CD28突变的CAR T细胞疗法展现出良好的安全性

为改善CD19靶向的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰的T细胞治疗后潜在的细胞因子风暴问题,提高临床应用的安全性,将CD28共刺激结构域中的YMNM和PYAP基序双突变,并分别构建包含CD28结构域(19-CD28)和CD28突变结构域(19-CD28M)的CD19-CAR,利用慢病毒载体构建CD19-CAR T细胞和CD19-CAR Jurkat细胞。将CD19-CAR Jurkat细胞株与肿瘤细胞共孵育来验证CD19-CAR对Jurkat细胞的特异性活化效果,随后检测CD19-CAR T细胞与靶细胞共孵育后的细胞毒性和细胞因子释放量。结果显示,与对照组比较,19-CD28-CAR Jurkat细胞和19-CD28M-CAR Jurkat细胞与Raji(CD19~+)细胞共孵育后CD69表达水平上调60%以上,CD25表达水平上调10%左右。在效应细胞∶靶细胞分别为0.5∶1、1∶1、5∶1的条件下,19-CD28-CAR T细胞和19-CD28M-CAR T细胞诱导Raji(CD19~+)细胞的凋亡率比对照组分别增加了15%、25%和40%左右,并于效应细胞∶靶细胞为5∶1时达到饱和。与此同时,19-CD28M-CAR T细胞释放细胞因子Granzyme B、IFN-γ、IL-2、TNF-α的量分别下降了14%、28%、34%和33%。该研究提示,CD28共刺激结构域突变的CD19-CAR T细胞毒性并未减弱,同时安全性显著增强。