CD4^+CD29^+T细胞亚群与溃疡性结肠炎的相关性及黄芩苷的干预作用

目的:探讨溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者CD4+CD29+辅助性T细胞及其表面标志和相关细胞因子的表达,并进一步探讨体外黄芩苷干预的作用.方法:选取33例UC患者,30例腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS-D)组,30例健康组,应用流式细胞仪检测UC患者CD4+C D29+的表达,Q-PCR的检测其GATA-3、FOXP3、T-bet、RORC的表达,Western blot检测其核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65和phospho-NF-κB p65、STAT4和phospho-STAT4、STAT6和phospho-STAT6的表达,用ELISA法检测血清γ-干扰素(interferonγ,IFN-γ)、白介素(interleukin,IL)-4、IL-5、IL-6、IL-10、肿瘤生长因子β(tumor specific growth factor-β,TGF-β)的水平及体外黄芩苷干预的作用.结果:UC患者外周血中CD4+C D29+T细胞与健康对照组和IBS-D组相比,CD4+和C D4+C D29+明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-10和TGF-β1与IBS-D组和健康对照组均有不同程度的升高,IL-6较IBS-D组和健康对照组稍降低;外周血单个核细胞RORC和FOXP3 mRNA与健康对照组和IBS-D组相比,RORC和FOXP3 mRNA明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);外周血T细胞转录因子T-bet基因的表达水平明显高于健康对照组,GATA-3基因的表达低于健康对照组,T-bet/GATA-3的比值明显高于健康对照组(P<0.05);40μmol/L和20μmol/L浓度黄芩苷的干预下CD4+C D29+较未干预前明显增高,明显降低IFN-γ、IL-5、IL-6,而升高IL-4和IL-10;RORC和FOXP3均明显下降,可明显降低T-bet,可稍降低GATA3,使T-bet/GATA-3的比值较干预前降低;p-STAT4/STAT4较未干预前明显下降,p-STAT6/STAT6明显增高,p-NF-κB/NF-κB明显下降.结论:黄芩苷可能通过促CD4+CD29+增殖作用及多方面的免疫抑制调节免疫平衡而缓解溃疡性结肠的炎症反应,为深入研究UC的发病机制及新药开发提供理论基础.

粘附分子CD29和VEGF在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨胃癌组织中粘附分子CD29的表达水平及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial grouth factor,VEGF)的关系。方法:选择胃癌患者84例和浅表性胃炎患者48例对CD29和VEGF抗体SP法免疫组化染色。结果:84例胃癌标本中CD29有68例阳性,阳性率为80.9%,48例浅表性胃炎组织中有12例阳性表达,阳性率为25%(P<0.05)。胃癌中70例(83.3%)VEGF阳性表达。其中有63例VEGF与CD29共同表达。具显著正相关(P<0.05)。CD29的表达与患者的年龄、性别和肿瘤的大小、组织学类型及浸润深度无关。但与肿瘤的淋巴结转移具有显著的相关性(P<0.05)。结论:CD29可通过介导VEGF的表达促进肿瘤新生血管的形成,从而进一步促进肿瘤的生长和转移。

CD4^+CD29^+T细胞含量及其免疫检查点水平与非小细胞肺癌患者的化疗效果及远期存活率的关系

目的分析CD4^+CD29^+T细胞含量及细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序坏死因子1(PD-1)及程序坏死因子配体1(PD-L1)免疫检查点表达水平与非小细胞肺癌患者的化疗效果及远期存活率的关系。方法选取2015年1月至2017年1月沧州市中心医院收治的100例非小细胞肺癌患者;采用流式细胞术检测患者血中CD4^+CD29^+T、CTLA-4^+T、PD-1^+T及PD-L1^+T细胞水平;随访2年,记录患者生存情况,分为存活组79例,死亡组21例;依照RECIST Version 1.1标准对患者化疗效果进行评估,并按此分为缓解组54例,进展组46例。比较各组的CD4+CD29+T、CTLA-4^+T、PD-1^+T及PD-L1^+T细胞水平,分析以上各细胞水平与患者疗效及远期存活率之间的相关关系。结果化疗缓解组CD4^+CD29^+T、CTLA-4^+T及PD-1^+T细胞水平均高于进展组[(22.74±1.92)%vs.(18.04±2.15)%、(28.91±1.24)%vs.(20.13±1.77)%、(26.29±1.19)%vs.(18.94±1.64)%],PD-L1+T细胞水平低于进展组[(17.22±1.07)%vs.(22.73±1.25)%],差异均有统计学意义(P<0.05);存活组CD4+CD29+T、CTLA-4+T及PD-1+T细胞水平均高于死亡组[(22.11±1.17)%vs.(14.81±1.64)%、(28.32±1.24)%vs.(11.90±1.93)%、(25.88±2.01)%vs.(11.73±2.06)%],PD-L1+T细胞水平低于死亡组[(16.41±2.72)%vs.(24.81±2.11)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。CD4^+CD29^+T、CTLA-4^+T、PD-1^+T细胞水平与患者疗效及远期存活率呈正相关(P<0.05),PD-L1^+T细胞水平与患者疗效及远期存活率呈负相关(P<0.05)。结论非小细胞肺癌患者血中CD4^+CD29^+、CTLA-4^+、PD-1^+T细胞水平与化疗效果及远期生存呈正相关,PD-L1+T细胞水平与其呈负相关关系。

CD4^+CD29^+T细胞在肺癌患者的表达及其与肿瘤病理学类型及分期的相关性

目的:探讨肺癌患者CD4+CD29+T细胞与病理类型及分期的相关性。方法:采用流式细胞术检测60例肺癌患者外周血CD4+CD29+T细胞、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子α(TNF-α),探讨三者与病理类型及分期的相关性。结果:(1)肺癌患者CD4+CD29+T细胞及TNF-α百分含量均较对照组显著升高(P<0.05),而IFN-γ显著降低(P<0.05);(2)肺癌患者鳞癌、腺癌、大细胞癌及小细胞癌分别为23、17、11及9例;0、Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ期患者分别为15、15、17及13例;(3)CD4+CD29+T细胞及TNF-α百分含量与病理类型及分期均呈显著正相关性,但IFN-γ与病理类型及分期呈显著负相关性(r绝对值均>0.65,均P<0.05)。结果:CD4+CD29+T细胞及TNF-α含量升高、IFN-γ降低是肺癌的一个重要免疫学特征,且与病理类型及分期密切相关。

CD4^+CD29^+T细胞在溃疡性结肠炎患者血清及结肠黏膜组织中的表达变化

目的观察CD4^+CD29^+T细胞血管细胞黏附分子1(VCAM-1)及髓过氧化物酶(MPO)在溃疡性结肠炎(UC)患者血清及结肠黏膜组织中的表达变化。方法选取UC患者60例(UC组),其中活动期及缓解期各30例,设立同期查体健康者30例为健康对照组,收集血清,采用流式细胞术测定定周血中CD4^+CD29^+T细胞百分率,肠镜下取UC组及健康对照组结肠黏膜组织,采用免疫荧光法测定结肠中CD4^+CD29^+T细胞的表达量,用免疫组化法测定结肠中髓过氧化物酶(MPO)及血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达,用皮尔森相关法分析CD4^+CD29^+T细胞与MPO的相关性。结果 UC组CD4^+CD29^+T细胞、VCAM-1及MPO在活动期及缓解期UC患者血清及结肠黏膜组织中的表达均较健康对照组升高,且活动期高于缓解期,P均<0.05;CD4^+CD29^+T细胞在健康对照组血清中有表达而在结肠中未检测到表达;外周血CD4^+CD29^+T细胞与MPO呈正相关(r=0.543,P<0.05)。结论CD4^+CD29^+T细胞在UC患者血清及结肠黏膜组织中均呈高表达,且与UC的病情程度密切相关。

黄芩苷对溃疡性结肠炎CD4^+CD29^+抑制作用随机平行对照研究

[目的]观测黄芩苷对溃疡性结肠炎患者CD4+CD29+抑制作用。[方法]使用随机平行对照方法,按抛硬币方法简单随机分溃疡性结肠炎组33例,IBS-D组30例,健康对照组30例。流式细胞仪检测UC患者CD4+CD29+的表达及MTS法检测细胞增殖。[结果]UC患者外周血中CD4+CD29+T细胞发现与健康对照组和IBS-D组相比,CD4+和CD4+CD29+增高;黄芩苷干预,第2和3天抑制增殖明显,在40umol和20umol浓度干预下CD4+CD29+较未干预前、DMSO干预、5umol干预和10umol干预之间有明显差异。[结论]黄芩苷能通过抑制CD4+CD29+增殖作用治疗溃疡性结肠炎。

轮状病毒肠炎患儿外周血CD4^+CD29^+T细胞表达及其与治疗关系

目的了解轮状病毒(RV)肠炎患儿外周血CD4^+CD29^+T细胞表达及其与治疗关系。方法 69例RV肠炎患儿分为观察组及对照组,分别给予抗RV免疫球蛋白及常规抗病毒治疗;比较两组患儿治疗前后外周血CD4^+CD29^+T细胞、IL-2、IL-12水平变化,粪便内RV-RNA含量及腹泻天数差异。结果观察组治疗后CD4^+CD29^+T细胞、IL-2及粪便内RV-RNA水平均显著低于治疗前及对照组(P<0.01),而IL-12水平显著增高(P<0.01)。观察组腹泻天数明显少于对照组(P<0.01)。RV肠炎患儿粪便内RV-RNA、腹泻天数与外周血CD4^+CD29^+T细胞、IL-2水平呈正相关(P<0.01或0.05),而与IL-12呈负相关(P<0 05)。结论外周血CD4^+CD29^+T细胞、IL-2水平升高及IL-12水平降低是RV肠炎的细胞免疫特征,且与病毒数量及腹泻程度明显相关。

脐血来源的CD29^+细胞神经转分化的研究

目的:脐血中分离CD29+细胞并诱导其转化为神经元样细胞,为神经损伤与修复提供种子细胞来源。方法:免疫磁珠法分离出脐血CD29+细胞,体外培养扩增。取2代细胞以BDNF、GDNF、PDGF为诱导因子对其进行神经诱导分化。观察细胞形态、生长情况,流式细胞仪检测细胞周期、表型及HLA相关抗原。诱导后免疫组织化学染色法检测Nestin、NSE、NF、GFAP表达。Western Blot检测β-tubulin、Tau的表达。结果:细胞贴壁生长,呈长梭形,细胞表型为CD29+、CD44+、CD166+。在诱导后,细胞逐渐增大并伸出明显突起。免疫组织化学染色结果显示,Nestin、NSE、NF、GFAP表达阳性。Western Blot显示了相应蛋白的表达。结论:脐血CD29+细胞在体外可以向神经元样细胞转化,有望成为异体修复神经损伤的种子细胞来源。

CD29和EGFR在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨粘附因子CD29和表皮生长因子受体(EGFR)在乳腺癌中的表达情况和临床意义。方法:收集乳腺癌标本98例,腺病52例。利用免疫组织化学方法检测CD29与EGFR的阳性表达率,并分析两者的相关性。结果:CD29和EGFR在腺病中的阳性表达率分别为5.8%(3/52)和3.8%(2/52),在乳腺癌中的阳性表达率分别为70.4%(69/98)和62.2%(61/98),在同一病种两者的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但两者在乳腺癌中的阳性表达率均明显高于腺病,差异均有统计学意义(P<0.05)。浸润性癌阳性表达率均高于原位癌(P<0.05),高级别癌的阳性表达率均高于低级别癌(P<0.05),有淋巴结转移的阳性表达率均高于无转移(P<0.05)。结论:CD29和EGFR的高表达与乳腺癌的发生、分化及转移有相关性,而且两者表达均呈正相关,因此检测乳腺癌的CD29和EGFR对治疗及预后有指导作用。

子宫内膜异位症不孕患者手术前后CD4^+CD29^+T细胞变化与妊娠率的关系

目的了解子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)不孕患者手术前后CD4^+ CD29^+ T细胞变化及其与妊娠率的关系。方法收集具有手术指征的EMS致不孕患者36例(手术组),无手术指征EMS患者38例(非手术组),同时选取38例健康女性作对照(健康组)。观察EMS患者治疗前后外周血CD4^+ CD29^+ T细胞及其细胞因子白介素1(IL-1)、白介素4(IL-4)及CA125水平的变化,并将其与妊娠率进行相关性分析。结果 EMS不孕患者CD4^+ CD29^+T细胞、IL-1、IL-4及CA125水平均显著高于健康女性(P<0.01)。治疗后,手术组和非手术组的CD4^+CD29^+T细胞、IL-1及CA125水平均显著低于治疗前,且手术组明显低于非手术组(P<0.01);手术组的妊娠率明显高于非手术组(P<0.05)。CD4^+CD29^+ T细胞、IL-1及IL-4与CA125均呈显著正相关,而与妊娠率呈显著负相关(P<0.05或0.01)。结论 CD4 ^+CD29^+T细胞升高是EMS不孕患者的重要免疫学表现,手术可显著降低该细胞及其细胞因子水平,提高妊娠率。

Effects of baicalin in CD4 + CD29 + T cell subsets of ulcerative colitis patients

AIM: To evaluate the role of baicalin in ulcerative colitis (UC) with regard to the CD4+CD29+ T helper cell, its surface markers and serum inflammatory cytokines.

非小细胞肺癌患者CD4^+CD29^+T细胞含量与复发及生存期的关系

目的探讨CD4+CD29+T细胞在预测非小细胞肺癌(NSCLC)患者复发的作用,以及不同因素下的生存期差异。方法对59例NSCLC进行为期5年的随访,检测外周血CD4+CD29+T细胞含量,使用受试者工作特征曲线(ROC)评价该细胞预测复发的敏感度及特异度,并与癌胚抗原(CEA)及细胞角蛋白21-1(Cyfra21-1)进行对比;使用Kaplan-Meier法对不同性别、年龄段、职业种类及是否放疗的NSCLC患者的生存情况进行分析。结果 59例NSCLC患者生存期最短为23个月,最长随访期>67个月;共有19例复发,其中有17例在随访期内均死于肿瘤转移(28.81%)。未接受放疗患者及复发患者的CD4+CD29+T细胞含量均分别显著高于放疗及无复发患者(均为P=0.000)。ROC分析显示曲线下面积(AUC)由大及小的顺序为CD4+CD29+T细胞>Cyfra21-1>CEA(P=0.002、0.006及0.013),95%可信区间(CI)分别为0.649~0.981、0.621~0.936及0.584~0.944;当CD4+CD29+T细胞百分含量为7.53%,其预测复发的敏感度为91.42%,特异度为87.59%。以上59例NSCLC患者的5年生存率为71.18%(42/59),Kaplan-Meier生存分析显示女性生存期长于男性(P=0.038),<50岁生存期长于>50岁(P=0.013),非脑力劳动者生存期长于脑力劳动者(P=0.029),放疗患者生存期长于未放疗患者(P=0.003)。结论 CD4+CD29+T细胞预测NSCLC复发的效能优于Cyfra21-1及CEA;男性、大于55岁、从事脑力劳动、未行放射治疗是NSCLC的复发高危因素。

肺腺癌患者CD4^+CD29^+T细胞含量与转移及放疗的关系

目的:观察肺腺癌患者CD4^+CD29^+T细胞含量与转移及放疗的关系。方法:收集71例肺腺癌患者为观察对象,并以非肺腺癌、慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者及健康志愿者作为对照,比较血CD4^+CD29^+T细胞及其胞内肿瘤坏死因子α及白介素1(IL-1)的含量差异;比较转移与未转移、放疗前后肺腺癌患者上述指标及整合素β1、血管内皮生长因子(VEGF)含量的差异,并分析其相关性。结果:肺腺癌及非肺腺癌患者均显著高于COPD及健康组,且肺腺癌组显著高于非肺腺癌组(P<0.05);肺腺癌转移患者的整合素β1、VEGF及CD4^+CD29^+T细胞、TNF-α及IL-1均显著高于未转移组(P<0.05);放疗后肺腺癌患者CD4^+CD29^+T细胞、TNF-α及IL-1均显著低于放疗前(P<0.05);CD4^+CD29^+T细胞、TNF-α及IL-1三者均与整合素β1及VEGF呈显著正相关性。结论:CD4^+CD29^+T细胞及其细胞因子在肺腺癌患者外周血表达增加,且与转移及放疗预后密切相关,具有重要临床意义。

CD4+CD29+辅助性T细胞在脊髓损伤患者的表达与临床意义

目的探索CD4+CD29+辅助性T细胞在脊髓损伤患者的表达与临床意义。方法收集脊髓损伤患者75例,以50例健康人作为对照组,采用流式细胞术检测外周血CD4+CD29+辅助性T细胞及其胞内细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及白介素4(IL-4)含量;分别在伤后第3及7天复查三者,并分析三者与Frankel分级的相关性。结果与正常人比较,脊髓损伤患者CD4+CD29+T细胞及IL-4含量明显升高,而IFN-γ含量明显降低(P<0.05);治疗第3天,CD4+CD29+T细胞及IL-4较受伤第1天均有不同程度下降,而IFN-γ不同程度回升,其中以D及E级的改变明显(P<0.05)。治疗第7天,CD4+CD29+T细胞及IL-4继续下降,IFN-γ继续回升,其中D及E级患者的CD4+CD29+T细胞、IFN-γ及IL-4均较day3有显著性差异(P<0.05)。相关性分析提示CD4+CD29+T细胞及IL-4均与Frankel分级具有显著正相关性,而IFN-γ与Frankel分级呈显著负相关性。结论 CD4+CD29+辅助性T细胞及IL-4升高,而IFN-γ降低是脊髓损伤的重要免疫特征,与病情转归相关,且与损伤程度呈相关性,因此具有重要临床意义。

胃癌患者CD4^+CD29^+T细胞表达及其临床意义

目的探讨CD4+CD29+辅助性T细胞在胃癌患者中的表达及其临床意义。方法收集Ⅰ~Ⅳ期胃癌患者共64例、慢性胃炎患者及健康对照组各60例作为观察对象。采用流式细胞术检测外周血CD4+CD29+T细胞及其细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及白介素4(IL-4)水平;采用ELISA法检测三组的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及癌胚抗原(CEA)的含量;分析以上六者的相关性。结果胃癌患者CD4+CD29+T细胞及IL-4水平显著高于慢性胃炎及健康对照组(P<0.05),而IFN-γ明显低于另外两组(P<0.05),但慢性胃炎与健康对照组上述三项指标无统计学差异。Ⅰ~Ⅳ期胃癌患者CD4+CD29+T细胞及IL-4呈递增趋势,而IFN-γ呈递减趋势,均表现为Ⅲ与Ⅰ期之间、Ⅳ与Ⅲ期之间均存在显著差异(P<0.05)。胃癌患者ICAM-1、TGF-β1及CEA显著高于慢性胃炎及健康对照组(P<0.05),但慢性胃炎与健康对照组上述三项指标无统计学差异。相关性分析显示CD4+CD29+T细胞及IL-4两者与ICAM-1、TGF-β1及CEA三者当中任意一者均呈正相关性,而IFN-γ与ICAM-1、TGF-β1及CEA三者当中任意一者均呈负相关性(P<0.05)。结论 CD4+CD29+T细胞及IL-4表达增加、IFN-γ表达减少是胃癌患者的一个重要免疫学特征,在早晚期胃癌呈显著差异性表达,且三者与胃癌的血管表达相关因子密切相关。

CD29的表达与人类唾液腺良恶性肿瘤发病关系的研究

目的:分析与明确各种细胞表面标记物的表达和分布,特别是CD29在成人唾液腺中的表达和分布。方法:采集成对的成人腮腺、舌下腺和颌下腺组织。并使用免疫组化检测收集的腺体中各种家族特异性细胞表面标记的表型表达(包括CD29)。结果:发现CD29在唾液腺腺泡和导管上皮,间充质基质和肌上皮细胞上均有表达;CD29+细胞在成人唾液腺上皮中与CD324、CD326、NKCC1和CD44共表达;间充质细胞主要表达CD73、CD90、波形蛋白和CD34而α-SMA主要是肌上皮细胞特异性祖细胞标记物。结论:CD29广泛表达于人唾液腺中,可作为唾液腺疾病和恶性肿瘤新型细胞治疗和诊断的潜在生物标志物。

舌鳞癌患者舌苔形成与CD29和E-cad表达的相关性研究

目的:探讨舌鳞癌患者舌苔形成与CD29和E-cad表达的关系。方法:选择口腔舌鳞癌切除术患者,根据不同舌苔分为白薄苔组、白厚苔组、黄薄苔组、黄厚苔组及剥苔组;并将胎儿正常白薄苔设为对照组。采用免疫组化S-P法检测不同舌苔黏膜组织中CD29和E-cad表达的情况。结果:CD29在白厚苔中表达最高,在黄薄苔中表达最低。E-cad在白薄苔中表达最高,在剥苔中表达最低。按舌苔厚薄来比较,CD29在厚苔中的高表达;而E-cad在薄苔中高表达。按苔色来比较,两者在白苔中的表达均高于黄苔。结论:舌鳞癌患者舌苔形成与CD29和E-cad表达水平的变化密切相关。