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CD28单抗对γδT细胞增殖和杀伤胃癌细胞的增强作用 被引量:3
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作者 冯永波 周忠海 +3 位作者 陈复兴 徐涛 徐晶 费素娟 《现代消化及介入诊疗》 2013年第1期1-4,共4页
目的探讨CD28单克隆抗体对人外周血γδT细胞体外增殖及杀伤胃癌BCG823、SGC7901细胞活性的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别在有或无CD28单抗(20μg/ml)参与的条件下,加入到含帕米膦酸、IL-2的RPMI1640完全培养基中诱... 目的探讨CD28单克隆抗体对人外周血γδT细胞体外增殖及杀伤胃癌BCG823、SGC7901细胞活性的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别在有或无CD28单抗(20μg/ml)参与的条件下,加入到含帕米膦酸、IL-2的RPMI1640完全培养基中诱导培养γδT细胞。在培养的第10天用台盼蓝染色计数细胞;采用流式细胞术检测各组γδT细胞的纯度及其穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达;用CCK-8试剂盒检测γδT细胞对胃癌细胞BCG823的体外杀伤效应。结果在诱导培养10d后,两组γδT细胞纯度均达到70%以上,与无CD28单抗对照组相比,CD28单抗组γδT细胞纯度显著高于对照组;CD28单抗组γδT细胞扩增倍数、穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达及对胃癌细胞BCG823和SGC7901的杀伤活性均显著高于无CD28单抗对照组。结论 CD28共刺激能增强γδT细胞增殖并通过上调穿孔素和颗粒酶B的表达增强其抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 cd28单抗 ΓΔT细胞 增殖 杀伤效应
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激发性CD28单抗对肿瘤患者外周血FOXP3^+Treg细胞的下调作用及意义 被引量:1
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作者 杜阳阳 沈丽琴 +4 位作者 王艳茹 刘玉华 孙杰 庄志祥 邱玉华 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2009年第2期113-117,共5页
目的探究肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中FOXP3^+Treg经CD28单抗激发后的改变及意义。方法采用腹水诱生法及免疫亲和层析法进行单抗的制备和纯化,Ficoll密度梯度离心法获取外周血PBMC,经激发性CD28单抗10μg/mL共培养后经免疫... 目的探究肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中FOXP3^+Treg经CD28单抗激发后的改变及意义。方法采用腹水诱生法及免疫亲和层析法进行单抗的制备和纯化,Ficoll密度梯度离心法获取外周血PBMC,经激发性CD28单抗10μg/mL共培养后经免疫荧光及流式细胞术分析其中FOXP3^+Treg的表达以及FOXP3^+Fas^+Treg和FOXP3^+FasL^+Treg的表达。结果免疫荧光和流式细胞术显示肿瘤患者外周血中FOXP3^+Treg表达比例为(6.208±2.754)%,而对照组为(2.653±0.638)%。FOXP3^+FasL^+Treg细胞经CD28单抗活化后FasL表达上调为(7.252±2.23)%,而健康对照组为(7.96±2.938)%,FOXP3^+Fas^+Treg活化前后的比例分别为(1.467±0.590)%和(3.692±1.822)%。结论肿瘤患者外周血中PBMC经CD28单抗激发后FOXP3^+Treg的比例下调(P〈0.01),提示该抗体能够使肿瘤患者的免疫功能得到一定程度的恢复与提高。 展开更多
关键词 FOXP3^+Treg PBMC FAS/FASL cd28单抗
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抗CD3和抗CD28单抗对淋巴细胞产生RANTES的影响
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作者 顾晓 唐孝达 +5 位作者 顾沈阳 杨尚琪 周佩军 徐达 王祥慧 谭建明 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期546-548,共3页
目的 探讨CD28共刺激通路活化对淋巴细胞产生RANTES的影响与意义,以及免疫抑制剂CsA对RANTES产生的抑制作用。方法 分离健康人外周静脉血中的淋巴细胞。实验分为4组:抗CD3mAb刺激组,抗CD28mAb刺激组,抗CD3mAb+抗CD28mAb共刺激组(CD28共... 目的 探讨CD28共刺激通路活化对淋巴细胞产生RANTES的影响与意义,以及免疫抑制剂CsA对RANTES产生的抑制作用。方法 分离健康人外周静脉血中的淋巴细胞。实验分为4组:抗CD3mAb刺激组,抗CD28mAb刺激组,抗CD3mAb+抗CD28mAb共刺激组(CD28共刺激组),未加任何刺激作为对照组。PDTC和CsA以不同终浓度干预CD28共刺激组。采用ELISA方法测定培养上清中RANTES含量,流式细胞术检测淋巴细胞CD25和CCR5表达率。结果 培养48h后,CD28共刺激组RANTES产生显著增加(P<0.05);不同剂量PDTC和CsA对CD28共刺激后淋巴细胞产生RANTES均具有抑制作用;CD28共刺激后淋巴细胞CD25表达率显著增高(P<0.05),而CCR5表达率显著降低(P<0.05)。结论 CD28通路共刺激后淋巴细胞产生RNATES显著增加,这一效应受到NF-κB信号通路的调控。淋巴细胞产生RANTES及其对RANTES的反应均受到CD28共刺激信号调控。抑制淋巴细胞产生RANTES可能是CsA发挥作用的重要分子免疫学机制。 展开更多
关键词 cd3单抗 cd28单抗 淋巴细胞 RANTES 免疫抑制剂 信号通路 趋化因子
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激发型CD28单抗参与诱导的CIK对乳腺MDA-MB-231、MCF-7细胞的杀伤作用研究
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作者 郑潇然 白吉明 +4 位作者 李建辉 王翔 钱浩 王新杰 李建华 《现代中西医结合杂志》 CAS 2016年第27期2995-2997,3047,共4页
目的观察激发型CD28单抗参与诱导的杀伤细胞(CIK)的增殖能力、表型特征及对乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞株的杀伤作用。方法制备鼠抗人激发型CD28单抗,采用激发型CD28单抗参与CIK的诱导,观察CIK细胞的增殖能力及表型特征;采用CCK-8法检... 目的观察激发型CD28单抗参与诱导的杀伤细胞(CIK)的增殖能力、表型特征及对乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞株的杀伤作用。方法制备鼠抗人激发型CD28单抗,采用激发型CD28单抗参与CIK的诱导,观察CIK细胞的增殖能力及表型特征;采用CCK-8法检测激发型CD28单抗参与诱导的CIK对乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞株的杀伤率,采用流式细胞术检测乳腺癌细胞的凋亡率。结果激发型CD28单抗能明显促进CIK细胞的体外增殖且能明显上调具有肿瘤杀伤活性的T细胞比例;CCK8检测发现,激发型CD28单抗诱导的CIK对乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7的杀伤率均高于对照组(P均<0.05),且杀伤率随效靶比升高,并确定20∶1为最终效靶比;流式细胞术检测发现,加入激发型CD28单抗诱导的CIK,可提高乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7的凋亡率及坏死率(P均<0.05)。结论激发型CD28单抗参与诱导的CIK能明显提高CIK的增殖能力及上调具有肿瘤杀伤活性的T细胞比例,增强对乳腺癌细胞的杀伤能力,可能为乳腺癌的免疫治疗提供新思路。 展开更多
关键词 激发型cd28单抗 细胞因子诱导的杀伤细胞 乳腺癌
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抗CD28单抗和IL-15对CIK增殖和杀肿瘤作用的研究 被引量:4
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作者 刘军权 朱云 +7 位作者 陈复兴 周燏 杨宛莹 吕小婷 张颂 陶征中 李昳 唐莉 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期484-489,共6页
CIK是肿瘤过继性细胞免疫治疗中的免疫效应细胞。为使CIK在实验室里能被更有效地诱导增殖并赋予其更强的杀肿瘤效应,我们在CIK常规培养环境中加入抗CD28单抗和IL-15,探讨抗CD28单抗和IL-15对CIK增殖和杀肿瘤效应。取人外周血单个核细胞(... CIK是肿瘤过继性细胞免疫治疗中的免疫效应细胞。为使CIK在实验室里能被更有效地诱导增殖并赋予其更强的杀肿瘤效应,我们在CIK常规培养环境中加入抗CD28单抗和IL-15,探讨抗CD28单抗和IL-15对CIK增殖和杀肿瘤效应。取人外周血单个核细胞(PBMC),预先以常规方法诱导CIK,然后加入抗CD28单抗和IL-15与CIK共培养。用全自动五分类血液分析仪计数CIK增殖率;用流式细胞术测定CIK中粒酶B、穿孔素和CD107a等分子的表达率;用ELISA方法检测CIK分泌IL-10、IL-12、INF-γ和TNF-α水平;用乳酸脱氢酶释放法测定CIK对人肺癌细胞株(A549)、乳腺腺癌细胞株(MFC-7)和人黑素瘤细胞株(HME1)的杀伤活性。PBMC经常规CIK诱导培养以后再加入抗CD28单抗和IL-15与对照组比较,前者细胞增殖率明显增强(P<0.05);在CIK培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15可促进颗粒酶B、穿孔素和CD107a等分子的表达率进一步增强(P<0.05);加入抗CD28单抗和IL-15,培养8d后CIK对A549、MFC-7和HME1细胞杀伤活性分别为82.2%、59.3%和70.6%,与对照组(分别为60.9%、49.6%和48.4%)相比差异有统计学意义(P<0.05);在培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15,培养8d后其细胞因子IFN-γ、TNF-α分泌水平显著高于对照组(P<0.05),组间IL-10和IL-12的分泌量未见显著差异(P>0.05)。实验说明在CIK培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15可增加CIK增殖率并提高其抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 cd28单抗 IL-15 CIK 增殖 抗肿瘤活性
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抗CD28+B7.1单抗共刺激T细胞诱导肝癌细胞凋亡的第二信使系统研究 被引量:4
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作者 杨红 彭立胜 +1 位作者 钟肖芬 黄树林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期541-543,共3页
目的 :探讨T淋巴细胞活化、增殖、诱导肝癌细胞凋亡过程中第二信使系统的调控机制。方法 :用CD2 8+B7 1(CD80 )单克隆抗体共刺激T淋巴细胞诱导肝癌细胞 (BLE 740 2 )凋亡 ,测定不同诱导时间T细胞内cAMP、cGMP和Ca2 + 的浓度改变及肝癌... 目的 :探讨T淋巴细胞活化、增殖、诱导肝癌细胞凋亡过程中第二信使系统的调控机制。方法 :用CD2 8+B7 1(CD80 )单克隆抗体共刺激T淋巴细胞诱导肝癌细胞 (BLE 740 2 )凋亡 ,测定不同诱导时间T细胞内cAMP、cGMP和Ca2 + 的浓度改变及肝癌细胞凋亡情况。结果 :活化的T淋巴细胞中 ,cAMP浓度在初期短暂升高 ,继而快速下降 ,作用于肝癌细胞后逐步回升至 1~ 2倍 ,而细胞内cGMP的浓度急剧升高 6~ 7倍 ,Ca2 + 浓度也显著增加 2~ 3倍 ,且均在第 4天达最高值 ,与癌细胞的凋亡呈正相关。结论 :T淋巴细胞内第二信使系统cAMP、cGMP和Ca2 + 的水平与细胞的活化增殖、杀伤效应密切相关。 展开更多
关键词 cd28+B7.1(cd80)单抗 细胞凋亡 cAMP cGMP Ca^2+ 第二信使系统 肝癌
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抗CD28+B7.1单抗共刺激PBLs诱导肝癌细胞凋亡的蛋白激酶信号转导 被引量:1
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作者 杨红 陈耕夫 +1 位作者 黄玉珊 黄树林 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期40-42,共3页
目的研究 T淋巴细胞活化、增殖、介导肝癌细胞凋亡过程中其蛋白激酶 C(PKC)和酪氨酸蛋白激酶 (TPK)的活性变化。方法用抗 CD2 8+ B7.1(CD80 )单克隆抗体共刺激正常人外周血淋巴细胞 (PBL s)后作用于肝癌细胞 (BEL -740 2 )。结果激活的 ... 目的研究 T淋巴细胞活化、增殖、介导肝癌细胞凋亡过程中其蛋白激酶 C(PKC)和酪氨酸蛋白激酶 (TPK)的活性变化。方法用抗 CD2 8+ B7.1(CD80 )单克隆抗体共刺激正常人外周血淋巴细胞 (PBL s)后作用于肝癌细胞 (BEL -740 2 )。结果激活的 T细胞中 PKC、TPK活性明显增强 ,并与肝癌细胞凋亡程度呈正相关。结论 PKC、TPK在 T细胞活化。 展开更多
关键词 蛋白激酶 cd28+B7.1单抗 细胞凋亡 信号转导 肝癌 PBLS
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The immunophenotypic changes and clinical effectiveness after treatment of cancer patients with infusion of human peripheral blood lymphocytes stimulated by anti-CD28 and anti-CD80 monoclonal antibodies in combination with radiotherapy and chemotherapy
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作者 JUN JIA LI QIONG LUO +4 位作者 XUE LING RUAN QI FENG CHENG LIAN HUA XIONG TONG WANG SHU LIN HUANG 《Journal of Microbiology and Immunology》 2005年第2期142-147,共6页
To investigate the changes on the immunopbenotypes and the clinical effects of treatment of the late cancer patients with infusion of human peripheral blood lymphocytes stimulated by anti-CD28 and anti-CD80 monoclonal... To investigate the changes on the immunopbenotypes and the clinical effects of treatment of the late cancer patients with infusion of human peripheral blood lymphocytes stimulated by anti-CD28 and anti-CD80 monoclonal antibodies in combination with radiotherapy and chemotherapy, 42 patients with late cancers were collected for study, among which 22 patients were treated with infusion of stimulated lymphocytes in combination with radiotherapy and chemotherapy. The immunological treatment procedure was given twice per week, and one course of treatment consisted of 8 times of giving infusion of lymphocytes. Another 20 patients were selected for control group, in which only radiotherapy and chemotherapy were given without lymphocyte infusions. Flow cytometry was used to examine the immunophenotypes and the clinical symptoms were observed before and after treatments. It was found that the numbers of the CD3^ + , CD4^+ cells increased, while those of the CD8 ^+ cells decreased, with an increase of CD4/CD8 radios, but no significant difference existed in case of 22 patients treated with lymphocyte infusion as well as with radiotherapy and chemotherapy. Fifteen patients out of these 22 cases (68.18%), the immunophenotypes changed obviously with increased numbers of CD3^ + , CD4^ + cells in comparison with those before treatment, and the number of CD95^ + cells was increased after treatment. The PS value in this group of patients decreased after treatment. In comparison with 20 cases in the control group, the immunophenotypes showed no differences before and after treatment. While the PS value decreased obviously. Seven out of the 22 cases (31.83 % ) treated with lymphocyte infusions as well as with radiotherapy and chemotherapy illustrated no major changes in their i mmunophenotypes, compared with the situation before treatment, but the PS value also decreased. In case of treatment with lymphocyte infusions in combination with radiotherapy and chemotherapy, the alteration of phenotypes was reversely correlated with the changes of clinical grades. Although there were 7 cases showing no major alterations of the immunological phenotypes, but their correlation was still evident. In the control group, neither alteration of immunophenotypes nor changes in clinical grades was found. It is concluded that immunotherapy in combination with radiotherapy and chemotherapy can relieve the side effects induced by radiotherapy and chemotherapy and also enhance the therapeutic efforts. 展开更多
关键词 Tumor immunotherapy Radiotherapy Chemotherapy Immunophenotype Clinical situation
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不同刺激物对细胞因子诱导的杀伤细胞分泌细胞因子的影响 被引量:4
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作者 李静 王菲 +5 位作者 刘艳芬 王丽萍 许钰杰 王盟 张斌 张毅 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第2期166-168,共3页
目的:探讨抗CD3单抗联合不同浓度的抗CD28单抗对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞细胞因子分泌的影响。方法:取6例肿瘤患者的外周血,分离、诱导培养,获取CIK细胞。CIK细胞成熟后用1.0 mg/L抗CD3单抗分别联合0.5、1.0、2.5 mg/L抗CD28单抗进... 目的:探讨抗CD3单抗联合不同浓度的抗CD28单抗对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞细胞因子分泌的影响。方法:取6例肿瘤患者的外周血,分离、诱导培养,获取CIK细胞。CIK细胞成熟后用1.0 mg/L抗CD3单抗分别联合0.5、1.0、2.5 mg/L抗CD28单抗进行活化,使用ELISA方法检测细胞因子IFN-γ、IL-10、IL-2、TNF-α的分泌水平,并用胞内细胞染色法检测CD3+CD8+T细胞中IFN-γ、穿孔素的表达水平。以50μg/L佛波酯联合750μg/L离子霉素共刺激的CIK细胞作对照。结果:抗CD3单抗联合不同浓度抗CD28单抗组CIK细胞IFN-γ、IL-10、IL-2、TNF-α分泌水平和胞内穿孔素表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抗CD3单抗联合不同浓度抗CD28单抗共刺激对CIK细胞细胞因子的分泌无影响,临床上可选择1.0 mg/L抗CD3单抗联合0.5 mg/L抗CD28单抗活化淋巴细胞。 展开更多
关键词 cd3单抗 cd28单抗 细胞因子 细胞因子诱导的杀伤细胞
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影响淋巴细胞共刺激作用的体外实验研究
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作者 周建华 苏燎原 +1 位作者 童建 薛莲 《苏州医学院学报》 2000年第7期614-616,共3页
目的 观察CD3单抗、CD2 8单抗、PHA和低剂量辐射对淋巴细胞增殖的影响 ,探讨影响T淋巴细胞信号转导的因素。方法 分别以CD3单抗、CD2 8单抗、PHA和低剂量辐射作为作用因素 ,用3H TdR掺入法观察在这些因素作用下 ,淋巴细胞增殖反应情... 目的 观察CD3单抗、CD2 8单抗、PHA和低剂量辐射对淋巴细胞增殖的影响 ,探讨影响T淋巴细胞信号转导的因素。方法 分别以CD3单抗、CD2 8单抗、PHA和低剂量辐射作为作用因素 ,用3H TdR掺入法观察在这些因素作用下 ,淋巴细胞增殖反应情况。结果 CD3单抗和CD2 8单抗联合刺激、PHA和低剂量辐射单独或联合处理 ,均可使淋巴细胞明显增殖。但CD3单抗和CD2 8单抗单独刺激 ,淋巴细胞增殖不明显。结论 CD3单抗和CD2 8单抗联合作用可使淋巴细胞有效增殖 ,PHA和低剂量辐射具有相似作用 。 展开更多
关键词 cd3单抗 cd28单抗 辐射 共刺激 淋巴细胞
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小鼠CTL体外非特异性扩增对其杀瘤活性的影响 被引量:2
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作者 黄辉 俞红 +1 位作者 熊思东 林云璐 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期143-145,共3页
目的 在体外用抗CD3单抗、抗CD2 8单抗和白细胞介素 2 (IL 2 )扩增肿瘤特异性CTL ,为肿瘤过继治疗提供足够数量的、具有高度杀瘤活性的效应细胞。方法 采用两种方案培养肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞。 (1)抗CD3单抗刺激 48h后 ,加入抗CD... 目的 在体外用抗CD3单抗、抗CD2 8单抗和白细胞介素 2 (IL 2 )扩增肿瘤特异性CTL ,为肿瘤过继治疗提供足够数量的、具有高度杀瘤活性的效应细胞。方法 采用两种方案培养肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞。 (1)抗CD3单抗刺激 48h后 ,加入抗CD3单抗和 2 0U mlrIL 2 (抗 CD3+IL 2组 ) ;(2 )抗CD3单抗和抗CD2 8单抗同时刺激 48h后 ,加入抗CD3单抗、抗CD2 8单抗和 2 0U mlrIL 2 (抗 CD3+抗 CD2 8+IL 2组 )。分别检测 2组效应细胞的增殖水平、杀瘤活性及表型。结果 抗 CD3+IL 2组细胞的3H TdR掺入量在第 6天、12天、2 0天分别为 2 2 12 6、5 42 6、2 0 72 ,抗 CD3+抗 CD2 8+IL 2组细胞的3H TdR掺入量在第 6天、12天、2 0天分别为 32 16 8、12 92 2、32 6 5 ,后者明显高于前者。在培养 12d时 ,抗 CD3+IL 2组细胞对FBL 3的最大杀伤活性为 6 6 .4% ,抗 CD3+抗 CD2 8+IL 2组细胞对FBL 3的最大杀伤活性为 77.8%。细胞表型FACS分析结果表明 ,抗 CD3+抗 CD2 8+IL 2组培养 12d后的细胞 90 %以上为Thy1.2 + 细胞 ,且CD2 5 + 细胞在抗 CD3+抗 CD2 8+IL 2组、抗 CD3+IL 2组分别为 2 3.0 0 %、8.15 %。结论 抗CD3单抗、抗CD2 8单抗和低剂量IL 2同时非特异性刺激 ,可获得大量扩增的、具有高度杀瘤活性的肿瘤特异性CTL。 展开更多
关键词 cd28单抗 cd3单抗 肿瘤特异性T细胞 肿瘤过继疗法
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