急性脑损伤患者血清TNF-α、IL-6、IL-8、全血hs-CRP、CD3^＋／HLA-DR^＋水平的变化及临床意义

目的动态监测急性脑损伤患者血清肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）及全血超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、CD3^＋／HLA-DR^＋水平的变化，为临床提供脑组织损伤严重程度的参考及评价预后方法将126例急性脑损伤患者分为4组（轻型组、中型组、重型组、特重型组），监测不同时间段（〈12h、24h及第3、5、7天）TNF-a、IL-6、IL-8、hs-CRP、CD3^＋／HLA-DR^＋的水平并进行比较分析。结果4组患者伤后12h内TNF-a、IL-6、IL-8、hs-CRP、CD3^＋／HLA-DR^＋水平均升高，TNF-a、IL-6、IL-8水平在伤后第3天达到高峰，轻型组、中型组、重型组上述指标水平均持续下降，而特重型组伤后第7天仍保持较高的水平（P〈0.05）。TNF-a、IL-6、IL-8水平升高与颅脑损伤程度呈正相关（P〈0.05）。TNF-a、IL-6、IL-8、CD3^＋／HLA-DR^＋水平升高又与hs-CRP呈正相关（P〈0.01）。结论脑损伤患者体内存在不同程度的炎症和免疫反应。脑损伤急性期，炎性反应因子TNF-a、IL-6、IL-8、hs-CRP及血管损伤的细胞因子CD3^＋／HLA-DR^＋表达与血肿的扩大密切相关，各类参与炎性反应的因子相互促进和调节，动态监测有助于早期判断脑损伤的严重程度和预后评估。

早期严重多发伤患者全血CD3^＋．CD4^＋．CD8^＋的变化

目的观察多发伤患者早期全血中CD3^＋（CD3阳性淋巴细胞）、CD4^＋（CD4阳性淋巴细胞）、CD8^＋（CD8阳性淋巴细胞）的动态变化并探讨多发伤与免疫的关系。方法观察2005年-2007年我院多发伤患者人院1wk内CD3^＋、CD4^＋．CD8^＋浓度的变化。结果24h内CD3^＋、CD4^＋．CD4^＋/CD8^＋比值明显降低，48h之后CD4^＋值降低不明显，而CD8^＋降低，CD4^＋／CD8^＋比值恢复。结论严重多发伤后患者免疫功能受到明显抑制，在72h之前达到高峰，此后缓慢地回升。

一种CD3^＋ T细胞细胞内CD69分子的检测方法

目的建立一种人外周血CD3^+ T细胞细胞内CD69的检测方法。方法分离获取健康人PBMC,用PMA^+ IM(佛波醇酯^+ 离子霉素)刺激PBMC,用蛋白转运抑制剂(Brefeldin A,BFA)阻断细胞内因子的分泌,用皂角素(Saponin)破膜,流式细胞术检测CD3^+ T细胞胞内CD69阳性率,以确定最佳的破膜时间。结果最佳的破膜时间为15 min,CD3^+ T细胞胞内CD69表达的阳性率较高,可达87.82%。结论流式细胞术是一种检测CD3^+ T细胞内CD69的较好方法,这一方法也为CD3^+ T细胞内其他分子的检测分析奠定了方法学基础。

1种用于分离猪肠道CD3^(+)T细胞方法的建立

CD3^(+)T细胞是猪肠道免疫系统的重要组成部分,对肠道病毒感染研究具有重要价值。该研究开发了一种采用磁珠富集手段从猪小肠组织中分离原代CD3^(+)T细胞的方法。该方法将为研究猪肠道免疫系统功能提供合适的细胞模型,还可加速抗病毒药物和疫苗研发。

胸腺肽联合奥沙利铂对NSCLC合并恶性胸腔积液患者外周血CD3^(+)、CD4^(+)水平的影响

探究胸腺肽联合奥沙利铂对非小细胞型肺癌(NSCLC)合并恶性胸腔积液(MPE)患者外周血CD3^(+)、CD4^(+)水平的影响。方法:纳入2019年1月~2022年1月来天津市蓟州区人民医院化疗的82例NSCLC合并MPE患者采用随机数字表法分为单一组和联合组各41例,入院后两组患者均给予常规科内治疗,在此基础上单一组采用奥沙利铂,联合组采用奥沙利铂+胸腺肽。化疗8 w后比较两组临床疗效,两组化疗前后免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))水平以及胸腔积液中炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)],两组不良反应发生情况。结果:化疗后联合组总有效率以及疾病控制率(DCR)明显高于单一组,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗前两组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),化疗后联合组上述数据明显高于单一组,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗后,两组患者胸腔积液中IL-6、TNF-α水平明显低于化疗前,且联合组明显低于单一组,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗后,联合组胃肠道反应及骨髓抑制发生率明显低于单一组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:应用胸腺肽联合奥沙利铂治疗NSCLC合并MPE患者临床疗效显著,对患者机体免疫功能有增强作用,且安全性较高。

线粒体内膜蛋白17(MPV17)通过阻断ERK通路抑制铁过载小鼠脾脏CD3^(+)T细胞铁死亡

目的探索铁过载对小鼠脾脏损伤的影响及线粒体内膜蛋白17(MPV17)在铁过载小鼠脾脏CD3^(+)T细胞铁死亡中的作用。方法将小鼠随机分为正常饮食组、高铁饮食组、高铁饮食联合铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)处理组、高铁饮食联合MPV17腺病毒注射组,每组5只。喂食8周后,取脾脏组织并固定,通过组织切片和HE染色法观察脾脏结构,碘化丙啶(PI)染色检测脾脏CD3^(+)T细胞死亡,脂质过氧化荧光探针C11 BODIPY 581/591检测脂质氧化,实时定量PCR检测溶质载体家族7成员11(SLC7A11)及前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)mRNA水平,流式细胞术检测M1、M2巨噬细胞比例,ELISA实验检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及IL-6的含量。同时增加高铁饮食联合细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂处理组、ERK激活剂处理组、β半乳糖苷(β-gal)酶联合ERK激活剂处理组、MPV17联合ERK激活剂处理组,Western blot法检测MPV17、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、磷酸化的ERK(p-ERK)水平,JC-1结合流式细胞术检测线粒体膜电位。结果与正常饮食组相比,高铁饮食组小鼠脾脏红髓形状不规则,白髓结构消失,脾脏CD3^(+)T细胞死亡增多,脂质过氧化物增多,SLC7A11及PTGS2表达升高,血液中M1/M2巨噬细胞比例升高,炎症因子含量升高;经Fer-1处理或过表达MPV17,部分恢复脾脏结构,CD3^(+)T细胞数量及脂质过氧化物减少,SLC7A11及PTGS2表达被抑制,M1/M2巨噬细胞比例及炎症因子的含量降低。高铁饮食导致GPX4表达降低,p-ERK表达升高,抑制ERK部分恢复GPX4表达,激活ERK降低GPX4表达;MPV17抑制ERK部分恢复GPX4表达,MPV17部分恢复因ERK激活导致的线粒体膜电势降低。结论铁过载可诱导小鼠脾脏CD3^(+)T细胞发生铁死亡,MPV17通过阻断ERK信号抑制高铁饮食诱导的脾脏CD3^(+)T细胞铁死亡。

CD3^(+)T淋巴细胞计数联合早期预警评分对重症肺炎患者28 d死亡风险的预测价值

目的 分析CD3^(+)T淋巴细胞计数联合早期预警评分(EWS)预测重症肺炎患者28 d死亡风险的价值。方法 选取2020年6月—2021年5月天津市中医药研究院附属医院收治的78例重症肺炎患者为研究对象。根据患者28 d后生存状况,将其分为死亡组与存活组,比较两组CD3^(+)T淋巴细胞计数、EWS评分及其他临床指标,行一般多因素Logistic回归分析,筛查重症肺炎患者28 d死亡的影响因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析CD3^(+)T淋巴细胞计数、EWS评分预测重症肺炎患者28 d死亡的价值。结果 死亡组入院时SOFA评分、APACHEⅡ评分、EWS评分高于存活组(P <0.05),死亡组ICU住院时间、机械通气时间长于存活组(P <0.05),死亡组入院时CD3^(+)、CD4^(+)及CD8^(+)少于存活组(P <0.05)。Pearson相关性分析结果显示,死亡组患者入院时外周血CD3^(+)与EWS评分呈负相关(r=-0.422,P=0.000),CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)与EWS评分无相关性(r=-0.113、-0.122和-0.171,P=0.684、0.682和0.661)。ROC曲线结果表明,入院时CD3(^(+)敏感性为73.9%,特异性为81.1%)、EWS评分(敏感性为91.3%,特异性为54.7%)预测重症肺炎患者28 d死亡效能较好,且两者联合应用可有效提高各指标单独应用效能(敏感性为78.3%,特异性为77.4%)。一般多因素Logistic回归分析结果:入院时EWS评分[O^R=1.701(95%CI:1.347,2.147)]、入院时APACHEⅡ评分[O^R=1.578(95%CI:1.284,1.938)]、ICU住院时间[O^R=1.399(95%CI:1.095,1.788)]、机械通气时间[O^R=1.335(95%CI:1.155,1.543)]是重症肺炎患者28 d死亡的危险因素(P <0.05);入院时外周血CD3^(+)[O^R=0.679(95%CI:0.556,0.829)]是重症肺炎患者28 d死亡的保护因素(P <0.05)。结论 入院时EWS评分、外周血T淋巴细胞亚群中CD3^(+)联合预测重症肺炎患者28 d死亡效能较好,可作为临床评估患者预后的新指标,且入院时EWS评分也是导致重症肺炎患者28 d死亡的危险因素,CD3^(+)是其保护因素。

抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性测定方法的建立

目的建立基于报告基因的抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法。方法以WIL2-S细胞系作为靶细胞,以Jurkat-NF-κB-Luc转基因细胞系作为效应细胞,对抗体的量效范围、孵育时间、诱导时间、效靶比及细胞接种密度进行优化,构建可用于测定抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性的报告基因法。依据ICHQ2的指导原则对方法进行全面验证,包括专属性、准确性、精密度、线性、稳定性。结果成功建立了具有量效关系的抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法,该方法的抗体起始浓度为500 ng/mL,稀释倍数为1∶4,共计8个浓度点(500,125,31.25,7.81,1.95,0.49,0.12,0.031 ng/mL),效靶比为4∶1,诱导时间为4 h。本方法具有良好的专属性;5个不同稀释组回收率样品经测定,相对效价分别为59.63%±4.57%,75.54%±4.05%,99.98%±9.63%,123.90%±5.54%和142.51%±12.82%;对应的回收率分别为93.17%±7.15%,94.42%±5.06%,99.98%±9.63%,99.12%±4.43%以及91.21%±8.21%,CV分别为7.67%,5.35%,9.63%,4.47%和9.00%,上述结果的变异系数CV值均<10%;实测效价与理论效价线性回归分析相关系数R^(2)=0.9823,线性良好;本研究建立的方法可以敏感检测出抗体结构变化对生物活性的影响,对双特异性抗体的稳定性检测有一定的指导意义。结论利用转基因细胞法成功建立了抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法,该方法专属性强、准确性高、重复性好,可用于评价抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性。

肺炎支原体肺炎外周血淋巴细胞CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平与疾病严重程度及预后关系研究

目的 探讨肺炎支原体肺炎患者外周血淋巴细胞CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平,分析其与疾病严重程度及预后的关系。方法 选取自2019年3月至2021年2月收治的98例支原体肺炎患者为研究对象,根据病情严重程度分为轻症组(n=51)与重症组(n=47);选取同期60例健康体检者作为健康组。采用流式细胞仪检测外周血CD3^(+)HLA-DR^(+)细胞占总淋巴细胞数的百分率。肺炎支原体肺炎患者出院后,进行半年随访,根据恢复情况分为预后良好组与预后不良组。采用Pearson法分析CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平与病情严重程度的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平对不良预后的预测价值。结果 健康组外周血CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平为(78.06%±9.47%),轻症组外周血CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平为(69.31%±7.84%),重症组外周血CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平为(56.52%±7.23%)。轻症组、重症组外周血CD3^(+)HLADR^(+)表达水平低于健康组,且重症组低于轻症组,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson法分析,外周血CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平与疾病严重程度呈负相关(r=-0.714,P<0.05)。预后不良组外周血CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平为(49.33%±5.94%),显著低于预后良好组的(72.68%±8.13%),差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,CD3^(+)HLA-DR^(+)检测预测肺炎支原体肺炎患者预后不良的ROC曲线下面积为0.858,灵敏度、特异度分别为76.7%、89.3%。结论 重症支原体肺炎患者外周血CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平较轻症支原体肺炎患者下降,CD3^(+)HLA-DR^(+)表达水平与病情严重程度呈负相关,且对预后不良有一定预测价值,可有助于早期预估患者病情严重程度及预后情况。

急性非ST抬高心肌梗死患者外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg和IL-27变化的临床意义

目的观察急性非ST抬高心肌梗死患者(Non-STMI)治疗过程中外周血CD4^(+)CD25^(+)T/CD4^(+)T、CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25high T比例及细胞因子TGF-β1、IL-10、INF-γ、IL-27的浓度变化,阐明Non-STMI患者是否存在调节性T细胞比例及功能异常。方法选取2012年8月至2016年4月入住中山大学附属第一医院急诊病房和CCU的Non-STMI40名,不稳定性心绞痛(UA)患者19名和同龄健康志愿者20名作为对照组(HC)。患者诊断明确后次日清晨和经规范治疗后5~7天,留取空腹外周血标本。流式细胞术检测CD4^(+)CD25^(+)T/CD4^(+)T、CD4^(+)CD25high Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25high T细胞。ELISA法检测细胞因子TGF-β1、IL-10、INF-γ和IL-27浓度。结果UA、Non-STMI组CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT比例较HC组减低(P<0.01);Non-STMI明显低于UA组(P<0.05),而治疗后Non-STMI组Foxp3^(+)Treg细胞比例显著升高(P<0.05)。入院时Non-STMI和UA组TGF-β1、IL-10浓度较HC组明显降低(P<0.05),而INF-γ和IL-27浓度明显升高(P<0.05)。治疗后Non-STMI组IL-27迅速下降,而UA组变化不明显。治疗前IL-27浓度与CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT呈线性负相关、与INF-γ浓度呈线性正相关。治疗后只有IL-27和CD4^(+)CD25high Foxp3^(+)Treg/CD4^(+)CD25highT呈线性负相关。结论Non-STMI患者CD4^(+)CD25highFoxp3^(+)Treg比例及功能异常,细胞因子IL-27有助于判断患者的临床疗效。

冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg的影响及机制

目的 探讨冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞影响及机制。方法 构建C57BL/6小鼠肺癌皮下移植瘤模型,随机分为模型组、冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组,每组5只。模型组行假手术,在小鼠移植瘤部位切开缝合,其余各组均行双循环冷冻消融术。术后冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组分别给予1.64、3.28、6.56 g/kg养肺方灌胃,模型组、冷冻消融组分别给予等体积的生理盐水灌胃,均1次/d,连续给药14 d。给药期间观察并记录各组小鼠肿瘤体积,末次给药后剥离脾脏和移植瘤,称取瘤体质量并计算抑瘤率;流式细胞术检测脾脏CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例;qRT-PCR和Western blot法检测瘤组织中Foxp3表达。结果 各组小鼠肿瘤体积均逐渐增长,增长速度为模型组>冷冻消融组>冷冻消融联合养肺方低剂量组>冷冻消融联合养肺方中剂量组>冷冻消融联合养肺方高剂量组。手术联合药物干预14 d后,与模型组比较,各治疗组肿瘤体积小(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组肿瘤体积小(P<0.01);冷冻消融联合养肺方高剂量组肿瘤体积小于低剂量组(P<0.01)。与模型组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组瘤体质量小(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组瘤体质量小(P<0.05)。冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组抑瘤率逐渐升高。与模型组比较,各治疗组CD4^(+)T细胞比例低(P<0.05),冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组的CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T%细胞比例低(P<0.05);与冷冻消融组比较,冷冻消融联合养肺方高剂量组CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例低(P<0.05);冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组CD4^(+)T、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞比例逐渐降低。与模型组比较,冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组肿瘤组织中Foxp3 mRNA相对表达量和Foxp3蛋白表达均降低(P<0.01);冷冻消融联合养肺方中、高剂量组Foxp3 mRNA相对表达量和Foxp3蛋白表达均低于冷冻消融组(P<0.01)和冷冻消融联合养肺方低剂量组(P<0.05)。结论冷冻消融联合养肺方通过减少Lewis肺癌小鼠脾脏CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例,下调肿瘤组织中Foxp3表达,发挥抑制Lewis肺癌增殖作用,其机制可能与增强机体抗肿瘤免疫应答,改善肿瘤免疫抑制有关。

CD3^(+)T细胞趋化因子受体在反复肺炎患儿血清中的表达水平及临床意义

目的探讨外周血CD3+T细胞趋化因子受体在反复肺炎患儿血清中的表达水平及临床意义。方法选取2019年10月至2021年1月该院98例反复肺炎患儿作为观察组,另选取同期88例急性肺炎患儿为对照1组,80例健康体检儿童为对照2组。比较3组CXCR1、CXCR2及肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV 1)、最大呼气流量(PEF)]水平,分析反复肺炎患儿CXCR1、CXCR2与肺功能相关性,比较1年内再次发作患儿与未发作患儿一般资料及CXCR1、CXCR2水平,分析再次发作的危险因素,以及CXCR1、CXCR2对再次发作的预测价值。结果观察组CXCR1、CXCR2水平较对照1组、对照2组高,对照1组CXCR1、CXCR2水平较对照2组高,观察组、对照1组FVC、FEV 1、PEF较对照2组低(P<0.05),但观察组与对照1组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CXCR1、CXCR2与FVC、FEV 1、PEF呈负相关(P<0.05)。1年内再次发作患儿营养状况较未发作患儿差(P<0.05),CXCR1、CXCR2水平较未发作患儿高(P<0.05);CXCR1、CXCR2水平高为反复肺炎患儿再次发作的危险因素(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,CXCR1、CXCR2联合预测再次发作的曲线下面积(AUC)为0.797,高于单独预测(P<0.05)。结论反复肺炎患儿外周血CD3+T细胞趋化因子受体CXCR1、CXCR2水平明显升高,且与肺功能密切相关,通过测定CXCR1、CXCR2水平不仅能评估病情程度,还可对再次发作风险进行评估。

非哺乳期乳腺炎与泌乳素、CD3^(+)、CD4^(+)的相关性研究

目的探讨与分析非哺乳期乳腺炎与泌乳素、CD3^(+)、CD4^(+)的相关性。方法选择2020年12月-2022年8月乌鲁木齐友爱医院收治的80例非哺乳期乳腺炎患者作为观察组,选择同期到乌鲁木齐友爱医院健康体检的80例女性作为对照组。检测两组血清泌乳素含量、血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量及外周血CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞相对含量并进行相关性分析。结果观察组血清泌乳素水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组外周血CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞相对含量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearsman分析显示,血清泌乳素水平、外周血CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞相对含量与非哺乳期乳腺炎的发病均存在相关性(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清泌乳素水平及外周血CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞相对含量为导致非哺乳期乳腺炎发病的重要因素(P<0.05)。结论非哺乳期乳腺炎患者多伴随有血清泌乳素的高表达与CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞相对含量降低,非哺乳期乳腺炎的发病与泌乳素及CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞存在相关性。

血清sB7-H3、CCSP、CD4^(+)/CD8^(+)水平与MPP患儿病情程度的关系

目的:探讨血清共刺激分子可溶性B7-H3(Soluble costimulatory molecule B7-H3,sB7-H3)、Clara细胞分泌蛋白(Clara cell secretory protein,CCSP)、CD4^(+)/CD8^(+)水平与肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿病情程度的关系。方法:选取我院2020年5月至2022年5月收治的80例MPP患儿为研究组,另选同期80例体检健康儿童为对照组。比较不同组别入院时血清sB7-H3、CCSP、CD4^(+)/CD8^(+)水平、肺功能指标及临床肺部感染评分(Clinical pulmonary infection score,CPIS)评分,并分析入院时血清sB7-H3、CCSP、CD4^(+)/CD8^(+)水平与CPIS评分及肺功能指标相关性及危险因素。结果:与对照组相比,入院时研究组血清sB7-H3水平较高,CCSP、CD4^(+)/CD8^(+)水平较低(P<0.05);重症患儿入院时血清sB7-H3水平、呼吸频率、CPIS评分高于轻症患儿,CCSP、CD4^(+)/CD8^(+)水平、潮气量、达峰时间/呼气时间、达峰容积/潮气量低于轻症患儿(P<0.05);入院时血清sB7-H3水平与潮气量、达峰时间/呼气时间、达峰容积/潮气量呈负相关,与呼吸频率、CPIS评分呈正相关(P<0.05);血清CCSP水平、血清CD4^(+)/CD8^(+)水平与潮气量、达峰时间/呼气时间、达峰容积/潮气量呈正相关,与呼吸频率、CPIS评分呈负相关(P<0.05);Logistic回归分析显示入院时血清sB7-H3水平(>7.72μg·L^(-1))、CCSP水平(≤8.38μg·L^(-1))、CD4^(+)/CD8^(+)水平(≤1.32)是重症MPP发生的危险因素(P<0.05)。结论:血清sB7-H3水平于MPP患者中呈高表达,血清CD4^(+)/CD8^(+)、CCSP水平呈低表达,动态监测血清变化有助于了解病情变化,为临床制定治疗方案起到指导作用。

外周血CD3^+CD56^+T细胞在恶性肿瘤患者中的表现及临床意义

目的了解 CD3+ CD5 6 + T细胞与 CD3- CD5 6 + 、CD3+ CD5 6 - 的关系及其在参与恶性肿瘤患者抗肿瘤免疫中的作用。方法采用流式细胞术对 10 0例恶性肿瘤患者 (5 5例实体瘤患者和 45例非实体瘤患者 )及 46例健康对照组外周血中的 CD3+ CD5 6 +、CD3- CD5 6 +、CD3+ CD5 6 - 3类淋巴细胞进行标记分析。结果在实体瘤和非实体瘤患者组中 :CD3+ CD5 6 + T细胞均有高表达 ,2组患者与健康对照组比较均有显著性差异 (P<0 .0 1)。 CD3+ CD5 6 - T细胞在实体瘤组的表达都显著低于非实体瘤组和健康对照组 ,2组间比较均有显著性差异 (P<0 .0 0 1) ;而 CD3- CD5 6 + NK细胞在 2患者组中的表达与健康对照组比较均无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 CD3+ CD5 6 + T细胞在恶性肿瘤患者外周血中的高表达较 CD3- CD5 6 + NK细胞更明显 ,并且不受恶性肿瘤细胞类型的影响 ,提示高表达的 CD3+ CD5 6 +

CD3^+ CD4^+ T细胞计数在重型再生障碍性贫血患者异基因造血干细胞移植术后病毒感染的预示价值

目的:探讨重型再生障碍性贫血(SAA)患者在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后CD3^+ CD4^+ T细胞对预测病毒感染的价值。方法:选广州市第一人民医院血液内科2014年1月至2016年5月SAA行allo-HSCT患者78例。用流式细胞术检测移植后第1、2、3、6、12个月外周血CD3^+ CD4^+ T细胞计数,并根据结果分为<50/μl(n=120)、50-100/μl(n=48)和>100/μl 3个组(n=123)。在时间点的前后2周,监测巨细胞病毒、EB病毒DNA的感染情况,计算各类感染发生率。移植后3个月,按移植患者的CD3^+ CD4^+ T细胞计数分为2组,>100/μl组(n=30)及≤100/μl组(n=48),计算2组的CMV和EBV感染率、持续时间及发病情况,并进行随访,行生存情况比较。结果:CD3^+ CD4^+ T细胞计数>100/μl组较50-100/μl和<50/μl组的CMV、EBV感染率下降。移植后第3个月,CD3^+ CD4^+ T细胞计数>100/μl组CMV及EBV感染率较≤100/μl组低,CMV感染持续时间缩短;移植后3月,CD3^+ CD4^+ T细胞绝对数>100/μl组生存情况优于≤100/μl组。结论:SAA患者allo-HSCT后,CD3^+ CD4^+ T细胞数恢复至100/μl以上时,CMV及EBV感染率明显下降。移植后第3个月,CD3^+ CD4^+ T细胞绝对数>100/μl时CMV及EBV感染率明显下降,CMV感染持续时间缩短,生存率较高。CD3^+ CD4^+ T细胞绝对数是SAA患者alloHSCT后良好的CMV及EBV感染的一个预示指标。

风湿性心脏病患者外周血CD3^+CD4^+T淋巴细胞与hs-CRP、IL-6表达的变化及意义

目的探讨风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达与超敏C反应蛋白(hs-CRP)及IL-6的水平和意义。方法风湿性心脏病患者38例,健康者37例(对照),采用流式细胞术检测风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达水平,ELISA测定hs-CRP和IL-6的水平。结果风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达水平明显高于健康者(P<0.05)。风湿性心脏病患者外周血hs-CRP及IL-6水平明显高于健康者(P<0.05)。风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达水平与外周血hs-CRP、IL-6呈正相关关系(P<0.01)。结论 CD3+CD4+T淋巴细胞表达增高与风湿性心脏病的发病有关;风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达增高影响hs-CRP及IL-6,参与风湿性心脏病的发病。

骨髓增生异常综合征CD3^+CD4^+T细胞共刺激分子表达的研究

本研究检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS?CD3+CD4+T细胞共刺激分子的表达,为进一步探讨MDS发病机制积累信息。以38例初治MDS患者为研究对象,依据FAB分型将他们进一步划分为RA/RARS、RAEB/RAEB-t组;以11例献血员为正常对照,应用流式细胞术检测两组外周血CD3+CD4+T细胞共刺激分子CD28、CD154、CTLA-4、PD-1、CD25的表达。结果表明:MDS组CD28表达下降,CD154升高,CTLA-4、PD-1、CD25表达明显升高。随着疾病恶性程度的增高,RAEB/RAEB-t组CTLA-4、PD-1的表达以及CTLA-4/CD28比值亦较RA/RARS组升高。结论:MDS患者CD3+CD4+T细胞共刺激分子表达存在异常改变,其表达异常可能在MDS的发病机制中起一定作用。

人外周血Vα24 NKT细胞和CD3^+CD56^+CIK细胞生物学特性的比较研究

目的进一步认识Vα24 NKT细胞和CIK细胞在生物学特性的差异。方法从人外周血单个核细胞扩增NKT细胞和CIK细胞;经免疫磁珠纯化获得高纯度的TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞。运用流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的表型、细胞因子和细胞坏死相关因子的表达情况,并用DIOC18染色及流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的细胞杀伤活性。结果经纯化TCRVα24+Vβ11+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞的纯度均达到>90%;纯化后的Vα24 NKT细胞多数为CD4+和DN NKT细胞,高表达TCRVα24、Vβ11、CD3、CD161,低表达CD56;而纯化后的CIK细胞则以CD8+T细胞为主,高表达CD3、CD56,低表达CD161,几乎不表达TCRVα24和Vβ11。在抗原刺激下,CD3+CD56+CIK细胞的IFN-γ、TNF-α、Perforin、FasL、TRAIL表达水平均高于NKT细胞,但CD3+CD56+CIK细胞几乎不分泌IL-4,而NKT细胞则分泌高水平的IL-4;CD3+CD56+CIK细胞对肿瘤细胞株K562、U937、Jurkat的杀伤率均远远高于NKT细胞。结论TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞是两类完全不同的细胞群,在抗肿瘤免疫和免疫调节中可能起着不同的作用。

胃癌患者不同区域淋巴结和外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的表达和临床意义

目的探讨胃癌患者不同区域淋巴结及外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Tregs)频数变化和临床意义。方法收集45例胃癌患者不同区域淋巴结及外周血标本,采用流式细胞仪检测各标本中Tregs占CD4+T细胞比例,并与胃癌TNM分期、分化程度等参数进行相关性分析。结果 Tregs在引流区阳性淋巴结、引流区阴性淋巴结、非引流区淋巴结、外周血中比例分别为(20.71±2.72)%、(14.43±2.62)%、(10.09±2.27)%、(9.72±2.13)%,前3组中两两相比均差异显著(P<0.05),后2组相比无显著差异(P>0.05)。引流区阳性淋巴结中Tregs细胞比例与肿瘤分期无显著相关(P>0.05);引流区阴性淋巴结、非引流区淋巴结、外周血中Tregs细胞比例与肿瘤分期相关(r=0.429、0.453、0.367;P<0.05),且Ⅲ+Ⅳ期Tregs比例显著高于Ⅰ+Ⅱ期比例。不同区域淋巴结Tregs分布与年龄、性别、肿瘤部位、病理分化间差异无相关性。结论 Tregs在不同区域淋巴结及外周血中分布表达呈递减趋势,可能是导致胃癌淋巴结微环境内出现局部免疫抑制,导致肿瘤细胞发生免疫逃逸的重要因素。