拉米夫定联合前列地尔对慢性肝炎患者CD3^+ CD25^+ Foxp3^+调节T细胞水平的影响

目的观察拉米夫定联合前列地尔治疗慢性乙型肝炎(CHB)的疗效及对CD3+ CD25+ Foxp3+调节T细胞水平的影响。方法 2010-2013年我院收治的148例慢性乙型肝炎患者随机分为实验组和对照组,每组74例,两组均接受综合保肝治疗和前列地尔注射,在此基础上实验组口服拉米夫定,对照组口服阿德福韦酯,观察两组患者HBV-DNA阴转率、ALT及CD3+ CD25+ Foxp3+调节T细胞水平变化。结果治疗后两组患者ALT水平均呈下降趋势,实验组在6、12、24、72周时显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者HBV-DNA阴转率均逐渐升高,在24周后实验组显著高于对照组(P<0.05)。在中度、重度CHB治疗后,实验组Treg水平显著低于对照组(P<0.05)。结论拉米夫定联合前列地尔能有效抗病毒,保护肝细胞,对慢性乙型肝炎有较好的治疗效果,能显著降低CD3+ CD25+ Foxp3+调节T细胞水平。

原发性干燥综合征患者T细胞亚群及CD4^+CD25^+ T细胞检测的意义

目的探讨T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+T细胞在原发性干燥综合征(PSS)患者中的检测意义。方法用流式细胞仪检测18例PSS患者以及20例健康体检者外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、NK细胞(CD3-/CD16+56+)、CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞及CD4+CD25+调节T细胞水平。结果 PSS患者与正常对照组比较,CD3+CD4+细胞亚群的百分率明显升高(P<0.05);CD4+/CD8+与对照组比较有明显升高(P<0.05);CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分率明显降低(P<0.01),其它T细胞亚群无明显变化。结论 PSS患者T淋巴细胞亚群的水平是异常的。T细胞亚群的比例异常与疾病的病程和临床表现相关联。CD3+CD4-CD8-和CD4+CD25+调节性T细胞水平降低导致机体自身免疫反应抑制功能减弱,免疫耐受状态被打破,可能是引发PSS发生发展的重要因素。

肾移植术后外周血CD3^+细胞CD69、CD25及CD71的表达及意义

目的 探讨肾移植患者术后外周血CD3+细胞CD6 9、CD2 5及CD71的表达及其意义。方法 提取患者的外周血淋巴细胞 ,进行CD3·PE和CD6 9/CD2 5 /CD71·FITC的双色免疫荧光标记 ,流式细胞分析仪测定。结果 术后稳定组和环孢素中毒组CD3+细胞CD6 9、CD2 5及CD71的表达均较术前下降 (P <0 .0 5 ) ,而急性排斥反应组和感染组则显著升高 (P <0 .0 1) ,而且其升高的时间比临床确诊要早 1～ 4d。结论 动态监测CD3+细胞CD6 9、CD2 5及CD71的表达将有助于急性排斥的早期诊断和鉴别诊断 ,对及时治疗和抗排斥疗效的评价具有一定意义。

猪瘟疫苗免疫反应低下猪CD3^+CD4^+和CD4^+CD25^+淋巴细胞亚群分析

目的分析猪瘟疫苗免疫反应低下猪CD3+CD4+和CD4+CD25+淋巴细胞亚群的分布。方法将接种过猪瘟疫苗的种母猪经ELISA和血清中和试验检测筛选出猪瘟病毒(CSFV)抗体阴性猪。从中挑选出15头作为研究对象,以15头抗体阳性猪作为对照。采集猪的抗凝血,分离外周血淋巴细胞(PBL),流式细胞术检测30头猪PBL中CD3+CD4+和CD4+CD25+淋巴细胞亚群的分布。结果CSFV抗体阴性猪PBL中CD3+CD4+细胞的比例(24.09%±1.29%)明显低于CSFV抗体阳性猪(37.49%±1.60%);CSFV抗体阴性猪PBL中CD4+CD25+细胞的比例(2.34%±0.20%)明显高于CSFV抗体阳性猪(1.64%±0.13%)。结论PBL中CD3+CD4+淋巴细胞亚群的减少及CD4+CD25+淋巴细胞亚群的增加,可能是导致猪瘟疫苗免疫反应低下的重要原因。

CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞和CD3^-CD56^+CD69^+NK细胞在肺结核患者中的意义

目的:探讨CD4+CD25+CD127low调节性T细胞和CD3-CD56+CD69+NK细胞在肺结核患者中的免疫调节作用。方法:取30例健康体检者(HD)、30例非耐药初治肺结核(S-TB)患者及30例多耐药结核病(MDR-TB)患者2 ml肝素抗凝外周静脉血,经CD3、CD4、CD25、CD56、CD69、CD127流式抗体标记后,Beckman流式细胞仪(FCM)计数各组CD4+CD25+CD127lowT、CD3-CD56+NK、CD3-CD56+CD69+NK细胞百分比含量。结果:MDR-TB组CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量为(10.63±3.85)%,明显高于HD组的(3.03±1.07)%和S-TB组的(7.17±2.94)%(P=0.000);S-TB组CD3-CD56+NK细胞百分比含量为(17.69±8.34)%,高于HD组的(16.60±6.21)%和MDR-TB组的(14.70±5.57)%,但差异无统计学意义(P>0.05);MDR-TB组CD3-CD56+CD69+NK细胞百分比含量为(3.50±1.22)%,明显低于HD组的(9.73±4.35)%和S-TB组的(5.71±2.28)%(P=0.004)。结论:随着肺结核病程的发展,外周血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞含量逐渐升高,CD3-CD56+NK细胞含量先上升然后下降,CD3-CD56+CD69+NK细胞含量逐渐下降。调节性T细胞可能通过抑制结核患者CD3-CD56+CD69+NK细胞免疫应答来影响肺结核病的进程。

抗CD3单克隆抗体对支气管哮喘患者CD4^+CD25^+ T细胞凋亡和自噬的影响

目的探讨抗CD3单克隆抗体对分离培养的支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血CD4+CD25+T细胞凋亡和自噬及其分泌的代表性因子转化生长因子β(TGF-β)的影响。方法采用密度梯度离心法及尼龙棉柱法分离32例哮喘患者(哮喘组)及30名健康者(对照组)外周血T细胞,磁性细胞分离器分离得到CD4+CD25+T细胞,分别利用电镜及流式细胞仪观察、检测抗CD3单克隆抗体干预72h的细胞凋亡率、自噬率,用ELISA法检测细胞培养上清液中细胞因子TGF-β的水平。结果抗CD3单克隆抗体干预72h后两组外周血CD4+CD25+ T细胞凋亡率、自噬率及TGF-β均增加(P值均<0.01),但哮喘组凋亡率、自噬率均低于健康对照组(P值均<0.01);两组间TGF-β水平无显著差异(P>0.01)。哮喘组外周血CD4+CD25+ T调节细胞在CD3单克隆抗体的干预下自噬与TGF-β的分泌呈显著负相关(r=-0.38,P<0.01)。结论抗CD3单克隆抗体可促进CD4+CD25+ T细胞凋亡和自噬及TGF-β分泌。

CCK-8法与FACS对抗CD3抗体诱导小鼠Treg细胞免疫抑制作用的比较

用非放射性同位素方法检测抗CD3抗体诱导的小鼠调节性T细胞(Treg)对效应性T细胞(Teff)增殖的抑制作用。本实验用丝裂霉素C处理脾细胞获得抗原递呈细胞(APC),用免疫磁珠分离BALB/c小鼠脾脏CD4^+CD25^+的Treg和CD4^+CD25^-的Teff,二者按1:2比例与APC共培养,并加入anti-CD3抗体刺激3 d,加CCK-8孵育检测细胞增殖。另外,CFSE标记Teff,与Treg共同培养,加入anti-CD3抗体刺激3 d,流式细胞仪分析Treg对Teff增殖的抑制作用。流式分析表明,0.1 mg/L、1 mg/L的anti-CD3抗体均能明显促进Teff细胞增殖,加Treg细胞能明显减低细胞增殖的比例和减少增殖的代数。anti-CD3抗体剂量增加到1 mg/L,Teff的增殖较0.1 mg/L剂量刺激时没有明显改变,但Treg的抑制功能减弱了。CCK-8法与流式检测得出的结果一致。CCK-8法和流式细胞术(FACS)均可以用来检测Treg细胞的免疫抑制作用,并且采用0.1 mg/L anti-CD3抗体刺激,对Treg细胞免疫抑制作用的检测效果更好。

调节T细胞在梅毒患者中的表达及临床意义

目的探讨梅毒患者外周血T细胞亚群及调节T细胞在梅毒病人发病中的临床意义。方法采用流式细胞术检测了32例梅毒患者以及30例健康体检者外周血T细胞亚群CD3、CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、CD4+CD45RA+、CD4+CD29+、CD8+CD28+、CD8+CD28-、NK细胞以及CD3+CD4+CD8-和CD4+CD25+调节T细胞水平。结果与正常对照组相比,梅毒患者NK细胞的百分率明显降低(P<0.01),CD4+CD25+和CD3+CD4-CD8-调节T细胞的百分率明显升高(P<0.01),其它T细胞亚群无明显变化。结论梅毒患者NK细胞,CD4+CD25+和CD3+CD4-CD8-调节T细胞的异常变化可能是梅毒患者RPR持续阳性或临床症状反复,经久不愈的原因所在。

肝细胞癌患者外周血中调节性T细胞、NK细胞及NKT细胞的表达及意义

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞、CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞在肝细胞癌患者外周血中的表达及意义。方法利用流式细胞仪对31例肝细胞癌患者、59例慢性肝炎、肝硬化患者及48例正常人外周血中的CD4+CD25+调节性T细胞、CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞进行定量分析。结果肝细胞癌组外周血中CD4+CD25+T细胞较正常对照组及慢性肝炎、肝硬化组明显减少(P<0.05),肝细胞癌组外周血中CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞较正常对照组及慢性肝炎、肝硬化组明显增加(P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能通过对CD3-CD57+NK细胞及CD3+CD57+NKT细胞功能的抑制参与了肝癌细胞的免疫逃逸作用。

T淋巴细胞亚群在肝移植术后长期生存患者外周血中的变化

目的分析肝移植术后长期生存患者外周血中Th1细胞和CD3+CD8low抑制性T细胞(Ts)及CD4+CD25+Foxp3+Treg水平的变化及其临床意义。方法研究对象为肝移植术后长期生存患者的外周血,血清学检测肝功能生化指标与FK506的含量,采用荧光标记单克隆抗体和流式细胞术检测Th1细胞、CD3+CD8low抑制性T细胞及CD4+CD25+Foxp3+Treg含量变化,分析表达变化特点及与免疫抑制药物FK506(他克莫司)的相关性。结果通过对肝移植术后存活2～3、8～10年患者及健康人外周血中Th1细胞、CD3+CD8low抑制性T细胞及CD4+CD25+Foxp3+Treg的含量检测显示三者水平呈逐渐下降趋势,最终接近至健康人的水平;肝移植术后生存2～3年组外周血中3种细胞百分比计数水平均显著高于健康对照组(P<0.05);生存8～10年患者CD3+CD8low抑制性T细胞百分比计数水平显著高于健康人组(P<0.05),而Th1及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比计数较2～3年组的水平显著降低(P<0.05);生存8～10年组患者中CD3+CD8low抑制性T细胞较生存2～3年组的水平虽然也降低,但无显著性差异(P>0.05);肝移植术后长期存活患者血清FK506浓度与三者水平呈直线正相关。结论肝移植术后患者产生免疫耐受一定程度上取决于Th1细胞、CD3+CD8low抑制性T细胞及CD4+CD25+Foxp3+Treg的平衡。

调节性T细胞在胃癌患者外周血的表达及临床意义

目的研究胃癌患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tregs)的表达,并探讨该群细胞频数的变化与肿瘤临床分期的相关性,从而探讨在胃癌肿瘤免疫过程中Treg细胞对免疫效应细胞的调节作用,探讨其在胃癌发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测39例胃癌患者外周血淋巴细胞CD3^+、CD4^+、CD8^+及CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达,并以30例健康人作为对照。结果胃癌患者外周血中CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+水平明显低于正常对照组,CD4^+CD25^+和CD8^+水平显著增高,胃癌临床分期越晚CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+水平越低,CD4^+ CD25^+和CD8^+水平越高,在临床Ⅰ、Ⅱ期患者与临床Ⅲ、Ⅳ期患者之间存在显著差异,差异有显著统计学意义。结论胃癌患者机体免疫功能低下,胃癌患者外周血中CD3^+、CD4^+ T细胞数量下降,而Treg细胞的数量较正常人明显增高,使T细胞不能有效地清除肿瘤,与胃癌的发病有关。

肾母细胞瘤患儿外周血调节性T细胞和自然杀伤T细胞的表达研究

目的研究肾母细胞瘤患儿外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞(Treg)和CD3^+CD16^+CD56^+自然杀伤T细胞(NKT)的表达变化,初步探讨发生改变的原因及其临床意义。方法选取2015年11月至2016年7月就诊的21例肾母细胞瘤患儿作为病例组,21例于本院体检的同年龄段健康儿童为健康对照组,采用流式细胞术检测两组儿童外周血中CD4^+CD25^+CD127^(low) T细胞占CD4^+T细胞百分比和CD3^+CD16^+CD56^+T细胞占CD3^+T细胞百分比,分别代表Treg水平和NKT水平。结果病例组肾母细胞瘤患儿外周血Treg水平低于健康对照组(P<0.05);病例组肾母细胞瘤患儿外周血NKT水平高于健康对照组(P<0.05)。结论 Treg和NKT水平变化与肾母细胞瘤的发生与发展有关,Treg和NKT水平可能是反映肾母细胞瘤患儿免疫功能状态的较好指标。