83名CU中,23例抗Ig E抗体为阳性,占27.7%(27/83);31例抗FcεRⅠ抗体为阳性,占37.3%(31/83)。CU患者外周血CD8^+T细胞比例、CD8^+CD28^-T细胞比例低于正常对照组(P<0.05),CD4^+/CD8^+比值、CD4^+CD25^+T细胞比例均高于对照组(P<0.05)。结论:CU患者机体外周血CD8^+CD28^-T细胞、CD4^+CD25^+T细胞比例与对照组相比存在差异,CD8^+CD28^-T细胞比例降低也可能是CU致病机制之一。

CD8^+CD28^-T细胞在脑疝患者的动态变化与临床意义

目的探讨脑疝患者外周血CD8+CD28-T细胞的动态变化与临床意义。方法收集36例脑疝组(A组)患者外周血,以41例未出现脑疝的重型颅脑损伤患者(B组)及32例健康人(C组)作为对照,采用流式细胞术检测外周血CD8+CD28-T细胞及其胞内转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)百分含量。分别在伤后3 h、6 h及12 h观察A及B组患者外周血CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10变化。结果三组CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10总体差异均有显著性(P<0.05),但B组与C组无统计学差异,而A组上述三者均显著低于另外B及C组(P<0.05)。B组患者在伤后3 h、6 h及12 h的CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10差异均无统计学意义;A组患者3 h、6 h及12 h的CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10均呈进行性下降,表现为任意两个时间点的差异均有统计学意义(P<0.05),且均显著低于B组(P<0.05)。结论 CD8+CD28-T细胞显著下降是脑疝患者的一个重要细胞免疫学特征,其伤后12h内进行性下降与病情进展密切相关。

肾癌根治术患者手术前后CD8^+CD28^-T细胞表达及临床意义

目的探讨肾癌根治术患者手术前后CD8^+CD28^-T细胞表达及临床意义。方法收集52例接受根治术的肾癌患者作为观察对象,采用流式细胞术检测手术前后外周血CD8^+CD28^-T细胞、白介素10(IL-10)及转化生长因子β1(TGF-β1)含量;分析三者含量与肿瘤分期的相关性,并以肾错构瘤患者及正常人作为对照。结果肾癌患者CD8^+CD28^-T细胞、IL-10及TGF-β1均显著高于另外两组,但肾错构瘤患者与正常人之间均无统计学差异(P<0.05);术前III期患者CD8^+CD28^-T细胞、IL-10及TGF-β1显著高于I及II期(P<0.05);术后各期肾癌患者CD8^+CD28^-T细胞及TGF-β1含量均显著低于术前(P<0.05),但IL-10却与术前无统计学差异;术后III期患者CD8^+CD28^-T细胞、IL-10及TGF-β1显著高于Ⅰ及Ⅱ期患者(P<0.05),但术前及术后I及II期患者上述三项指标均无统计学差异。相关性分析显示CD8^+CD28^-T细胞、IL-10及TGF-β1与分期均呈显著正相关性(P<0.05),其相关程度由大至小依次为CD8^+CD28^-T细胞>TGF-β1>IL-10。结论CD8^+CD28^-T细胞及其细胞因子表达含量增多可能是肾癌的一个新免疫机制,前者可在一定程度上鉴别肾癌与良性肿瘤,且可以评价手术效果。

脑卒中患者外周血CD4^+CD25^+及CD4^+CD28^-T细胞的变化及临床意义

目的:研究脑卒中患者外周血CD4^+CD25^+及CD4^+CD28^-T细胞的变化及其与神经元损害标志物、炎症细胞因子、斑块稳定性指标的相关性。方法:选择在我院诊断为急性缺血性脑卒中的患者作为研究的脑卒中组,另取同期体检的健康志愿者作为对照组。采集外周血并测定CD4^+CD25^+及CD4^+CD28^-T细胞的含量,采集血清并测定神经元损害标志物、炎症细胞因子、斑块稳定性指标的含量。结果:脑卒中组外周血中CD4^+CD25^+的含量以及血清中BDNF、IGF-1、IL-10、TGF-β1、TIMP2、Vaspin的含量低于对照组,外周血中CD4^+CD28^-T细胞的含量以及血清中NSE、VILIP-1、ET-1、IL-6、CX-CL12、VCAM-1、P-selectin、ox-LDL、CatS、ICTP、VEGF的含量的含量高于对照组;脑卒中组外周血中CD4^+CD25^+的含量与血清中BDNF、IGF-1、IL-10、TGF-β1、TIMP2、Vaspin的含量呈正相关,NSE、VILIP-1、ET-1、IL-6、CXCL12、VCAM-1、P-selectin、ox-LDL、CatS、ICTP、VEGF的含量呈负相关;外周血中CD4^+CD28^-T细胞的含量与血清中BDNF、IGF-1、IL-10、TGF-β1、TIMP2、Vaspin的含量呈负相关,NSE、VILIP-1、ET-1、IL-6、CXCL12、VCAM-1、P-selectin、ox-LDL、CatS、ICTP、VEGF的含量呈正相关。结论:脑卒中患者外周血CD4^+CD25^+及CD4^+CD28^-T细胞的变化能够加重神经元损害、促进炎症反应激活及斑块稳定性下降。

经前期综合征患者外周血CD8^+CD28^-T细胞、TGF-β1、IL-1水平检测及其与心理应激的关系

目的探索经前期综合征(PMS)患者心理应激与CD8^+CD28^-T细胞及其相关细胞因子的关系。方法选取50例PMS患者(PMS组)、35例单纯焦虑患者(单纯焦虑组)及30例健康女性(健康组),采用流式细胞术检测外周血CD8^+CD28^-T细胞、TGF-β1及IL-10水平,焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)检测心理应激程度,并观察阿普唑仑或维生素B6治疗后变化。结果与健康组比较,PMS组和单纯焦虑组CD8^+CD28^-T细胞、TGF-β1水平降低(P<0.01或0.05),尤以PMS组更显著。PMS患者CD8^+CD28^-T细胞、TGF-β1水平与SAS评分呈显著负相关(P<0.01)。PMS患者在阿普唑仑或维生素B6治疗后CD8^+CD28^-T细胞、TGF-β1及IL-10水平均较治疗前回升(P<0.01)。结论 PMS患者的焦虑状态与CD8^+CD28^-T细胞、TGF-β1水平降低有关。

移植肾功能异常者与正常者外周血CD8^+CD28^-T细胞水平的比较

目的探讨肾移植受者外周血CD8+CD28-T细胞含量对移植肾功能的影响。方法将接受同种异体肾移植后6~30个月,血清肌酐>133μmol/L的患者25例作为肾功能异常组,同期肾移植手术后血清肌酐≤133μmol/L患者25例为肾功能正常组,两组间根据移植后时间、性别、年龄、手术方式及所用免疫抑制方案等因素进行配对。流式细胞仪测定两组外周淋巴细胞中CD8+CD28-T细胞含量。结果肾功能异常组外周血CD8+CD28-T细胞显著低于肾功能正常组。结论肾移植后外周CD8+CD28-T细胞对移植肾功能具有保护作用。

重症肌无力患者的外周血CD8^+CD28^-T细胞的变化及意义

目的探讨CD8+CD28-T细胞在重症肌无力(MG)发病中的作用。方法采用流式细胞术对51例MG患者和35例健康对照者外周血中CD8+CD28-T细胞的构成比进行测定。结果 MG患者外周血中CD8+CD28-T细胞明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);病情未能控制的MG患者外周血中CD8+CD28-T淋巴细胞构成比显著低于正常对照组(P<0.01);胸腺切除的MG患者CD4/CD8比值均低于胸腺未切除组(P<0.05)。胸腺瘤B2型MG患者外周血CD8+CD28-T细胞构成比明显高于胸腺增生的MG患者以及胸腺正常MG患者,其差异有统计学意义(P<0.01)。胸腺瘤B2型的MG患者外周血CD4/CD8比值低于胸腺正常的MG患者的(P<0.05)。结论提示MG患者外周血中存在异常比例的CD8+CD28-T细胞,可能参与疾病的发生与发展。

初发过敏性紫癜患儿外周血CD_4^+CD_^(28)-和CD_8^+CD_(28)^-T细胞水平变化及意义

目的观察初发过敏性紫癜(HSP)患儿外周血T淋巴细胞亚群(CD4+CD2-8T细胞和CD8+CD2-8T细胞)的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用流式细胞技术(FCM)检测89例初发HSP患儿(HSP组)和30例健康儿童(对照组)外周血T淋巴细胞免疫表型。结果 HSP组CD4+CD2+8、CD8+CD2+8、CD3+CD4+T淋巴细胞表达水平及CD4+/CD8+比率较对照组显著降低(P均<0.05);HSP组CD3+和CD3+CD8+T淋巴细胞表达水平与对照组相比无显著性差异(P>0.05);HSP组CD4+CD2-8T细胞和CD8+CD2-8T细胞较对照组明显增高(P均<0.05),但在皮肤型、关节型、腹型、混合型和紫癜性肾炎五种临床类型间无明显差别(P均>0.05)。结论 HSP患儿存在T淋巴细胞亚群的紊乱,CD4+CD2-8T细胞及CD8+CD2-8T细胞的异常增高可能参与了其发病过程,但与HSP临床类型无关。

CD8^＋CD28^-T细胞在大鼠肾脏缺血预处理保护效应中的作用

Burne—Taney等研究表明造成肾脏缺血组织损伤的T淋巴细胞功能减退起到了类似缺血预处理样作用，提出T淋巴细胞中可能存在对肾脏缺血再灌注损伤（IRI）起保护作用的亚群，其中造成缺血组织损伤的免疫细胞主要是表达CD28^＋的CD4^＋T细胞、NKT细胞等，而起保护作用的T细胞亚群尚不清楚。我们在建立大鼠肾脏热IRI模型的基础上通过对外周血免疫抑制性细胞CD8^＋CD28^-T的检测探讨其在肾脏缺血预处理（IP）中的作用。

CD_8^+CD_(28)^-T细胞介导大鼠远距离缺血预处理肾脏保护效应的研究

目的探讨CD8+CD28-T细胞在远程缺血预处理保护早期肾脏热缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性SD大鼠40只随机分为假手术对照组(sham)、单纯缺血再灌注组(IRI)、肾脏缺血预处理+缺血再灌注组(KIP+IRI)、远程缺血预处理+缺血再灌注组(RIP+IRI),再灌注2h后各组抽血检测肌酐、IL-10、CD8及CD28并作肾脏组织学观察。结果RIP+IRI组、KIP+IRI组外周血CD8+CD28-T细胞比例、血清IL-10浓度高于IRI组、sham组(P<0.01),而外周血CD28+T细胞含量低于IRI组,并伴随血清肌酐、肾组织中肾小管损害程度Paller氏评分的下降(P<0.01),RIP+IRI和KIP+IRI组间以上指标差异无显著性(P>0.05)。结论远程缺血预处理与肾脏缺血预处理存在相似的保护早期肾脏热缺血再灌注损伤的作用,其中CD8+CD28-T细胞参与其中并发挥免疫抑制作用。

2型糖尿病合并大血管病变患者CD4^+CD28^-T细胞的变化及意义

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者及大血管病变患者外周血CD4+CD28-T细胞及其肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ的变化及其意义。方法应用免疫荧光、流式细胞术及ELISA法检测36例初诊单纯T2DM(A组)、30例T2DM合并大血管病变(B组)和28例正常人(C组)的外周血CD4+CD28-T细胞亚群及血清IFN-γ、TNF-α的水平。结果B组CD4+CD28-T细胞和血清TNF-α、IFN-γ水平均高于A组(P<0.05),且两组均高于C组(P<0.05)。结论自身反应性CD4+CD28-T细胞可通过高分泌IFN-γ等细胞因子参与T2DM及大血管病变发生和发展。

组蛋白H4的乙酰化在急性冠脉综合征患者CD4^＋CD28^-T细胞CD28表达缺失中的作用

目的通过对急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）患者外周血CD4^＋T细胞CD28 mRNA水平和CD28基因启动子区域组蛋白H4（histone 4，H4）的乙酰化状态的研究，旨在探讨H4的乙酰化在ACS患者CD4^＋CD28^－T细胞CD28表达缺失中的作用。方法免疫磁珠法分离外周血CD4^＋T细胞，经逆转录实时定量PCR（Real time-PCR）技术检测CD4^＋T细胞CD28mRNA表达水平，染色质免疫共沉淀和实时荧光定量PCR技术（ChIP-qPCR）检测CD28启动子区域H4的乙酰化状态。结果与正常对照组相比，ACS患者CD4^＋T细胞CD28mRNA表达水平显著减低，差异具有统计学意义[正常对照组比ACS组：（1.063±0.131）比（0.739±0.065），t＝2.65，P〈0.05]。CD28基因启动子区域H4的乙酰化水平降低，差异具有统计学意义[正常对照组比ACS组：（3.115±0.545）比（1.275±0.168），t＝3.222，P〈0.05]。CD28基因启动子区域H4乙酰化化水平与CD28mRNA表达水平呈正相关（P＝0.03，r＝0.582）。结论ACS患者CD4＋T细胞CD28基因启动子区域H4低乙酰化调控了CD28基因转录抑制。

急性冠脉综合征患者CD4^+CD28^-T淋巴细胞与HLA-DRB1的相关性

目的:探讨人HLA-DRB1等位基因多态性与急性冠脉综合征(ACS)CD4+CD28-T细胞数量的关系。方法:采用聚合酶链反应-序列特异性引物DNA分型技术对136例ACS患者和115例健康对照进行HLA-DRB1基因分型。同时采用流式细胞术(FCM)进行CD4+CD28-T细胞测定,分析HLA与CD4+CD28-T细胞的相关性。结果:HLA-DRB1*15,DRB1*04和DRB1*01等位基因与CD4+CD28-T淋巴细胞数量相关,表达DRB1*04和DRB1*01的患者有高百分比的CD4+CD28-T淋巴细胞,而表达DRB1*15的所有患者却有低数量的CD4+CD28-T淋巴细胞。结论:在黑龙江地区人群中,ACS患者CD4+CD28-T细胞的形成与HLA-DRB1*01、DRB1*04和DRB1*15密切相关。

CD4^+CD28^-T淋巴细胞与ACS关系的研究进展

近年来,在急性冠脉综合征(ACS)患者的粥样斑块中和外周血中发现一种不寻常的T细胞,CD4+CD28-T淋巴细胞,IL-12使它CCR-5的表达增加,CCR-5与粥样硬化病变中MIP-1α/CCL3和RANTES/CCL5结合促进CD4+CD28-T淋巴细胞的聚集,这种细胞既表现效应性记忆细胞的特性,又具有中心记忆性T细胞的特性,表现在产生大量干扰素-γ,细胞溶解功能和在体内能杀死内皮细胞和血管平滑肌细胞(VSMCs)功能、克隆扩增性和长寿命性,促进动脉粥样硬化斑块不稳定性,与ACS的发病密切相关。其研究结果对ACS的预防和治疗提供新的途径。

CD4^＋CD28^-T细胞与糖尿病

CD4^＋CD28^-T细胞是一个具有特殊生物学效应的T细胞亚群，可在某些免疫性疾病中出现。这类特殊的细胞亚群在缺乏CD28分子的情况下，不仅存在异常的细胞免疫功能，而且具有自身反应性及大量扩增和抗凋亡的特征。研究表明，糖尿病的发生、发展与CD4^＋CD28^-T细胞功能、数目的变化及其与调节性T细胞的比例失衡有关，研究其生物学特性及功能对探讨糖尿病及其并发症的免疫病理机制、指导临床治疗提供了理论依据。

GD患者外周血CD4^+CD28-T细胞亚群的表型特征及临床意义

检测Graves病(GD)患者外周血CD4^+CD28-T细胞水平及其表面CD45RO/CD45RA及ICOS的表达,探讨CD4^+ CD28-T细胞亚群在GD免疫致病机制中的作用。采用三色荧光抗体染色及流式细胞术检测了42例初发GD患者和30例健康者外周血中CD4^+CD28-T细胞的百分率及其表面CD45RO/CD45RA和ICOS表达水平,同时检测其甲状腺功能并进行相关性分析。结果GD患者外周血中CD4^+CD28-T细胞百分率明显高于健康对照组,并高表达ICOS分子,与FT3水平显著正相关;与健康对照组相比,GD患者CD4^+CD28^-CD45RO^+T细胞百分率也显著增高,而CD4^+CD28^-CD45RA^+T细胞呈下降趋势,FT3、FT4水平与CD4^+CD28-T细胞表面CD45RO的表达率呈正相关,而FT3水平与CD45RA表达呈负相关。结论GD患者外周血CD4^+CD28^-T细胞异常增高,表面高表达ICOS分子,具有记忆性细胞的表型特征,与甲状腺功能异常有一定的相关性,CD4^+CD28-T细胞可能是参与GD免疫病理反应的自身反应性T细胞。

急性冠脉综合征患者CD4^+ CD28^- T细胞的抗原特异性探讨

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者CD4+ CD28- T细胞的抗原特异性。方法22例ACS患者和12例稳定性心绞痛(SAP)患者以及10名健康体检者外周血白细胞经巨细胞病毒(HCMV)、肺炎衣原体(Cp)、人热休克蛋白60(hHSP60)和氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)刺激培养,然后分离CD4+CD28-T细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞内干扰素γ(IFN-γ)和穿孔素mRNA表达,以转录上调作为标准来评价抗原的识别。结果来自22例ACS患者中有18例的CD4+CD28-T细胞与hHSP60反应,与HCMV、Cp和oxLDL不反应。SAP患者的CD4+CD28-T细胞对4种抗原都不反应。10名健康体检者中有4名有CD4+CD28-T细胞,但这些细胞没有与hHSP60反应。结论hHSP60是ACS患者中CD4+CD28-T细胞识别的一种抗原,循环中hHSP60特异性CD4+CD28-T细胞可能参与促成ACS患者的血管损害。