淋巴细胞白血病患者CD3基因表达模式的变化

目的:了解T细胞受体信号传导分子CD3γδεζ基因在T和B细胞白血病病人中的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测32例淋巴细胞肿瘤病人:急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)12例、慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)9例、急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)11例及10例健康人外周血单个核细胞中CD3各亚单位表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算CD3分子γ、δ、ε和ζ链表达水平。结果:B-ALL病人的CD3分子γ、δ和ε链表达中位数水平分别为4.29%,0.67%,17.8%,与健康对照组相比,无显著性差异(P>0.05);而CD3γ链表达水平为0.99%,与健康对照组相比,显著降低(P=0.02)。B-CLL病人的CD3δ、ε基因的表达分别为0.52%,6.72%,与健康对照组相比,无显著性差异(P>0.05);而CD3γ、ζ基因(2.72%,0.77%)则比健康人明显下降(P<0.05)。在T-ALL病人中,CD3分子γ、δ和ε的表达(32.99%,12.9%,61.56%)与健康对照组相比,均明显上升(P<0.05),而CD3ζ的表达量为4.17%,与健康人无显著性差异(P=0.44)。B-ALL、B-CLL病人和健康对照组的CD3分子各链的表达模式依次为CD3ε,CD3γ,CD3ζ,CD3δ,而T-ALL病人的表达模式顺序为CD3ε,CD3γ,CD3δ,CD3ζ。结论:在B细胞白血病中CD3各基因的表达水平多为降低,其变化可能与机体T细胞免疫缺陷相关。而在T细胞白血病中CD3各基因表达水平增加可能是白血病性T细胞一个特点。

CML病人外周血T细胞CD3基因表达模式变化

在我们前期研究发现慢性髓系白血病(CML)病人中T细胞受体信号传导分子CD3ζ基因表达下调的基础上,本研究进一步分析病人外周血中全部4种CD3γδεζ基因的表达模式特点,以深入了解病人的T细胞免疫中信号转导的变化。利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测17例初诊慢性期CML病人外周血单个核细胞中CD3γ、δ、ε和ζ链的表达水平,以β2微球蛋白基因(β2MG)作为内参照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算CD3分子各亚单位的相对mRNA表达量,以17例健康成人外周血作为对照。结果表明:CML中CD3γ、δ、ε基因表达水平分别为2.344%,0.515%和3.516%(中位数),与健康对照组比较(3.093%,0.853%和2.302%)并没有显著性差异(p=0.072,p=0.190,p=0.615),而CML中CD3ζ链基因的表达水平(0.395%)则明显低于健康对照组(1.538%)(p<0.001)。在CML中4种CD3分子表达水平模式依次为CD3ε>CD3γ>CD3δ>CD3ζ,而对照组中则为CD3γ>CD3ε>CD3ζ>CD3δ。结论:本研究首先提供了CML病人中CD3各基因表达模式情况,显示以CD3ζ为主的TCR信号分子的表达缺陷,4种CD3链分子的表达水平模式也发生变化。

G-CSF动员前后外周血T细胞CD3基因表达水平变化特点

目的:分析G-CSF动员前后外周血T细胞中CD3分子的γ,δ,ε和ζ链基因表达水平变化特点,以深入了解G-CSF对T细胞信号转导的影响。方法:利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测17例健康供者G-CSF动员前后外周血单个核细胞中CD3γ、δ、ε和ζ链的表达水平,以β2微球蛋白基因(β2MG)作为内参照,采用相对定量公式:2-ΔCt×100%,计算CD3分子各亚单位的相对mRNA表达量。结果:G-CSF动员前后4种CD3基因表达水平模式均为CD3ζ>CD3ε>CD3δ>CD3γ。供者G-CSF动员后CD3ζ和ε链基因表达水平(2.194%,0.867%)明显低于G-CSF动员前(7.615%,1.839%),动员前后比较存在显著差异(P=0.031,P=0.009);动员前CD3δ和γ基因平均表达水平分别为1.097%和0.271%,与动员后比较(0.333%和0.077%)并没有显著性差异(P=0.093,P=0.070)。G-CSF动员前与动员后CD3ζ基因表达水平存在正相关性(rs=0.576,P=0.016);G-CSF动员前与动员后CD3γ、δ和ε基因表达水平均不存在显著相关性(P=0.726,P=0.236,P=0.198)。G-CSF动员前与动员后CD3ζ基因以及G-CSF动员后CD3δ基因表达水平与供者年龄均有负相关性(rs=-0.549,P=0.023;rs=-0.679,P=0.003;rs=-0.570,P=0.017)。结论:本研究结果提示G-CSF动员可能主要影响TCR信号通路中的CD3ζ和ε链基因的表达,而整体的CD3基因表达模式未发生改变。

血液肿瘤病人TCR/CD3信号缺陷及其治疗策略

T细胞免疫缺陷导致机体监测恶性转化细胞不力,是血液肿瘤发生发展的重要原因,T细胞受体信号分子CD3复合物尤其是CD3ζ表达下降或缺失严重影响T细胞的活化功能,本文主要综述近年对血液肿瘤中T细胞受体信号传导分子CD3ζ的缺陷及其可能的治疗策略的研究进展。