高纯度CD3^-CD56^+CD16^+NK细胞体外扩增技术的研究

本研究探索高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞体外扩增技术。应用免疫磁珠分选法(MACS)分离出高纯度的CD3-CD56+CD16+NK细胞,置于含10%人AB血清的造血干细胞培养基(SCGM)中,加入细胞因子IL-2、IL-15、SCF组成不同培养体系进行体外扩增。采用细胞计数法、流式细胞术免疫表型分析和CCK-8试剂盒检测对K562细胞的杀伤率等方法比较不同培养体系对NK细胞增殖前后的数量、纯度及杀伤活性的影响;并采取相同方法对IL-2的浓度与NK细胞增殖效率及杀伤活性之间的关系进行探讨。结果发现,经免疫磁珠分选法所得的高纯度CD3-CD56+CD16+NK细胞扩增18天后,IL-2/IL-15/SCF组扩增倍数显著高于其他组(p<0.05);含细胞因子组的NK细胞对K562细胞的杀伤活性显著提高,尤其是IL-2/IL-15组和IL-2/IL-15/SCF组在效靶比10∶1时杀伤活性均高达90%以上。低、中、高浓度IL-2组扩增倍数之间比较差异无显著性(p>0.05),而在对K562细胞杀伤率的比较上,高浓度组明显高于低、中浓度组(p<0.05)。结论:在10%人AB血清的SCGM中加入IL-2/SCF/IL-15细胞因子组合,可使经MACS纯化的NK细胞在体外高效地活化及增殖;本培养体系中IL-2浓度较低(<1 000U/ml)时,NK细胞的扩增效率及对K562细胞的杀伤率与IL-2的浓度高低无相关性;而高浓度的IL-2(≥1 000U/ml)可进一步激活纯化后NK细胞的体外杀伤活性。

CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞水平变化在急性胰腺炎严重程度预测中的作用

目的分析急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)发病早期CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数在AP严重程度预测中的作用。方法采用流式细胞仪荧光抗体标记法分别对164例AP患者的外周血单核细胞进行CD3、CD16、CD56荧光抗体标记,分析比较AP患者CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞在外周血单核细胞中的百分比和计数情况,及其与AP严重程度的关系。用ROC曲线和AUC评价CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞在外周血单核细胞中的百分比和计数对SAP的诊断价值。结果与正常对照组相比,MAP组、MSAP组和SAP组的CD3^-CD16^+CD56^+百分比和计数均显著下降,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。CD3^-CD16^+CD56^+细胞百分比的AUC为0.86(95%CI:0.745~0.973),取值≤5.27%时,特异性为0.92,敏感性为0.79;CD3^-CD16^+CD56^+细胞计数的AUC为0.89(95%CI:0.808~0.961),取值≤0.056×109/L时特异性为0.90,敏感性为0.79。结论 CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞在外周血单核细胞中的百分比和细胞计数对SAP早期诊断有一定的价值。

CD_3^+CD_(56)^+NKT细胞及CD_3^-CD_(56)^+NK细胞在恶性肿瘤患者的临床意义研究

背景与目的细胞毒性淋巴细胞在抗肿瘤免疫效应中发挥着重要作用,CD3+CD56+NKT细胞作为一类新的具有细胞毒性的效应细胞,目前关于其抗肿瘤意义的探讨主要集中于血液系统恶性疾病,而在实体肿瘤中的应用和临床价值研究尚少。本研究旨在初步探讨抗肿瘤细胞CD3+CD56+NKT细胞及CD3-CD56+NK细胞在恶性肿瘤患者外周血的表达状态及其临床意义。方法采用流式细胞术分析118例恶性肿瘤患者(55例肺癌患者和63例乳腺癌患者)及46例健康对照组外周血中的T细胞亚群及CD3+CD56+NKT细胞、CD3-CD56+NK细胞表达。结果恶性肿瘤患者组CD3+CD8+T细胞、CD3+CD56+NKT细胞以及CD3-CD56+NK细胞表达率均明显高于健康对照组(P<0.01)。肺癌患者中以CD3+CD8+T细胞和CD3+CD56+NKT细胞明显增加为主;乳腺癌患者中以CD3+CD56+NKT细胞和CD3-CD56+NK细胞明显增加为主。结论CD3+CD56+NKT细胞在肺癌和乳腺癌患者的抗肿瘤效应中占据重要地位,而CD3+CD8+CTL和CD3-CD56+NK细胞在不同类型肿瘤患者中具有不同的重要性。

人外周血细胞毒性CD3^-CD56^+ NK细胞高效扩增的研究

目的 探索从人PBMC中高效扩增细胞毒性CD3-CD5 6 + NK细胞的方法。方法 使用干细胞生长培养基 (SCGM )和RPMI 16 4 0培养基 ,在抗CD3单抗、IL 2和植物血凝素 (PHA)的作用下从 5例健康成人PBMC中诱导扩增CD3-CD5 6 + NK细胞 ,并用MTT法检测其细胞毒活性。结果 只有在使用SCGM为基础培养基时 ,PBMC经抗CD3单抗、IL 2作用获得大量增殖 ,在PHA存在时获得最大增殖(P <0 .0 5 ) ,在 14天时扩增 5 1.3± 7.2倍 ,含有 (5 2 .4± 7.9) %CD3-CD5 6 + NK细胞和 (14 .2± 4 .0 ) %CD3+ CD5 6 + T细胞 ;在效 /靶比 10∶1时 ,对K5 6 2和Raji的杀伤率分别达83.7%和 5 5 .8%。结论 可使用SCGM ,在抗CD3单抗、IL 2和PHA协同作用下大量扩增细胞毒性CD3-CD5 6 + NK细胞 ,为应用NK细胞进行肿瘤过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增NK细胞的方法。

系统性红斑狼疮患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞水平变化的临床意义

分析系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞水平变化。94例SLE患者作为研究对象,另选取同期健康体检者50例为对照组。结果显示SLE组CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数和百分率均明显低于对照组(P<0.05);Pearson积差分析显示CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数与SLEDAI评分和24 h尿蛋白定量呈明显负相关性(P<0.05);以8.04%为临界值,CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数判断SLE活动性的灵敏度为57.78%,特异度为78.57%,AUC为0.677。实验表明SLE患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞表达明显减少,观察其表达水平变化可为判断病情活动度和肾功能损害提供参考依据。

CD4^+、CD25^+、CD127 low调节T细胞及CD16^+、CD56NK细胞在脑梗死急性期患者外周血中的表达及其关系

目的探讨脑梗死(CI)患者外周血中CD4+、CD25+、CD127 low调节T细胞及CD16+、CD56NK细胞的百分比变化及两者在CI患者免疫反应中的相互作用机制。方法采用流式细胞术检测50例急性CI患者(发病2d)外周血中CD4+、CD25+、CD127 low调节T细胞及CD16+、CD56NK细胞的表达水平,并与健康对照组进行比较。结果急性CI患者(发病2d)外周血中的CD4+、CD25+、CD127 low调节T细胞的表达水平低于健康对照组,而CD16+、CD56NK细胞的数量则明显高于健康对照组(p<0.05)。结论急性CI患者发病2d,CD16+、CD56NK细胞表达水平上升,而CD4+、CD25+、CD127 low调节性T细胞表达明显低于健康对照组,说明CD4+、CD25+、CD127 low调节性T细胞和CD16+、CD56NK细胞是促进CI发生的原因之一。

脐血中CD56^(bright)CD16^(dim)/^-NK细胞亚群的检测

目的了解新生儿脐血NK细胞和CD56bright CD16dim/-NK细胞亚群的比率,探讨CD56bright CD16dim/-NK细胞在脐血低免疫应答中的作用。方法使用血细胞分析仪计数淋巴细胞;采用流式细胞术检测脐血、母亲及对照组中NK细胞和CD56bright CD16dim/-NK细胞亚群的比率。结果脐血中淋巴细胞计数显著高于母亲及对照组;NK细胞比率无显著性差异;CD56bright CD16dim/-NK细胞高于母亲及对照组;母亲组CD56bright CD16dim/-NK细胞高于对照组。结论脐血中丰富的CD56bright CD16dim/-NK细胞是脐血低免疫应答的原因之一。

CD16+CD56+NK细胞在重症肌无力发病机制中的作用

目的:研究重症肌无力(MG)患者外周血CD16+CD56+ NK细胞的水平,及其在MG发病机制中的作用。方法:应用流式细胞仪检测16例MG患者与20名正常对照外周血CD16+CD56+NK细胞的百分率。结果:MG组外周血CD16+CD56+NK细胞百分率(13.81±5.59)%明显高于对照组的(7.23±1.95)%,P<0.05。结论:NK细胞在MG发病中起重要作用,既可通过分泌IFN2γ等细胞因子途径促进MG的发病,也可通过细胞毒作用发挥免疫效应。

人血中CD3^+CD16^-及CD3^-CD16^+细胞在异种肾移植间接体内模型中的变化

目的：探讨人血中ＣＤ３＋ＣＤ１６－及ＣＤ３－ＣＤ１６＋细胞在异种肾移植（猪／人）间接体内模型中的变化。方法：利用模拟人体生理条件的体外灌注系统，将人新鲜血灌注离体猪肾２２只（实验组），人肾８只（对照组）。经免疫荧光双标记，用流式细胞仪检测灌注前及灌注后不同时间内，人血中ＣＤ３＋ＣＤ１６－及ＣＤ３－ＣＤ１６＋细胞的变化。结果：最初经由猪肾灌注出来的人血中ＣＤ３＋ＣＤ１６－细胞、ＣＤ３－ＣＤ１６＋细胞与灌注前相比，分别由（６７．８±３．４）％降至（３２．４±４．１）％和（１７．３±１．８）％降至（６．９±１．２）％。随着灌注时间的延长，两种细胞减少的趋势逐渐减弱；而经由人肾灌注的人血与灌注前相比，两种细胞无明显变化。结论：人血中Ｔ细胞、ＮＫ细胞可能通过与猪肾血管内皮细胞的粘附，参与了异种肾移植的排斥反应。

乙型肝炎病毒导致慢性乙型肝炎患者血中CD56^(dim)NK细胞亚群数量下降

目的观察乙型肝炎病毒对慢性乙型肝炎患者NK细胞亚群的影响。方法利用流式细胞术检测20例正常人及62例慢性乙型肝炎患者人外周血淋巴细胞CD3、CD4、CD8、CD56、CD16的表达;同时观察NK细胞亚群改变与乙型肝炎病毒携带量的相关性。结果①人类NK细胞根据CD56分子的表面密度可分为两个截然不同的群体,绝大多数(约90%)的NK细胞低水平表达CD56(CD56dim)且高表达CD16,少数NK细胞(10%)高水平表达CD56(CD56bright)且缺乏或低水平表达CD16;②慢性乙型肝炎患者CD56brightNK细胞的表达及绝对数量较正常对照组无明显的改变,CD3-CD56+、CD3-CD56dimNK细胞的绝对数量较正常对照组显著减少(P<0.05);③慢性乙型肝炎患者NK细胞亚群改变与患者的病毒携带量无关;④慢性乙型肝炎患者CD3+、CD3+CD4+比例及绝对数量较正常对照组显著减少(P<0.05)。结论机体感染乙型肝炎病毒后,导致CD56dim增殖的关键因子IL-2、IL-21活性下降,使CD56dim数量选择性减少,减弱NK细胞介导机体ADCC的功能。

Graves病治疗前后CD3^-CD56^+的变化及临床意义

目的检测CD3-CD56+在Graves病治疗前后变化,探讨NK细胞在治疗过程中的变化及ADCC效应对Graves的影响或作用。方法选取正常对照组22例,Graves病初次发现且未治疗病人33例,抗甲状腺药物(ATD)治疗后缓解患者30例,完全缓解患者12例,及复发患者11例,用流式细胞术检测CD3-CD56+的比值。结果正常对照组结果为7.03±3.91,初发组结果为4.83±2.72,缓解组结果为5.12±3.19,完全缓解组结果为7.91±4.05,复发组结果为6.97±3.28;初发组及缓解组结果低于正常对照组,差异有统计学意义(P=0.018,P=0.043),初发组结果明显高于完全缓解组,差异有统计学意义(P=0.007);缓解组结果低于完全缓解组,差异有统计学意义(P=0.016)。结论 Graves病CD3-CD56+低于正常,ADCC效应及NK细胞的其他免疫功能有可能受到损害或限制,破坏体内的免疫平衡或免疫功能紊乱。CD3-CD56+结果对Graves各阶段病程的诊断、治疗及预后有临床意义。

IVF-ET术后妊娠早期绒毛膜下血肿与NK细胞及其表面分子CD49d、CD11b的关系

目的:探讨辅助生殖(IVF^-ET)术后患者妊娠早期绒毛膜下血肿(SCH)与两种NK细胞亚型CD56^+CD16^+NK细胞、CD56^+16^-NK细胞及其表面整合素αm4(CD49d)、整合素αm (CD11b)的关系。方法:选取2019年2月^-2019年12月于本院生殖中心行IVF^-ET术助孕后临床妊娠患者41例,其中伴有绒毛膜下血肿20例为观察组,未合并绒毛膜下血肿21例为对照组。比较两组外周血中CD56^+CD16^+NK细胞、CD56^+16^-NK细胞及其表面整合素分子CD49d、CD11b的表达量。结果:CD56^+CD16^+NK细胞在观察组和对照组外周血淋巴细胞中的占比分别为9.73(6.32~15.18)%、9.96(6.50~12.68)%,CD56^+16^-NK细胞在观察组和对照组外周血淋巴细胞中占比分别为4.61(3.54~8.39)%、5.71(4.35~8.86)%,两组间均无差别(P>0.05)。CD11b在观察组和对照组CD56^+CD16^+NK细胞表面占比分别为98.59(97.20~99.33)%、100.00(99.80~100.00)%,CD11b在观察组和对照组CD56^+16^-NK细胞表面占比分别为78.09(60.64~86.24)%、87.09(80.36~91.33)%,观察组均低于对照组(均P<0.05)。CD49d在观察组和对照组CD56^+CD16^+NK细胞表面占比100.00(99.97~100.00)%、100.00(100.00~100.00)%,CD49d在观察组和对照组CD56^+16^-NK细胞表面占比99.52(97.93~100.00)%、99.44(98.28~100.00)%,观察组与对照组无差异(P>0.05)。结论:IVF^-ET术后妊娠早期合并绒毛膜下血肿患者外周血中CD56^+CD16^+NK细胞、CD56^+16^-NK细胞表面CD11b的表达低于IVF^-ET术后妊娠早期未合并绒毛膜下血肿患者,CD49d在两种细胞亚型表面的表达无差异。

晚期血吸虫病患者外周血NK细胞Tim-3分子的表达及其与肝纤维化指标的关系

目的探讨T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3(T cell immunoglobulin and mucin domain protein 3,Tim-3)在晚期血吸虫病患者外周血CD56+自然杀伤细胞(NK细胞)表面的表达及其与肝纤维化指标的关系。方法采用流式细胞术检测28例临床晚期血吸虫病患者和30例健康者CD56+NK细胞表面Tim-3的表达,应用全自动化学发光免疫分析仪检测肝纤维化血清学三型前胶原N端肽(PIIIP N-P)、层黏连蛋白(LN)、IV型胶原(CIV)和透明质酸(HA)等4项指标,ELISA检测血清中γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,Fibroscan仪检测肝硬度值(LSM)反映肝纤维化程度。统计分析Tim-3表达水平与IL-4和IFN-γ水平、肝脏纤维化程度以及肝纤维化血清指标的相关性。结果流式细胞分析结果显示,晚期血吸虫病患者外周血CD56+NK细胞表面Tim-3表达水平为(62.3±11.4)%,高于健康对照组的(52.1±6.5)%(P<0.01)。晚期血吸虫病患者和健康对照组的PIIIP N-P水平分别为(86.5±29.5)ng/ml和(22.0±7.8)ng/ml,LN分别为(49.3±21.5)ng/ml和(20.4±6.3)ng/ml,CIV分别为(67.5±22.3)ng/ml和(22.0±3.9)ng/ml,HA分别为(645.9±483.1)ng/ml和(54.7±27.7)ng/ml,两组各指标差异均具有统计学意义(P<0.05)。晚期血吸虫病患者和健康对照组IFN-γ水平分别为(93.9±20.1)ng/L和(107.7±24.6)ng/L,IL-4分别为(46.6±11.8)ng/L和(28.9±8.9)ng/L,两组差异均具有统计学意义(P<0.05)。Spearman非参数相关分析结果显示患者CD56+NK细胞表达的Tim-3水平与患者肝纤维化指标LSM、PIIIP N-P、LN、CIV和IL-4水平呈正相关(r=0.528~0.834,P<0.01),与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.501,P<0.01),而与HA水平无明显相关性(r=0.352,P>0.05)。结论晚期血吸虫病患者外周血CD56+NK细胞Tim-3表达呈上调,并与患者肝纤维化指标LSM、PIIIP N-P、LN、CIV和IL-4水平呈正相关。

CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞与系统性红斑狼疮活动的相关性研究

目的探讨SLE患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞的表达水平及其临床意义。方法流式细胞术检测134例SLE患者、90名健康对照外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数及占淋巴细胞百分比,ELISA法测定血清抗核抗体、抗dsDNA抗体、抗C1q抗体水平;Logistic多元逐步回归分析SLE患者疾病活动的独立危险因素,Pearson或Spearman相关分析CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞与SLE患者临床指标的相关性,多元逐步回归分析影响CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞的独立危险因素。结果SLE患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数和占淋巴细胞百分比[(151±126)%,(10±7)%,134例]均低于健康对照组[(404±261)%,(19±9)%,90名](t=-12.218,P<0.01;t=-9.606,P<0.01)。活动组SLE患者外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数和占淋巴细胞百分比[(94±67)%,(9±6)%,54例],均低于非活动组[(189±142)%,(11±6)%,80例](t=-4.586,P<0.01;t=-2.241,P=0.027)。外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数和百分比、病程、尿蛋白定量(24 h)、ESR、C4均与SLE患者疾病活动的独立相关(OR=0.990、0.936、0.979、1.813、1.040、0.183,P均<0.05)。而SLEDAI评分与SLE患者CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数独立相关(β=-0.358,P<0.01)。结论SLE患者外周血中CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞计数及百分比是SLE患者疾病活动的独立危险因素,外周血CD3^-CD16^+CD56^+NK细胞下降可能在SLE发生、进展中扮演重要角色。

壹期煤工尘肺患者CD19^+B淋巴细胞、CD56^+CD16^+NK细胞表达及补体C3、C4水平

目的探讨CD19+B淋巴细胞、CD56+CD16+NK细胞和补体C3、C4水平在壹期煤工尘肺(CWP)中的变化及意义。方法采用流式细胞术检测56例壹期CWP患者(CWP组)、45例井下健康接尘矿工(接尘对照组)及48例井上健康人(正常对照组)外周血中CD19+B淋巴细胞、CD56+CD16+NK细胞表达水平;免疫比浊法检测血清补体C3、C4水平。结果与正常对照组和接尘对照组比较,CWP组CD19+升高,CD56+CD16+下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);C3与C4水平无明显改变(P>0.05)。接尘对照组CD56+CD16+和C4水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CD19+和C3水平虽也有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。CWP组C3与C4呈正相关(r=0.610,P<0.01),其他各指标间无相关性。结论壹期CWP患者存在B淋巴细胞介导的体液免疫上调,NK细胞免疫功能低下。

CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞和CD3^-CD56^+CD69^+NK细胞在肺结核患者中的意义

目的:探讨CD4+CD25+CD127low调节性T细胞和CD3-CD56+CD69+NK细胞在肺结核患者中的免疫调节作用。方法:取30例健康体检者(HD)、30例非耐药初治肺结核(S-TB)患者及30例多耐药结核病(MDR-TB)患者2 ml肝素抗凝外周静脉血,经CD3、CD4、CD25、CD56、CD69、CD127流式抗体标记后,Beckman流式细胞仪(FCM)计数各组CD4+CD25+CD127lowT、CD3-CD56+NK、CD3-CD56+CD69+NK细胞百分比含量。结果:MDR-TB组CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量为(10.63±3.85)%,明显高于HD组的(3.03±1.07)%和S-TB组的(7.17±2.94)%(P=0.000);S-TB组CD3-CD56+NK细胞百分比含量为(17.69±8.34)%,高于HD组的(16.60±6.21)%和MDR-TB组的(14.70±5.57)%,但差异无统计学意义(P>0.05);MDR-TB组CD3-CD56+CD69+NK细胞百分比含量为(3.50±1.22)%,明显低于HD组的(9.73±4.35)%和S-TB组的(5.71±2.28)%(P=0.004)。结论:随着肺结核病程的发展,外周血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞含量逐渐升高,CD3-CD56+NK细胞含量先上升然后下降,CD3-CD56+CD69+NK细胞含量逐渐下降。调节性T细胞可能通过抑制结核患者CD3-CD56+CD69+NK细胞免疫应答来影响肺结核病的进程。

CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞在急性白血病患者中的变化

目的通过分析急性白血病患者发病时以及缓解时外周血CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的数量以及功能变化,进一步了解急性白血病患者免疫功能状态。方法使用流式细胞分析外周血CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的数量,同时分析上述两群细胞内的干扰素表达水平来评估细胞的功能。结果CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞数量在急性白血病发病时显著增加,经化疗获得完全缓解后数量又下降到正常健康人水平,并且无论在发病时还是缓解时CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞内干扰素水平均明显下降。CD3^-CD56^+NK细胞的变化有所不同,在发病时数量以及功能改变均不明显,而在疾病缓解时,急性淋巴细胞白血病患者CD3^-CD56^+NK细胞的数量下降明显,急性髓系白血病患者CD3^-CD56^+NK细胞的功能下降明显。结论急性白血病患者发病时可能产生免疫反应,但免疫细胞功能缺陷可能参与疾病的发生进展,其中CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的变化可能与疾病的关系更密切,且急性髓系白血病患者免疫细胞功能异常更明显。

食管癌贲门癌患者T淋巴细胞、NK细胞免疫功能检测及意义

目的本研究检测食管癌、贲门癌患者的免疫功能,寻找肿瘤患者的病情量化指标,用来预测和判定临床治疗效果。方法采集本院胸外科手术前的食管癌贲门癌患者115例及359例正常体检者的血液标本,应用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8及NK细胞(CD56)的表达。结果食管癌、贲门癌组与健康对照组相比较CD3、CD4有明显下降(P<0.05),而CD8、CD56有明显的增高(P<0.05)。将癌症组分为淋巴结转移组和无淋巴转移组,两组间CD3、CD4、CD8、CD56的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论食管癌外周血T细胞免疫检测有助于了解疾病的发展进程。

人外周血NK细胞亚群、表型和生物学特征

目的:探讨人外周血NK细胞的异质性和生物学特征。方法:利用多种标记抗体进行细胞表面和细胞内细胞毒效应分子染色,再利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析NK细胞亚群的多样性和生物学特征。结果:NK细胞可分为CD56+、CD56+CD16+和CD16+三个亚群。所有CD56+NK细胞均表达CD95,但表达水平的高(CD95bright)和低(CD95dim)不同。在CD95bright和CD8+细胞亚群中有43.5%的细胞同时表达颗粒酶B和穿孔素。而CD56+CD16+和CD16+细胞表达CD95均为CD95bright,同时表达颗粒酶B(83.6%)和穿孔素(89.8%)。结论:NK细胞乃异质性群体,随着CD56表达减少和CD16表达增加,其生物效应功能逐渐成熟。