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CD3和CD28单克隆抗体联合作用对CIK细胞及其亚群增殖及功能的影响 被引量:7
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作者 李玉 韩娇玲 +7 位作者 张震 王菲 李红 黄建敏 赵璇 杨黎 黄岚 张毅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期255-260,共6页
目的:探讨CD3和CD28单克隆抗体联合作用对细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞及其亚群增殖及功能的影响。方法:采集2014年6月至2015年6月在郑州大学第一附属医院接受生物细胞治疗的20例肿瘤患者(肾癌6例,肺癌5例,肝... 目的:探讨CD3和CD28单克隆抗体联合作用对细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞及其亚群增殖及功能的影响。方法:采集2014年6月至2015年6月在郑州大学第一附属医院接受生物细胞治疗的20例肿瘤患者(肾癌6例,肺癌5例,肝癌、乳腺癌和恶性黑素瘤各2例,胆囊癌、淋巴瘤和卵巢癌各1例)的外周血,每例外周血均分为4组(对照组,单用CD3单抗组,单用CD28单抗组,CD3和CD28单抗联合作用组)进行CIK细胞的诱导培养。用CFSE染色检测CIK细胞的增殖能力;ELISA检测CIK细胞分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2的水平;磁珠分选CIK细胞亚群CD4+、CD8+和CD56+细胞,然后用ELISA检测对CIK细胞亚群分泌IFN-γ、TNF-α和IL-2能力的影响。结果:CD3/CD28单抗联合作用(PI=59.35)对CIK细胞的增殖能力的影响与单独使用CD3单抗(PI=64.4)相比效果并不明显,但是可以刺激CIK细胞分泌较高水平的IFN-γ和TNF-α[IFN-γ:(384.6±263.1)vs(201.5±271.5)pg/ml,P=0.0361;TNF-α:(4.795±1.251)vs(2.835±0.443)pg/ml,P=0.0265];进一步分析发现,两单抗的联合作用可增强亚群细胞CD8+分泌IFN-γ、CD56+分泌IL-2和TNF-α的活性,从而起到对淋巴细胞功能的增强作用。结论:CD3与CD28单抗联合作用不能增强CIK的增殖能力,但可以在一定程度上增强CIK细胞的功能,在肿瘤的细胞免疫治疗应用中具有一定的潜力。 展开更多
关键词 cd3单克隆抗体 cd28单克隆抗体 细胞因子诱导的杀伤细胞 IFN-Γ TNF-α IL-2 肿瘤免疫治疗
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N-乙酰-D-乳糖胺、抗CD28单克隆抗体对肺癌患者来源的CIK细胞增殖及杀伤功能的影响 被引量:1
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作者 石晓娟 乔永涛 +5 位作者 杨黎 杨双宁 黄建敏 赵璇 李红 张毅 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期176-179,共4页
目的:观察N-乙酰-D-乳糖胺联合抗CD28单克隆抗体对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖及杀伤功能的影响。方法:提取32例肺癌患者的外周血单个核细胞,分为对照组、抗CD28单克隆抗体组、N-乙酰-D-乳糖胺组及抗CD28单克隆抗体和N-乙酰-D... 目的:观察N-乙酰-D-乳糖胺联合抗CD28单克隆抗体对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖及杀伤功能的影响。方法:提取32例肺癌患者的外周血单个核细胞,分为对照组、抗CD28单克隆抗体组、N-乙酰-D-乳糖胺组及抗CD28单克隆抗体和N-乙酰-D-乳糖胺联合组(联合组),依据CIK细胞培养流程培养和分组处理后于第4、8、10、12、14天测定各组细胞增殖,第14天测定IL-2、IL-10、γ干扰素及肿瘤坏死因子-α的分泌及对K562细胞的杀伤作用。结果:抗CD28单克隆抗体、N-乙酰-D-乳糖胺单独作用均能促进CIK细胞增殖及IL-2及肿瘤坏死因子-α的分泌,增加效应细胞(CD3^+CD8^+细胞)的比例,增强CIK细胞对K562细胞的杀伤能力(P<0.05),但二者联合没有协同效应(P>0.05)。结论:N-乙酰-D-乳糖胺与抗CD28单克隆抗体均能增强CIK细胞增殖及杀伤功能,但二者无协同作用。 展开更多
关键词 N-乙酰-D-乳糖胺 CIK细胞 cd28单克隆抗体 细胞增殖 杀伤功能 肺肿瘤
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CD28单克隆抗体对病毒性心肌炎小鼠的治疗作用
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作者 张仪 韩波 +4 位作者 赵立健 刘振虎 席俊芳 路康 韩秀珍 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第11期1037-1040,共4页
目的探讨CD28单克隆抗体(CD28 mAb)对柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)小鼠的死亡率、心肌病理改变及病毒滴度的影响。方法随机将106只BALB/c小鼠分为CD28 mAb组16只、病毒组40只I、gG组40只及正常对照组10只,腹腔注射半数组织感染... 目的探讨CD28单克隆抗体(CD28 mAb)对柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)小鼠的死亡率、心肌病理改变及病毒滴度的影响。方法随机将106只BALB/c小鼠分为CD28 mAb组16只、病毒组40只I、gG组40只及正常对照组10只,腹腔注射半数组织感染量(TCID50)为10-6/mL的柯萨奇B3病毒0.15 mL,正常对照组接种0.15 mL的Eagle氏液。CD28 mAb组I、gG组接种病毒后67、2 h分别接种CD28 mAb(0.1 mg/kg)和IgG(0.1 mg/kg)。于接种病毒后第7天处死所有小鼠,取心脏,在光镜下观察心肌病理变化,采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测心肌组织中CVB3mRNA的表达。结果CD28单克隆抗体组小鼠死亡率、心肌病理积分、心肌CVB3mRNA均低于病毒对照组(P均<0.05)。结论CD28单克隆抗体可降低心肌病毒滴度,减轻VMC小鼠心肌炎症,降低VMC小鼠死亡率。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 柯萨奇病毒感染 小鼠 近交BALBC cd28单克隆抗体
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Iodogen法^(125)I标记CD28单克隆抗体2F5的方法
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作者 苏娟 苏成海 《放射免疫学杂志》 CAS 2012年第1期15-18,共4页
目前放射性核素125碘(125I)标记技术已广泛应用于分子生物学、免疫学等基础医学研究及相关临床领域,但关于单抗2F5的放射性核素标记国内外尚未见报道,本文利用Iodogen法标记单抗2F5,对标记产物的生物学活性及体外稳定性进行探索,为不... 目前放射性核素125碘(125I)标记技术已广泛应用于分子生物学、免疫学等基础医学研究及相关临床领域,但关于单抗2F5的放射性核素标记国内外尚未见报道,本文利用Iodogen法标记单抗2F5,对标记产物的生物学活性及体外稳定性进行探索,为不同放射性碘(123I、125I、131I)标记单抗2F5以及建立放射免疫显像和靶向治疗方法提供实验依据. 展开更多
关键词 IODOGEN法 125I标记 cd28单克隆抗体 放射性核素标记 标记单抗 放射免疫显像 放射性碘 分子生物学
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CD28单克隆抗体共刺激检测T细胞功能 被引量:3
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作者 雷其洪 吴健民 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期226-228,共3页
目的 为深入研究T细胞功能 ,探讨一种更为实用可靠的实验方法。方法 应用白细胞表面分化抗原 2 8(CD2 8)单克隆抗体 (单抗 )共刺激检测T细胞功能 ,并观察其影响因素。CD2 8单抗协同CD3单抗或植物血凝素 (PHA)诱导外周血淋巴细胞增殖... 目的 为深入研究T细胞功能 ,探讨一种更为实用可靠的实验方法。方法 应用白细胞表面分化抗原 2 8(CD2 8)单克隆抗体 (单抗 )共刺激检测T细胞功能 ,并观察其影响因素。CD2 8单抗协同CD3单抗或植物血凝素 (PHA)诱导外周血淋巴细胞增殖转化及细胞因子 (白细胞介素 2、4及γ干扰素 )产生 ,分别用氚胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入法和酶联免疫法检测。结果 单独CD2 8单抗几乎不能诱导外周血淋巴细胞活化及细胞因子产生 ;CD2 8协同CD3或PHA刺激外周血淋巴细胞增殖效应的增殖指数 (GI)分别为 2 0 .1± 9.5及 5 3.9± 17.2 ,与单用CD3或PHA (G .I为 10 .6± 4.9及 2 2 .0±7.2 )比较 ,差异有非常显著意义 ;CD2 8共刺激显著促进细胞因子产生 ,与CD3或PHA诱生比较约提高 0 .7~ 10倍 ;由CD2 8单抗共刺激诱导的外周血淋巴细胞转化能力受其浓度和培养时间影响 ;CD2 8单抗共刺激所需浓度在 0 .1~ 10mg/L对外周血淋巴细胞均有活化作用。结论 CD2 8单抗共刺激可作为检测T细胞功能的有效方法。 展开更多
关键词 共刺激检测 cd28单克隆抗体 T细胞
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抗CD3/CD28单克隆抗体联合PHA对T淋巴细胞活化和增殖的影响 被引量:4
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作者 覃秋红 张瑶尧 +3 位作者 潘剑 黄天明 陈承晓 罗国容 《微生物学免疫学进展》 2020年第2期16-21,共6页
目的探讨抗人CD3/CD28单克隆抗体联合植物血凝素(PHA)对人外周血T淋巴细胞活化增殖的影响。方法通过Ficoll密度梯度离心法分离健康成人外周血单核细胞后,用CD3免疫磁珠分选T淋巴细胞,抗CD3/CD28单抗、PHA及重组人白介素-2(recombinant h... 目的探讨抗人CD3/CD28单克隆抗体联合植物血凝素(PHA)对人外周血T淋巴细胞活化增殖的影响。方法通过Ficoll密度梯度离心法分离健康成人外周血单核细胞后,用CD3免疫磁珠分选T淋巴细胞,抗CD3/CD28单抗、PHA及重组人白介素-2(recombinant human IL-2,rhIL-2)刺激T淋巴细胞。用CCK-8试剂盒(CCK-8 cell counting kit)检测细胞增殖情况,ELISA测定细胞上清液干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的含量。结果CCK-8结果显示在增殖3 d时,CD3/CD28+PHA组A450 nm值与PHA组、IL-2组与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);比较各组在6、9、12 d的增殖情况,CD3/CD28+PHA组的A450 nm值与其他各组差异均有统计学意义(P<0.05)。刺激3 d各组分泌的IFN-γ质量浓度是最高的。刺激9 d时,CD3/CD28+PHA组、CD3/CD28组、PHA组上清液中IFN-γ浓度分别为(235.27±27.80)、(189.23±24.79)和(124.66±3.39)pg/mL,CD3/CD28+PHA组上清液中IFN-γ的质量浓度高于其余2组(P<0.05)。结论抗CD3/CD28单抗联合PHA比单用抗CD3/CD28单抗、PHA或rhIL-2能更好地激活T细胞及持久地促使T细胞增殖。 展开更多
关键词 cd3/cd28单克隆抗体 植物血凝素 T淋巴细胞 干扰素-Γ
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TP-PCR法构建抗人CD28嵌合抗体双启动子昆虫杆状病毒重组转移载体 被引量:6
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作者 朱艳 陈永井 +2 位作者 邱玉华 郑峰丰 朱江 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期832-836,共5页
为构建能同时表达抗人CD28嵌合重链和嵌合轻链基因的双启动子杆状病毒转移载体,利用PCR法扩增出抗人CD28鼠源性单抗的可变区基因和人IgG1的恒定区基因,再采用一种不需要限制性核酸内切酶和连接酶的新方法———三引物PCR(TP_PCR)法将两... 为构建能同时表达抗人CD28嵌合重链和嵌合轻链基因的双启动子杆状病毒转移载体,利用PCR法扩增出抗人CD28鼠源性单抗的可变区基因和人IgG1的恒定区基因,再采用一种不需要限制性核酸内切酶和连接酶的新方法———三引物PCR(TP_PCR)法将两者拼接后分别插入杆状病毒转移载体pAcUW3的ph和p10启动子后,并通过酶切、电泳、PCR扩增和测序对重组体进行了鉴定。研究结果表明,TP_PCR法快速、方便、准确,无需设计外源的DNA序列,就能构建完好的融合表达基因。该转移载体的构建成功为嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达奠定了基础。 展开更多
关键词 杆状病毒 转移载体 cd28单克隆抗体 嵌合抗体 TP-PCR
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抗人CD28激发性单抗对T细胞淋巴瘤的抑制作用研究 被引量:2
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作者 胡玲玲 陈昌友 +4 位作者 张益红 郭静雅 陆海波 旬神美 邱玉华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期880-883,共4页
目的:研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应,为抗体介导肿瘤靶向治疗提供新的方法和思路。方法:流式细胞术检测鼠抗人CD28单克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;MTT法检测2F5对Ju... 目的:研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应,为抗体介导肿瘤靶向治疗提供新的方法和思路。方法:流式细胞术检测鼠抗人CD28单克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;MTT法检测2F5对Jurkat细胞体外增殖的影响;将Jurkat细胞株接种于裸鼠腋下,建立Jurkat细胞荷瘤裸鼠模型;经瘤内多点注射2F5(注射剂量1μg/mm3),逐日观察肿瘤的大小和裸鼠的生存状态。结果:2F5能够识别Jurkat细胞表面CD28分子,阳性结合率可达93.37%;2F5与Jurkat细胞共培养后,显微镜下观察可见胞质中出现黑色颗粒,胞膜破裂,细胞的折光性和立体感减弱;MTT法分析结果显示,抗CD28单抗对Jurkat细胞的体外增殖具有明显的抑制作用;将Jurkat细胞接种35只裸鼠(成瘤率达70%);经瘤内多点注射2F5,35天后荷瘤小鼠体内肿瘤的生长速率明显降低;而生理盐水对照组肿瘤生长无明显改变。结论:鼠抗人CD28单克隆抗体2F5通过与Jurkat细胞表面膜型CD28分子结合对其增殖具有明显的抑制作用,提示CD28分子可作为治疗T淋巴瘤的一个潜在靶点,抗体对治疗CD28分子阳性的肿瘤具有潜在临床应用价值。 展开更多
关键词 cd28 鼠抗人cd28单克隆抗体 T淋巴细胞瘤
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Tca8113-4-1BBL细胞联合CD28单抗在口腔鳞癌免疫治疗中的作用 被引量:1
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作者 张淼 岳磊 +4 位作者 孙顺涛 罗娟 杨辉俊 黄冬兰 杨宏宇 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2009年第5期446-450,共5页
目的:探讨转4-1BBL肿瘤细胞联合抗CD28单抗体外诱导抗肿瘤活性的能力。方法:通过脂质体法将重组载体pEGFP/neo-h4-1BBL转染人舌鳞癌细胞Tca8113,经G418(400μg/mL)筛选及有限稀释后,获得稳定高表达克隆,分别用RT-PCR和Western印迹检测... 目的:探讨转4-1BBL肿瘤细胞联合抗CD28单抗体外诱导抗肿瘤活性的能力。方法:通过脂质体法将重组载体pEGFP/neo-h4-1BBL转染人舌鳞癌细胞Tca8113,经G418(400μg/mL)筛选及有限稀释后,获得稳定高表达克隆,分别用RT-PCR和Western印迹检测转染细胞中h4-1BBLmRNA和蛋白的表达。将转染与未转染4-1BBL基因的Tca8113细胞用丝裂霉素C(MMC)处理后,制成肿瘤细胞瘤苗。联合抗CD28单克隆抗体与经体外抗CD3mAb诱导的人外周血T淋巴细胞共同培养,测定T细胞增殖、CTL杀伤活性及产生细胞因子(IL-2和IFN-γ)的能力。实验数据以SPSS12.0软件包进行方差分析。结果:h4-1BBL基因真核表达载体在Tca8113细胞中获得稳定表达。转染h4-1BBL基因的Tca8113细胞联合抗CD28单抗能显著刺激T细胞活化、增殖(P<0.01),促进IL-2、IFN-γ分泌(P<0.01),并能有效地诱导CTL的特异性杀伤活性(P<0.01)。结论:转4-1BBL肿瘤细胞联合抗CD28抗体能显著增强肿瘤细胞的免疫原性,诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答。 展开更多
关键词 4-1BBL cd28单克隆抗体 抗肿瘤免疫 细胞毒性T细胞
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The immunophenotypic changes and clinical effectiveness after treatment of cancer patients with infusion of human peripheral blood lymphocytes stimulated by anti-CD28 and anti-CD80 monoclonal antibodies in combination with radiotherapy and chemotherapy
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作者 JUN JIA LI QIONG LUO +4 位作者 XUE LING RUAN QI FENG CHENG LIAN HUA XIONG TONG WANG SHU LIN HUANG 《Journal of Microbiology and Immunology》 2005年第2期142-147,共6页
To investigate the changes on the immunopbenotypes and the clinical effects of treatment of the late cancer patients with infusion of human peripheral blood lymphocytes stimulated by anti-CD28 and anti-CD80 monoclonal... To investigate the changes on the immunopbenotypes and the clinical effects of treatment of the late cancer patients with infusion of human peripheral blood lymphocytes stimulated by anti-CD28 and anti-CD80 monoclonal antibodies in combination with radiotherapy and chemotherapy, 42 patients with late cancers were collected for study, among which 22 patients were treated with infusion of stimulated lymphocytes in combination with radiotherapy and chemotherapy. The immunological treatment procedure was given twice per week, and one course of treatment consisted of 8 times of giving infusion of lymphocytes. Another 20 patients were selected for control group, in which only radiotherapy and chemotherapy were given without lymphocyte infusions. Flow cytometry was used to examine the immunophenotypes and the clinical symptoms were observed before and after treatments. It was found that the numbers of the CD3^ + , CD4^+ cells increased, while those of the CD8 ^+ cells decreased, with an increase of CD4/CD8 radios, but no significant difference existed in case of 22 patients treated with lymphocyte infusion as well as with radiotherapy and chemotherapy. Fifteen patients out of these 22 cases (68.18%), the immunophenotypes changed obviously with increased numbers of CD3^ + , CD4^ + cells in comparison with those before treatment, and the number of CD95^ + cells was increased after treatment. The PS value in this group of patients decreased after treatment. In comparison with 20 cases in the control group, the immunophenotypes showed no differences before and after treatment. While the PS value decreased obviously. Seven out of the 22 cases (31.83 % ) treated with lymphocyte infusions as well as with radiotherapy and chemotherapy illustrated no major changes in their i mmunophenotypes, compared with the situation before treatment, but the PS value also decreased. In case of treatment with lymphocyte infusions in combination with radiotherapy and chemotherapy, the alteration of phenotypes was reversely correlated with the changes of clinical grades. Although there were 7 cases showing no major alterations of the immunological phenotypes, but their correlation was still evident. In the control group, neither alteration of immunophenotypes nor changes in clinical grades was found. It is concluded that immunotherapy in combination with radiotherapy and chemotherapy can relieve the side effects induced by radiotherapy and chemotherapy and also enhance the therapeutic efforts. 展开更多
关键词 Tumor immunotherapy Radiotherapy Chemotherapy Immunophenotype Clinical situation
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抗细胞表面抗原抗体可作为良好的免疫佐剂
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作者 Barr T +5 位作者 Carlring J Hatzifoti C 张云昆(摘) 杨净思(校) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2007年第1期43-43,共1页
目前非常需要能增强重组蛋白、合成多肽以及DNA疫苗免疫原性的优良免疫佐剂。许多尚在研究的免疫佐剂都是通过APC表面的识别受体来发挥作用,这类免疫佐剂通常会诱发细胞因子释放,从而导致注射部位或全身的不良反应。CD40和CD28是共刺... 目前非常需要能增强重组蛋白、合成多肽以及DNA疫苗免疫原性的优良免疫佐剂。许多尚在研究的免疫佐剂都是通过APC表面的识别受体来发挥作用,这类免疫佐剂通常会诱发细胞因子释放,从而导致注射部位或全身的不良反应。CD40和CD28是共刺激受体,分别位于B淋巴细胞和T淋巴细胞表面,它们能发出某种信号,在抗原受体受到刺激时增强淋巴细胞活化。过去的研究表明大剂量抗CD40抗体能增强机体对胸腺非依赖抗原的免疫应答,此项研究旨在确认抗原与抗CD40或CD28单克隆抗体(mAb)结合后,其免疫原性能否得到显著提高。 展开更多
关键词 表面抗原抗体 细胞因子释放 免疫佐剂 cd28单克隆抗体 疫苗免疫原性 B淋巴细胞 cd40 淋巴细胞活化
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