扶正排毒颗粒对人类免疫缺陷病毒感染者CD3^+CD4^+CD127^+水平的影响

目的观察扶正排毒颗粒对人类免疫缺陷病毒感染者CD3+CD4+CD127+水平的影响。方法采用流式细胞仪检查服用扶正排毒颗粒6个月前后的人类免疫缺陷病毒感染者血浆CD3+CD4+CD127+的表达水平的变化,评价扶正排毒颗粒对该指标的影响。结果治疗前CD3+CD4+CD127+分子表达水平为(6.59±6.25)%,治疗后为(12.30±8.22)%,治疗前后比较有差异(P<0.05)。结论扶正排毒颗粒可以上调CD3+CD4+CD127+的水平,抑制CD4+T凋亡、调整CD4+T细胞的免疫激活,是其作用机制之一。

骨髓增生异常综合征CD3^+CD4^+T细胞共刺激分子表达的研究

本研究检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS?CD3+CD4+T细胞共刺激分子的表达,为进一步探讨MDS发病机制积累信息。以38例初治MDS患者为研究对象,依据FAB分型将他们进一步划分为RA/RARS、RAEB/RAEB-t组;以11例献血员为正常对照,应用流式细胞术检测两组外周血CD3+CD4+T细胞共刺激分子CD28、CD154、CTLA-4、PD-1、CD25的表达。结果表明:MDS组CD28表达下降,CD154升高,CTLA-4、PD-1、CD25表达明显升高。随着疾病恶性程度的增高,RAEB/RAEB-t组CTLA-4、PD-1的表达以及CTLA-4/CD28比值亦较RA/RARS组升高。结论:MDS患者CD3+CD4+T细胞共刺激分子表达存在异常改变,其表达异常可能在MDS的发病机制中起一定作用。

流式细胞仪分选外周血CD3^+CD4^+T淋巴细胞方法的建立

首先用Percoll连续密度梯度离心法制备外周血单个核细胞,采用流式细胞仪分选CD3+CD4+T淋巴细胞。分选后的细胞通过细胞存活率、细胞纯度鉴定和形态观察对分选方法进行评价。结果显示,Percoll连续密度梯度离心法能很好的制备外周血单个核细胞,分选前CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(51.9±9.6)%,分选后CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(95.9±0.8)%,差异有统计学意义(P<0.01)。分选后的细胞存活率为(95.8±1.2)%,细胞的形态保持完整。

风湿性心脏病患者外周血CD3^+CD4^+T淋巴细胞与hs-CRP、IL-6表达的变化及意义

目的探讨风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达与超敏C反应蛋白(hs-CRP)及IL-6的水平和意义。方法风湿性心脏病患者38例,健康者37例(对照),采用流式细胞术检测风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达水平,ELISA测定hs-CRP和IL-6的水平。结果风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达水平明显高于健康者(P<0.05)。风湿性心脏病患者外周血hs-CRP及IL-6水平明显高于健康者(P<0.05)。风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达水平与外周血hs-CRP、IL-6呈正相关关系(P<0.01)。结论 CD3+CD4+T淋巴细胞表达增高与风湿性心脏病的发病有关;风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达增高影响hs-CRP及IL-6,参与风湿性心脏病的发病。

人体外周血CD3^+CD4^-CD8^-双阴性T细胞体外扩增的实验研究

目的探讨人体外周血CD3^+CD4^-CD8^-双阴性T细胞(DNT细胞)在体外进行分离和扩增的方法。方法取健康的成人外周血20ml,应用Rosettesep抗体吸附法去除CD4^+T细胞和CD8^+T细胞;再将DNT细胞放入anti-CD3mAb包被的培养板中,并加入rhIL-2、rhIL-4,共同培养,第10天和第14天计数细胞扩增倍数及记录扩增曲线;利用Easysep免疫磁珠法纯化,采用流式细胞仪检测其纯度。结果经分选、纯化后的DNT细胞,纯度可达94%以上;体外培养第10天和第14天,DNT细胞扩增倍数分别为53倍和41倍。结论通过Rosettesep抗体吸附法及Easysep免疫磁珠法分离及纯化DNT细胞是可行的,可获得大量高纯度的DNT细胞。

CD19^+、CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞对儿童重症手足口病的预警作用

选取2010年10月~2013年11月我院收治住院的手足口病患儿150例,分为重症组50例和普通组100例,另选同期30例健康体检儿童作为对照组。分别采用流式细胞仪检测患儿外周血CD19^+、CD3^+、CD4^+、CD8^+的表达率。两组间均数比较采用独立样本t检验,分析其相关性。结果共检测150例手足口病患儿,其中100例为普通手足口病患儿,50例为重症患儿,重症手足口病患儿的CD3^+、CD4^+以及CD8^+T淋巴细胞亚群的百分比低于普通组及对照组,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。重症手足口病患儿的CD19^+B淋巴细胞亚群的百分较普通组及对照组升高,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。手足口病患儿监测其CD19^+、CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞表达有对重症倾向的患儿有一定的预警作用。

不同试剂检测北京地区健康献血者淋巴细胞CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+百分比参考值调查

目的探讨北京地区健康献血者CD3+CD4+、CD3+CD8+百分比的参考值范围,并对国产和进口的淋巴细胞免疫表型双染试剂进行比较。方法收集北京地区500例健康献血者全血标本,分别使用进口和国产的CD3FITC/CD4PE和CD3FITC/CD8PE双染试剂,应用同一台流式细胞仪进行检测,并对不同性别、民族和年龄段的结果以及不同试剂的结果进行比较。结果进口试剂检测的北京地区健康献血者CD3+CD4+、CD3+CD8+百分比以及CD3+CD4+/CD3+CD8+的范围(95%可信限)分别为22.92～49.96、14.86～41.70、0.37～2.47,不同年龄段(18～29、30～39与40岁以上组)各项指标均值的差异有统计学意义(P<0.05),而不同性别的比较仅CD3+CD4+(%)的差异有统计学意义(P<0.01),比较汉族(n=484)与少数民族(n=16)中各项指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。国产与进口试剂的检测结果显著相关,CD3+CD4+(%)、CD3+CD8+(%)以及CD3+CD4+/CD3+CD8+的r值分别为0.970、0.953、0.967。u检验结果显示CD3+CD4+(%)的差异无统计学意义(P>0.05),而CD3+CD8+(%)、CD3+CD4+/CD3+CD8+的差异有统计学意义(P<0.01)。结论初步建立北京地区健康献血者CD3+CD4+(%)、CD3+CD8+(%)的参考值,参考值受年龄、性别、民族、检测试剂和仪器等多种因素的影响。国产和进口淋巴细胞免疫表型双染试剂检测结果基本一致,相关性具有显著性。

αβ-TCR^+CD3^+CD4^-CD8^-双阴性T细胞:一种新发现的免疫调节T细胞

免疫系统对自身或异体抗原产生免疫耐受的主要机制之一 ,是免疫调节T细胞的抑制性调节反应。此理论已在数种进行器官移植和自身免疫研究的动物模型中被证实。现已明确 ,免疫调节T细胞由多种不同的细胞亚型所组成。最近发现 ,一种新的抗原特异性αβ TCR+ CD4 CD8 免疫调节T细胞 (双阴性T细胞 ,DNT )能够抑制具有相同T细胞受者特异性的CD8+和CD4 + T细胞 ,从而抑制异体皮肤移植的排斥反应。有关DN调节T细胞及其独特抑制机制的研究 ,对于了解受者如何获得针对供体移植器官的特异性耐受 ,及正确理解如何保持对自身抗原的外周免疫耐受 。

腹泻型肠易激综合征患者血中CD3＋CD4＋CD8＋T淋巴细胞变化的观察

目的 探讨免疫因素与腹泻型肠易激综合征(IBS)的关系。方法 用APAAP法检测32例IBS患者和30例健康对照者的外周血T淋巴细胞亚群，并对二者进行比较观察。结果 IBS患者外周血CD3值与健康对照组无差别(P>0．05)，CD4值明显低于对照组(P<0．05)，CD8值明显高于对照组(P<0．05)，CD4／CD8比值下降(P<0．05)。结论 IBS的腹泻型可能与免疫改变有关。

静脉吸毒人群HIV感染者CD3^+CD4^+CD8^+T淋巴细胞水平定量研究与分析

目的:定量分析静脉吸毒人群HIV感染者CD3^+CD4^+CD8^+T淋巴细胞水平。方法:采用流式细胞技术(FCM)对76例无症状HIV阳性的静脉吸毒者,165例HIV阴性的静脉吸毒者及61例正常对照组分别检测CD3^+、CD4^+、CD8^+淋巴细胞绝对计数和CD4^+/CD8^+比值。结果:HIV感染组与静脉吸毒组及健康对照组各项指标间存在有不同程度的统计学差异性(F=105.02,F=159.13,F=220.08,P<0.01=;CD4^+细胞计数和CD4^+/CD8^+比值表现为HIV感染组<静脉吸毒组<健康对照组(q=18.4,q=24.6,q=11.1,q=51.8,q=56.7,q=13.3,P<0.01),CD3^+细胞计数呈现为HIV感染组>健康对照组>静脉吸毒组(q=19.8,q=6.5,q=10.8,P<0.01),CD8^+细胞计数表现为HIV感染组>静脉吸毒组>健康对照组(q=27.2,q=24.9,P<0.01;q=3.48,P<0.05)。结论:HIV感染和/或静脉吸毒均可不同程度的导致CD4+和CD8+细胞水平的改变,有关静脉吸毒合并HIV感染对免疫细胞水平的影响尚需进一步深入研究。

轮状病毒肠炎患儿外周血中CD3^+CD4^+CD8^+T淋巴细胞亚群的研究

轮状病毒（RV）是秋冬季婴幼儿腹泻最常见的病原菌，轮状病毒肠炎临床症状以呕吐、腹泻、发热为主。有报道认为其发病可能与细胞免疫功能有关，但国内的相关报道不多。为了了解T细胞亚群在轮状病毒肠炎发病时的作用，现对轮状病毒肠炎患儿以及健康儿童外周血中CD3、CD4、CD8和CD4／CD8值进行比较，初步探讨如下。

4-1BBL胞膜外区蛋白增强抗CD3/抗PgP的抗肿瘤作用

目的研究4-1BBL胞膜外区蛋白对抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体抗肿瘤作用的影响。方法表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白及抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,体外CytoTox96检测联合应用人4-1BBL胞膜外区融合蛋白、抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用,体内建立裸鼠移植瘤模型检测4-1BBL胞膜外区蛋白作为一种免疫调节蛋白,增强抗CD3/抗Pgp基于PBL的抗肿瘤效果。结果4-1BBL胞膜外区融合蛋白在体外能够增强抗CD3/抗Pgp及PBL对靶细胞K562/A02的杀伤作用,在体内能够增强抗CD3/抗Pgp基于PBL的抗肿瘤作用。结论可溶型4-1BBL可能成为一种有前景的生物治疗佐剂,有助于PBL更高效地靶向杀伤肿瘤细胞。

外周血CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞与T_(1)期高级别尿路上皮癌预后的关系

目的研究外周血CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞数量与T_(1)期高级别尿路上皮癌术后预后的相关性。方法回顾性分析2012年1月至2016年12月在上海市第一人民医院诊治为T_(1)期高级别尿路上皮癌的患者168例,以外周血细胞数量为320个/μl分界将患者分为CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)正常组(87例)和数量低组(81例)。采用Kaplan-Meier法制作生存曲线,Cox回归模型分析外周血CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞数量与T_(1)期尿路上皮癌的无复发生存和无进展生存(PFS)的关系。结果CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)正常组和CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)数量低组的PFS均值分别为54.97个月vs 49.07个月,外周血CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞数量低和更短的PFS相关(P=0.017,HR=2.31,95%CI=1.163~4.570)。结论外周血CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞数量低是T_(1)期尿路上皮癌进展的独立危险因素。

固相MICA协同s4-1BBL、IL-15体外高效扩增CD3^+CD56^+细胞的研究

目的:观察固相MHCⅠ类相关抗原A(iMICA)是否协同s4-1BBL、IL-15促进外周血CD3+CD56+细胞的增殖并增强其活性。方法:首先将iMICA联合s4-1BBL、IL-15分别刺激外周血单个核细胞或纯化的CD3+CD56+细胞,共培养19天,动态观察CD3+CD56+细胞频率变化及记录其增殖曲线;其次利用LDH释放法和ELISA分别检测长期培养的CD3+CD56+细胞杀伤活性及IFNγ-、IL-4的分泌;最后检测CD3+CD56+细胞表面活性相关受体的表达。结果:iMICA联合s4-1BBL、IL-15促进CD3+CD56+细胞的频率自2%升高至21.7%,绝对细胞数平均增长32倍;扩增后的CD3+CD56+细胞杀伤K562活性明显增高,IFNγ-分泌能力增强,不分泌IL-4;其表面活化性受体表达上调,抑制性受体表达下调。结论:iMICA联合s4-1BBL、IL-15能高效扩增CD3+CD56+细胞,体外大量增殖后可用于肿瘤的过继免疫治疗。

增用玉屏风散对支气管哮喘患者疗效及CD3+、CD4+、CD8+水平的影响

目的研究增用玉屏风散对支气管哮喘患者的疗效以及对CD3+、CD4+、CD8+水平的影响。方法选择2016年3月—2018年3月本院收治的126例支气管哮喘患者作为研究对象,采用数字随机法分为对照组和观察组两组,每组各63例。其中对照组患者进行常规治疗,观察组患者则在对照组的基础上增用玉屏风散,比较两组患者的治疗效果。结果观察组患者治疗后哮喘症状评分和无症状天数显著优于对照组;观察组患者治疗后的FEV1、FVC、PEF显著高于对照组;观察组患者治疗后的CD3+、CD4+水平显著高于对照组,CD8+水平显著低于对照组(P<0.05);观察组患者治愈的比例为71.43%,治疗有效率为100.00%,显著高于对照组的52.38%、90.48%(P<0.05)。结论增用玉屏风散治疗支气管哮喘的效果更好,调节患者的CD3+、CD4+、CD8+水平,可显著改善患者的肺功能和免疫功能,调节患者的CD3+、CD4+、CD8+水平,促进临床症状的消失,可在临床上广泛推荐应用。

中西医结合治疗胆结石患者中IL-4、IL-10及CD3+、CD4+、CD8+水平的变化观察——芪术利胆消石汤联合腹腔镜胆囊切除术

目的:研究芪术利胆消石汤联合腹腔镜胆囊切除术(LC)对胆囊炎和胆结石患者白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)及CD3+、CD4+、CD8+水平的影响。方法:选择2018年1月—2018年12月在我院接受治疗的胆囊炎和胆结石患者126例。将患者按照随机数表法分成观察组和对照组,各63例,两组均常规给予LC术式治疗,观察组在此基础上另增用芪术利胆消石汤治疗,对比两组手术相关指标、免疫指标、炎症因子及两组并发症情况。结果:观察组的住院时间、肛门排气时间及下床活动的时间均分别明显少于对照组(P<0.05)。治疗后两组的CD3+、CD4+、CD8+水平均明显升高,但观察组又明显高于对照组(P<0.05)。治疗后两组的IL-4及IL-10水平均明显降低,但观察组又明显低于对照组(P<0.05)。两组并发症的发生率相比,差异不显著(P>0.05)。结论:芪术利胆消石汤联合LC术式对胆囊炎和胆结石患者的疗效较好,能够明显改善患者机体的免疫功能及炎症状态,安全性也较高,值得给予推广。

融合蛋白Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)介导的T细胞对B细胞淋巴瘤细胞杀伤作用观察

目的观察融合蛋白Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)介导的T细胞对人B细胞淋巴瘤细胞Raji的杀伤作用。方法采用常规酶切、连接等分子克隆方法构建慢病毒表达载体pLentiR.SV40-Tandab(CD3/CD19/4-1BBL),将其瞬时转染至293T细胞,收集培养上清并纯化融合蛋白Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)。采用流式细胞术分析Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)与CD19^(+)细胞(Raji细胞)、CD3^(+)细胞(人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat)、4-1BB^(+)细胞(Jurkat细胞)的结合活性。收集Raji细胞,按照效靶比20∶1加入T细胞,分别加入0.08、0.8、8 pmol/mL的Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)、Tandab(CD3/CD19)、4-1BBL,采用LDH释放实验测算T细胞对Raji细胞的杀伤效率,采用ELISA法检测8 pmol/mL融合蛋白作用后细胞培养液上清中的IL-2、采用流式细胞术检测CD3^(+)CD69^(+)细胞、CD3^(+)CD25^(+)细胞比例。结果pLentiR.SV40-Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)构建成功,表达的融合蛋白Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)可与CD19^(+)、CD3^(+)、4-1BB^(+)细胞结合。Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)组、Tandab(CD3/CD19)组T细胞对Raji细胞杀伤百分比均高于4-1BBL组(P均<0.01)。在效靶比一定时,随着融合蛋白Tandab浓度增高,T细胞对Raji细胞的杀伤百分比逐渐增高(P均<0.01)。Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)组、Tandab(CD3/CD19)组、4-1BBL组细胞培养液上清中的IL-2水平均高于PBS组(P均<0.05)。Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)组、Tandab(CD3/CD19)组CD3^(+)CD69^(+)细胞、CD3^(+)CD25^(+)细胞比例高于4-1BBL组、PBS组(P均<0.01)。结论融合蛋白Tandab(CD3/CD19/4-1BBL)可有效介导T细胞对B细胞淋巴瘤细胞的杀伤作用。

胞内分枝杆菌感染对小鼠肺CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)T细胞表达的影响

为研究胞内分枝杆菌感染对宿主CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)T细胞表达的影响。用卡介苗(BCG)和分离出的胞内分枝杆菌分别腹腔注射感染C57BL/6小鼠,观察细菌增殖率和肺部病理切片,ELISA法检测血清中IFN-γ、TNF-α、IL-12、IL-10的表达。流式细胞术检测小鼠肺CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)T细胞的变化。通过比较细菌增殖率发现,胞内分枝杆菌比BCG在小鼠体内细菌增殖率更高。感染胞内分枝杆菌的小鼠在前30d肺内CD3^(+)CD4^(+)T细胞比例迅速增加,血清中含有更高水平的IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-12。感染胞内分枝杆菌后期,小鼠肺CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例迅速增加。IFN-γ、TNF-α、IL-12表达下降,IL-10下降不明显。表明胞内分枝杆菌感染小鼠后,前期以CD3^(+)CD4^(+)T细胞反应为主,而在感染后期,CD3^(+)CD8^(+)T细胞反应强烈。

Construction and photocatalytic properties toward rhodamine B of CdS/Fe_(3)O_(4) heterojunction

A simple two-step hydrothermal method synthesized four different CdS/Fe_(3)O_(4)photocatalysts with varying ratios of mass of CdS to Fe_(3)O_(4).The composition and morphology of the prepared samples were investigated using X-ray diffraction(XRD),Raman spectrum,X-ray photoelectron spectroscopy(XPS),scanning electron microscopy(SEM),and transmission electron microscopy(TEM).Solid UV reflectance spectra testing found that CdS/Fe_(3)O_(4)nanocomposites had good light absorption throughout the spectral range,promoting their photocatalytic properties.Under visible light irradiation,CdS/Fe_(3)O_(4)(2∶5)with a mass ratio of 2∶5 exhibited excellent photocatalytic perfor-mance,with a degradation rate of 98.8%for rhodamine B.Furthermore,after five cycles of photocatalytic degrada-tion reaction,the rhodamine B degradation rate remained at 96.2%,indicating that the photocatalysts have good pho-tocatalytic stability.

TiO_(2)/g-C_(3)N_(4)/CdS快速光催化降解氧四环素研究

为减少抗生素废水对生态环境的危害,通过制备TiO_(2)/g-C_(3)N_(4)/CdS光催化材料,研究对氧四环素的降解性能,探讨氧四环素初始浓度、材料投加量对降解的影响,并测试降解稳定性。结果表明,该材料对520 nm可见光具有响应;当初始浓度为10.0 mg/L、材料投加量为1.0 mg/mL时,10 min可完全去除氧四环素,总有机碳去除率为83.1%;循环4次后,降解率依然保持稳定。